检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 369-373页

作者：曹长姝沈伟哉李药兰王辉暨南大学医学院解剖学教研室广东广州510632 暨南大学药学院中药及天然产物研究所广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室广东广州510632 暨南大学医学院微生物学及免疫学教研室广东广州510632

目的:探讨中药臭灵丹中3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(HTMF)诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的机制。方法:倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst 33258染色,观察对Hep-2细胞的致凋亡能力;流式细胞仪检测HTMF对Hep-2细胞的凋亡率和线粒体... 详细信息

目的:探讨中药臭灵丹中3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(HTMF)诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的机制。方法:倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst 33258染色,观察对Hep-2细胞的致凋亡能力;流式细胞仪检测HTMF对Hep-2细胞的凋亡率和线粒体跨膜电位(Δφm)的改变;Western blotting法检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的变化。结果:倒置显微镜下Hep-2细胞随HTMF浓度加大而变小变圆,细胞存活数随浓度增加而减少。Hoechst 33258染色后高浓度组Hep-2细胞核固缩并出现呈致密浓染蓝白色颗粒状荧光的凋亡小体。流式结果显示HTMF对Hep-2细胞有促凋亡作用并呈明显的量效关系,线粒体跨膜电位(Δφm)随HTMF浓度的增加而下降。Western blotting结果显示HTMF可诱导Hep-2细胞中caspase-3和caspase-9蛋白活化,并呈浓度依赖性关系。结论:HTMF可通过线粒体途径诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9 3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(HTMF)

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人次级淋巴组织趋化因子对宫颈癌Siha细胞侵袭能力的影响

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肿瘤防治研究 2010年第11期37卷 1238-1240页

作者：刘宏杰胡萍张志丽卢晓沈关心吴砂广州市第一人民医院胃肠外科广州510510 暨南大学医学院免疫学教研室南方医科大学基础医学院免疫学教研室华中科技大学同济医学院免疫学系

目的研究人次级淋巴组织趋化因子(SLC)对Siha细胞侵袭能力的影响。方法从人脾脏cDNA扩增出SLC,构建真核表达载体,转染宫颈癌细胞株Siha。Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力,利用NF-κB特异性启动子荧光素酶报告系统检测肿瘤细胞内NF-κB的... 详细信息

目的研究人次级淋巴组织趋化因子(SLC)对Siha细胞侵袭能力的影响。方法从人脾脏cDNA扩增出SLC,构建真核表达载体,转染宫颈癌细胞株Siha。Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力,利用NF-κB特异性启动子荧光素酶报告系统检测肿瘤细胞内NF-κB的活化。结果经PCR、酶切、测序及ELISA证实,SLC真核表达载体构建表达成功。SLC转染Siha细胞,肿瘤侵袭能力增强约(2.34±0.14)倍,且肿瘤细胞内NF-κB的活化增强约(3.98±0.194)倍。结论 SLC作为趋化因子,其作用已不局限于趋化作用,还可诱导肿瘤细胞NF-κB的活化,促进肿瘤细胞侵袭,有着多重作用。

关键词：人次级淋巴组织趋化因子SLC 宫颈癌侵袭 NF-κB

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CpG ODN对ZP^(121-140)表位合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响

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中国免疫学杂志 2010年第1期26卷 46-50页

作者：秦卫兵王一峰蒋敏蒋建伟苗竹林欧汝强广东省计划生育科学技术研究所广州510600 暨南大学医学院生化教研室广州510632

目的:探讨CpGODN对透明带(ZP)抗原表位ZP121-140合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响。方法:应用人工合成ZP2121-140表位肽,与20μgCpGODN或等量完全弗氏佐剂(CFA)混悬后左胫前肌免疫雌性BALB/c小鼠,初次免疫后2、4、6周各加强免疫... 详细信息

目的:探讨CpGODN对透明带(ZP)抗原表位ZP121-140合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响。方法:应用人工合成ZP2121-140表位肽,与20μgCpGODN或等量完全弗氏佐剂(CFA)混悬后左胫前肌免疫雌性BALB/c小鼠,初次免疫后2、4、6周各加强免疫一次,共免疫四次。在每次加强免疫前和末次免疫后两周断尾取血,分离血清,分析特异性IgG抗体及非特异性细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-10水平;收集小鼠阴道冲洗液,离心取上清,分析特异性IgA抗体水平。免疫小鼠生育实验结束后,取卵巢组织行病理学分析。结果:CpGODN组诱导的特异性IgG和IgA水平较CFA组有增高趋势,但无显著性差异(P>0.05)。CpGODN组诱导的非特异性IFN-γ和TNF-α水平明显高于CFA组(P<0.05);而CpGODN组诱导的IL-10水平显著低于CFA组(P<0.05)。两种佐剂对小鼠的受孕率影响没有显著性差异,但CpGODN组孕鼠每胎产仔数明显低于CFA组(P<0.05)。病理学分析显示实验小鼠卵巢组织无病理性变化。结论:CpGODN对ZP121-140合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应略优于CFA,更适合用于避孕疫苗佐剂研究。

