检索结果-内蒙古大学图书馆

广东医学 2008年第10期29卷 1631-1633页

作者：郭蓉姣黄秀艳梁兆端狄静芳曾耀英暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632

目的利用α-半乳糖酰基鞘胺醇(α-galactosylceramide,α-Galcer)诱发性C57BL/6J小鼠流产模型,初步探讨NKT细胞活化与C57BL/6J小鼠流产的关系。方法孕7 d和孕10 d C57BL/6J小鼠,每组8只腹腔注射α-Galcer,72 h后处死鼠剖腹探察胚胎数量... 详细信息

目的利用α-半乳糖酰基鞘胺醇(α-galactosylceramide,α-Galcer)诱发性C57BL/6J小鼠流产模型,初步探讨NKT细胞活化与C57BL/6J小鼠流产的关系。方法孕7 d和孕10 d C57BL/6J小鼠,每组8只腹腔注射α-Galcer,72 h后处死鼠剖腹探察胚胎数量。于0,24 h取胎盘淋巴细胞,流式细胞术检测CD3+NK1.1+细胞百分率和CD69+/CD3+NK1.1+细胞百分率,ELISA方法检测α-Galcer处理不同时间血清孕酮(P)水平,并做子宫胎盘免疫组化切片观察。结果C57BL/6J小鼠可由α-Galcer引起流产。胎盘CD3+NK1.1+淋巴细胞在0,24 h分别为(2.96±0.22)%和(4.17±0.67)%,CD69+/CD3+NK1.1+细胞百分率分别为(6.54±1.13)%和(82.45±5.85)%。ELISA方法测得血清P浓度为(0.15±0.01)ng/ml与对照组(1.28±0.03)ng/ml相比差异有显著性。胎盘子宫免疫组化切片显示α-Galcer处理组孕激素受体(PR)表达明显强于对照组。结论α-Galcer可诱发C57BL/6J小鼠流产,NKT细胞的活化及其分泌的细胞因子可能是导致流产的主要原因。

关键词： α—Galcer 小鼠流产 NKT细胞

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红车轴草提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化的抑制作用

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现代免疫学 2008年第5期28卷 377-380页

作者：杨志曾耀英黄秀艳李林姚满林宋兵滕菲暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632

探讨红车轴草提取物(Trifolium pratense Leguminosae extract,TLE)对小鼠T淋巴细胞的体外活化的影响。无菌条件下制备小鼠淋巴细胞悬液;双色荧光抗体染色结合流式细胞术分别分析TLE对小鼠T淋巴细胞在刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PDB)刺... 详细信息

探讨红车轴草提取物(Trifolium pratense Leguminosae extract,TLE)对小鼠T淋巴细胞的体外活化的影响。无菌条件下制备小鼠淋巴细胞悬液;双色荧光抗体染色结合流式细胞术分别分析TLE对小鼠T淋巴细胞在刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PDB)刺激下的体外分化抗原CD69、CD25、CD71表达的影响。终质量浓度为20、30、40 mg/L的TLE对小鼠T淋巴细胞在ConA或PDB刺激下的体外分化抗原CD69、CD25、CD71表达具有明显的抑制作用(P<0.01)。TLE对ConA或PDB刺激的不同时期的小鼠T淋巴细胞的体外活化具有明显的抑制作用。

关键词：红车轴草提取物 T淋巴细胞 CD69 CD25 CD71

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三氧化二砷诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体的变化

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中国病理生理杂志 2008年第8期24卷 1600-1603页

作者：贺芳曾耀英王通肇静娴暨南大学组织移植与免疫实验室广东广州510632

目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体的变化特点。方法:以As2O3诱导Jurkat细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,DiOC6(3)/PI染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm),壬基酚丫啶... 详细信息

