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第十六届全国实验血液学学术会议

作者：肖彦恺赵素文陈少华杨力建李萡李扬秋暨南大学生命科学技术学院再生医学教育部重点实验室暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院血液病研究所暨南大学生命科学技术学院再生医学教育部重点实验室暨南大学医学院血液病研究所暨南大学第一附属医院血液科

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优化细胞因子诱导胎盘源间充质干细胞向胰岛β样细胞分化的实验研究

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热带医学杂志 2017年第8期17卷 1000-1003,1011,F0004页

作者：陆琰王娟吴韶清张洹广州市妇女儿童医疗中心广州脐血库广东广州510623 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的优化多种细胞因子联合诱导人胎盘源间充质干细胞分化为胰岛β样细胞的实验条件。方法从胎盘中分离、扩增间充质干细胞;扩增后的细胞采用激活素A、表皮生长因子(EGF)等多种细胞因子联合诱导;在诱导过程中运用消化重悬、调节葡萄糖浓... 详细信息

目的优化多种细胞因子联合诱导人胎盘源间充质干细胞分化为胰岛β样细胞的实验条件。方法从胎盘中分离、扩增间充质干细胞;扩增后的细胞采用激活素A、表皮生长因子(EGF)等多种细胞因子联合诱导;在诱导过程中运用消化重悬、调节葡萄糖浓度等方法优化诱导方案,促进细胞形成胰岛样细胞团,向胰岛β样细胞的分化;比较不同诱导条件下,诱导后的细胞在胰岛素、C肽分泌及胰岛素释放实验中的差异,筛选出最佳方案。结果经诱导后的细胞,免疫荧光染色及免疫细胞化学染色均能检测出PDX-1及胰岛素表达;优化方案3诱导后的细胞不仅胰岛素分泌量明显提高至(222.00±38.00)mU/L,还能分泌C肽至(0.45±0.22)ng/mL,而且对胰岛素释放实验敏感,胰岛素刺激释放指数为(5.93±0.79)。结论经多种细胞因子联合诱导后,人胎盘源间充质干细胞可分化为胰岛β样细胞,胰岛样细胞团的形成有助于胰岛β样细胞的分化发育。

关键词：胎盘间充质干细胞分化胰岛糖尿病

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淋巴浆细胞淋巴瘤误诊为溶血性贫血一例

淋巴浆细胞淋巴瘤误诊为溶血性贫血一例

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广东省医学会第二十一次血液病学学术会议

作者：赖菁卢育洪陈洁郁志罗更新李扬秋暨南大学医学院第一附属医院暨南大学医学院第一附属医院暨南大学血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

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ITP病人外周血中T细胞免疫抑制性受体Tim-3、LAG-3和BTLA的表达特点

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中国免疫学杂志 2016年第7期32卷 1028-1030页

作者：钟隽陈少华张涛郁志卢育洪杨力建赖菁李扬秋暨南大学附属一院血液科广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

免疫性血小板减少症（Immune thrombocyt-openia,ITP）是一种自身免疫性出血性疾病,T细胞免疫调控在ITP的发生发展中起重要作用。我们前期研究发现了ITP中存在异常的TCR亚家族克隆增殖和TCR信号通路。近几年系列研究发现ITP的T细胞免疫... 详细信息

免疫性血小板减少症（Immune thrombocyt-openia,ITP）是一种自身免疫性出血性疾病,T细胞免疫调控在ITP的发生发展中起重要作用。我们前期研究发现了ITP中存在异常的TCR亚家族克隆增殖和TCR信号通路。近几年系列研究发现ITP的T细胞免疫异常与一些介导免疫耐受的分子表达异常相关。

关键词：免疫抑制性受体 T细胞免疫 ITP LAG-3 Tim-3 BTLA 免疫异常介导免疫表达特点出血性疾病

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提高嵌合抗原受体T细胞疗效的研究进展：第57届美国血液学会年会报道

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白血病．淋巴瘤 2016年第1期25卷 1-3,11页

作者：李扬秋曾成武暨南大学医学院血液病研究所暨南大学附属第一医院血液科广州510632

如何增强嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）效应是CAR-T研制和应用的一个关键问题。文章主要总结第57届美国血液学会（ASH）年会中针对这一问题的研究成果，包括一些信号通路的抑制、联合表达刺激分子、提高靶细胞的抗原性、优化CAR—T治疗前... 详细信息

如何增强嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）效应是CAR-T研制和应用的一个关键问题。文章主要总结第57届美国血液学会（ASH）年会中针对这一问题的研究成果，包括一些信号通路的抑制、联合表达刺激分子、提高靶细胞的抗原性、优化CAR—T治疗前处理方案以及新的CAR-T制作策略等。

