检索结果-内蒙古大学图书馆

现代免疫学 2009年第2期29卷 134-138页

作者：姚满林曾耀英狄静芳黄秀艳杨志宋兵暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

为了分析MNC对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的药理效应,探讨其在体内免疫抑制作用的机制,我们采用0.5%DNFB腹部致敏,耳廓激发的方法建立小鼠DTH模型。激发后48 h,取小鼠双耳称重分析MNC对DTH模型小鼠耳组织肿胀、炎... 详细信息

为了分析MNC对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的药理效应,探讨其在体内免疫抑制作用的机制,我们采用0.5%DNFB腹部致敏,耳廓激发的方法建立小鼠DTH模型。激发后48 h,取小鼠双耳称重分析MNC对DTH模型小鼠耳组织肿胀、炎性细胞浸润度和胸腺指数、脾脏指数的影响;光学显微镜下观察小鼠耳廓组织学变化;噻唑兰(MTT)法检测淋巴结淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖情况。双耳称重结果显示,MNC(70 mg/ml)处理组与DTH组相比,能明显抑制DNFB引起的炎症反应(P<0.05);耳廓局部组织学检测也表明,MNC能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润;MNC能降低DTH小鼠胸腺指数和脾脏指数,抑制淋巴结淋巴细胞(P<0.05)和脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05)。实验结果提示,MNC可显著抑制DTH小鼠耳组织肿胀和淋巴细胞浸润程度,降低胸腺和脾脏指数,抑制淋巴细胞的增殖可能是其作用机制之一。

关键词：米诺环素 DNFB 迟发型超敏反应淋巴细胞增殖

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PKC抑制剂Bis Ⅷ对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响

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现代免疫学 2009年第3期29卷 218-222页

作者：赵晓慧曾耀英黄秀艳慕静静暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

研究Bis Ⅷ对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。分离小鼠淋巴结细胞,制备细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在ConA的刺激下,Bis Ⅷ对T淋巴细胞早期活化抗原CD69的表达的影响;用羧... 详细信息

研究Bis Ⅷ对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。分离小鼠淋巴结细胞,制备细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在ConA的刺激下,Bis Ⅷ对T淋巴细胞早期活化抗原CD69的表达的影响;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色结合流式细胞术检测在ConA或者PMA和Ion的刺激下,Bis Ⅷ对所分离的T淋巴细胞增殖的影响。终浓度为1μmol/L、3μmol/L、5μmol/L的Bis Ⅷ对ConA刺激的早期活化抗原CD69的表达具有明显的抑制作用(P<0.01);对ConA或者PMA和Ion刺激的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性。Bis Ⅷ对小鼠淋巴细胞的体外活化及增殖均具有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词： Bis ⅧI 活化增殖流式细胞术

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根皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化、周期、Ca^(2+)离子内流以及凋亡的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第12期25卷 1199-1201页

作者：陆晓宇曾耀英叶燕霞曾祥凤肇静娴暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的:研究根皮素(Ph)对小鼠T淋巴细胞中期活化、细胞周期、Ca2+离子内流以及凋亡的影响,探讨将其发展为免疫干预药物的可能性。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术(FCM)分析Ph对多克隆刺激剂(ConA)刺激下的小鼠T淋巴细胞CD25表达的影... 详细信息

目的:研究根皮素(Ph)对小鼠T淋巴细胞中期活化、细胞周期、Ca2+离子内流以及凋亡的影响,探讨将其发展为免疫干预药物的可能性。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术(FCM)分析Ph对多克隆刺激剂(ConA)刺激下的小鼠T淋巴细胞CD25表达的影响;PI染色法检测Ph对T淋巴细胞周期的影响;Fluo-4/AM染色结合FCM分析Ph对T淋巴细胞Ca2+离子内流的影响;calcein/Co2+技术检测Ph对T淋巴细胞线粒体通透性转换(MPT)的影响,并用DIOC6(3)染色检测其对线粒体膜电势(MMP)的影响。结果:Ph(40,60,80μmol/L)对ConA刺激的T淋巴细胞CD25表达有显著的抑制作用(P<0.01);Ph能抑制T淋巴细胞Ca2+离子内流(P<0.01);细胞周期分析显示,Ph能将T淋巴细胞抑制在S期;且Ph能够诱导和加速MPT,并导致MMP的显著下降。结论:Ph对小鼠T淋巴细胞活化和Ca2+内流具有显著的抑制作用,并能将细胞抑制在S期,能通过线粒体途径诱导T淋巴细胞凋亡,可望发展成为一种新的免疫抑制药物。

