检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药房 2024年第23期35卷 2863-2869页

作者：王宁杨雅熊丽蓉孙凤军田衍平夏培元陆军军医大学第一附属医院药剂科重庆400038 重庆医科大学附属儿童医院药剂科重庆401122 陆军军医大学组织学及胚胎学教研室重庆400038

目的研究利奈唑胺(LZD)对MEG-01巨核细胞代谢及细胞增殖和血小板前体生成的影响,为阐明LZD诱导的血小板减少症的发病机制提供参考。方法将MEG-01细胞接种于增殖培养基中,分为空白对照组(无处理)、溶剂对照组(4‰二甲基亚砜)和100、200、... 详细信息

目的研究利奈唑胺(LZD)对MEG-01巨核细胞代谢及细胞增殖和血小板前体生成的影响,为阐明LZD诱导的血小板减少症的发病机制提供参考。方法将MEG-01细胞接种于增殖培养基中,分为空白对照组(无处理)、溶剂对照组(4‰二甲基亚砜)和100、200、400、800μg/mL LZD组,培养4 d后光镜下观察各组细胞增殖状态,进行细胞计数并检测细胞增殖活力。将细胞接种于分化培养基中,分为空白对照组(无处理)、溶剂对照组(4‰二甲基亚砜)和400μg/mL LZD组,培养14 d后光镜下观察细胞的伪足生成情况,统计生成伪足的细胞比例及测量伪足相对长度,测定细胞中CD41、CD42b mRNA的表达水平。提取分化培养基中培养14 d的溶剂对照组和400μg/mL LZD组细胞,运用液相色谱-串联质谱技术进行非靶向代谢组学和靶向能量代谢组学检测;在此基础上测量和观察添加丙酮酸(10 mmol/L)、LZD(400μg/mL)+丙酮酸(10 mmol/L)培养14 d后细胞中丙酮酸相对含量及其对细胞增殖和伪足生成的影响。结果400μg/mL LZD可显著抑制MEG-01细胞增殖和伪足的生成(P<0.01)。400μg/mL LZD处理后,MEG-01细胞的非靶向代谢组学分析结果显示,mTOR信号通路,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及癌症的中心碳代谢等与能量代谢相关的途径发生了显著变化;进一步的靶向能量代谢组学分析结果显示,400μg/mL LZD处理后MEG-01细胞中三磷酸腺苷、鸟苷三磷酸、丙酮酸相对含量较溶剂对照组显著减少(P<0.01),乳酸相对含量较溶剂对照组显著增加(P<0.01)。与LZD组相比,LZD+丙酮酸组细胞中丙酮酸相对含量、细胞计数、生成伪足的细胞比例和伪足相对长度均显著升高/增加(P<0.01)。结论LZD可能通过抑制线粒体能量代谢导致丙酮酸生成减少,进而抑制巨核细胞增殖和血小板前体生成,最终导致血小板减少症的发生。

关键词：利奈唑胺血小板减少症血小板前体能量代谢丙酮酸

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正常肺上皮细胞致瘤性转化中抑癌基因的全基因组筛选及数据库验证

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陆军军医大学学报 2022年第6期44卷 503-512页

作者：赵斌瑜张俊磊王加琪阮艳张月刘恋恋蹇锐熊加祥姚忠祥陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院教学实验中心重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院眼科重庆400038