关键词：嵌合抗原受体T细胞血液肿瘤细胞毒活性信号通路抑制剂美国血液学会年会

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伊马替尼诱导原代T细胞凋亡作用机制研究

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中国免疫学杂志 2016年第9期32卷 1268-1271,1275页

作者：陈小华邱华云施珊珊吴莎林晨李扬秋韶关学院医学院韶关512000 暨南大学医学院微生物与免疫学系广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的:研究伊马替尼(IM)诱导正常人原代CD3^+T细胞凋亡的分子机制。方法:0~100 nmol/L的IM作用原代T细胞24 h后,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用实时荧光定量PCR技术检测Caspase-3、Caspase-8、A20和NF-κB基因表达变化;应用Western... 详细信息

目的:研究伊马替尼(IM)诱导正常人原代CD3^+T细胞凋亡的分子机制。方法:0~100 nmol/L的IM作用原代T细胞24 h后,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用实时荧光定量PCR技术检测Caspase-3、Caspase-8、A20和NF-κB基因表达变化;应用Western blot技术检测A20和NF-κB蛋白表达变化。结果:IM具有明显促T细胞凋亡能力,其凋亡分子Caspase-3和A20基因表达水平均上调,而NF-κB的基因和蛋白水平均下调。结论:IM通过上调A20的表达诱导了T细胞的凋亡。

关键词：伊马替尼原代CD3^+T细胞 TNF-α诱导蛋白3 核转录因子

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急性髓性白血病患者异基因造血干细胞移植后γδT细胞免疫功能重建分析

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免疫学杂志 2016年第11期32卷 966-971页

作者：陈洁金真伊王欣玉罗强陈少华杨力建吴秀丽朱康儿李扬秋暨南大学第一附属医院血液科广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632

目的系统分析急性髓性白血病(AML)患者接受异基因造血干细胞移植前后γδT细胞免疫功能重建情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测12例AML患者移植前后外周血γδT细胞TRGV和TRDV各亚家族的谱系分布情况,进一步应用基因扫... 详细信息

目的系统分析急性髓性白血病(AML)患者接受异基因造血干细胞移植前后γδT细胞免疫功能重建情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测12例AML患者移植前后外周血γδT细胞TRGV和TRDV各亚家族的谱系分布情况,进一步应用基因扫描分析各亚家族基因的互补决定区3(CDR3)的克隆性增殖情况。同时,采用实时荧光定量PCR方法对患者外周血γδT细胞的3个TRGV亚家族基因表达水平进行定量检测。收集8例健康成人外周血样作为对照。结果移植前后患者的TRGV亚家族谱系表达以及T细胞克隆性增殖情况无明显变化。移植前患者TRDV亚家族谱系存在明显限制性利用,部分亚家族不表达;其中TRDV3、TRDV4和TRDV8亚家族出现克隆性增殖,而移植后患者γδT细胞的TRDV亚家族谱系限制性利用情况虽有所改善,但TRDV3、TRDV4、TRDV5、TRDV6和TRDV8亚家族仍存在克隆性增殖情况。移植前后患者TRGVⅡ亚家族的表达水平均显著低于正常对照组;移植后患者的TRGV亚家族表达模式(TRGVⅠ>TRGVⅢ>TRGVⅡ)发生了明显改变,以TRGVⅠ亚家族的表达占优势。移植后无发生GVHD患者的TRGVⅠ亚家族的表达水平显著高于发生GVHD患者的TRGVⅠ亚家族的表达水平。结论移植后TRGVⅡ亚家族的免疫重建恢复较慢,且移植后TRGVⅠ亚家族表达水平较高提示较好的γδT细胞免疫重建。移植后克隆性增殖的γδT细胞可能是机体体内相关抗原的刺激下产生的反应性增殖性T细胞。

关键词：异基因造血干细胞移植 γδT细胞免疫重建

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TIM-3、LAG-3和BTLA介导的血液肿瘤免疫耐受及其逆转研究

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中国实验血液学杂志 2016年第5期24卷 1594-1597页

作者：陈少华查显丰李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学第一附属医院检验科广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑... 详细信息

近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑制受体T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)、淋巴细胞活化基因-3(LAG3)和B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)在血液肿瘤介导T细胞免疫耐受中的作用及其靶向治疗研究进展作一综述,旨在为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供新的思路。

关键词：血液肿瘤细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 淋巴细胞活化基因-3 B和T淋巴细胞弱化子靶向治疗

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反义miRNA-20a及联用伊马替尼对K562细胞增殖的影响

