检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2007年第4期23卷 331-335页

作者：林羿陈艺菁曾山冯铮狄静芳曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

目的研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate,RR)与母-胎界面局部免疫状况的关系。方法计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCID×NOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/c×BALB/c小鼠的RR,并采用4色流式细胞术检测NOD/SCID小鼠... 详细信息

目的研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate,RR)与母-胎界面局部免疫状况的关系。方法计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCID×NOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/c×BALB/c小鼠的RR,并采用4色流式细胞术检测NOD/SCID小鼠非孕期和孕13.5天脾脏和胎盘细胞内细胞因子的表达状况,以明确其与妊娠耐受相关的淋巴细胞功能亚群。结果NOD/SCID小鼠的RR与对照组BALB/c小鼠相比无显著差异。与此相应,虽然能够证实NOD/SCID小鼠具有多重免疫缺陷,但是孕期母-胎界面多种功能性细胞亚群的百分率发生自发性改变。结论NOD/SCID小鼠脾脏和胎盘某些细胞百分率的自发性改变可能对妊娠结局有利。

关键词：动物模型细胞表面标志物免疫缺陷妊娠耐受

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小鼠派氏集合淋巴结T细胞活化和调节性T细胞的分析

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中国病理生理杂志 2006年第3期22卷 537-542页

作者：黄秀艳曾耀英肇静娴王通暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:通过对小鼠派氏集合淋巴结(PPs)、肠系膜淋巴结(MLNs)和腹股沟淋巴结(ILNs)的比较性研究,以分析PPsT细胞活化和调节性T细胞的功能特点。方法:无菌分离小鼠PPs、MLNs和ILNs,分别制备单个淋巴细胞悬液,运用流式细胞术结合荧光抗体染... 详细信息

目的:通过对小鼠派氏集合淋巴结(PPs)、肠系膜淋巴结(MLNs)和腹股沟淋巴结(ILNs)的比较性研究,以分析PPsT细胞活化和调节性T细胞的功能特点。方法:无菌分离小鼠PPs、MLNs和ILNs,分别制备单个淋巴细胞悬液,运用流式细胞术结合荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞、CD3+CD4+辅助性T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞的比例;用多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)、佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激活化淋巴细胞,随后运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测T细胞早期活化标志CD69的表达水平。结果:PPs内CD3+T细胞所占比例明显低于MLNs和ILNs,然而CD4+CD25+调节性T细胞的比例明显高于MLNs和ILNs;在没有加入刺激剂的培养条件下,PPs来源的T细胞CD69的表达水平明显高于MLNs和ILNs来源的T细胞,MLNs来源的T细胞CD69的表达水平明显高于ILNs来源的T细胞;而在加入ConA或者单纯PDB的培养条件下,PPs来源的T细胞却表现出低反应性;在加入PDB+Ion的培养条件下,3者来源的T细胞CD69的表达水平没有明显差别。结论:PPs内CD3+T细胞所占比例较低,CD4+CD25+调节性T细胞的比例较高,这可能是PPs整体T细胞低反应性的原因之一;PPs来源T细胞的高基础活化率可能与其不断接触小肠来源的食物和共生菌抗原有关;PPs来源T细胞选择性地对某些刺激剂表现出低反应性,提示这群细胞处于某种程度的无能状态。上述特征的生物学意义在于避免因为不断接受小肠来源的食物和共生菌抗原的刺激而发生病理性炎症的同时还保留对病原微生物抗原的应答。

关键词：淋巴集结 T淋巴细胞淋巴细胞转化小鼠

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T细胞识别同种异型移植抗原的研究进展

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中国免疫学杂志 2004年第3期20卷 149-152页

作者：曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

移植是末期组织、器官功能衰竭最彻底的治疗措施.同种异体移植(allogeneic transplantation)是临床最常见的移植类型.在本质上,人类的同种异体移植排斥反应是由受者的T细胞介导的、针对移植抗原的免疫应答.这一免疫应答是通过受者T细胞... 详细信息

移植是末期组织、器官功能衰竭最彻底的治疗措施.同种异体移植(allogeneic transplantation)是临床最常见的移植类型.在本质上,人类的同种异体移植排斥反应是由受者的T细胞介导的、针对移植抗原的免疫应答.这一免疫应答是通过受者T细胞表面的T细胞受体(T cell receptor,TCR)识别移植物细胞的同种异型抗原引发的.受者T细胞可以通过直接识别(direct recognition)和间接识别(indirect recognition)移植物细胞的同种异型MHC分子而被激活.在移植免疫领域里,有些问题一直困扰着学者们,近年的研究进展使这些问题在一定程度上得到阐明.

