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第十三届亚洲运动医学大会

作者：王力先广东省体育科学研究所实验检测中心暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心

目的中药单体葫芦素E 是从葫芦科植物中提取的一种四环三萜类化合物,是葫芦素家族的一个重要成员.现代研究表明葫芦素E 具有抗肿瘤、抗病毒等微生物感染、保肝、抗炎等多种生物学活性.本研究通过分析葫芦素E 对人外周血活化淋巴细胞炎...

目的中药单体葫芦素E 是从葫芦科植物中提取的一种四环三萜类化合物,是葫芦素家族的一个重要成员.现代研究表明葫芦素E 具有抗肿瘤、抗病毒等微生物感染、保肝、抗炎等多种生物学活性.本研究通过分析葫芦素E 对人外周血活化淋巴细胞炎症反应的影响,探讨其抗炎作用的分子机制.

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淫羊藿素、脱水淫羊藿素对T淋巴细胞的比较研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第3期34卷 353-358页

作者：赖新强黄秀艳曾耀英暨南大学分析测试中心广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东广州510632

通过分离制备小鼠淋巴细胞;CCK-8法检测脱水淫羊藿素(AHI)、淫羊藿素(ICA)对淋巴细胞的毒性;流式细胞术(FCM)结合双色免疫荧光染色技术检测AHI、ICA对con A刺激T淋巴细胞早期活化标志CD69,中期活化标志CD25的表达情况;利用活性染料CFSE... 详细信息

通过分离制备小鼠淋巴细胞;CCK-8法检测脱水淫羊藿素(AHI)、淫羊藿素(ICA)对淋巴细胞的毒性;流式细胞术(FCM)结合双色免疫荧光染色技术检测AHI、ICA对con A刺激T淋巴细胞早期活化标志CD69,中期活化标志CD25的表达情况;利用活性染料CFSE,结合流式细胞术分析AHI、ICA对T淋巴细胞增殖的影响;流式细胞术分析AHI、ICA对T淋巴细胞周期的影响;流式细胞术实时分析AHI、ICA对T淋巴细胞钙离子内流的影响;使用流式蛋白定量检测技术(CBA)检测AHI、ICA对T淋巴细胞分泌细胞因子的影响.结果显示AHI与ICA对活化的小鼠T淋巴细胞具有明显的免疫抑制作用,特别是ICA,能明显抑制经con A刺激的T淋巴细胞早中期活化、增殖、钙离子内流,并阻滞细胞周期在G0/G1期,以及分泌IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF和IL-12p70细胞因子;ICA比AHI对活化的小鼠T淋巴细胞具有更明显的免疫抑制作用.

关键词：淫羊藿素脱水淫羊藿素 T淋巴细胞免疫抑制

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广东女手备战第十二届全运会训练冲刺阶段细胞因子等免疫指标变化情况

广东女手备战第十二届全运会训练冲刺阶段细胞因子等免疫指标变化...

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第五届中国体育博士高层论坛

作者：王力先张援李捷广东省体育科学研究所暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东省体育局科教宣传与交流处

研究目的:以实验动态调查广东省女子手球队备战第十二届全运会的训练冲刺阶段白细胞计数、免疫球蛋白三联及细胞因子等免疫指标的变化,旨在探讨阶段性大强度训练对运动员免疫水平的影响,从而为制定合理的训练计划、提高运动员免疫机能... 详细信息