关键词：根皮素淋巴细胞流式细胞术抑制作用

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茴香霉素对Jurkat T细胞生物学行为的影响

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现代免疫学 2009年第1期29卷 11-18页

作者：潘山邢飞跃暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632

探讨茴香霉素对Jurkat T细胞活化、增殖、周期及凋亡的影响。应用双荧光抗体标记结合流式细胞仪检测茴香霉素对豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ion)诱导Jurkat T细胞表面分子CD69和CD25的表达;利用倒置显微镜和噻唑蓝(MTT)比色法观察... 详细信息

探讨茴香霉素对Jurkat T细胞活化、增殖、周期及凋亡的影响。应用双荧光抗体标记结合流式细胞仪检测茴香霉素对豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ion)诱导Jurkat T细胞表面分子CD69和CD25的表达;利用倒置显微镜和噻唑蓝(MTT)比色法观察茴香霉素对Jurkat T细胞的集落形成和增殖影响;采用碘化丙锭(PI)染色检测茴香霉素对Jurkat T细胞周期的影响;应用Annexin V-FITC和PI双染色检测茴香霉素对Jurkat T细胞凋亡的影响。结果表明,在PMA和Ion共同刺激下随茴香霉素剂量上升CD69和CD25的表达量逐渐下降;随着茴香霉素剂量增高,Jurkat T细胞的集落形成减小,其对细胞增殖的抑制率最高可达74.29%,使细胞周期停滞于G0/G1期之前;当茴香霉素剂量为40.0~160.0 ng/ml时能明显促进Jutkat T细胞凋亡。结果提示,茴香霉素能明显抑制PMA和Ion刺激下的Jurkat T细胞早期和中期活化,抑制Jurkat T细胞的增殖,使细胞周期停滞于G0/G1期之前,并能促进Jurkat T细胞凋亡。

关键词：茴香霉素 Jurkat T细胞活化增殖周期凋亡

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红车轴草提取物对小鼠同种异基因皮片移植的影响

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中华中医药杂志 2009年第4期24卷 443-446页

作者：杨志黄秀艳狄静芳曾耀英暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632

目的:探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosaeextract,TLE)对小鼠同种异基因皮片移植的影响。方法:受体BALB/c小鼠分为生理盐水对照组(physiologicsaline,PS)与TLE处理组,通过背-背法进行C57BL/6的全厚皮皮片移植,以观察TLE处理组移植皮片生长情况是否优于PS组。取受体小鼠淋巴细胞进行羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFDA-SE)标记的增殖追踪及混合淋巴细胞反应。结果:尾静脉注射TLE25μg/kg每天的处理组移植皮片生长情况优于PS组。TLE处理组BALB/c小鼠淋巴细胞增殖低于PS组。结论:TLE可能参与了小鼠免疫系统调节,诱导了其对同种异基因皮片的耐受。

关键词：红车轴草提取物皮片移植同种异基因增殖混合淋巴细胞反应实验研究

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正常月经周期妇女和自然流产妇女外周血中树突状细胞亚群的变化

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生殖与避孕 2009年第5期29卷 299-303页

作者：沈媛曾耀英肇静娴暨南大学附属第一医院妇产科广州510630 暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的:探讨正常月经周期妇女和自然流产妇女外周血中髓样树突状细胞(myeloid dendritic cell,MDC)和浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,PDC)的变化。方法:选择正常月经周期妇女30例,分别在每个妇女月经周期卵泡期和黄体期... 详细信息

