检索结果-内蒙古大学图书馆

第一军医大学学报 2003年第7期23卷 696-698,701页

作者：胡贵方吴小兵俞守义康禹侯云德第一军医大学流行病教研室广东广州510515 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

目的观察人外周血单核细胞来源树突状细胞(DCs)经重组腺相关病毒(rAAV)载体介导乙肝表面抗原(HBsAg)基因感染后的功能改变。方法采用ELISA试剂盒检测感染rAAV-HBsAg后的DCs (rAAV-HBsAg-DC)分泌IL-12水平以及rAAV-HBsAg-DCs与淋巴细胞... 详细信息

目的观察人外周血单核细胞来源树突状细胞(DCs)经重组腺相关病毒(rAAV)载体介导乙肝表面抗原(HBsAg)基因感染后的功能改变。方法采用ELISA试剂盒检测感染rAAV-HBsAg后的DCs (rAAV-HBsAg-DC)分泌IL-12水平以及rAAV-HBsAg-DCs与淋巴细胞共孵育后上清中γ-干扰素(IFN-γ)的含量;采用混合白细胞反应(MLR)检测rAAV- HBsAg感染前后DCs刺激同种异体淋巴细胞的增殖能力;用FACSort流式细胞仪检测rAAV-HBsAg-DCs表面分子CD80、CD83、CD86和HLA-DR的变化。结果rAAV-HBsAg感染可促进DCs分泌IL-12(P<0.05),感染后的DCs刺激淋巴细胞分泌IFN-γ的水平显著提高(P<0.01),感染前后的DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力及其特征性表面分子无明显改变。结论rAAV介导HBsAg基因感染的DCs能诱发淋巴细胞朝Th1型细胞分化,且不明显改变DCs的表型和刺激淋巴细胞增值的功能,rAAV载体介导HBsAg基因体外遗传修饰的DCs可以进一步用于乙型肝炎的免疫治疗研究。

关键词：人外周血单核细胞树突状细胞感染重组腺相关病毒乙肝表面抗原

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成年癫痫患者生活质量-31量表的信度和效度

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中华神经医学杂志 2003年第2期2卷 106-109页

作者：刘雪琴任晓琳周谷兰陈平雁第一军医大学珠江医院护理部广东广州510282 第一军医大学珠江医院神经外科广东广州510282 第一军医大学医学统计学教研室广东广州510515

目的考核QOLIE-31评价成年癫痫患者生活质量的信度和效度。方法采用随机抽样调查方法.用QOLIE-31量表信函调查成年癫痫患者52例,计算该量表的重测信度、内部一致性信度和构建效度。结果QOLIE-31量表具有较好的信度和效度。结论QOLIE-3... 详细信息

目的考核QOLIE-31评价成年癫痫患者生活质量的信度和效度。方法采用随机抽样调查方法.用QOLIE-31量表信函调查成年癫痫患者52例,计算该量表的重测信度、内部一致性信度和构建效度。结果QOLIE-31量表具有较好的信度和效度。结论QOLIE-31量表是一份较好的用于测量我国癫痫病人生活质量的量表。

关键词：癫痫生活质量信度效度

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含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究

引用

第一军医大学学报 2003年第6期23卷 553-556页

作者：胡贵方吴小兵俞守义董小岩陈清候云德第一军医大学流行病教研室广东广州510515 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂... 详细信息

目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中,G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-HBsAg;用具有rAAV包装功能的HSV-1- HSV1-rc/△UL2感染BHK-HBsAg,纯化后得到rAAV-HBsAg;ELISA检测重组病毒表面抗原基因在BHK-21细胞和293细胞中的表达;用rAAV-HBsAg免疫BalB/C小鼠,RIA法检测血清中表面抗体的滴度。结果ELISA法检测到混合细胞系BHK-HBsAg中HBsAg的表达量为(28.6±6.7)ng/5×106细胞;rAAV-HBsAg感染BHK-21细胞和293细胞后均能检测到HBsAg的表达,表达量随感染复数的增加而升高;rAAV-HBsAg免疫的BalB/C小鼠能产生表面抗体(抗-HBs抗体)。结论rAAV-HBsAg在体外能表达,免疫动物能诱导体液免疫反应的产生。rAAV-HBsAg有希望成为乙型肝炎候选疫苗,也可以进一步用于探索慢性乙型肝炎的免疫治疗。