研究目的:以实验动态调查广东省女子手球队备战第十二届全运会的训练冲刺阶段白细胞计数、免疫球蛋白三联及细胞因子等免疫指标的变化,旨在探讨阶段性大强度训练对运动员免疫水平的影响,从而为制定合理的训练计划、提高运动员免疫机能提供理论基础。研究方法:研究对象:广东省女子手球队优秀运动员15人,年龄:19.5±2.1岁,身高:173.7±5.8 cm,体重:68.1±8.3 kg;BMI:22.3±1.5 kg/cm2,所有研究对象均无肝、肾及内分泌疾病史,调查研究期间未感染疾病、未使用免疫刺激剂或免疫抑制剂。研究设计:以备战第十二届全运会训练冲刺阶段为研究期间。2013年5月中下旬为全运会手球预赛。预赛结束后广东省女手队员做调整。在此调整期结束时采一次血,记为1,作为全运会训练冲刺阶段的基础值。6月-7月为全运会训练最后冲刺阶段,所有研究对象根据教练员训练安排,参加正常训练,在本训练期结束时采一次血,记为2,作为全运会训练冲刺阶段结束值。以上训练冲刺阶段结束后为调整期,调整完毕出队参加决赛,出队前采一次血,记为3,作为全运会训练冲刺阶段结束调整后的参考值。取材方法:晨起安静状态下肘静脉采血,EDTA抗凝管采2ml,血清分离管采5ml。EDTA抗凝全血用于血常规分析。血清分离管静置30min后,以3500 rpm转速离心10min,分离血清,置-80℃保存,用于白介素6、白介素8、白介素10、肿瘤坏死因子α等的检测。检测方法:血常规测试采用Bayer ADVIA 120全自动六分类血球分析仪及配套试剂;白介素6、白介素8、白介素10、肿瘤坏死因子α均采用美国R＆D公司人白介素ELISA试剂盒。实验数据采用SPSS 13.0软件包进行处理。实验数据以平均值±标准差表示,显著性水平为P＜0.05,极显著性水平为P＜0.01。研究结果:白细胞计数方面,基础值、训练阶段结束后和调整后两两之间无显著差异。免疫球蛋白方面,除了训练阶段结束时Ig G比基础值有显著升高外,其它各时期互相比较均无显著变化。细胞因子方面,训练阶段结束值与基础值相比:训练阶段结束后IL-8和TNF-α均极显著升高,IL-10极显著降低。调整值与训练阶段结束值相比:调整后IL-8极显著上升,TNF-α极显著上升,IL-10极显著下降。调整值与基础值相比:调整后IL-6、IL-8、TNF-α极显著上升,IL-10极显著下降。提示运动员炎症呈一直加剧趋势。结论:（1）细胞因子敏感性比免疫球蛋白高,有望成为监控运动员免疫水平的灵敏指标。（2）广东女手备战第十二届全运会训练冲刺阶段体内炎症水平一直呈上升趋势,提示应从慢病预防的角度关注该人群机体的炎症状况,适当调整训练计划并合理补充营养剂。

关键词：运动生物化学细胞因子 IL-6 IL-8 IL-10 TNF-α

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2周大强度训练对广东省优秀皮划艇运动员外周血调节性T细胞的影响

2周大强度训练对广东省优秀皮划艇运动员外周血调节性T细胞的影响

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2014年广州运动与健康国际学术研讨会

作者：王力先何贤辉季建民广东省体育科学研究所国家体育总局体能与训练适应控制系统重点实验室广东广州510663 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东广州510632 广东省体育科学研究所国家体育总局体能与训练适应控制系统重点实验室广东广州510663

目的：通过研究广东省优秀皮划艇运动员2周大强度训练前后外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的变化情况,探讨大强度运动训练对运动员外周血T淋巴细胞及其亚群的影响和运动员免疫应答模式... 详细信息

目的：通过研究广东省优秀皮划艇运动员2周大强度训练前后外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的变化情况,探讨大强度运动训练对运动员外周血T淋巴细胞及其亚群的影响和运动员免疫应答模式的变化情况.方法：随机选取广东省优秀皮划艇运动员25人(男运动员13人,年龄17.3±2.8岁,身高184.8±5.6 cm,体重84.3±7.4,BMI 25.2±1.7;女运动员12人,年龄17.1±2.5岁,身高173.5±4.3cm,体重67.5±8.3,BMI 22.3±2.6),所有研究对象均无肝、肾及内分泌疾病史,调查研究期间未感染疾病、未服用刺激免疫或抑制免疫的中西药物.以2周大强度训练为调查期间.所有研究对象根据教练员训练安排,参加正常训练.堂课最大心率为186.4±4.3次/min,课后乳酸为9.2±2.5.实验室在训练阶段开始前和结束12h后各采一次血样进行测试.晨起安静状态下肘静脉采血2ml置EDTA抗凝管,密度梯度离心法分离运动员外周血淋巴细胞,荧光抗体染色后(所有抗体均购自BD公司),以BD Calibur流式细胞仪检测T细胞、Th/Ts和CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达情况,实验数据采用SPSS 13.0软件包进行处理.结果：训练阶段结束后,T细胞百分比、T细胞计数、Th/Ts、CD4+CD25+Foxp3+百分比、CD4+CD25+Foxp3+计数均极显着下降(P＜0.01).结论：大强度训练可导致外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及调节性T细胞极显着下降,提示运动员机体由T细胞介导的免疫应答受抑制.

