检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中西医结合杂志 2010年第2期30卷 170-173页

作者：李育敏谷景义朱雪娇陈万群郭敏姚君琳林春燕费嘉暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院临床医学系

目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-m... 详细信息

目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-miR-21、As2O3以及两者联合使用对细胞增殖的抑制作用,并计算抑制率和IC50;PI单染检测细胞周期及凋亡;实时定量PCR检测miRNA-21表达水平的改变;免疫荧光法检测miRNA-21候选靶基因PDCD4蛋白表达的改变。结果AMO-miR-21与As2O3联合使用后,IC50从2.10μmol/L降低到1.23μmol/L,敏感性提高到单用As2O3的1.78倍;AMO-miR-21联合As2O3组细胞凋亡明显增加(P<0.05);单独转染AMO-miR-21可显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.01),同时抑癌基因PDCD4蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论AMO-miR-21与As2O3联合使用可提高K562细胞对As2O3的敏感性,为白血病的治疗提供了新的方法。AMO-miR-21通过靶向抑制miRNA-21,进而上调抑癌基因PDCD4的表达而发挥抗肿瘤作用。

关键词：微小RNA-21 反义寡核苷酸三氧化二砷白血病化疗敏感性

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促肝细胞生长素部分逆转巨噬细胞趋化因子和马兜铃酸Ⅰ诱导的人肾小管上皮细胞转分化

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第二军医大学学报 2010年第1期31卷 51-54页

作者：陈超蒋建伟周序珑严玉霞陈涛张小鹰暨南大学医学院基础部病理学教研室广州510632 焦作市人民医院普通外科焦作454002 暨南大学医学院基础部生物化学教研室广州510632

目的观察促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)对巨噬细胞趋化因子(monocyte chemo-tatic protein-1,MCP-1)协同马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidⅠ,AAⅠ)诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡及上皮细胞-间质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法体外培养的HKC随机分为:空白对照组、转分化模型组及不同浓度pHGF(0.15、1.5、15、150、1500ng/ml)处理组。转分化模型组采用MCP-1(0.1μg/ml)协同AAⅠ(10μg/ml)诱导HKC转分化模型;pHGF处理组采用不同浓度pHGF对转分化模型HKC进行处理;空白对照组常规培养。采用WST-8法和流式细胞术观察各组细胞增殖和凋亡情况;RT-PCR检测各组细胞α-SMA mRNA表达;免疫组化检测各组细胞α-SMA、TGF-β1、FN蛋白的表达。结果与空白对照组相比,转分化模型组、不同浓度pHGF处理组HKC细胞增殖抑制率,凋亡细胞所占比例,α-SMA mRNA表达均明显升高(P<0.01),提示转分化模型制备成功。与转分化模型组细胞相比,pHGF(150ng/ml)处理组HKC增殖抑制率明显降低(P<0.01),各浓度pHGF处理组HKC凋亡细胞所占比例均明显降低(P<0.01),HKC细胞α-SMA mRNA表达下调(150ng/ml pHGF处理组尤明显);α-SMA、TGF-β1、FN蛋白表达下调。结论pHGF(150ng/ml)可部分逆转MCP-1协同AAⅠ诱导的HKC增殖抑制、凋亡和EMT。

关键词：促肝细胞生长素肾小管上皮细胞细胞凋亡上皮-间质细胞转分化

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经卡介苗刺激后结核性胸腔积液中记忆性γδT细胞的细胞因子水平及其受体表达

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中华结核和呼吸杂志 2010年第10期33卷 775-778页

作者：李丽乔丹劳穗华陈少华李扬秋吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080 广州市胸科医院暨南大学医学院血液病研究所

目的观察卡介苗刺激后结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞中γδ T细胞的细胞因子及细胞受体表达,了解γδ T细胞在结核病局部细胞免疫应答中的作用.方法分离结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞,经卡介苗刺激后检测γδ T细胞的细胞因子分... 详细信息

目的观察卡介苗刺激后结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞中γδ T细胞的细胞因子及细胞受体表达,了解γδ T细胞在结核病局部细胞免疫应答中的作用.方法分离结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞,经卡介苗刺激后检测γδ T细胞的细胞因子分泌、细胞亚群、细胞表型及细胞受体表达特征,并提取mRNA,利用3种Vγ和8种Vδ引物,经逆转录PCR扩增cDNA,将PCR产物进行基因扫描分析γδ T细胞各亚家族克隆性.结果卡介苗刺激胸腔积液细胞后,CD4＋和γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率分别为0.38%和5.35%,且γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率远高于CD4＋ T细胞,分泌γ-干扰素的γδ T细胞主要表达白细胞共同抗原（CD45RO）,其阳性率为73.5%.此外,δ2细胞也分泌γ-干扰素（11.1%）和肿瘤坏死因子-α（25.5%）.与未刺激者相比,卡介苗选择性扩增δ2细胞,由多克隆或双克隆转变为寡克隆.结论卡介苗刺激结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞能诱导记忆性γδT细胞分泌细胞因子,卡介苗体外扩增γδT细胞后,基因扫描显示Vδ2出现寡克隆性.