关键词：乙型肝炎表面抗原基因表达重组腺相关病毒 PCR法 PTHBV-1质粒

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大剂量葡萄糖诱导人视网膜内皮细胞凋亡

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第一军医大学学报 2003年第5期23卷 435-438页

作者：马建芳杨中汉宋志宏郭颖蔡卫斌刘倩平郭琳琅高国全解放军第476医院内科福建福州350002 中山大学中山医学院生物化学教研室广东广州510089 第一军医大学珠江医院内科广东广州510282 第一军医大学珠江医院病理科广东广州510282

目的检验大剂量葡萄糖水平对培养的原代人视网膜毛细血管内皮细胞(humanretinalcapillaryendothelialcells,HRCEC)的直接影响。方法HRCEC细胞从捐赠人眼中分离得到。细胞在含有5mmol/L或25mmol/L葡萄糖的培养基中培养6d。应用锥虫蓝染... 详细信息

目的检验大剂量葡萄糖水平对培养的原代人视网膜毛细血管内皮细胞(humanretinalcapillaryendothelialcells,HRCEC)的直接影响。方法HRCEC细胞从捐赠人眼中分离得到。细胞在含有5mmol/L或25mmol/L葡萄糖的培养基中培养6d。应用锥虫蓝染色测定细胞活力、流式细胞计数分析细胞周期、TUNEL分析细胞凋亡。结果HRCEC细胞在25mmol/L葡萄糖中培养6d,细胞活力显著下降。通过流式细胞计数和TUNEL测定,凋亡细胞的数目在大剂量葡萄糖培养基中显著升高。结论大剂量葡萄糖可诱导人视网膜毛细血管内皮细胞凋亡,这有可能是促进糖尿病性视网膜病发展的原因。

关键词：视网膜病糖尿病性细胞凋亡视网膜内皮细胞高血糖症流式细胞计数

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缺失耶尔森菌HPI irp6基因EAggEC的构建

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中国公共卫生 2003年第6期19卷 641-643页

作者：胡静俞守义阚飙刘志华第一军医大学流行病学教研室广州510515 中国预防医学科学院流行病微生物学研究所第一军医大学南方医院感染内科

目的　构建小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6重组自杀质粒 ,并应用其构建EAggEC上该基因的缺失株。方法　根据已知小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6基因序列 ,设计PCR引物 ,扩增并克隆了irp6结构基因 ,在体外进行精确突变后 ,插入氯霉素... 详细信息

目的　构建小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6重组自杀质粒 ,并应用其构建EAggEC上该基因的缺失株。方法　根据已知小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6基因序列 ,设计PCR引物 ,扩增并克隆了irp6结构基因 ,在体外进行精确突变后 ,插入氯霉素抗性基因。再将含氯霉素的irp6缺失基因亚克隆入自杀质粒 pKNG1 0 1中 ,构建成irp6基因重组自杀质粒 pKH6 ,并以肠粘附聚集性大肠杆菌EAggEC 1 7 2为出发菌株 ,通过体内同源重组 ,置换其irp6基因。结果　经接合转移和同源重组 ,利用蔗糖抗性筛选 ,pKH6上的同源序列有效的置换了EAggEC 1 7 2的irp6基因。结论　以小肠结肠炎耶尔森菌为靶构建的irp6基因重组自杀质粒成功的缺失了EAggEC 1 7 2的irp6基因 ,获得了携带耶尔森菌强毒力岛的EAggEC 1 7 2irp6基因缺失株EAG6 。