目的利用CRISPR/Cas9敲除文库在人正常肺上皮细胞致瘤性转化过程中进行全基因组筛选,以发现新的人肺癌抑癌基因,并利用临床非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)样本数据库进行初步验证。方法构建稳定表达Cas9蛋白的人正常... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9敲除文库在人正常肺上皮细胞致瘤性转化过程中进行全基因组筛选,以发现新的人肺癌抑癌基因,并利用临床非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)样本数据库进行初步验证。方法构建稳定表达Cas9蛋白的人正常肺上皮BEAS-2B细胞系,在该细胞中感染含有77441个单链向导RNA(sgRNA)、靶向19114个人类基因的Brunello慢病毒文库,于裸鼠皮下移植。提取全瘤体细胞(Tumor)及移植前细胞(Input)的全基因组DNA,扩增sgRNA序列,建库进行深度测序。通过分析Tumor中sgRNA读数占比及Tumor与Input中sgRNA读数差异倍数的改变,筛选功能缺失后诱导BEAS-2B细胞致瘤性转化的抑癌基因,并利用公共数据平台进行初步验证。结果成功在稳定表达Cas9蛋白的BEAS-2B细胞中进行了文库感染及裸鼠皮下成瘤实验。只有感染文库的细胞在部分接种位点成瘤。测序结果显示Tumor中只检测到少数sgRNA,选取sgRNA的读数占总读数的比例>1%或有2个及以上sgRNA被显著富集的38个基因为有效的人肺癌候选抑癌基因,包括NF2、PTEN等已知抑癌基因及未在肺癌中报道过的候选抑癌基因,如AP2M1、PSENEN等。富集分析发现候选抑癌基因在Notch和Hippo信号等参与癌症发生的关键生物学通路中富集。应用临床NSCLC样本数据库证实38个候选抑癌基因在NSCLC样本中均发生了突变,其中突变率>2%的17个基因中有14个与KRAS或TP53发生共突变,3个突变与预后相关;30个基因在NSCLC样本中的表达水平与正常癌旁组织有明显差异,17个基因的表达水平与患者的预后密切相关。结论利用体内全基因组CRISPR/Cas9技术筛选出38个人肺癌候选抑癌基因,并在临床NSCLC样本数据库中得到了初步验证。

关键词：致瘤性转化 CRISPR/Cas9 抑癌基因全基因组筛选肺癌

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HO1工程化无细胞提取液联合石墨烯远红外光促糖尿病溃疡修复的疗效及机制

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局解手术学杂志 2023年第4期32卷 285-292页

作者：温晴范睿诚杨艺李红丽熊玮陆军军医大学第一附属医院老年与特勤医学科重庆400038 陆军军医大学基础医学院组织学与胚胎学教研室/重庆市神经科学重点实验室重庆400038 陆军军医大学基础医学院基础医学教学实验中心重庆400038

目的探讨HO1工程化无细胞提取液(CE)联合石墨烯远红外光(FIR)在糖尿病溃疡创面修复中的疗效及机制。方法将40只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠建立正常创面模型(对照组,n=8)及糖尿病溃疡模型(n=32),其中将糖尿病溃疡模型小鼠随机分为糖尿病组、... 详细信息

目的探讨HO1工程化无细胞提取液(CE)联合石墨烯远红外光(FIR)在糖尿病溃疡创面修复中的疗效及机制。方法将40只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠建立正常创面模型(对照组,n=8)及糖尿病溃疡模型(n=32),其中将糖尿病溃疡模型小鼠随机分为糖尿病组、HO1BMSCs-CE组、FIR组、联合组。构建过表达血红素氧合酶1(HO1)的骨髓间充质干细胞(BMSCs),获取工程化富含HO1蛋白的无细胞提取液(HO1BMSCs-CE),运用Western blot、ELISA、RT-PCR、Masson染色、免疫组化等检测各组创面愈合率、组织修复情况、创面氧化应激及炎症水平等。结果Western blot及ELISA检测结果显示,HO1BMSCs-CE中HO1、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β(TGF-β)表达水平显著高于BMSCs-CE(P<0.05)。治疗后第5、11天,联合组的创面愈合率均显著高于HO1BMSCs-CE组和FIR组(P<0.05)。与HO1BMSCs-CE组及FIR组相比,联合组在治疗后第3、7、11天创缘组织中Ca2+浓度较高,TNF-α、IL-6表达水平较低,而ROS水平仅在治疗后第3、7天较低(P<0.05)。治疗后第14天,联合组创面组织的表皮厚度较厚,真皮Masson染色胶原容积分数和VEGF免疫阳性信号OD值均显著高于FIR组和HO1BMSCs-CE组(P<0.05);治疗后第7天,联合组创面组织中凋亡相关蛋白Caspase-3表达水平显著低于FIR组和HO1BMSCs-CE组(P<0.05)。结论糖尿病溃疡创面中运用工程化富含HO1蛋白的HO1BMSCs-CE联合石墨烯FIR治疗可明显抑制局部组织氧化应激反应,减少炎症因子释放和细胞凋亡发生,加快创面区域皮肤组织上皮化形成、真皮胶原和血管增生,较HO1BMSCs-CE或FIR治疗的促愈疗效更为突出,为探索临床糖尿病难愈性创面的新型联合治疗提供了基础研究证据。

