检索结果-内蒙古大学图书馆

广州医学院学报 2007年第6期35卷 5-8页

作者：李晓栋李君武宋东周曙光王珊黄清华暨南大学医学院微生物免疫学教研室广东广州510632

目的:构建可表达丙型肝炎病毒(HCV)EGFP-CORE融合蛋白的真核表达载体,获得重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系。方法:克隆HCV核心抗原基因于真核表达载体pEGFP-C1中,脂质体法转染QSG7701细胞后,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测EGFP-COR... 详细信息

目的:构建可表达丙型肝炎病毒(HCV)EGFP-CORE融合蛋白的真核表达载体,获得重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系。方法:克隆HCV核心抗原基因于真核表达载体pEGFP-C1中,脂质体法转染QSG7701细胞后,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测EGFP-CORE融合蛋白的表达。再经持续G418压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。最后用Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果:成功构建真核表达载体pEGFP-C1/CORE;建立了重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系。结论:重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系可表达EGFP-CORE,为以CORE基因作为靶位的抗HCV感染研究奠定了基础。

关键词：丙型肝炎病毒病毒融合蛋白类绿色荧光蛋白细胞系

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早、中、晚孕期胎盘因子对人外周血淋巴细胞CD4、CCR5和CXCR4表达的影响

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免疫学杂志 2007年第4期23卷 409-412页

作者：李莉平林羿康佳丽夏薇王自能广州市第一人民医院妇产科广州510180 暨南大学组织移植与免疫国家重点实验室广州510632 暨南大学第一临床医学院妇产科教研室广州510632

目的通过研究早、中、晚孕期胎盘因子(PF)对人外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4、CCR5和CXCR4表达的作用,探讨PF在人免疫缺陷病-毒1(HIV-1)垂直传播中的作用及其机理。方法制备早、中、晚孕期PF。分离人外周血单个核细胞,并分别与相对浓度为25... 详细信息

目的通过研究早、中、晚孕期胎盘因子(PF)对人外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4、CCR5和CXCR4表达的作用,探讨PF在人免疫缺陷病-毒1(HIV-1)垂直传播中的作用及其机理。方法制备早、中、晚孕期PF。分离人外周血单个核细胞,并分别与相对浓度为25%的早、中、晚孕期PF作用,培养24 h后收集细胞,荧光抗体标记,流式细胞术检测外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4、CCR5和CXCR4表达,以及CD4+T细胞中CCR5+细胞、CXCR4+细胞、CCR5+CXCR4+细胞所占的百分率。结果各孕期PF均可显著降低PBLs中CCR5的表达,其中早孕期PF的作用明显强于中、晚孕期PF的作用;各孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+细胞的百分率均显著低于对照组,早孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+细胞的百分率明显低于中、晚孕期PF组;各孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+CXCR4+细胞的百分率均显著低于对照组,早孕期PF组CD4+T细胞中CCR5+CX-CR4+细胞的百分率显著低于晚孕期PF组。结论各孕期PF均可显著降低PBLs中CCR5的表达,以及CD4+T细胞中CCR5+细胞和CCR5+CXCR4+细胞的百分率,早孕期PF作用最强,中、晚孕期PF效应相当,PF可能通过抑制R5病毒的入胞而具有抗R5病毒的作用,并可能在阻断HIV-1宫内感染中具有重要作用。

关键词：胎盘因子 HIV-1 垂直传播 CD4 CCR5 CXCR4

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运动训练对局灶性脑梗死大鼠神经功能、细胞超微结构及突触小泡蛋白表达的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2007年第6期28卷 566-571页

作者：马尚峰胡昔权宿宝贵潘三强李鹏吕来清暨南大学医学院人体解剖学教研室广东广州510632 中山大学附属第三医院康复科广东广州510630

目的:研究运动训练对脑梗死大鼠神经功能、脑组织缺血半影区细胞超微结构及突触小泡蛋白(synap-tophysin,SYN)含量变化的影响。方法:用90只SD成年大鼠制作左侧大脑中动脉栓塞模型,术后24 h随机分成卒中训练组、卒中未训练组,假手术组大... 详细信息

