检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2004年第6期20卷 659-663页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表... 详细信息

目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表达并鉴定。结果 :克隆到PD L1cDNA编码区的全长序列 ,经DNA测序证明其与已报道的序列一致。同时构建了在羧基端带有His6标签的PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。免疫印迹分析表明 ,在IPTG诱导后表达的PD L1胞外区蛋白 ,相对分子质量 (Mr)为 2 50 0 0 ,与理论值的大小相符。该重组蛋白能与抗His6标签的单抗 (mAb)特异性反应。结论 :成功地克隆PD L1基因 ,其胞外区蛋白在大肠杆菌中获得表达 ,为利用PD L1转基因修饰移植物或以PD

关键词： PD-L1 cDNA克隆淋巴细胞重组蛋白

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小檗碱对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第4期21卷 418-421页

作者：杜丽蕊何贤辉徐丽慧曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法... 详细信息

目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法建立模型,Ber处理的DTH组每天腹腔注射(i.p)Ber,连续7d,总剂量为30mg/kg体质量。激发后48h,取小鼠双耳称重了解Ber对炎症抑制率的影响。镜下观察耳廓局部组织的变化;以结晶紫法检查Ber对脾脏T淋巴细胞与细胞外基质(ECM)黏附作用的影响;以膜联蛋白V(AnnexinV)染色检查淋巴结细胞的凋亡率。结果:双耳称重的结果显示,Ber处理的DTH组与DTH组具有显著的差异(P<0.05),能明显抑制DNFB引起的炎症反应;耳廓局部组织学检测也表明,Ber能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润。Ber处理的DTH组的T细胞与ECM的黏附能力明显降低(P<0.05)。Ber处理的DTH组与DTH组和对照组的细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:Ber对DNFB诱导的小鼠DTH具有明显的抑制作用,降低小鼠T细胞与ECM的黏附能力可能是其抑制DTH的机制之一。

关键词：小檗碱淋巴细胞细胞黏附迟发型超敏反应

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视网膜色素上皮细胞诱导活化淋巴细胞的凋亡

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中华眼底病杂志 1999年第4期15卷 241-244页

作者：彭广华李志杰李辰暨南大学组织移植与免疫实验中心眼科学实验室广州510632

目的　观察视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞对体外抗原特异性活化淋巴细胞的影响，探索ＲＰＥ细胞在眼免疫赦免中的作用。　方法　建立ＲＰＥ与抗原特异性Ｔ淋巴细胞系和静止淋巴细... 详细信息

目的　观察视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞对体外抗原特异性活化淋巴细胞的影响，探索ＲＰＥ细胞在眼免疫赦免中的作用。　方法　建立ＲＰＥ与抗原特异性Ｔ淋巴细胞系和静止淋巴细胞之间的共培养系统。使用基因组ＤＮＡ电泳、ＤＮＡ末端标记和流式细胞技术检测凋亡的诱导情况。　结果　与ＲＰＥ共培养的抗原特异性活化淋巴细胞出现凋亡征象。随着时间的延长，凋亡细胞的数量逐渐增加。定量分析表明：共育２４小时的凋亡细胞占５．９５％；４８小时占９．３８％；７２小时占１７．９５％。与此相反，ＲＰＥ对于静止的Ｔ细胞则不具有显著诱导凋亡的作用。　结论　ＲＰＥ细胞具有诱导入侵淋巴细胞凋亡的能力。这种现象作为免疫反应的限制机制，在眼后节免疫赦免的维持和保护眼免受免疫性炎症反应中可能具有重要的意义。

关键词：视网膜色素上皮细胞 RPE 细胞凋亡

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表皮生长因子对传代培养的大鼠生长板软骨细胞增殖与胶原合成的影响

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中国病理生理杂志 2006年第3期22卷 592-596页

作者：季煜华曾耀英俞瑜暨南大学组织移植与免疫研究中心教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨不同浓度的表皮生长因子(EGF)对传代培养的大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)增殖和胶原合成的影响。方法:分离、培养RGC,分别用Westernblot和阿尔新蓝(Alcineblue)染色检测各代RGC中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达;用[3H]-TdR和[3H]-prol... 详细信息

目的:探讨不同浓度的表皮生长因子(EGF)对传代培养的大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)增殖和胶原合成的影响。方法:分离、培养RGC,分别用Westernblot和阿尔新蓝(Alcineblue)染色检测各代RGC中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达;用[3H]-TdR和[3H]-proline掺入分别检测1、10和100μg/LEGF对第1、3和5代RGC增殖和胶原合成的影响。结果:原代培养的RGC表达Ⅱ型胶原和蛋白多糖,从第4代起Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达迅速降低,RGC发生了去分化。[3H]-TdR掺入表明,EGF促进第1代RGC的增殖(P<0.01),3个浓度的作用依次为:1μg/L>10μg/L>100μg/L,差异显著(P<0.01);3个浓度的EGF对第3代RGC保持了相近的促增殖作用(P<0.01);对第5代RGC均无促增殖作用(P>0.05)。与促增殖作用不同,不同浓度EGF促不同传代的RGC的[3H]-proline掺入率比对照组均高20%左右(P<0.01)。结论:EGF具有促进培养RGC增殖和胶原合成的作用,连续传代引起的去分化降低了RGC对EGF促增殖作用的反应,但对EGF的促胶原合成作用没有产生影响。

