检索结果-内蒙古大学图书馆

现代免疫学 2009年第5期29卷 392-396页

作者：尹乐乐曾耀英侯会娜暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫研究中心广州510632

探讨连翘提取物(FS)对盲肠结扎穿孔(CLP)诱导脓毒血症小鼠的影响以及FS对CLP诱导小鼠脓毒血症体内T淋巴细胞的影响。建立脓毒血症动物模型,观察7 d内FS对小鼠存活率的影响;计算各组小鼠胸腺和脾脏指数;MTT比色法以及CFDA-SE染色分析,流... 详细信息

探讨连翘提取物(FS)对盲肠结扎穿孔(CLP)诱导脓毒血症小鼠的影响以及FS对CLP诱导小鼠脓毒血症体内T淋巴细胞的影响。建立脓毒血症动物模型,观察7 d内FS对小鼠存活率的影响;计算各组小鼠胸腺和脾脏指数;MTT比色法以及CFDA-SE染色分析,流式细胞术(FCM)检测FS对机体T淋巴细胞增殖的影响。FS可延长CLP诱导脓毒血症小鼠的存活率;FS药物治疗组小鼠脾脏的重量和指数明显增加和小鼠胸腺指数明显增加;药物FS治疗组对脓毒血症早期炎症性小鼠淋巴结细胞的增殖有抑制作用。FS对CLP小鼠胸腺和脾脏有保护作用。对脓毒血症早期炎症引起的T淋巴细胞增殖有抑制作用。

关键词：连翘提取物脓毒血症 T淋巴细胞

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γ-分泌酶抑制剂DAPT抑制Jurkat T细胞增殖

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第2期30卷 152-156页

作者：李玉婷邢飞跃郭中峰暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫研究中心广东广州510632

目的:探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT在体外对人T淋巴细胞白血病JurkatT细胞株增殖的抑制作用及其某些机制。方法:通过倒置显微镜和MTT法检测DAPT对Jurkat T细胞聚集的影响和对其增殖的抑制作用;利用碘化丙锭染色结合流式细胞术检测DAPT对Jurk... 详细信息

目的:探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT在体外对人T淋巴细胞白血病JurkatT细胞株增殖的抑制作用及其某些机制。方法:通过倒置显微镜和MTT法检测DAPT对Jurkat T细胞聚集的影响和对其增殖的抑制作用;利用碘化丙锭染色结合流式细胞术检测DAPT对Jurkat T细胞周期的影响;藉免疫印迹法检测DAPT对Jurkat T细胞周期蛋白ICBP90表达的影响。结果:DAPT能显著影响Jurkat T细胞的聚集,抑制Jurkat T细胞的增殖,使其细胞周期停滞于S期,且周期蛋白ICBP90的表达下调。结论:γ-分泌酶抑制剂DAPT能够抑制Jurkat T细胞的增殖和细胞周期的进行,其抑制作用可能与ICBP90蛋白表达的下调有关。

关键词：反义CCAAT盒结合蛋白(ICBP90) 人T淋巴细胞白血病JurkatT细胞 γ-分泌酶抑制剂DAPT 细胞增殖细胞周期

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P38α对人血管内皮一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子转录活性的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第6期30卷 610-613页

作者：刘娜邢飞跃暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的:研究P38α对人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子转录活性的影响。方法:利用硝酸还原酶法检测不同浓度氯化钴作用下人脐静脉血管内皮细胞-12(HUVEC-12)上清中的一氧化氮(NO)的含量。以pRL-TK为内参照,将已经构建好的pGL2-e... 详细信息

目的:研究P38α对人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子转录活性的影响。方法:利用硝酸还原酶法检测不同浓度氯化钴作用下人脐静脉血管内皮细胞-12(HUVEC-12)上清中的一氧化氮(NO)的含量。以pRL-TK为内参照,将已经构建好的pGL2-eNOS-p质粒分别与pGL3-BASIC、pcDNA3、p38 a、及p38 a(AF)共转染HUVEC-12细胞,利用双荧光素酶报告基因技术检测eNOS基因启动子转录活性,并在共转染的基础上加氯化钴刺激,并检测eNOS基因启动子转录活性。结果:氯化钴刺激下HUVEC-12细胞培养上清的NO含量随氯化钴作用浓度增加而提高,成功建立化学缺氧模型;p38 a在正常和缺氧条件下均明显降低eNOS基因启动子的活性,可被无活性诱变体p38 a(AF)逆转。结论:P38α下调人血eNOS基因启动子转录活性。