目的:研究运动训练对脑梗死大鼠神经功能、脑组织缺血半影区细胞超微结构及突触小泡蛋白(synap-tophysin,SYN)含量变化的影响。方法:用90只SD成年大鼠制作左侧大脑中动脉栓塞模型,术后24 h随机分成卒中训练组、卒中未训练组,假手术组大鼠只暴露分离血管、神经。卒中训练组大鼠每天予以抓握、平衡、旋转等训练;卒中未训练组则置于普通笼内饲养,除可自由进食与自主活动外,不予以任何针对性训练,并分别在造模后3、7、21及35 d时进行神经功能评分。以免疫组织化学方法检测脑组织缺血半影区SYN免疫阳性产物的表达,用W estern b lot方法测定SYN蛋白表达含量的变化,用透射电子显微镜观察缺血半影区神经细胞超微结构的变化。结果:造模后3 d,神经功能评分两组无显著性差异(P>0.05),而造模后7、21和35 d,卒中训练组大鼠的神经功能评分均优于卒中未训练组(P<0.05)。在细胞线粒体、核和粗面内质网等超微结构方面,卒中训练组亦多于未训练组;在造模后3和7 d时,卒中训练组、未训练组和假手术组SYN蛋白的表达无显著性差异(P>0.05),卒中训练组SYN蛋白的表达则在21和35 d时均明显多于卒中未训练组和假手术组(P<0.05)。结论:运动训练能提高脑梗死大鼠平衡、抓握与行走能力,改善神经功能,其机制可能与保护缺血半影区神经细胞线粒体等超微结构,上调脑组织缺血半影区SYN蛋白的表达有关。

关键词：运动训练脑梗死大鼠神经功能超微结构突触小泡蛋白

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栓塞大鼠大脑中动脉对海马结构内星形胶质细胞的形态学影响

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中国临床解剖学杂志 2007年第4期25卷 427-429页

作者：宿宝贵吕来清郑发武郝木峰暨南大学医学院人体解剖学教研室广州510632 广东省中山市三乡人民医院广东中山528400

目的:探讨栓塞大鼠大脑中动脉是否可以引致海马结构内星形胶质细胞的形态学改变。方法:用免疫组织化学方法显示栓塞大脑中动脉大鼠、假手术大鼠和对照大鼠海马结构内的GFAP阳性的星形胶质细胞的形态和数量以及GFAP表达,对比组间差异,寻... 详细信息

目的:探讨栓塞大鼠大脑中动脉是否可以引致海马结构内星形胶质细胞的形态学改变。方法:用免疫组织化学方法显示栓塞大脑中动脉大鼠、假手术大鼠和对照大鼠海马结构内的GFAP阳性的星形胶质细胞的形态和数量以及GFAP表达,对比组间差异,寻找梗塞对远离缺血中心区的海马结构内星形胶质细胞的影响。结果:栓塞大鼠大脑中动脉可以引致远离缺血中心区的海马结构内星形胶质细胞数量增多、体积增大和GFAP表达增加。结论:脑缺血损伤引起的胶质细胞激活不仅限于缺血中心区和边缘区,远离缺血中心区的脑区也可以出现神经胶质细胞形态学改变,即胶质细胞激活现象。

关键词：栓塞星形胶质细胞海马结构形态学

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晚孕期胎盘因子对小鼠淋巴细胞增殖的影响

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现代免疫学 2007年第2期27卷 125-128页

作者：李莉平林羿康佳丽夏薇王自能广州市第一人民医院妇产科广州510180 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学第一临床医学院妇产科教研室广州510632

通过晚孕期胎盘因子(PF)对小鼠淋巴细胞体外增殖的作用,探讨PF对正常机体免疫系统和免疫功能的效应。分离小鼠淋巴细胞,用ConA刺激其增殖,并分别与晚孕期不同浓度的PF作用,于48 h和72 h用活体染料羧基荧光素乙酰乙琥珀酰亚胺酯(CFSE)标... 详细信息

通过晚孕期胎盘因子(PF)对小鼠淋巴细胞体外增殖的作用,探讨PF对正常机体免疫系统和免疫功能的效应。分离小鼠淋巴细胞,用ConA刺激其增殖,并分别与晚孕期不同浓度的PF作用,于48 h和72 h用活体染料羧基荧光素乙酰乙琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记,流式细胞术检测增殖。于48 h碘化丙啶染色,流式细胞术检测细胞周期分布。结果显示,晚孕期PF在48 h和72 h时间点均能显著促进ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖反应,且效应与剂量呈正相关。晚孕期各浓度PF组G0期所占比率均显著低于对照组,且浓度越大,比率越低,组间两两比较有统计学意义。各浓度PF组S期所占比率均显著高于对照组,各浓度PF组G2/M期所占比率均显著高于对照组,25%PF组G2/M期所占比率均显著高于5%PF组和15%PF组。晚孕期PF通过促进小鼠淋巴细胞由G1期向S和G2/M期而促进ConA刺激小鼠淋巴细胞的增殖反应,提示PF具有免疫调节的功能,可以提高机体的免疫功能。