关键词： T细胞同种异型移植抗原免疫应答 T细胞受体 TCR 移植物基因编码

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阻断p38途径对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡的影响

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第三军医大学学报 2006年第16期28卷 1667-1670页

作者：王通曾耀英何贤辉邢飞跃梁佩燕贺芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510630

目的研究阻断p38途径对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的胸腺细胞凋亡的影响。方法WesternBlott检测DEX对p38途径的阻断作用。以SB203580(SB)阻断BALB/c小鼠胸腺细胞p38途径,在3、5和7h,利用An-nexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;利用DiOC6(3)/PI双染流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm)和细胞膜完整性变化。结果DEX显著减少了胸腺细胞p38蛋白含量;阻断p38后DEX诱导小鼠胸腺细胞晚期凋亡率显著增加(P<0.01);DEX诱导了胸腺细胞△ψm降低,同时阻断p38途径后,DiOC6(3)阴性PI阳性细胞显著增多(P<0.01)。结论阻断p38后加速了DEX介导的小鼠胸腺细胞凋亡中细胞膜完整性的破坏,该现象可能与线粒体功能有关。

关键词： p38 胸腺细胞细胞膜完整性线粒体

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人β_2-微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

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生物工程学报 2004年第1期20卷 99-103页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅曾耀英组织移植与免疫教育部重点实验室(暨南大学) 广州510632

β2 微球蛋白 (β2 m)是主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅰ类分子的轻链部分 ,为制备MHCⅠ类分子四聚体的必要成分。根据已报道的序列设计特异引物 ,利用RT PCR方法从人白细胞中克隆了 β2 m基因 ,并构建了成熟β2 m的原核表达载体 ,在大... 详细信息

β2 微球蛋白 (β2 m)是主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅰ类分子的轻链部分 ,为制备MHCⅠ类分子四聚体的必要成分。根据已报道的序列设计特异引物 ,利用RT PCR方法从人白细胞中克隆了 β2 m基因 ,并构建了成熟β2 m的原核表达载体 ,在大肠杆菌中得到高效表达。表达的β2 m大部分在包涵体中 ,经洗涤、变性和复性 ,并以强阴离子交换柱层析纯化 ,获得SDS PAGE纯的人重组 β2 m ,Western印迹法分析表明该蛋白具有与抗人天然 β2 m抗体反应的特性。此工作为制备MHCⅠ类分子四聚体奠定基础。

关键词： β2-微球蛋白基因克隆大肠杆菌表达基因克隆重组蛋白包涵体

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妊娠水平孕酮体外对HIV-1感染和复制的影响

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中国免疫学杂志 2006年第5期22卷 445-448页

作者：李海仙曾耀英肇静娴曾祥凤李孝建暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

目的:研究相当于妊娠后外周血和胎盘局部浓度的孕酮(P4)体外对HIV-1感染及复制的影响。方法:检测终浓度为10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母胎界面局部浓度)的P4对HIV-1介导细胞融合的影响;ELISA法检测感染HIV的... 详细信息

目的:研究相当于妊娠后外周血和胎盘局部浓度的孕酮(P4)体外对HIV-1感染及复制的影响。方法:检测终浓度为10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母胎界面局部浓度)的P4对HIV-1介导细胞融合的影响;ELISA法检测感染HIV的MT-2细胞培养上清p24抗原含量来探讨对HIV-1复制的影响;流式细胞术检测对淋巴细胞活化后CD69表达的影响和3H-TdR掺入法检测对淋巴细胞增殖的影响。结果:10-5mol/L的P4可以明显抑制HIV-1介导的细胞融合,并且降低感染细胞培养上清中p24抗原含量,两种浓度对淋巴细胞的活化和增殖都有抑制作用。结论:相当于妊娠后母胎界面局部浓度的P4体外可以抑制HIV-1感染和复制,其机制与抑制淋巴细胞活化和增殖有关。

关键词：妊娠孕酮人类免疫缺陷病毒细胞融合活化

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脐血和外周血单个核细胞培养上清影响HIV-1感染的体外实验研究

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中国病理生理杂志 2006年第4期22卷 638-641页

作者：李海仙曾耀英曾祥凤肇静娴李孝建王通暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:体外研究脐血和外周血单个核细胞(CBMC和PBMC)培养上清对HIV-1感染的影响,为发现抗HIV-1的可溶性因子奠定基础。方法:PHA刺激CBMC和PBMC后5h和12h收集上清,加入荧光标记的HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞培养体系中,2h后在倒置荧光显微镜下... 详细信息

目的:体外研究脐血和外周血单个核细胞(CBMC和PBMC)培养上清对HIV-1感染的影响,为发现抗HIV-1的可溶性因子奠定基础。方法:PHA刺激CBMC和PBMC后5h和12h收集上清,加入荧光标记的HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞培养体系中,2h后在倒置荧光显微镜下观察其对细胞融合的影响;用Luminex100TM分析仪检测收集上清中细胞因子含量。结果:PHA刺激CBMC和PBMC后5h和12h的上清均可抑制HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞融合,同一时间收集的PBMC和CBMC上清对HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞融合的抑制作用无差异,但5h上清的抑制作用强于12h的上清;CBMC5h上清中促炎症细胞因子比PBMC5h上清为低,而CCR5配体MIP-1α和RANTES则比PBMC5h上清高,差异显著(P<0·05)。结论:通过脐血和外周血单个核细胞可以制备有效抗HIV感染的可溶性因子,可能为艾滋病治疗药物提供新的来源。