关键词：一氧化氮合酶(NOS) 启动子 P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK) 氯化钴内皮细胞

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角质形成细胞与表皮干细胞双向电泳图谱差异分析

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中华烧伤杂志 2009年第1期25卷 61-62页

作者：李孝建李延仓曾耀英沈雁杨小红暨南大学第四附属医院广州市红十字会医院烧伤科广州510220 暨南大学生命科学院组织移植与免疫中心

1材料与方法1．1主要试剂与仪器pH同相梯度干胶条（IPGstrip pH3～10，长17cm）购自广州威佳公司，dispaseⅡ、表皮干细胞（ESC）培养基、FBS和DMEM培养基购自美国Gibco公司，角蛋白19购自美国San-ta Cruz公司。等电聚焦仪、垂直电泳系统、

1材料与方法 1．1主要试剂与仪器 pH同相梯度干胶条（IPGstrip pH3～10，长17cm）购自广州威佳公司，dispaseⅡ、表皮干细胞（ESC）培养基、FBS和DMEM培养基购自美国Gibco公司，角蛋白19购自美国San-ta Cruz公司。等电聚焦仪、垂直电泳系统、

关键词：双向电泳图谱表皮干细胞角质形成细胞 DMEM培养基 dispaseⅡ Gibco 角蛋白19 等电聚焦仪

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活化大鼠肝星状细胞的蛋白质表达谱

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中华肝脏病杂志 2009年第12期17卷 921-924页

作者：季菊玲张锦生王雪晴季煜华南通大学医学院病理学教研室 226001 复旦大学上海医学院病理学系暨南大学组织移植与免疫中心

目的用在线二维纳升高效液相结合串联质谱（2D nanoLC—MS／MS）技术分析体外培养大鼠原代肝星状细胞（HSC）的蛋白质表达谱。方法分离培养大鼠原代HSC，取体外培养第10天自动活化的大鼠HSC总蛋白质，通过2D nanoLC—MS／MS对酶解所获... 详细信息

目的用在线二维纳升高效液相结合串联质谱（2D nanoLC—MS／MS）技术分析体外培养大鼠原代肝星状细胞（HSC）的蛋白质表达谱。方法分离培养大鼠原代HSC，取体外培养第10天自动活化的大鼠HSC总蛋白质，通过2D nanoLC—MS／MS对酶解所获肽段进行分离和鉴定，并对鉴定的蛋白质进行细胞定位和功能分类。结果从50μg HSC总蛋白质中鉴定出1014种蛋白质，相对分子质量范围为7832～588364；主要分布于细胞核、细胞骨架、线粒体、内质网，分别占25％、17％、13％、13％。蛋白质功能主要与核酸代谢、细胞器组装、信号传导、能量代谢等生理进程有关，分别占17％、14％、10％、9％；其中细胞骨架蛋白α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白和结蛋白是活化大鼠HSC特异性表达的蛋白质。结论本研究获得了目前较为全面的活化大鼠原代HSC的蛋白喷表达谱，为深入研究HSC的活化机制奠定了基础。

关键词：肝星状细胞蛋白质组串联质谱分析二维纳升高效液相

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子痫前期患者血清细胞因子表达谱及其临床意义

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生殖与避孕 2009年第10期29卷 683-687页

作者：钱中清曾耀英朱斌季煜华何芳黄秀燕暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632 蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染免疫重点实验室蚌埠232001 广州市番禺区何贤纪念医院产科广州510632

目的:研究子痫前期患者血清中细胞因子表达谱的变化及其临床意义。方法:①以Luminex液相芯片技术检测子痫前期患者(A组)16例、正常妊娠妇女(B组)19例、正常非孕妇(C组)12例3组人群血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-γ、TNF-α、MCP-1... 详细信息