关键词：糖尿病溃疡骨髓间充质干细胞无细胞提取液血红素氧合酶1 石墨烯远红外光

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不同Dax1剪接体在肺鳞癌中表达的临床意义及功能研究

不同Dax1剪接体在肺鳞癌中表达的临床意义及功能研究

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中国解剖学会2019年年会

作者：阮艳蹇锐何萍吴蔚王嘉丽刘高科田衍平张俊磊肖岚陆军军医大学基础医学院组织学与胚胎学教研室陆军军医大学第一附属医院心胸外科

＜正＞肺鳞癌（lung squamous cell carcinoma,LSCC）由于起源背景复杂、肿瘤间异质性明显,目前尚无有效的靶向治疗药物,对于影响其发生发展关键基因的了解也十分有限。Dax1在肺癌、卵巢癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞中高表达,并与肿瘤的...

＜正＞肺鳞癌（lung squamous cell carcinoma,LSCC）由于起源背景复杂、肿瘤间异质性明显,目前尚无有效的靶向治疗药物,对于影响其发生发展关键基因的了解也十分有限。Dax1在肺癌、卵巢癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞中高表达,并与肿瘤的分级和预后密切相关,但该分子是否及如何参与肺鳞癌的发生发展过程尚未见文献报道。我们首先利用现有公共数据平台分析,结果显示约90%的

关键词：

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间质细胞衍生因子SDF-I促进ESCs迁移修复创面中的实验研究

间质细胞衍生因子SDF-I促进ESCs迁移修复创面中的实验研究

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中国解剖学会2015年年会

作者：郭锐柴琳琳李红丽曹川李世荣第三军医大学第一附属医院整形外科第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室

＜正＞创面的上皮化对创面愈合极为重要。位于表皮基底层的表皮干细胞（epidermal stem cells,ESCs）能够持续增殖分化以取代外层终末细胞,从创面附近的表皮、毛囊、汗腺等部位向创面中心迁移,在皮肤组织创面修复愈合中发挥着极为重要...

＜正＞创面的上皮化对创面愈合极为重要。位于表皮基底层的表皮干细胞（epidermal stem cells,ESCs）能够持续增殖分化以取代外层终末细胞,从创面附近的表皮、毛囊、汗腺等部位向创面中心迁移,在皮肤组织创面修复愈合中发挥着极为重要的作用。然而创面愈合生理过程的调控机制还不清楚。间质细胞衍生因子1（stromal derived factor1,SDF-1）对组织成体干细胞具有很强的趋化作用,能够促进创面的上皮化和修复。本课题组前期研究发现,创

关键词：

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电针足三里对慢性不可预见性抑郁症大鼠多器官损伤的作用及其机制

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解剖学杂志 2007年第5期30卷 538-541页

作者：吴爱群党瑞山周强张伟宏王栋陈尔瑜吴景兰第二军医大学解剖学教研室上海200433 郑州大学第一附属医院眼科郑州450052 郑州大学医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052

目的:探讨电针足三里对慢性不可预见性应激大鼠多内脏器官损伤的作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(对照组)、慢性应激组(应激组)、慢性应激非经非穴电针刺激组(非穴组)、慢性应激足三里电针刺激组(足三里组)和慢性应激氟... 详细信息