关键词：软骨细胞生长面表皮生长因子胶原

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染料木黄酮抑制生长板软骨细胞的增殖与基质合成

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中国病理生理杂志 2007年第8期23卷 1590-1592页

作者：季煜华曾耀英俞瑜暨南大学组织移植与免疫研究中心教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨染料木黄酮对大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)的形态、增殖和胞外基质成分合成的影响。方法:原代培养RGC,1×10-6μmol/L-1×10-4μmol/L染料木黄酮处理第1代RGC 24 h,观察RGC形态,同位素掺入检测RGC增殖、胶原和蛋白多糖合... 详细信息

目的:探讨染料木黄酮对大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)的形态、增殖和胞外基质成分合成的影响。方法:原代培养RGC,1×10-6μmol/L-1×10-4μmol/L染料木黄酮处理第1代RGC 24 h,观察RGC形态,同位素掺入检测RGC增殖、胶原和蛋白多糖合成,RT-PCR检测collagenⅡ和aggrecan基因表达。结果:染料木黄酮改变了RGC的形态,随着浓度的升高,突起和漂浮细胞的数量增加。染料木黄酮剂量依赖性地抑制RGC的增殖、胶原和蛋白多糖的合成(P<0.05),以及collagenⅡ和aggrecan mRNA的转录。结论:染料木黄酮抑制RGC的增殖和胞外基质的合成。

关键词：染料木黄酮软骨细胞生长面胶原Ⅱ型基因,aggrecan

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尿酸钠对BALB/c小鼠抗体应答及树突状细胞和迟发型超敏反应的影响

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中国病理生理杂志 2010年第3期26卷 424-429页

作者：刘春永王飞鹏郭贺高琦何贤辉暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析D... 详细信息

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析DC表型,评价尿酸钠体外对DC成熟的效应。以二硝基氟苯建立迟发型超敏反应(DTH)模型,分析尿酸钠在体内对细胞免疫应答的影响。结果:传统弗氏佐剂可极大地增强小鼠对TCS的抗体应答,尿酸钠佐剂对抗体应答不但没有促进,与单独使用免疫原相比,抗体应答反而明显降低。流式细胞术分析显示,尿酸钠对DC表达CD11c和CD83没有影响,但可明显提高MHCII的表达水平。DTH模型中,尿酸钠增强致敏原引发的耳廓肿胀程度,并促进DTH小鼠淋巴细胞的体外增殖能力。结论:尿酸钠悬浮液作为佐剂,对细胞免疫有显著增强作用,而对体液免疫应答却有一定的抑制作用,提示该佐剂在疫苗研究中有潜在应用前景。

关键词：尿酸钠体液免疫应答树突细胞迟发型超敏反应

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大鼠肋生长板软骨细胞的分离、培养及生物学特性的研究

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中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 997-1000页

作者：季煜华俞瑜曾耀英暨南大学组织移植与免疫研究中心教育部重点实验室广东广州510632

目的建立大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)分离、培养的方法,探讨其生物学特性,为软骨细胞增殖分化的调控和软骨组织工程修复的研究建立实验基础。方法显微解剖出大鼠肋生长板软骨,酶消化法获得分散的单个RGC。观察单层培养的不同代数RGC的细... 详细信息

目的建立大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)分离、培养的方法,探讨其生物学特性,为软骨细胞增殖分化的调控和软骨组织工程修复的研究建立实验基础。方法显微解剖出大鼠肋生长板软骨,酶消化法获得分散的单个RGC。观察单层培养的不同代数RGC的细胞形态变化,并进行细胞生长动力学分析;组织化学和免疫细胞化学方法检测不同代数RGC蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达。结果本实验分离的RGC中活细胞比例大于98%;原代培养细胞呈多角形或圆形,第6代细胞仍保持多角的形态;前4代细胞的每日倍增指数随着传代次数的增加而增加,第5代后显著降低;原代培养的RGC中Ⅱ型胶原阳性染色细胞比例大于95%,阿尔新蓝染色也呈阳性;随着传代次数增加阳性细胞的比例下降。结论本研究所建立的分离培养方法可以获得高纯度、高活性的软骨细胞,前3代RGC保持了在体软骨细胞的表型是研究软骨增殖分化调控的良好材料。

关键词：生长面软骨细胞胶原Ⅱ型蛋白聚糖类

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妊娠激素对HIV-1体外感染MT-2细胞及复制的影响

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哈尔滨医科大学学报 2006年第1期40卷 6-9页

作者：李海仙曾耀英曾祥凤肇静娴王通林羿暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的研究妊娠激素对HIV-1体外感染MT-2细胞及复制的影响。方法检测终浓度为1×106U/L的重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)和终浓度为10-7mol/L(相当于妇女分泌期外周血水平)、10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母... 详细信息