关键词：受体,抗原,T细胞,γ-δ 细胞因子类卡介苗

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肿瘤耐药相关蛋白及β-catenin在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

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癌症 2010年第3期29卷 323-329页

作者：甘思远钟雪云谢思明李素梅彭辉罗枫暨南大学医学院病理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院人体解剖学系广东广州510632 广东省中医院病理科广东州510375

背景与目的:随着化疗药物在肿瘤临床治疗中的广泛应用,肿瘤对化疗药物产生多药耐药性的问题越来越突出,已成为肿瘤联合化疗失败的主要原因之一。本研究检测β-catenin以及肿瘤耐药相关蛋白MRP2、P-gp、Bcl-2在食管鳞状细胞癌(esophageal... 详细信息

背景与目的:随着化疗药物在肿瘤临床治疗中的广泛应用,肿瘤对化疗药物产生多药耐药性的问题越来越突出,已成为肿瘤联合化疗失败的主要原因之一。本研究检测β-catenin以及肿瘤耐药相关蛋白MRP2、P-gp、Bcl-2在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cellcar cinoma,ESCC)中的表达,探讨它们在ESCC的多药耐药发生发展中的作用和相互关系。方法:运用组织芯片技术、免疫组织化学方法以及图像分析技术检测582例ESCC及其癌旁294例正常黏膜、92例单纯细胞增生和87例不典型增生上皮组成的组织芯片中MRP2、P-gp、β-catenin及Bcl-2的表达情况,并分析其与各临床病理参数之间的关系。结果:MRP2、Bcl-2在ESCC中的累积光密度(integral optical density,IOD)值[分别为(195.7±175.9)×103和(90.5±112.5)×103]显著高于其在癌旁正常组织中的IOD值[分别为(104.8±86.1)×103和(25.2±46.6)×103],差异有统计学意义(P<0.01);P-gp、β-catenin在ESCC中的IOD值[分别为(57.7±75.5)×103和(32.0±47.0)×103]显著低于其在癌旁正常组织中的IOD值[分别为(114.8±106.6)×103和(46.1±35.7)×103],差异有统计学意义(P<0.01);随着ESCC的分化程度按高分化-中分化-低分化顺序依次改变,MRP2的IOD值依次递增,β-catenin在低分化ESCC中的IOD值大于其在中、高分化ESCC中的IOD值,Bcl-2在高分化ESCC中的IOD值低于其在中、低分化ESCC中的IOD值,差异有统计学意义(P<0.01);β-catenin、Bcl-2在ESCC浸润至黏膜层的病例的癌组织标本中的IOD值大于其在ESCC浸润至肌层或浆膜层的病例的癌组织标本中的IOD值,差异有统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移的Bcl-2的IOD值显著高于无淋巴结转移(P<0.01);ESCC中P-gp的表达分别与MRP2、Bcl-2的表达呈明显正相关(r=0.288和r=0.253,P<0.01)。结论:P-gp与MRP2及Bcl-2可作为ESCC多药耐药的预测因子。β-catenin可能在ESCC的发生发展中起着重要作用。

关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌 MRP2 P-gp β-catenin Bcl-2 组织芯片免疫组织化学图像分析技术

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广州市4所高校大学生乙型肝炎KAP调查

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中国学校卫生 2010年第3期31卷 276-278页

作者：何夏婷马绍斌范存欣董大伟鲍敏暨南大学医学院医学心理与行为科学教研室广东广州510632 暨南大学医学院卫生学教研室暨南大学医学院2005级临床医学本科生

目的了解广州地区大学生乙型肝炎知识、态度、行为的状况,为在大学生中普及乙肝知识、开展预防乙型肝炎的健康教育提供参考。方法采用自行设计的大学生乙型肝炎知识-态度-行为问卷,抽取广州市4所高校大学生共700名进行调查。结果57.7%... 详细信息