关键词：运动员调节性T细胞 Treg 淋巴细胞训练

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细胞自噬与炎症反应相互作用的研究进展

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第2期34卷 125-128页

作者：何贤辉何健欧阳东云暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫研究中心免疫生物学系广东广州510632

细胞自噬是维持细胞内环境自稳的一种自我保护机制,是由溶酶体介导的降解细胞内受损的蛋白质或者细胞器的代谢过程。细胞自噬与炎症反应密切相关,模式识别受体Toll样受体的激活能够诱导细胞自噬的发生,而细胞自噬又对炎症反应有调控作... 详细信息

细胞自噬是维持细胞内环境自稳的一种自我保护机制,是由溶酶体介导的降解细胞内受损的蛋白质或者细胞器的代谢过程。细胞自噬与炎症反应密切相关,模式识别受体Toll样受体的激活能够诱导细胞自噬的发生,而细胞自噬又对炎症反应有调控作用。同时细胞自噬与抗感染免疫密切相关,而细胞自噬的缺损是诱发炎症反应和炎症性疾病的一个重要因素。本文简要综述细胞自噬与炎症反应的相互作用,为研究细胞自噬调控炎症反应的机制提供参考。

关键词：细胞自噬炎症炎症性疾病

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2周大强度训练对广东省优秀皮划艇运动员外周血调节性T细胞的影响

2周大强度训练对广东省优秀皮划艇运动员外周血调节性T细胞的影响

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2014年中国运动生理生化学术会议

作者：王力先张援何贤辉季建民广东省体育科学研究所国家体育总局体能与训练适应控制系统重点实验室暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心

目的:通过研究广东省优秀皮划艇运动员2周大强度训练前后外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（RegulatoryTcell,Treg）的变化情况,探讨大强度运动训练对运动员外周血T淋巴细胞及其亚群的影响和运动员免疫应答模式的... 详细信息

目的:通过研究广东省优秀皮划艇运动员2周大强度训练前后外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（RegulatoryTcell,Treg）的变化情况,探讨大强度运动训练对运动员外周血T淋巴细胞及其亚群的影响和运动员免疫应答模式的变化情况。方法:随机选取广东省优秀皮划艇运动员25人（男运动员13人,年龄17.3±2.8岁,身高184.8±5.6cm,体重84.3±7.4kg,BMl25.2±1.7kg/m;女运动员12人,年龄17.1±2.5岁,身高173.5±4.3cm,体重67.5±8.3,BM122.3±2.6）,所有研究对象均无肝、肾及内分泌疾病史,调查研究期间未感染疾病、未服用刺激免疫或抑制免疫的中西药物。以2周大强度训练为调查期间。所有研究对象根据教练员训练安排,参加正常训练。堂课最大心率为185.4±5.3次/min,课后乳酸为7.7±5.8。实验室在训练阶段开始前和结束12h后各采一次血样进行测试。晨起安静状态下肘静脉采血2ml置EDTA抗凝管,密度梯度离心法分离运动员外周血淋巴细胞,荧光抗体染色后（所有抗体均购自BD公司）,以BDCalibur流式细胞仪检测T细胞、Th/Ts和CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达情况,实验数据采用SPSS13.0软件包进行处理。结果:训练阶段结束后,T细胞百分比、T细胞计数、Th/Ts、CD4+CD25+Foxp3+百分比、CD4+CD25+Foxp3+计数均极显著下降（P<0.01）。结论:大强度训练可导致外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及调节性T细胞极显著下降,提示运动员机体由T细胞介导的免疫应答受抑制。

关键词：运动员调节性T细胞 Treg 淋巴细胞训练

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曲古抑菌素A对缺糖/缺氧损伤PC12细胞的保护作用

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中国药理学通报 2013年第5期29卷 688-692页

作者：越茂松黄琼王进京季秋虹季煜华暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫研究中心广州510632 南通大学附属医院神经内科南通226001 暨南大学功能蛋白质研究广东普通高校重点实验室广州510632

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对PC12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺糖/缺氧损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法建立PC12细胞缺糖/缺氧(oxygen and glucose deprivation,OGD)损伤模型,1-640 nmol.L-... 详细信息

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对PC12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺糖/缺氧损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法建立PC12细胞缺糖/缺氧(oxygen and glucose deprivation,OGD)损伤模型,1-640 nmol.L-1TSA处理细胞,噻唑蓝(MTT)检测对PC12细胞活性的影响,Propidium iodide(PI)和Hoechst33258染色检测细胞凋亡与坏死,荧光显微镜和流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(ROS)的含量。结果与模型组相比,80 nmol.L-1TSA可明显提高ODG PC12的细胞存活率,降低细胞内的ROS含量(P<0.05)。结论 TSA对OGD损伤的PC12细胞具有保护作用,其机制可能是通过增加细胞内能量代谢中各种酶的乙酰化水平来应对缺血损伤。

关键词： TSA PC12细胞缺糖缺氧能量代谢乙酰化活性氧

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曲古抑菌素A对SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤的保护作用

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中国药理学通报 2013年第10期29卷 1395-1400页

作者：黄琼越茂松季秋虹王进京季煜华暨南大学生命科学技术学院组织移植和免疫研究中心广东广州510632 南通大学附属医院神经内科江苏南通226001 暨南大学功能蛋白质研究广东普通高校重点实验室广东广州510632