关键词： CpG ODN 透明带合成肽免疫避孕

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NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体的构建与表达

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 346-351页

作者：唐小龙江振友庞雪云蓝锴欧财文广东省中医院检验科广东广州510120 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:运用pADxsi系统构建带人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体。方法:采用基因克隆技术,将目的基因NGN3从pEGFP-N1-NGN3质粒上切下连到pShuttle-GFP-CMV上,替换GFP,得到pShuttle-CMV-NGN3;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上切下连到系统pShuttle-CMV-NGN3上,得到pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4穿梭质粒;最后将CMV-NGN3/CMV-PAX4从pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4转移到ADxsi骨架载体上,得到pADxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4病毒质粒,然后在293细胞中进行包装与扩增活性病毒,并进行病毒滴度测定。体外感染人脐带间充质干细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫印迹(Western blotting)检测目的基因在细胞内的表达情况,免疫细胞化学与间接荧光法检测目的分子在细胞内的定位。结果:酶切鉴定和PCR证明重组人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体构建正确;RT-PCR与Western blotting结果显示目的基因在细胞持续稳定表达;间接荧光与免疫化学表明重组腺病毒可高效感染人脐带间充质干细胞,且目的基因特异性地定位于细胞核内。结论:应用重组技术成功构建人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体,且在间充质干细胞内持续而稳定表达。

关键词：腺病毒神经元素3(NGN3) 成对盒基因4(PAX4) 间充质干细胞(MCS)

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干细胞迁移机理的近场扫描光学显微术研究

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分析测试学报 2010年第6期29卷 548-552页

作者：陈家楠潘运龙丁晖覃莉蔡继业暨南大学生命科学技术学院生物纳米技术实验室广东广州510632 暨南大学附属第一医院普外科广东广州510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical m... 详细信息

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同时获取了VEGF诱导前后的MSCs的形貌和光学信息。结果表明,近场光学图观测到形貌图上所没有的黑色斑点,分析认为这些黑斑为细胞的黏着斑。近场光学图显示经过VEGF诱导后细胞的黏着斑数量明显增加。同时,对诱导前后干细胞的骨架蛋白进行免疫荧光标记并用共聚焦显微镜进行观察,结果表明细胞骨架由诱导前的无序状态转变为诱导后的有序状态,说明诱导后的干细胞处于迁移状态。光学超微结构图则显示了诱导后干细胞表面的光学细节比诱导前细胞大量增加,出现了大量直径约200 nm的光斑,这是由于细胞表面大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,这些结果为VEGF能够诱导MSCs进行定向迁移提供了实验依据和可视化证明。也表明NSOM不但能提供高分辨的光学分辨率,还可提供生物细胞精细结构的更深层次的光学信息。

关键词：近场光学显微镜间充质干细胞黏着斑

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子痫前期患者系统性氧化应激反应的检测

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基础医学与临床 2010年第4期30卷 343-347页

作者：钱中清曾耀英朱斌季煜华何芳暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 广州市何贤纪念医院产科广东广州510632

目的研究子痫前期系统性氧化应激检测方法。方法组织化学染色检测胎盘组织缺氧表现;用胞内活性氧(ROS)探针H2DCFDA及全血染色方法检测中性粒细胞(PMN)胞内ROS水平;用H2O2检测试剂盒检测血清中H2O2水平。结果与正常妊娠胎盘组织比较,子... 详细信息

目的研究子痫前期系统性氧化应激检测方法。方法组织化学染色检测胎盘组织缺氧表现;用胞内活性氧(ROS)探针H2DCFDA及全血染色方法检测中性粒细胞(PMN)胞内ROS水平;用H2O2检测试剂盒检测血清中H2O2水平。结果与正常妊娠胎盘组织比较,子痫前期患者胎盘组织合胞体细胞显著增多;血管破坏,结构不清,局部血管有纤维钙化特征;非孕妇女、正常妊娠妇女及子痫前期患者PMN胞内ROS水平分别为:45.61±12.20、51.02±13.60(P<0.01)、85.10±16.30(P<0.01);而血清H2O2浓度分别为:(24.57±5.17)μmol/L、(26.61±3.25)μmol/L、(39.84±9.67)μmol/L。结论对子痫前期系统性氧化应激进行定性和定量检测结果与疾病发生和发展一致。

关键词：子痫前期氧化应激胎盘中性粒细胞

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人外周血初始B细胞和记忆性B细胞亚群的特征和功能

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国际免疫学杂志 2010年第3期33卷 184-187页

作者：冯敛吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080

B淋巴细胞是免疫系统的重要免疫成份，主要功能是介导体液免疫应答。在人外周血中，按照B淋巴细胞的发育阶段及功能的不同，可将B淋巴细胞分为初始成熟B细胞、记忆B细胞和浆细胞。记忆B细胞又可分为IgM记忆B细胞和类型转换的记忆B细胞... 详细信息