目的:探讨正常月经周期妇女和自然流产妇女外周血中髓样树突状细胞(myeloid dendritic cell,MDC)和浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,PDC)的变化。方法:选择正常月经周期妇女30例,分别在每个妇女月经周期卵泡期和黄体期采集外周血;早期自然流产妇女30例流产后清宫前采集外周血,并以正常早期妊娠妇女为对照组。应用流式细胞术,检测各组外周血单个核细胞中MDC和PDC的百分率及MDC/PDC比率。应用放射免疫法检测各组外周血中雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)的水平。结果:正常月经周期黄体期外周血中MDC的百分率和MDC/PDC比率显著低于卵泡期(P<0.01),PDC的百分率黄体期与卵泡期无统计学差异(P>0.05)。正常月经周期妇女黄体期外周血中E_2和P_4水平显著高于卵泡期(P<0.01)。早期自然流产妇女外周血中MDC的百分率和MDC/PDC比率显著高于正常早孕组(P<0.01),而PDC的百分率与正常早孕组无统计学差异(P>0.05)。自然流产组E_2和P_4水平显著低于正常早孕组(P<0.01)。结论:早期自然流产妇女外周血中MDC的百分率和MDC/PDC比率显著升高,可能参与了导致母体对胎儿发生免疫排斥。

关键词：自然流产外周血树突状细胞亚群

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中华实用诊断与治疗杂志 2010年第5期24卷 426-428,432页

作者：刘毅徐丽慧何贤辉孙建方中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京市210042 暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广州市510632 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广州市510632

目的:构建负载人恶性黑素瘤相关抗原gp100抗原肽的HLA-A*2402四聚体并进行鉴定,为分析gp100抗原肽诱发的特异性细胞免疫应答创造条件。方法:以羧基端融合生物素化酶BirA底物肽的HLA-A*2402重链胞外域融合蛋白、人β2-微球蛋白、gp100 VY... 详细信息

目的:构建负载人恶性黑素瘤相关抗原gp100抗原肽的HLA-A*2402四聚体并进行鉴定,为分析gp100抗原肽诱发的特异性细胞免疫应答创造条件。方法:以羧基端融合生物素化酶BirA底物肽的HLA-A*2402重链胞外域融合蛋白、人β2-微球蛋白、gp100 VYFFLPDHL抗原肽、PE-链亲和素为材料,制备HLA-A*2402/VYF四聚体;非还原SDS-PAGE鉴定四聚体四聚化程度;三色免疫荧光标记流式细胞术分析HLA-A*2402+健康志愿者外周血gp100特异性CD8+T细胞的频率。结果:HLA-A*2402/VYF四聚体形成率为83%,所制备的四聚体具有与HLA-A*2402+供者抗原特异性CD8+T细胞的结合活性,特异性CD8+T细胞的频率为外周血总CD8+T细胞的0.02%～0.06%。结论:成功制备HLA-A*2402/VYF四聚体并用于检测gp100特异性CD8+T细胞,为研究HLA-A*2402+黑素瘤患者免疫治疗的机制及疗效监测创造了条件。

关键词：恶性黑素细胞瘤 MHC四聚体 HLA-A^＊2402 gp100

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孕酮处理树突状细胞诱导同种移植免疫耐受的研究

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生殖与避孕 2009年第4期29卷 201-205页

作者：沈媛曾耀英肇静娴暨南大学附属第一医院妇产科广州510630 暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的:探讨孕酮(P4)处理的树突状细胞(dendritic cell,DC)在诱导同种异基因移植免疫耐受中的作用。方法:实验小鼠分为4组,每组动物供体为C57BL/6雄性小鼠8只,受体为BALB/c雄性小鼠8只。体外培养供体小鼠骨髓来源DC,然后用P4处理。受体小... 详细信息

目的:探讨孕酮(P4)处理的树突状细胞(dendritic cell,DC)在诱导同种异基因移植免疫耐受中的作用。方法:实验小鼠分为4组,每组动物供体为C57BL/6雄性小鼠8只,受体为BALB/c雄性小鼠8只。体外培养供体小鼠骨髓来源DC,然后用P4处理。受体小鼠在皮肤移植前经尾静脉分别输注体外培养且经P4处理的供体小鼠DC、供体小鼠成熟DC以及不成熟DC,输注磷酸盐缓冲液为对照组。1周后受体小鼠进行同种异基因皮肤移植,手术后观察皮肤存活情况,应用流式细胞术检测手术前后受体小鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+T)百分率的变化。结果:在同种异基因皮肤移植中,受体小鼠尾静脉输注经P4处理的DC组分别与成熟DC组、不成熟DC组和对照组比较,移植皮肤存活时间显著延长(P<0.01);与成熟DC组、不成熟DC组和对照组比较,P4处理组外周血中CD4+CD25+T百分率显著升高(P<0.01)。结论:P4处理的DC可以延长同种异基因移植物存活时间。