目的了解广州地区大学生乙型肝炎知识、态度、行为的状况,为在大学生中普及乙肝知识、开展预防乙型肝炎的健康教育提供参考。方法采用自行设计的大学生乙型肝炎知识-态度-行为问卷,抽取广州市4所高校大学生共700名进行调查。结果57.7%的学生知道乙肝的主要传染源是乙肝患者和乙肝病毒携带者,只有22.9%的学生能读懂"乙肝两对半"结果;医学生绝大多数题目的知晓率高于非医学生(P<0.01)。30.7%的学生担心自己被传染乙肝;男生比女生,农村学生比城市学生更能接受和乙肝病毒携带者恋爱(P<0.01)。女生在行为方面做得比男生好(P<0.01);非医学类学生比医学类学生饮酒频率高(P<0.01),且在洗手卫生方面没有医学生做得好(P<0.01);城市学生在洗手卫生和疫苗注射方面优于农村学生(P<0.01)。经Pearson相关分析,知识、态度和行为3个维度之间呈正相关(P<0.01)。结论应针对不同大学生采取有效的健康教育,尤其应注重网络的宣传作用。

关键词：肝炎,乙型健康知识,态度,实践对比研究学生

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小鼠胼胝体的蛋白组学研究(英文)

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神经解剖学杂志 2010年第3期26卷 225-232页

作者：潘三强宿宝贵吕来清暨南大学医学院人体解剖学教研室广州510632

目的:探讨胼胝体内主要蛋白的构成。方法:通过二维电泳技术分离小鼠胼胝体的蛋白,用PDQuest软件对蛋白点进行分析,用串联飞行质谱仪对蛋白进行鉴定,并用Western Blot和免疫组织化学对鉴定的蛋白进行分析。结果:二维凝胶电泳显示在小鼠... 详细信息

目的:探讨胼胝体内主要蛋白的构成。方法:通过二维电泳技术分离小鼠胼胝体的蛋白,用PDQuest软件对蛋白点进行分析,用串联飞行质谱仪对蛋白进行鉴定,并用Western Blot和免疫组织化学对鉴定的蛋白进行分析。结果:二维凝胶电泳显示在小鼠胼胝体有679个蛋白点。选取47个高丰度蛋白点进行质谱鉴定,鉴定为44种蛋白,它们分别为结构、代谢、信号转导、转运和应激蛋白。WesternBlot和免疫组织化学方法进一步证实了蛋白在胼胝体的表达和分布。结论:该结果为胼胝体主要蛋白的构成提供了资料。

关键词：二维电泳蛋白组学胼胝体小鼠

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热休克蛋白90在硫化氢保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤中的作用

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中国药理学通报 2010年第1期26卷 103-107页

作者：孟金兰兰爱平杨春涛杨战利王立伟陈丽新朱琳燕陈培熹冯鉴强广东药学院生理学教研室广东广州5100062 中山大学中山医学院生理学教研室广东广州510080 暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632

目的探讨热休克蛋白90(Hsp90)在硫化氢(H2S)保护PC12细胞对抗氯化钴(CoCl2)引起的化学性缺氧损伤中的作用。方法在PC12细胞建立H2S预处理对抗CoCl2诱导PC12细胞损伤的实验模型。应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活率;Hoechst 3325... 详细信息

目的探讨热休克蛋白90(Hsp90)在硫化氢(H2S)保护PC12细胞对抗氯化钴(CoCl2)引起的化学性缺氧损伤中的作用。方法在PC12细胞建立H2S预处理对抗CoCl2诱导PC12细胞损伤的实验模型。应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活率;Hoechst 33258染色荧光显微镜照相术检测凋亡PC12细胞的形态学改变;应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫印迹法(Western blot)检测Hsp90的表达。结果H2S的供体400μmol·L-1硫氢化钠(NaHS)可上调PC12细胞Hsp90的表达,NaHS作用3h,Hsp90表达达最高峰,作用24h时表达恢复到基础水平;NaHS也能明显地增加CoCl2引起的Hsp90的表达上调。NaHS预处理能对抗CoCl2引起的PC12细胞损伤,提高细胞存活率,降低细胞凋亡率。Hsp90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)可拮抗NaHS预处理对Hsp90表达的上调作用,并明显地减弱H2S诱导的适应性细胞保护作用。结论H2S能保护PC12细胞对抗CoCl2诱导的低氧损伤作用,诱导Hsp90表达上调可能是其细胞保护机制之一。

关键词：硫化氢氯化钴化学性缺氧热休克蛋白细胞保护凋亡 PC12细胞

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P53结合位点在NOD8启动子基因克隆调节及其对NOD8基因中的作用

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现代免疫学 2010年第6期30卷 471-476页

作者：曾琪蒋宇胡巢凤孙丽萍陆大祥暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632

为探讨P53结合位点在NOD8基因调控中的作用,采用PCR技术从人基因组DNA中扩增含有P53结合位点人NOD8基因启动子序列,并定向克隆入已切除启动子的表达载体pEGFP-C2中,构建含有人P53结合位点的人NOD8基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP... 详细信息