关键词：胎血单核细胞细胞因子类 HIV-1

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MLR中刺激细胞活化状态对应答T细胞CD69表达的影响

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中国病理生理杂志 2002年第8期18卷 913-917页

作者：肇静娴曾耀英何贤辉狄静芳曾山王南暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :研究混合淋巴细胞反应 (MLR)中刺激细胞的活化状态对应答T细胞活化的影响 ,为指导临床的组织器官移植提供一定理论依据。方法 :混合淋巴细胞培养 (MLC)前对刺激细胞进行不同预处理以改变其功能状态 ,利用单克隆抗体与流式细胞术 ... 详细信息

目的 :研究混合淋巴细胞反应 (MLR)中刺激细胞的活化状态对应答T细胞活化的影响 ,为指导临床的组织器官移植提供一定理论依据。方法 :混合淋巴细胞培养 (MLC)前对刺激细胞进行不同预处理以改变其功能状态 ,利用单克隆抗体与流式细胞术 ,在混合培养后不同时点对各组应答T细胞活化表面分子CD69的表达程度进行分析。结果 :在培养 2 4h、48h和 72h后 ,MLCa组 (刺激细胞经预先活化组 )应答T细胞的CD69表达百分率均明显高于MLC组 (刺激细胞未经预先活化组 ) ,分别为 5 2 1 %± 0 2 4 %vs 1 98%± 0 33 % ,2 9 81 %± 0 85 %vs 2 0 65 %±1 0 0 %和 39 61 %± 1 62 %vs 1 3 49%± 0 60 % ,(P <0 0 1 )。结论

关键词：刺激细胞 T细胞混合淋巴细胞培养试验活化分析流式细胞术器官移植移植免疫

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卵巢切除对成年小鼠免疫系统淋巴细胞亚群组成的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第2期21卷 254-255页

作者：赵莉曾耀英罗璐俞瑜王青狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

　目的: 研究卵巢切除对成年小鼠胸腺和外周淋巴器官淋巴细胞亚群组成的影响。方法: 用双色免疫荧光结合流式细胞仪, 检测成年小鼠双侧卵巢切除 14d后, 胸腺、脾脏和腹腔淋巴细胞亚群的比例。结果: 与伪手术组相比较, 卵巢切除的成年小... 详细信息

　目的: 研究卵巢切除对成年小鼠胸腺和外周淋巴器官淋巴细胞亚群组成的影响。方法: 用双色免疫荧光结合流式细胞仪, 检测成年小鼠双侧卵巢切除 14d后, 胸腺、脾脏和腹腔淋巴细胞亚群的比例。结果: 与伪手术组相比较, 卵巢切除的成年小鼠胸腺CD4+ CD8+ T细胞的比率显著升高(P<0. 05), CD4- CD8- T细胞和CD4+ CD8- T细胞的比率显著降低(P<0. 05); 脾脏和淋巴结中CD4+ CD8- T细胞的比率显著降低(P<0. 05)。结论: 成年小鼠切除卵巢后, 可明显影响免疫系统淋巴细胞亚群的组成; 对于胸腺T细胞的发育及向外周输出也有一定的影响。

关键词：卵巢切除胸腺细胞流式细胞术

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天花粉蛋白诱导人类白血病细胞株HL-60细胞凋亡的研究

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中国病理生理杂志 2001年第3期17卷 200-203,T001页

作者：何贤辉曾耀英孙荭曾洁铭徐丽慧狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白 (TCS)诱导人类白血病细胞株HL - 6 0细胞发生凋亡的作用及放线菌酮 (CHX)对此作用的影响。方法 :采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL - 6 0细胞发生凋亡的情况。结果 :流式细胞... 详细信息

目的 :研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白 (TCS)诱导人类白血病细胞株HL - 6 0细胞发生凋亡的作用及放线菌酮 (CHX)对此作用的影响。方法 :采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL - 6 0细胞发生凋亡的情况。结果 :流式细胞术分析表明TCS能够诱导HL - 6 0细胞发生明显的凋亡现象 ,TCS (2 0mg/L)处理48h细胞凋亡百分率为 48 7%± 2 3% ( x±s) ,明显高于对照组的凋亡率 (6 3%± 1 0 % ) (P <0 0 5 ) ,而CHX (5mg/L)相同条件下诱导的凋亡率为 6 5 3%± 3 9%。TCS诱导的凋亡现象进一步为荧光显微镜的观察及DNA凝胶电泳所证实 ,TCS处理的细胞中有许多细胞呈现典型的凋亡细胞核形态改变 ,如染色体凝缩、核碎裂等 ;DNA凝胶电泳显示TCS处理的细胞呈典型的梯级格局。进一步研究表明预先以低浓度CHX (0 2mg/L)处理可显著加强TCS的作用 ,而在这个浓度下单独CHX并不诱导明显的细胞凋亡。TCS诱导HL - 6 0细胞的凋亡呈时间和剂量依赖关系。结论 :TCS能够诱导HL - 6 0细胞发生明显的凋亡 ,CHX可加强这种作用。

关键词：天花粉素放线菌酮细胞凋亡流式细胞术白血病 HL-60细胞

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