目的:研究子痫前期患者血清中细胞因子表达谱的变化及其临床意义。方法:①以Luminex液相芯片技术检测子痫前期患者(A组)16例、正常妊娠妇女(B组)19例、正常非孕妇(C组)12例3组人群血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-γ、TNF-α、MCP-1、VEGF、NT-proBNP等细胞因子表达水平,并进行比较;②收集、整理和分析3组对象血压、白细胞计数、尿蛋白及尿酸等临床常规检查指标,并与细胞因子表达谱的变化间进行对比分析。结果:①与B比,A组血清中IL-8、MCP-1、IL-6、TNF-α和VEGF5种细胞因子表达水平升高,有统计学差异(P<0.05),与疾病严重程度无明显相关性;②与B比,轻度(A1组)和重度(A2组)子痫前期者白细胞计数、尿酸水平均升高,有统计学差异(P<0.05或0.01);A1组与A2组间比较,尿酸水平有统计学差异(P<0.05),而白细胞计数水平则无统计学差异(P>0.05)。结论:子痫前期患者血清细胞因子表达呈炎症及血管损伤特征,尿酸水平可作为其疾病严重程度的监控指标。

关键词：子痫前期细胞因子 Luminex

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负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B*1703可溶性单体及其四聚体的制备和鉴定

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第4期30卷 349-354页

作者：王笑迎欧阳东云何贤辉徐丽慧施焕敬高琦郭贺暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广东广州510632

目的:制备负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B*1703可溶性单体及其四聚体。方法:以含Mamu-B*1703重链cDNA序列的pMD19-T克隆为模板,通过PCR的方法克隆Mamu-B*1703重链基因,进而构建羧基端融合生物素化酶BirA底物肽(BSP)的Mamu-B*1703重链... 详细信息

目的:制备负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B*1703可溶性单体及其四聚体。方法:以含Mamu-B*1703重链cDNA序列的pMD19-T克隆为模板,通过PCR的方法克隆Mamu-B*1703重链基因,进而构建羧基端融合生物素化酶BirA底物肽(BSP)的Mamu-B*1703重链胞外域融合蛋白的表达载体,并在大肠杆菌中获得表达。β微球蛋白、SIV抗原肽共存时,通过稀释法复性可溶性Mamu-B*1703单体,经生物素化并纯化后与荧光素标记的链亲和素按4∶1的比例混合形成四聚体。结果:ELISA检测显示获得具有正确构象的负载SIV抗原肽的Mamu-B*1703四聚体。结论:印度恒河猴Mamu-B*1701特异性抗原肽IW9,与中国恒河猴的Mamu-B*1703相结合形成可溶性Mamu-B*1703/IW9单体和四聚体。

关键词：恒河猴 Mamu-B*1703 猴免疫缺陷病毒四聚体

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雷公藤多甙和FK506滴眼防治大鼠角膜移植免疫排斥反应的比较

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国际眼科杂志 2009年第3期9卷 440-443页

作者：邓宏伟陈建苏李辰姚晓明赵松滨狄静芳暨南大学附属深圳眼科医院中国广东省深圳市518001 暨南大学医学院眼科中国广东省广州市510632 暨南大学医学院组织移植免疫中心中国广东省广州市510632

目的:观察雷公藤多甙(tripterygiitotorum,TⅡ)及FK506滴眼液局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立大鼠角膜移植模型,随机按局部滴用药物分组成A,B,C组,用裂隙灯记录及比较各组移植排斥指数,并比较角膜排斥发生时间。... 详细信息

目的:观察雷公藤多甙(tripterygiitotorum,TⅡ)及FK506滴眼液局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立大鼠角膜移植模型,随机按局部滴用药物分组成A,B,C组,用裂隙灯记录及比较各组移植排斥指数,并比较角膜排斥发生时间。分别于术后15d及30d行常规病理学检查。并通过免疫组化检查CD25,CD5+4在角膜植片基质中的表达。结果:0.3g/LTⅡ及0.5g/LFK506抑制角膜移植免疫排斥反应的效应均有效,两者相比效果无显著性差异。HE染色及免疫组化分析可见15d时各有效组角膜植片厚度基本正常,基质中仅有少量CD25,CD5+4阳性细胞表达、淋巴细胞浸润,新生血管少见。结论:TⅡ与FK506疗效近似。具有抑制高危角膜移植免疫排斥反应发生的临床应用价值。