关键词：毒力岛强毒力岛耶尔森菌自杀质粒

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DHPLC快速诊断中国人静止型-α^(4.2)地中海贫血

引用

第一军医大学分校学报 2003年第2期26卷 81-84页

作者：欧阳鸿华亮曹东林白英明徐湘民第一军医大学分校生化教研室广东省广州市510315 第一军医大学医学遗传学教研室广东省广州市510515 第一军医大学分校检验教研室广东省广州市510315

目的　开发基于断裂点序列信息的 -α4.2 缺失检测技术。方法　对中国人 -α4.2 基因断裂点区域及其正常同源片断的进行测序获得可用于基因诊断的信息 ,设计PCR/DHPLC方法快速检测 -α4.2 基因。结果　序列同源性分析表明 :1个包含 4个... 详细信息

目的　开发基于断裂点序列信息的 -α4.2 缺失检测技术。方法　对中国人 -α4.2 基因断裂点区域及其正常同源片断的进行测序获得可用于基因诊断的信息 ,设计PCR/DHPLC方法快速检测 -α4.2 基因。结果　序列同源性分析表明 :1个包含 4个单核苷酸位点的单体型存在于所有的 1 0个中国人 -α4.2 基因中 ,采用盲法检测了 4 0个样本的基因型以验证DHPLC方法的可靠性 ,检测结果和Gap -PCR的完全一致。结论　DHPLC是一种快速、敏感和可靠的 -α4.2

关键词：中国人 -α^4.2地中海贫血变性高效液相色谱法基因诊断

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BDNF重组腺病毒的构建及在大鼠骨髓间质干细胞的表达

引用

中国病理生理杂志 2003年第4期19卷 438-442,T001页

作者：李红乐李浩威邢飞跃孙学刚邓宇斌张秀明姜勇李树浓中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080 第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515

目的 :利用大肠杆菌细菌内同源重组构建带有增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的脑源性神经营养因子前体 (proBDNF)和脑源性神经营养因子 (BDNF)重组腺病毒并在大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)高效表达。方法 :采用两步亚克隆的方法将proBDN... 详细信息

目的 :利用大肠杆菌细菌内同源重组构建带有增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的脑源性神经营养因子前体 (proBDNF)和脑源性神经营养因子 (BDNF)重组腺病毒并在大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)高效表达。方法 :采用两步亚克隆的方法将proBDNF和BDNF构建入带有EGFP表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack -CMV中 ,形成转移载体pAdTrack -proBDNF和pAdTrack -BDNF ,采用化学转化法在大肠杆菌BJ5 183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy- 1同源重组 ,得到重组腺病毒载体pAd -proBDNF和pAd -BDNF ;转染 2 93细胞 ,包装成重组病毒颗粒 ;将重组病毒上清感染rMSC ,用荧光显微镜下观察和Western -blotting鉴定重组病毒在rMSC表达 ;用Ad -proBDNF和Ad -BDNF感染的rMSC在体外诱导向神经样细胞分化 ;用Ad -proBDNF和Ad -BDNF的感染的rMSC接种于裸鼠肌肉内 ,两周后荧光显微镜下直接观察。结果 :成功地构建了proBDNF和BDNF重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒 ,重组病毒能在体外培养的rMSC高效表达并不影响其分化潜能 ,体内移植实验表明Ad -proBDNF和Ad -BDNF感染的rMSC能在体内表达。结论 :重组腺病毒具有较高的介导proBDNF和BDNF基因表达于rMSC的效率 ,带有报告基因EGFP的Ad -proBDNF和Ad -BDNF感染的rMSC可以用于体内移植实验。

关键词： BDNF 重组腺病毒构建大鼠骨髓间质干细胞表达增强型绿色荧光蛋白基因融合脑源性神经营养因子

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激光扫描共聚焦显微镜测定培养神经细胞脂氢过氧化物含量

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中华神经医学杂志 2003年第3期2卷 203-205页