B淋巴细胞是免疫系统的重要免疫成份，主要功能是介导体液免疫应答。在人外周血中，按照B淋巴细胞的发育阶段及功能的不同，可将B淋巴细胞分为初始成熟B细胞、记忆B细胞和浆细胞。记忆B细胞又可分为IgM记忆B细胞和类型转换的记忆B细胞。近年来的研究表明，B淋巴细胞的亚群远比人想象中的复杂，因此对人B细胞各亚群的起源、发育和功能进行更深入的研究，将有助于治疗自身免疫性疾病，在慢性感染性疾病的治疗过程中找到新的策略，并指导研发安全有效的疫苗。

关键词：初始成熟B细胞 IgM记忆B细胞类型转换的记忆B细胞浆细胞

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姜黄素对IL-6损伤的大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 352-356页

作者：谢赛董军余启贵黄涛付咏梅暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632 美国印第安纳大学医学院微生物和免疫学系美国印第安纳州46202

目的:探讨姜黄素对IL-6损伤的大鼠海马神经元的功能性保护作用及其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频电刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率... 详细信息

目的:探讨姜黄素对IL-6损伤的大鼠海马神经元的功能性保护作用及其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频电刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,IL-6和N-甲基D-天冬氨酸(NM-DA)对大鼠海马脑片的LTP产生明显的抑制作用(P<0.05);而姜黄素可部分拮抗IL-6和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05);IL-6、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递无影响。结论:姜黄素对海马神经元具有功能性保护作用,其机制可能是作用于神经元细胞膜上的NMDA受体,拮抗IL-6引起神经元功能异常。

关键词： HIV-1相关痴呆(HAD) 姜黄素白介素6(IL-6) 长时程增强(LTP) N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)

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荔枝核提取物对HepG-2细胞生长抑制及凋亡诱导机制的探讨

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 364-368页

作者：王辉沈伟哉黄雪松陶小红暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室甘肃兰州730000 暨南大学医学院人体解剖教研室甘肃兰州730000 暨南大学理工学院食品科学与工程系广东广州510632 甘肃省第二人民医院肾内科甘肃兰州730000

目的:探讨荔枝核提取物成分L2.3对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用及其分子机制。方法:MTT法测定样品对HepG-2细胞的增殖抑制,荧光染色观察细胞凋亡;比色法检测样品对HepG-2中caspase-3、caspase-8和caspase-9活性的影响,流式细胞仪检... 详细信息

目的:探讨荔枝核提取物成分L2.3对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用及其分子机制。方法:MTT法测定样品对HepG-2细胞的增殖抑制,荧光染色观察细胞凋亡;比色法检测样品对HepG-2中caspase-3、caspase-8和caspase-9活性的影响,流式细胞仪检测并分析Fas蛋白表达的变化。结果:L2.3对HepG-2细胞表现出时间及剂量依赖性增殖抑制活性(P<0.05),其半数抑制质量浓度为43.0μg/mL;处理组细胞中出现致密浓染亮蓝色凋亡小体。较高质量浓度的L2.3处理细胞后,caspase-3、8、9的活性均呈时间依赖性增高(P<0.01),且Fas蛋白的表达也明显上调(P<0.05)。结论:荔枝核提取物L2.3对HepG-2细胞有体外增殖抑制活性,并介导caspase-3、caspase-8、caspase-9活性改变及Fas蛋白表达的上调,以此诱导细胞凋亡的发生。

关键词：荔枝核提取物 HepG-2 细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 Fas蛋白

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胚胎心肌干细胞体外的分化

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广东医学 2010年第11期31卷 1376-1378页

作者：马征来常青夏潮勇王丽京吴婷李艳杨雪松暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广州510632 广东药学院血管生物学实验室广州510224

目的鸡胚原肠胚形成期含有心肌干细胞（cardiac stem cell,CSC）的生心区原条组织离体后体外培养,使其增殖分化成具有舒缩功能的心肌组织。方法改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育,待胚胎发育到原肠胚的HH4期,无菌环境内选择性... 详细信息

目的鸡胚原肠胚形成期含有心肌干细胞（cardiac stem cell,CSC）的生心区原条组织离体后体外培养,使其增殖分化成具有舒缩功能的心肌组织。方法改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育,待胚胎发育到原肠胚的HH4期,无菌环境内选择性离体胚胎生心区原条组织（原条组织的前25%~40%）于10%FBSDMEM-F12培养基中培养,2~5d后得到局部跳动的细胞组织,通过原位杂交、免疫组织化学、DiI示踪和细胞的超微结构鉴定是否分化为心肌组织。结果 FGF8特异性表达于心管和神经管;N-cadherin特异性表达于心管、神经管和体节;DiI标记的细胞迁移参与心管的形成;细胞的超微结构显示心肌组织特有的结构---闰盘。结论 CSC体外培养可以定向分化发育成心肌组织,为进一步研究心肌细胞的发育分化和生理药理学实验提供了良好的平台。

关键词：心肌干细胞原肠胚 FGF8 N-cadherin DiI 分化心肌细胞

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