反义miRNA-20a及联用伊马替尼对K562细胞增殖的影响

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中华医学会临床输血学分会第二届学术年会

作者：周婴何冬梅包世杰赖菁翁瑜君陈盛亭暨南大学附属第一医院血液科南方医科大学深圳医院暨南大学医学院血液病研究所暨南大学附属第一医院血液科广州市南沙中心医院

目的研究微小RNA-20a(microRNA-20a,miR-20a)反义寡核苷酸(antisense oligo-nucleotides,ASODN)对K562细胞增殖和凋亡的影响,并初步观察其与伊马替尼(imatinib)联合对K562细胞的作用。方法化学合成miR-20aASODN,并合成随机寡核苷酸序列(scrambled oligonu-cleotides,SODN)作为对照,利用转染试剂lipofectamine2000将miR-20a ASODN转染至K562细胞株,并与imatinib联用,采用实时定量RT-PCR检测miR-20a的表达;用CCK8法检测细胞生长的抑制率;用Hoechchst33258染色检测细胞凋亡形态;采用AnnexinV/PI双染法通过流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测转染后K562细胞株E2F1、P21和Bim蛋白的表达。

关键词： microRNA-20a 反义寡核苷酸链 K562细胞伊马替尼增殖细胞凋亡

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山东医药 2016年第25期56卷 24-27页

作者：王欣玉胡峻岩金真伊陈少华杨力建卢育洪吴秀丽李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广州医学院第三附属医院暨南大学第一附属医院

目的观察急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血中人白细胞抗原G1(HLA-G1)及Th17/Tregs轴相关免疫调节分子(FOXP3、RORα、t-bet、ROR-γ、GATA-3、IL-17A、IL-23和CD25)的基因表达变化,并分析其相关性。方法收集经MICM分型确诊的29例B-... 详细信息

目的观察急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血中人白细胞抗原G1(HLA-G1)及Th17/Tregs轴相关免疫调节分子(FOXP3、RORα、t-bet、ROR-γ、GATA-3、IL-17A、IL-23和CD25)的基因表达变化,并分析其相关性。方法收集经MICM分型确诊的29例B-ALL患者外周血样本,初发B-ALL 14例(初发组),复发难治的BALL 8例(复发组),完全缓解的B-ALL 7例(缓解组);同时收集10例健康志愿者外周血样本作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测各组外周血中膜结合型HLA-G1及Th17/Tregs轴相关免疫调节分子(FOXP3、RORα、t-bet、ROR-γ、GATA-3、IL-17A、IL-23和CD25)的mRNA相对表达水平。结果初发组、复发组、缓解组、对照组膜结合型HLA-G1 mRNA相对表达水平分别为0.415%、0.565%、0.108%、0.110%,初发组、复发组与缓解组及对照组比较,P均<0.05。初发组IL-17A、IL-23、t-bet和CD25基因表达水平显著高于复发组(P均<0.05)。初发组的FOXP3、IL-17A、IL-23、t-bet、GATA3和CD25基因表达水平亦显著高于缓解组(P均<0.05);复发组、初发组、缓解组ROR-γmRNA相对表达水平分别为2.777%、1.425%、0.089%,复发组与初发组、缓解组比较,P均<0.05。初发组HLAG1 mRNA表达水平与IL-17A和FOXP3相对表达水平呈正相关(r分别为0.635、0.647;P均<0.05),且HLA-G1mRNA表达水平与IL-17A呈正相关(r=0.573,P<0.05)。初发组HLA-G1 mRNA表达水平与IL-23、ROR-γ、RORα、t-bet、GATA-3、CD25表达水平无明显相关关系(P均>0.05)。复发组HLA-G1表达水平与各免疫相关调节分子均未发现明显相关性(P均>0.05)。缓解组HLA-G1表达水平与IL-17A和FOXP3表达水平呈负相关(r分别为-0.857、-0.785,P均<0.05),而与其他免疫相关调节分子表达水平无显著相关关系(P均>0.05)。对照组HLA-G1表达水平与t-bet表达水平呈负相关(r=-0.665;P<0.05),与其他免疫相关调节分子均未见显著相关关系(P均>0.05)。结论初发及复发B-ALL患者外周血中膜结合型HLA-G1基因表达水平显著升高,缓解后HLA-G1基因水平下降;且初发患者HLA-G1表达水平与IL-17A和FOXP3存在正相关关系,ROR-γ基因与复发BALL关系密切。HLA-G1和ROR-γ可能参与调节Th17/Tregs轴的平衡,影响B-ALL预后。

关键词：急性B淋巴细胞白血病人白细胞抗原G1 调节性T细胞

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