作者：莫永炎杨翠兰马晓冬陈瑗周玫姜勇第一军医大学病理生理学教研室广东广州510515 第一军医大学细胞生物学教研室广东广州510515 第一军医大学中心实验室广东广州510515 第一军医大学自由基医学研究室广东广州510515

目的探讨一种既可定量又可动态测定培养神经细胞内脂氢过氧化物(LPO)含量变化的新方法。方法应用激光扫描共聚焦显微镜测定β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)对PC12细胞内LPO含量,及星形胶质细胞条件培养液(ACM)对叔丁基脂氢过氧化物(tbOOH)引发的... 详细信息

目的探讨一种既可定量又可动态测定培养神经细胞内脂氢过氧化物(LPO)含量变化的新方法。方法应用激光扫描共聚焦显微镜测定β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)对PC12细胞内LPO含量,及星形胶质细胞条件培养液(ACM)对叔丁基脂氢过氧化物(tbOOH)引发的PC12细胞内LPO动态变化的影响。结果观察到Aβ1-42诱导了PC12细胞LPO含量的增加,ACM可抑制tbOOH引发的LPO上升。结论利用激光扫描共聚焦显微镜既可用定量测定又可动态观察培养活神经细胞内LPO含量变化。

关键词：激光扫描共聚焦显微镜神经细胞脂氢过氧化物 PCI2细胞 ACAS 570

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定量数据重复测量的方差分析

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中华创伤骨科杂志 2003年第1期5卷 67-70页

作者：陈平雁第一军医大学卫生统计学教研室广州市510515

医学研究中有时会遇到重复测量数据,而此类数据统计分析不当的现象在国内医学期刊中较为普遍,例如,只做单独效应分析,或用配伍组设计资料的方差分析来处理。针对此现象,本文专门介绍定量数据重复测量的方差分析方法,以及如何应用SPSS10.... 详细信息

医学研究中有时会遇到重复测量数据,而此类数据统计分析不当的现象在国内医学期刊中较为普遍,例如,只做单独效应分析,或用配伍组设计资料的方差分析来处理。针对此现象,本文专门介绍定量数据重复测量的方差分析方法,以及如何应用SPSS10.0软件处理此类数据和如何在论文中正确地表达统计分析结果。

关键词：方差分析重复测量交互效应主效应 ε校正

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移植神经干细胞促进脊髓全横断大鼠结构与功能修复的研究

引用

解剖学报 2003年第2期34卷 113-117页

作者：郭家松曾园山李海标丁英吴立志陈穗君第一军医大学分校广州510315 中山大学中山医学院组织学胚胎学教研室神经科学研究室广州510080

目的　探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。　方法　在脊髓全横断处移植神经干细胞 6 0d后 ,在横断处下方 3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元 ,用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化 ,... 详细信息

目的　探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。　方法　在脊髓全横断处移植神经干细胞 6 0d后 ,在横断处下方 3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元 ,用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化 ,同时用体视学方法观测脑干红核和大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层的神经元密度变化。用BBB评分法和爬网格法观测大鼠后肢运动功能的恢复等。　结果　移植的神经干细胞能在宿主内存活并向前后方向迁移到脊髓内 ,部分神经干细胞分化为GFAP、NF 2 0 0和GAP 4 3阳性细胞。移植神经干细胞后在红核和感觉运动区内锥体细胞层可见有被荧光金标记的神经元胞体 ,脊髓横断处附近脊髓组织的溃变程度减轻 ,红核及躯体感觉运动区内神经元密度高于未移植组 ,大鼠后肢的自主运动功能明显好于未移植组。　结论　神经干细胞移植入损伤脊髓后能分化为神经元及神经胶质细胞 ,能减轻脊髓的继发性损伤 ,保护受损伤的神经元。

关键词：移植神经干细胞脊髓全横断结构功能修复脊髓损伤

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