目的研究妊娠激素对HIV-1体外感染MT-2细胞及复制的影响。方法检测终浓度为1×106U/L的重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)和终浓度为10-7mol/L(相当于妇女分泌期外周血水平)、10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母胎界面局部浓度)的雌二醇(E2)和孕酮(P4)对HIV-1介导荧光标记的HIV-1ⅢB/H9与未标记荧光的MT-2细胞融合的影响;ELISA法检测感染HIV的MT-2细胞培养上清p24抗原含量来探讨妊娠激素对HIV-1复制的影响。结果10-5mol/L的E2和P4可以明显抑制HIV-1介导的细胞融合,合胞体形成数分别为14.87±2.18和16.52±3.20,与对照组(28.93±4.22)比较有极显著性差异(P<0.01),hCG和10-6mol/L的E2也能抑制HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞的融合,融合数分别为22.18±3.87和24.16±4.25,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。hCG及10-5mol/L E2和P4能明显降低感染细胞培养上清中p24抗原含量,依次为(42.61±2.97)pg/ml(、44.28±3.42)pg/ml和(45.37±2.88)pg/ml,与对照组(57.22±3.10)pg/ml比较有显著性差异(P<0.05)。结论妊娠激素hCG、E2和P4体外可以抑制HIV-1感染MT-2细胞及在其内复制。

关键词：妊娠激素人类免疫缺陷病毒细胞融合复制

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小鼠NKT细胞体外扩增的初步研究

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哈尔滨医科大学学报 2007年第6期41卷 541-543页

作者：郭蓉姣黄秀艳梁兆端曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的探索小鼠脾脏NKT细胞的分离、纯化及体外培养扩增的方法。方法分离小鼠脾细胞,制成单细胞悬液,α-半乳糖神经鞘胺醇(α-galactosylceramide,α-Galcer)和rhIL-2作用下刺激其活化增殖,不同时间点取样,利用双色免疫荧光抗体标记技术... 详细信息

目的探索小鼠脾脏NKT细胞的分离、纯化及体外培养扩增的方法。方法分离小鼠脾细胞,制成单细胞悬液,α-半乳糖神经鞘胺醇(α-galactosylceramide,α-Galcer)和rhIL-2作用下刺激其活化增殖,不同时间点取样,利用双色免疫荧光抗体标记技术和流式细胞术(FACS)检测NKT细胞纯度,并用MTT法检测其对靶细胞K562的杀伤活性。结果脾NKT细胞在第0、4、8、12天计数细胞总数为0.5×107、(1.3±0.1)×107、(1.9±0.2)×107和(2.2±0.2)×107,第0、4、8、12天纯度分别为(6.27±1.04)%、(8.54±1.58)%、(10.65±1.95)%和(21.36±4.34)%;α-Gal-cer和rhIL-2作用下,纯化的NKT细胞较脾新鲜分离的单个核细胞对靶细胞K562的杀伤作用强。在效靶比20∶1时,培养时间为4、8,12天的NKT细胞杀伤率分别为52.7%、71.2%和85.7%,明显高于脾MNC33.8%(P<0.05)。结论在α-Galcer和rhIL-2作用下,小鼠NKT细胞得到扩增,细胞纯度约为22%。在效靶比20∶1时,NKT细胞对K562细胞杀伤率约为86%。

关键词： NKT细胞 α-Galcer IL-2

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凋亡细胞体外抑制T细胞活化

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中国免疫学杂志 2000年第8期16卷 407-411页

作者：张雷孙尔维葛琪曾耀英高伟第一军医大学珠江医院肾移植科广州510515 暨南大学组织移植与免疫国家专业实验室广州510632

目的 :研究凋亡细胞对T细胞活化的影响。方法 :以ConA刺激小鼠脾细胞增殖体系为研究对象 ,观察凋亡细胞预处理后对ConA刺激的脾细胞CD6 9表达的影响。结果 :凋亡细胞可以抑制T细胞活化 ,而活细胞或坏死细胞却不能 ,同时抑制效果与凋亡... 详细信息

目的 :研究凋亡细胞对T细胞活化的影响。方法 :以ConA刺激小鼠脾细胞增殖体系为研究对象 ,观察凋亡细胞预处理后对ConA刺激的脾细胞CD6 9表达的影响。结果 :凋亡细胞可以抑制T细胞活化 ,而活细胞或坏死细胞却不能 ,同时抑制效果与凋亡种类及凋亡诱导方式无关 ,而与凋亡细胞数量密切相关。结论 :研究证明了凋亡细胞可以主动抑制T细胞活化 ,这一发现拓宽了目前对凋亡的认识 ,表明凋亡细胞主动调节免疫反应在一些生命的基本现象和一些疾病中有重要意义。

关键词：细胞凋亡免疫抑制 T细胞活化 CD69

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