目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体的变化特点。方法:以As2O3诱导Jurkat细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,DiOC6(3)/PI染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm),壬基酚丫啶橙(NAO)/PI染色流式细胞术检测线粒体质量,利用2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸(DCFH-DA)染色流式细胞术检测细胞内活性氧的变化。结果:在4×10-6mol/LAs2O3诱导下,Jurkat细胞在48h凋亡比率为(18.98±1.40)%,对照组为(5.17±0.80)%,组间差异显著(P<0.01);As2O3组坏死比率为(8.56±0.70)%,对照组为(1.53±0.55)%,组间差异显著(P<0.01)。As2O3组在48h时点的线粒体膜电势低于对照组(P<0.05),线粒体膜电势下降的Jurkat细胞比率分别为(23.07±3.62)%和(6.63±1.46)%。同时Jurkat细胞As2O3组线粒体质量显著低于对照组(P<0.01),线粒体质量下降的细胞比率分别为(25.90±1.80)%和(6.37±1.04)%。As2O3组自由基产生明显高于对照组(P<0.01),DCFDA平均荧光强度分别为24.41±0.75和17.06±0.48。结论:As2O3诱导Jurkat细胞凋亡过程中,线粒体膜电势和质量均下降,细胞内氧自由基水平升高。

关键词：三氧化二砷 Jurkat细胞细胞凋亡线粒体

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芹菜素对小鼠T淋巴细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第4期24卷 337-340页

作者：梁兆端曾耀英黄秀艳贺芳暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东广州510632

目的：研究芹菜素（AP）对小鼠T细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法：无菌分离小鼠淋巴结和胸腺细胞,MTT法检测不同浓度（25、50、100、150、200μmol/L）的AP对多克隆刺激剂刀豆蛋白A（ConA）诱导的T细胞增殖的影响,PI染色结合... 详细信息

目的：研究芹菜素（AP）对小鼠T细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法：无菌分离小鼠淋巴结和胸腺细胞,MTT法检测不同浓度（25、50、100、150、200μmol/L）的AP对多克隆刺激剂刀豆蛋白A（ConA）诱导的T细胞增殖的影响,PI染色结合流式细胞术（FCM）分析细胞周期的分布,Annexin V-FITC/PI双染色结合FCM检测AP对T细胞凋亡的影响,以及AP与地塞米松（DEX）共同作用下T细胞凋亡的变化,并用MTT法检测该药物浓度对T细胞的毒性作用。结果：25-200μmol/LAP对T细胞无药物毒性作用,并明显抑制ConA诱导的T细胞增殖（P〈0·01）,使细胞周期停滞在G0/G1期,且呈剂量依赖关系;各浓度AP对T细胞凋亡均具有抑制作用,并明显抑制DEX诱导的T细胞凋亡（P〈0·01）,且呈剂量依赖关系。结论：在一定浓度范围内,AP明显抑制ConA诱导的小鼠T细胞体外增殖,使细胞周期停滞G0/G1期,并明显抑制T细胞凋亡。

关键词：芹菜素 T淋巴细胞增殖周期凋亡

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早、中、晚孕期胎盘因子对人外周血淋巴细胞CD4,CCR5和CXCR4表达的影响(英文)

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中南大学学报（医学版） 2008年第6期33卷 461-467页

作者：李莉平康佳丽夏薇曾耀英广州市第一人民医院妇产科广州510180 暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的:通过研究早、中、晚孕期胎盘因子(PF)对人外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4,CCR5和CXCR4表达的作用,探讨PF在人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)垂直传播中的作用及其机制。方法:制备早、中、晚孕期PF。分离人外周血单个核细胞,并分别与相对浓度为... 详细信息

目的:通过研究早、中、晚孕期胎盘因子(PF)对人外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4,CCR5和CXCR4表达的作用,探讨PF在人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)垂直传播中的作用及其机制。方法:制备早、中、晚孕期PF。分离人外周血单个核细胞,并分别与相对浓度为25%的早、中、晚孕期PF作用,培养24h后收集细胞,荧光抗体标记,流式细胞术检测外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4,CCR5和CXCR4表达,以及CD4+T细胞中CCR5+细胞、CXCR4+细胞、CCR5+CXCR4+细胞所占的百分率。结果:各孕期PF均可显著降低PBLs中CCR5的表达,其中早孕期PF的作用明显强于中、晚孕期PF的作用;各孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+细胞的百分率均显著低于对照组,早孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+细胞的百分率明显低于中、晚孕期PF组;各孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+CXCR4+细胞的百分率均显著低于对照组,早孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+CXCR4+细胞的百分率显著低于晚孕期PF组。结论:各孕期PF均可显著降低PBLs中CCR5的表达,以及CD4+T细胞中CCR5+细胞和CCR5+CXCR4+细胞的百分率,早孕期PF作用最强,中、晚孕期PF效应相当,PF可能通过抑制R5病毒的入胞而具有抗R5病毒的作用,并可能在阻断HIV-1宫内感染中具有重要作用。