目的:探讨电针足三里对慢性不可预见性应激大鼠多内脏器官损伤的作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(对照组)、慢性应激组(应激组)、慢性应激非经非穴电针刺激组(非穴组)、慢性应激足三里电针刺激组(足三里组)和慢性应激氟西汀治疗组(氟西汀组)。采用慢性不可预见性应激法造模后,非穴组和足三里组给予电针刺激,氟西汀组给药,每天1次3周;经Open-field行为测试,解剖观察、H-E染色和免疫组化法等进行统计学分析。结果:与应激组相比,足三里组和氟西汀组大鼠的行为明显改善;应激组大鼠出现胃腺和食管黏膜上皮萎缩,肺出现灶状充血,肺组织间炎症细胞增多,20%～30%出现肺脓肿现象;足三里组和氟西汀组胃腺、食管黏膜上皮和肺组织病变减轻,未见肺脓肿发生,5-羟色胺(5-HT)免疫反应增强,阳性细胞数目增多;足三里组与应激组相比具有显著性差异。结论:电针足三里对慢性不可预见性抑郁症大鼠多器官损伤具有改善作用,其机制可能与电针的刺激效应,调节了神经通路,并促进了周围器官的5-HT合成有关。

关键词：电针足三里 5-羟色胺抑郁症

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HPV18E2蛋白CTL表位多肽的构建与表达

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局解手术学杂志 2007年第6期16卷 376-378页

作者：汪云肖岚吕凤林第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第一研究室重庆400042

目的分析HPV18E2蛋白的CTL表位,合成并纯化这些表位多肽,构建表达HPV18E2蛋白的靶细胞,检验特异性CTL对靶细胞的杀伤效果,为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,利用PCR方法扩... 详细信息

目的分析HPV18E2蛋白的CTL表位,合成并纯化这些表位多肽,构建表达HPV18E2蛋白的靶细胞,检验特异性CTL对靶细胞的杀伤效果,为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,利用PCR方法扩增HPV18E2 DNA片段,将HPV18E2 DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2-EGFP)。用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性。重组质粒转染Hela细胞。51Cr释放实验评估CTL杀伤能力。结果克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2-EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变。转染并用G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达。三条候选多肽特异性杀伤能力分别为60.00%、71.29%和80.00%。结论三条备选肽段都具有明显的杀伤效应,均为HPV18E2蛋白的有效CTL表位。

关键词：人乳头瘤病毒18型 E2基因多肽

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应用组织工程化肌腱修复兔跟腱缺损

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中国临床康复 2005年第2期9卷 39-41,i001页

作者：付文玉路艳蒙乔东访朴英杰李锋杰吴洪娟吕娥潍坊医学院组织学与胚胎学教研室山东省潍坊市261042 解放军第一军医大学中心实验室广东省广州市510515

目的:由于肌腱来源受限及人工代用品力学性能差等缺点限制了临床肌腱损伤的修复,为此探索组织工程化肌腱修复兔跟腱缺损的可行性,以期为肌腱修复提供实验依据。方法:实验于2000-08/2001-12在第一军医大学中心实验室完成。30只新西兰白... 详细信息

目的:由于肌腱来源受限及人工代用品力学性能差等缺点限制了临床肌腱损伤的修复,为此探索组织工程化肌腱修复兔跟腱缺损的可行性,以期为肌腱修复提供实验依据。方法:实验于2000-08/2001-12在第一军医大学中心实验室完成。30只新西兰白兔分为2组:人发角蛋白(HHK)组:用HHK材料修复兔跟腱缺损;组织工程化肌腱组:骨髓间充质干细胞(MSCs)与HHK在模拟微重力条件下形成细胞-材料复合体,修复兔跟腱缺损。采用组织学和免疫组织化学方法观察术后3,6和12周损伤肌腱的修复情况。利用分子生物学手段检测新生肌腱Ⅰ型胶原mRNA表达。结果:扫描电镜下可见MSCs-HHK组织工程化肌腱上有大量梭形的MSCs贴附生长,细胞平行排列,细胞间有突起相连。与HHK组相比,组织工程化肌腱组新生肌腱组织Ⅰ型胶原mRNA呈较高表达,腱细胞增生活跃,胶原纤维更为成熟。结论:在模拟微重力条件下以MSCs为种子细胞,HHK为支架材料构建的组织工程化肌腱能够有效地修复兔跟腱缺损。