为探讨P53结合位点在NOD8基因调控中的作用,采用PCR技术从人基因组DNA中扩增含有P53结合位点人NOD8基因启动子序列,并定向克隆入已切除启动子的表达载体pEGFP-C2中,构建含有人P53结合位点的人NOD8基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-NOD8;并构建P53结合位点缺失突变载体pEGFP-C2-NOD8,将构建的质粒经阳离子聚合物JetPeiTM介导瞬时转染HEK293细胞,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。用不同浓度的p53抑制剂PFT-α(pifithrinalpha,PFT-α)预处理HEK293细胞24 h后,将重组质粒pEGFP-C2-NOD8wt瞬时转染HEK293细胞,观察绿色荧光蛋白的表达。结果表明pEGFP-C2-NOD8wt和mpEGFP-C2-NOD8经酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功。细胞转染后,缺失P53结合位点的NOD8启动子驱动的绿色荧光蛋白荧光强度明显低于含P53结合位点的重组质粒;且不同浓度PFT-α预处理HEK293细胞后重组质粒绿色荧光蛋白表达下降呈剂量依赖性。结论是P53结合位点突变重组质粒在HEK293细胞中其绿色荧光表达明显减弱;PFT-α可以通过抑制P53表达使重组质粒pEGFP-C2-NOD8wt在细胞中绿色荧光表达呈剂量依赖性减弱。说明P53结合位点在NOD8基因调控中发挥了正调节作用。

关键词： NOD8启动区 P53结合位点基因调控缺失突变 PFT-α

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多发性骨髓瘤患者外周血CD3ε基因的表达特点

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第2期26卷 159-161页

作者：林春兰陈少华杨力建周羽竝陈思李扬秋暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部门重点实验室广东广州510632

目的:建立荧光定量PCR法检测CD3ε链表达水平的方法,了解多发性骨髓瘤(MM)T细胞信号传导分子CD3ε基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测22例MM患者及22例正常人外周血单个核细胞CD3ε基因的表达情况,... 详细信息

目的:建立荧光定量PCR法检测CD3ε链表达水平的方法,了解多发性骨髓瘤(MM)T细胞信号传导分子CD3ε基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测22例MM患者及22例正常人外周血单个核细胞CD3ε基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,22例健康人作为对照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算MM患者CD3ε基因相对mRNA表达量。结果:MM患者和正常人外周血单个核细胞均表达CD3ε基因,具体表达量呈现很大的个体差异性。MM患者CD3ε基因mRNA相对表达量最高为39.78%,最低为0.48%,正常人CD3ε基因mRNA相对表达量最高为5.15%,最低为0.01%。MM患者CD3ε基因表达量明显高于正常人(P<0.05)。结论:成功建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR法检测CD3ε链表达水平的方法,率先报道了多发性骨髓瘤中CD3ε基因高表达的特点,为了解多发性骨髓瘤T细胞免疫学特点提供新的资料。

关键词：多发性骨髓瘤荧光定量PCR CD3ε基因

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脐带血CD4^+和CD8^+ T细胞中T细胞特异转录因子Elf-1表达特点

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中国病理生理杂志 2010年第4期26卷 777-780页

作者：林春兰陈少华杨力建郑海涛沈琦周羽竝李扬秋暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部门重点实验室广东广州510632

目的:了解脐带血单个核细胞(CBMCs)及其CD4+和CD8+ T细胞亚群中转录因子Elf-1的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测12例脐带血CBMCs、CD4+和CD8+ T细胞亚群中Elf-1基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M... 详细信息

目的:了解脐带血单个核细胞(CBMCs)及其CD4+和CD8+ T细胞亚群中转录因子Elf-1的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测12例脐带血CBMCs、CD4+和CD8+ T细胞亚群中Elf-1基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参照,10例健康成人作为对照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Elf-1mRNA相对表达量。结果:脐带血和健康成人外周血单个核细胞(PBMC)、CD4+和CD8+ T细胞均表达Elf-1,具体表达量呈现明显的个体差异性。Elf-1 mRNA相对表达量在CBMCs为18.55%±2.48%(其中最高为36.22%,最低为6.45%),在脐带血CD8+ T细胞为3.52%±0.45%(其中最高为6.75%,最低为1.71%),均明显高于健康成人PBMC(9.16%±1.92%)及其CD8+ T细胞(2.02%±0.27%)(P<0.01,P<0.05),而脐带血CD4+T细胞Elf-1 mRNA相对表达量为3.83%±0.61%,与健康成人外周血CD4+ T细胞(2.73±0.52%)比较,无显著差异。结论:本研究率先报道脐带血T细胞亚群中Elf-1 mRNA表达特点,结果提示Elf-1基因在CBMCs及其CD8+ T细胞亚群中的高表达可能是T细胞的免疫学特点之一。

关键词：脐带血基因,Elf-1 T淋巴细胞

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