关键词：胎盘因子 HIV-1 垂直传播 CD4 CCR5 CXCR4

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α-Galcer对小鼠NKT细胞超微结构的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第3期29卷 311-314页

作者：郭蓉姣黄秀艳梁兆端曾耀英暨南大学组织移植与免疫中心实验室广东广州510632

本实验观察在α-半乳糖神经鞘胺醇（α-Galcer）诱导下，小鼠NKT细胞超微结构的改变．分离小鼠脾脏单个核细胞，MTT法观察细胞对α-Galcer的药物敏感性，流式细胞术分选活化和未活化的NKT细胞，并用透射电镜观察NKT细胞超微结构．研究... 详细信息

本实验观察在α-半乳糖神经鞘胺醇（α-Galcer）诱导下，小鼠NKT细胞超微结构的改变．分离小鼠脾脏单个核细胞，MTT法观察细胞对α-Galcer的药物敏感性，流式细胞术分选活化和未活化的NKT细胞，并用透射电镜观察NKT细胞超微结构．研究发现在24h，50～100ng／mL的α-Galcer作用下，实验组NKT细胞的增殖活性显著高于对照组（P〈0．05）．流式细胞术结果显示实验组活化NKT细胞百分率明显高于对照组（P〈0．05）．电子显微镜观察显示，活化的NKT细胞呈典型细胞活化改变，凋亡的NKT细胞，核固缩，致密形成新月小体，核膜破裂，凋亡小体形成．说明α-Galeer可促使小鼠NKT细胞活化，且活化的NKT细胞产生大量分泌小泡．

关键词： NKT细胞 α-Galcer 流式细胞术超微结构

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连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬和NO释放的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第6期24卷 557-559,563页

作者：尹乐乐曾耀英侯会娜暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫研究中心广东广州510632

目的:分析连翘(FS)对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响。方法:无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记大肠杆菌DH5α,短期培养3h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响。... 详细信息

目的:分析连翘(FS)对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响。方法:无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记大肠杆菌DH5α,短期培养3h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响。用LPS体外刺激活化腹腔巨噬细胞,Griess Reagent试剂盒检测并分析FS对巨噬细胞体外释放NO的影响。结果:FCM分析显示,终浓度为40、80、160mg/L的FS对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬具有明显的促进作用(P<0.05)。不同终质量浓度的FS对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外NO的释放均有抑制作用(P<0.05)。结论:FS可以促进小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和抑制NO体外的释放。

关键词：连翘提取物腹腔巨噬细胞吞噬 NO释放

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凋亡细胞线粒体膜电势与物理参数变化的可视化研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第2期29卷 105-109,120页

作者：梁佩燕曾耀英王通楼湘莹暨南大学组织移植与免疫研究中心暨南大学附属第一医院妇产科广东广州510632

目的:通过放线菌酮(CHX)诱导HL-60细胞凋亡模型,探讨线粒体膜电势与细胞物理参数的变化。方法:建立CHX诱导HL-60细胞凋亡模型。于6和18 h时点,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡和晚期凋亡细胞及坏死细胞比率;利用JC-1染色... 详细信息

目的:通过放线菌酮(CHX)诱导HL-60细胞凋亡模型,探讨线粒体膜电势与细胞物理参数的变化。方法:建立CHX诱导HL-60细胞凋亡模型。于6和18 h时点,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡和晚期凋亡细胞及坏死细胞比率;利用JC-1染色流式细胞术,通过对对照组和CHX组FL1/FL2散点图上具有不同荧光强度的细胞群划分为R2,R3,R4 3个细胞群,并分别对这些细胞群在FSC/SSC二维散点图上进行反向设门,分析细胞凋亡过程中线粒体膜电势变化与细胞物理参数间的关系。通过透射电镜观察凋亡细胞形态结构改变。结果:CHX可引起HL-60细胞凋亡;与对照组相比,CHX组R2和R3细胞群物理参数为FSC和SSC均显著增高,但线粒体膜电势无显著性差异,P>0.05;R4细胞群则为FSC降低,SSC增高,P<0.05,且线粒体膜电势降低。CHX可诱导HL-60细胞体积变小,皱缩,并出现凋亡特征,如核固缩形成新月体和质膜"出芽"现象。结论:流式细胞仪FSC/SSC图可视为细胞指纹图谱。本模型中线粒体膜电势降低的细胞变小,且颗粒程度增加,可能与细胞凋亡过程中的结构改变有关。