关键词：树突状细胞(DC) 孕酮(P4) 母-胎免疫耐受皮肤移植小鼠

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山奈酚对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第12期25卷 1106-1108,1111页

作者：慕静静曾耀英黄秀艳赵晓慧宋兵暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究山奈酚(KA)对小鼠T细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。方法:分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)进行刺激,以不同终浓度的KA与T细胞共培养。流式细胞术结合双色荧光抗体染... 详细信息

目的:研究山奈酚(KA)对小鼠T细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。方法:分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)进行刺激,以不同终浓度的KA与T细胞共培养。流式细胞术结合双色荧光抗体染色,检测T细胞早期活化抗原CD69的表达;MTT法检测KA对T细胞增殖的影响;用碘化丙锭(PI)染色分析T细胞的细胞周期。结果:终浓度为10、20和40μmol/L的KA可以显著抑制ConA刺激的T细胞CD69的表达,由ConA组的(39.11±1.17)%,分别降低为(30.64±0.23)%、(27.95±0.04)%和(5.63±0.37)%(P<0.05);MTT法结果显示,KA对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖,具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性;PI染色结果显示,随着KA浓度的增加,均能明显阻止淋巴细胞进入S期和G2/M期。结论:KA可显著抑制ConA刺激下的小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖;它能抑制T淋巴细胞进入细胞分裂期。

关键词：山奈酚 T淋巴细胞活化增殖细胞周期流式细胞术

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灭活HIV-1颗粒对人CD4^+T细胞活化标记分子CD25、CD71和HLA-DR表达的作用

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免疫学杂志 2009年第4期25卷 397-401,417页

作者：黄秀艳曾耀英王辉暨南大学组织移植与免疫中心深圳市东湖医院肝病研究所

目的通过深入研究AT-2灭活HIV-1颗粒对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PB-MCs)来源的CD4+T细胞中期活化标记分子(CD25)和晚期活化标记分子(CD71和HLA-DR)的作用,进一步探讨HIV病中普遍性的免疫过度活化的病理... 详细信息

目的通过深入研究AT-2灭活HIV-1颗粒对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PB-MCs)来源的CD4+T细胞中期活化标记分子(CD25)和晚期活化标记分子(CD71和HLA-DR)的作用,进一步探讨HIV病中普遍性的免疫过度活化的病理机制。方法AT-2灭活HIV-1IIIB型病毒颗粒,ELISA法检测p24抗原的含量,调整p24抗原含量为50 ng/mL;然后按照p24抗原量为0.1 ng/mL(记作HIV-1 1/500组)、1 ng/mL(记作HIV-1 1/50组)和10 ng/mL(记作HIV-11/5组)的浓度加入到PBMCs中,以植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)组为阳性对照,24 h后,运用免疫荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测PBMCs中CD4+T细胞CD25的表达百分率;48 h后,运用免疫荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测PBMCs中CD4+T细胞CD71和HLA-DR的表达百分率。结果24 h后,空白对照组中,CD4+T细胞CD25的表达百分率为(9.46±2.12)%,PHA组为(79.45±3.72)%,HIV-1 1/500组为(14.89±2.53)%,HIV-1 1/50组为(19.04±2.41)%,HIV-11/5组为(23.50±2.21)%;48 h后,空白对照组中,CD4+T细胞CD71的表达百分率为(3.39±1.40)%,PHA组为(75.52±5.14)%,HIV-1 1/500组为(11.70±2.34)%,HIV-1 1/50组为(18.45±3.19)%,HIV-1 1/5组为(22.59±2.96)%;CD4+T细胞HLA-DR的表达百分率为(8.11±2.13)%,PHA组为(66.48±6.81)%,HIV-1 1/500组为(14.52±1.68)%,HIV-1 1/50组为(19.94±2.38)%,HIV-1 1/5组为(23.74±2.30)%。结论AT-2灭活的HIV-1IIIB颗粒能够明显的诱导PBMCs中CD4+T细胞活化,并可能引起CD4+T细胞增殖,从而为HIV-1感染提供更多的"燃料细胞"。

关键词： HIV-1颗粒 CD25 CD71 HLA-DR 同种异基因识别

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