关键词：雷公藤多甙(TII) 角膜移植移植物排斥

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bFGF特异性结合噬菌体的活性研究

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中国生物工程杂志 2009年第1期29卷 23-26页

作者：颜秋霞吴晓萍黄慧贤聂昌君聂燕芳柯实肖健李校堃温州医学院药学院/浙江省生物技术制药工程重点实验室温州325035 暨南大学医药生物技术研究开发中心广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632

研究从噬菌体随机7肽库中筛选的bFGF特异性结合噬菌体的活性。采用ELISA检测3轮淘选后得到的阳性噬菌体克隆对bFGF的结合曲线。通过竞争抑制实验,分析bFGF结合噬菌体与bFGF的竞争结合活性。采用MTT法检测bFGF结合噬菌体对由bFGF诱导的Ba... 详细信息

研究从噬菌体随机7肽库中筛选的bFGF特异性结合噬菌体的活性。采用ELISA检测3轮淘选后得到的阳性噬菌体克隆对bFGF的结合曲线。通过竞争抑制实验,分析bFGF结合噬菌体与bFGF的竞争结合活性。采用MTT法检测bFGF结合噬菌体对由bFGF诱导的Balb/c3T3细胞增殖的影响。从噬菌体肽库中淘选获得的阳性噬菌体克隆能够特异地与bFGF结合,并呈剂量依赖性,其与固相bFGF的结合能被游离的bFGF竞争抑制,并可抑制由bFGF诱导的Balb/c3T3细胞增殖。bFGF特异性噬菌体可拮抗bFGF的活性,为开发针对bFGF的抗肿瘤短肽类新药提供基础。

关键词：噬菌体展示肽库碱性成纤维细胞生长因子 bFGF结合噬菌体

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nanoLC-ESI/MS/MS在ECV304细胞蛋白质组学研究中的应用

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中国病理生理杂志 2009年第1期25卷 205-208页

作者：李菊玲曾耀英季煜华杜彬复旦大学上海医学院病理学系上海200032 南通大学医学院病理学教研室江苏南通226001 暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632 暨南大学医学院广东广州510632

目的:应用纳升液联用技术(nanoLC-ESI/MS/MS)对ECV304细胞蛋白质组学进行初步分析。方法:提取ECV304细胞总蛋白,经变性、还原、烷基化和酶解,nanoLC-ESI/MS/MS对酶解后的肽段进行分析,数据库(Swissprot)检索鉴定蛋白质,生物信息学工具... 详细信息

目的:应用纳升液联用技术(nanoLC-ESI/MS/MS)对ECV304细胞蛋白质组学进行初步分析。方法:提取ECV304细胞总蛋白,经变性、还原、烷基化和酶解,nanoLC-ESI/MS/MS对酶解后的肽段进行分析,数据库(Swissprot)检索鉴定蛋白质,生物信息学工具对所鉴定的蛋白质进行细胞定位和功能分类。结果:从8μg细胞总蛋白中鉴定了120种蛋白质,所鉴定蛋白质的分子质量(MW)范围从6 648 D至280 739 D,MW<20 kD的蛋白质占24.2%,MW>100 kD的蛋白质占5.0%;主要位于细胞质、细胞骨架、细胞核和细胞膜,分别为27.8%、19.0%、15.2%和10.1%;大多为结构蛋白质和催化活性的蛋白质,分别为36.4%和34.1%,具有信号转导活性的占11.4%;其中角蛋白8、18和vimentin等为内皮细胞特异表达的蛋白质。结论:本研究建立了nanoLC-ESI/MS/MS分析ECV304细胞的蛋白质组学方法,为内皮细胞及内皮细胞损伤机制的蛋白质组学研究奠定了实验基础。

关键词： nanoLC—ESI/MS/MS技术 ECV304细胞蛋白质组

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