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)缺氧/缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用及其可能机制。方法采用化学方法建立SH-SY5Y细胞不同时间(1、2、4、6和8 h)... 详细信息

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)缺氧/缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用及其可能机制。方法采用化学方法建立SH-SY5Y细胞不同时间(1、2、4、6和8 h)持续性OGD损伤模型,MTT法检测细胞活性,以评估持续性OGD损伤对SH-SY5Y细胞的损伤程度。继而观察TSA(10、20、40、80 nmol·L-1)对OGD诱导的神经元损伤的影响,实验指标如下:倒置显微镜观察细胞形态学变化,MTT检测TSA对细胞活性的影响,Propidium iodide(PI)和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡与坏死情况,荧光显微镜检测各组细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和线粒体膜电位(mitochondrion membrane potential,MMP)的变化。结果 OGD损伤2 h,模型组的细胞活性和MMP水平较对照组明显降低,并随OGD时间的延长而变化越明显。而ROS含量较对照组明显升高,Hoechst和PI双染检测也发现染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,并随OGD时间的延长,凋亡和坏死细胞的数量增加。与模型组相比,40 nmol·L-1TSA能明显提高OGD诱导的神经元的活性,降低细胞内ROS含量,以及提高MMP水平。结论TSA对OGD诱导SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤具有明显的保护作用,其保护机制可能与降低细胞内ROS水平及维持MMP的高能状态有关。

关键词：曲古抑菌素A SH—SY5Y细胞缺氧缺糖损伤氧化应激活性氧线粒体膜电位

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银杏内酯B对小鼠腹膜巨噬细胞体外增殖、吞噬及产生NO和ROS的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第1期28卷 4-7页

作者：王晓东曾耀英宋兵暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的:银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本研究中GB对小鼠腹膜巨噬细胞的增殖、吞噬及产生NO和ROS的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法:分离纯化... 详细信息

目的:银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本研究中GB对小鼠腹膜巨噬细胞的增殖、吞噬及产生NO和ROS的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法:分离纯化小鼠腹膜巨噬细胞(PM),以不同浓度的GB(1.25～20μmol/L)预孵后加以脂多糖(LPS)刺激并继续培养至相应时间点;以MTT法检测GB对PM活力及LPS诱导的增殖的影响;以荧光微球的摄入结合流式细胞术评价PM的吞噬作用;以Griess法检测GB对LPS诱导的NO释放的影响;以H2DCFDA标记结合流式细胞术检测PM的ROS水平。结果:LPS刺激后24 h时PM吞噬能力增强,ROS水平显著上升,并释放大量NO,至48 h时PM增殖明显,而经终浓度为5、10、20μmol/L GB在LPS刺激前对PM进行4 h预孵处理可以大幅下调PM对荧光微球的吞噬作用,显著降低PM的ROS水平及NO释放量,并能有效抑制PM的增殖。结论:GB能有效抑制LPS诱导的细胞增殖、吞噬作用、产生NO和ROS的水平,凭借GB对巨噬细胞的体外行为和功能的出色调节作用,理应将其作为天然的免疫抑制剂候选者进行更深入的研究。

关键词：银杏内酯B 巨噬细胞增殖吞噬活性氧簇一氧化氮

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脱水淫羊藿素对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第4期28卷 374-376,380页

作者：赖新强黄秀艳曾耀英暨南大学分析测试中心广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究脱水淫羊藿素(AHI)在体外对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。方法:分离制备小鼠骨髓来源巨噬细胞;CCK-8法检测不同终浓度的AHI对巨噬细胞的毒性;采用Griess试剂盒检测AHI对巨噬细胞产生NO的影响;流式细胞术(FCM... 详细信息

目的:研究脱水淫羊藿素(AHI)在体外对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。方法:分离制备小鼠骨髓来源巨噬细胞;CCK-8法检测不同终浓度的AHI对巨噬细胞的毒性;采用Griess试剂盒检测AHI对巨噬细胞产生NO的影响;流式细胞术(FCM)检测AHI对巨噬细胞吞噬***颗粒的影响;利用FCM结合双色免疫荧光染色技术检测AHI对巨噬细胞早期活化标志CD69的表达情况;使用流式液相蛋白定量检测技术(CBA)检测AHI对LPS刺激巨噬细胞分泌细胞因子的影响。结果:终浓度为2.5、5、10μmol/L的AHI对活化的小鼠巨噬细胞均具有明显的免疫抑制作用,特别是5μmol/L AHI能明显抑制经LPS刺激的巨噬细胞早期活化,释放NO,吞噬***颗粒,以及分泌IL-6、MCP-1、TNF和IL-12p70四种细胞因子。结论:AHI对LPS诱导的小鼠巨噬细胞的活化具有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词：脱水淫羊藿素巨噬细胞脂多糖免疫抑制

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