关键词：线粒体膜电势细胞物理参数放线菌酮 HL-60细胞

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Jagged1在树突状细胞介导淋巴细胞诱导皮肤移植免疫耐受中的作用

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第2期29卷 147-151页

作者：陈玲邢飞跃狄静芳陈笛廖继东暨南大学组织移植与免疫中心暨南大学医学院实验中心广东广州510632

目的:探讨Jagged1在树突状细胞(DC)介导淋巴细胞诱导同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植术,受体小鼠分为对照组,Jagged1+DAPT处理组和Jagged1处理组。取供体小鼠淋巴细胞加入经rmI... 详细信息

目的:探讨Jagged1在树突状细胞(DC)介导淋巴细胞诱导同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植术,受体小鼠分为对照组,Jagged1+DAPT处理组和Jagged1处理组。取供体小鼠淋巴细胞加入经rmIL-4和rmGM-CSF处理9 d的供体骨髓细胞中,当日和隔日分别加入Jagged1和DAPT。2 d后取淋巴细胞,于皮肤移植第0天、第2天和第4天,经尾静脉注入受体小鼠。观察皮肤移植物存活时间和移植物病理变化,并检测受体小鼠混合淋巴细胞反应和迟发型超敏反应。结果:Jagged1处理组的皮肤移植物平均存活83.6 d,显著长于其它各组(P<0.01);Jagged1处理组移植皮片内浸润的炎细胞数量明显减少;在混合淋巴细胞反应中,Jagged1处理组小鼠对供体小鼠呈现低反应性(P<0.01),而对第三方无关供体KM小鼠表现强烈的增殖反应,Jagged1处理组小鼠在迟发型超敏反应中也表现出显著的低反应性(P<0.01)。结论:输注Jagged1联合DC处理的淋巴细胞诱导受体获得供体抗原特异性的免疫耐受。

关键词： Jagged1 树突状细胞淋巴细胞骨髓细胞皮肤移植

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雌激素处理DCs在诱导小鼠同种皮肤移植免疫耐受中的作用

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中国病理生理杂志 2008年第10期24卷 2020-2024页

作者：沈媛曾耀英肇静娴暨南大学附属第一医院广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验室广东广州510632

目的:研究雌二醇(17β-estradiol,E2)处理的供体骨髓来源树突细胞(dendritic cells,DCs)在诱导小鼠同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:体外培养小鼠骨髓来源DCs,然后用E2处理。受体小鼠在皮肤移植前经尾静脉分别输注经E2处理的... 详细信息

目的:研究雌二醇(17β-estradiol,E2)处理的供体骨髓来源树突细胞(dendritic cells,DCs)在诱导小鼠同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:体外培养小鼠骨髓来源DCs,然后用E2处理。受体小鼠在皮肤移植前经尾静脉分别输注经E2处理的供体小鼠DCs、供体小鼠成熟DCs以及不成熟DCs,输注PBS为对照组。1周后对受体小鼠进行同种异基因皮肤移植,手术后观察皮肤存活情况,应用流式细胞术检测手术前后受体小鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞百分率的变化。结果:在同种异基因皮肤移植中,受体小鼠尾静脉输注经E2处理的DCs组与对照组和不成熟DCs组比较,移植皮肤存活时间显著延长,较不成熟DCs组存活时间平均延长10.6d(P<0.01);与对照组和不成熟DCs组比较,E2处理组外周血中CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显升高(P<0.01)。结论:在同种异基因小鼠皮肤移植模型中,E2处理的供体小鼠DCs可以延长移植皮肤存活时间。

关键词：树突细胞雌二醇免疫耐受皮肤移植小鼠

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