关键词：干细胞角蛋白生物医学工程腱

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NT_3基因修饰施万细胞促进移植的神经干细胞在损伤脊髓内分化为神经元样细胞

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解剖学报 2005年第6期36卷 577-581页

作者：郭家松曾园山李海标黄文林中山大学中山医学院组织学胚胎学教研室神经科学研究室第一军医大学分校广州510315 中山大学中山医学院肿瘤防治中心广州510080

目的探讨神经营养素-3(NT-3)基因修饰施万细胞(SCs)对植入全横断性脊髓损伤处的神经干细胞(NSCs)分化为神经元样细胞的影响。方法将NSCs单独移植或与NT-3基因修饰SCs、LacZ基因修饰SCs和SCs联合移植到全横断性脊髓损伤处,67 d后用免疫... 详细信息

目的探讨神经营养素-3(NT-3)基因修饰施万细胞(SCs)对植入全横断性脊髓损伤处的神经干细胞(NSCs)分化为神经元样细胞的影响。方法将NSCs单独移植或与NT-3基因修饰SCs、LacZ基因修饰SCs和SCs联合移植到全横断性脊髓损伤处,67 d后用免疫组织化学方法观测NSCs的分化,并计算其中神经元样细胞的分化率。结果NSCs在损伤脊髓内可分化为神经元样细胞和神经胶质样细胞,与未基因修饰的SCs的作用相比,NT-3基因修饰的SCs能更有效地提高NSCs向神经元样细胞的分化率,而LacZ基因修饰的SCs与未修饰SCs没有明显区别。结论NT-3基因修饰SCs能促进NSCs在损伤脊髓内向神经元样细胞分化。

关键词：神经干细胞神经营养素-3 基因修饰施万细胞分化神经元样细胞脊髓损伤免疫组织化学大鼠

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FGF8在神经胚形成和NTD中的表达变化及其与STAT3的关系研究

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第三军医大学学报 2005年第14期27卷 1436-1439页

作者：纪华李泽桂丁震宇马路李红丽蔡文琴常智杰刘力傅新元第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 重庆医科大学附属第一医院解剖学教研室重庆400016 清华大学生命科学与技术学院基因组研究所北京100084

目的探讨FGF8在神经胚形成和神经管缺陷(NTD)发生过程中的作用及其可能的分子调控机制。方法采用全胚胎原位杂交技术观察FGF8在胚胎神经胚形成中的表达;通过喂服过量的维甲酸(retinoicacid,RA)诱导NTD模型,观察NTD鼠胚FGF8和STAT3的表... 详细信息

目的探讨FGF8在神经胚形成和神经管缺陷(NTD)发生过程中的作用及其可能的分子调控机制。方法采用全胚胎原位杂交技术观察FGF8在胚胎神经胚形成中的表达;通过喂服过量的维甲酸(retinoicacid,RA)诱导NTD模型,观察NTD鼠胚FGF8和STAT3的表达变化。结果①在E8·75d整个鼠胚几乎没有FGF8的表达;到E9·5d、E10·5d,在前脑泡的前缘、脑峡部位和神经管的末端观察到较局限的紫蓝色阳性区域,但到E10·5d时,上述3个部位的染色较E9·5d减弱;E11·5d时阳性信号主要集中在中脑部位。②FGF8在NTD鼠胚的表达,E9·5d时脑峡部位的染色减弱,前脑泡的前缘和神经管的尾端染色略有减弱;E10·5d,脑峡部位染色加深,且范围扩大,前脑泡的前缘和神经管的尾端染色较正常减弱。③STAT3在NTD鼠胚的表达,E9·5d和E10·5d时,STAT3的表达较正常鼠胚明显减少,在前脑泡和中脑泡均无明显的STAT3mRNA表达的阳性信号。结论FGF8可能作为STAT3的上游分子,二者共同参与了神经管的关闭。

关键词： FGF8 STAT3 神经胚形成神经管缺陷

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