关键词：胎盘因子人免疫缺陷病毒 CFSE 淋巴细胞增殖细胞周期分布

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丹参素和丹酚酸对胎鼠脑神经干细胞迁移的诱导

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第7期11卷 1225-1228,I0002页

作者：郭国庆沈伟哉钟世镇暨南大学医学院解剖学教研室广东省广州市510630 南方医科大学临床解剖学研究所广东省广州市510150

目的:以丹参水溶性成分丹参素、丹酚酸为干预药物,观察其对胎鼠脑神经干细胞迁移的诱导作用。方法:实验于2006-03/08在广州暨南大学医学院完成。①丹参素(粉剂,纯度大于90%,昆明长春花科技公司生产,批号1108552200203);丹酚酸(粉剂,纯... 详细信息

目的:以丹参水溶性成分丹参素、丹酚酸为干预药物,观察其对胎鼠脑神经干细胞迁移的诱导作用。方法:实验于2006-03/08在广州暨南大学医学院完成。①丹参素(粉剂,纯度大于90%,昆明长春花科技公司生产,批号1108552200203);丹酚酸(粉剂,纯度大于90%,昆明长春花科技公司生产,批号CCH601012);MBC96型趋化小室(NeuroProbe公司)。②取妊娠13.5d昆明种小鼠2只,处死后取出胎鼠,分离其胎脑神经干细胞进行传代培养。取培养至对数生长期的细胞,采用Boyden小室法观察细胞迁移情况。取单细胞悬液50μL,分别加入Boyden小室的12个上室;取分别含有5,10,20,40,80,100mg/L丹参素和5,10,20,40,80,100mg/L丹酚酸的DMEM培养基各450μL,加入Boyden小室的12个下室;另2孔以不含丹参素和丹酚酸的DMEM培养基作为空白对照。上下两室以预先包被Ⅰ型胶原的聚碳酸酯微孔滤膜相隔。将Boyden小室置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养24h,取出微孔滤膜,用甲醇将迁移至微孔滤膜下层的细胞固定,Nissl染色,显微镜下随机选择3个不同视野,计数膜上不同层次的细胞数。③选取昆明种小鼠18只,随机数字表法分为生理盐水对照组、丹参素组、丹酚酸组,6只/组。丹参素组于侧脑室内连续注射80mg/L丹参素5μL,丹酚酸组注射40mg/L丹酚酸5μL,生理盐水对照组注射等量生理盐水,共3d,术后14d处死,取脑,制备切片,行ABC免疫细胞化学染色,观察丹参素和丹酚酸干预后nestin阳性神经元的分布变化。结果:18只小鼠全部进入结果分析。①不同质量浓度的丹参素对神经干细胞迁移的诱导:与空白对照比较,5,10mg/L的丹参素促神经干细胞迁移的作用并不明显(t=1.037,1.374,P>0.05);20,40mg/L的丹参素可明显促进神经干细胞的迁移(t=2.894,3.468,P<0.01);当丹参素质量浓度为80mg/L时促迁移作用最为强烈(t=4.031,P<0.01),之后有所减弱。②不同浓度的丹酚酸对神经干细胞迁移的诱导:与空白对照比较,5mg/L的丹酚酸促神经干细胞迁移的作用并不明显(t=1.365,P>0.05);10,20mg/L的丹酚酸可明显促进神经干细胞的迁移(t=3.021,3.947,P<0.01);当丹酚酸质量浓度为40mg/L时促迁移作用最为强烈(t=4.342,P<0.01),之后有所减弱。③丹参素和丹酚酸对小鼠室管膜下nestin阳性神经元迁移的影响:丹参素组侧脑室内侧和外侧的nestin阳性细胞的数量多于生理盐水对照组,而且并不局限于侧脑室周围区,在脑皮质和尾壳核可见少量的阳性细胞,细胞的突起明显,伸向皮质方向,侧脑室内侧的阳性细胞有相似的特征。丹酚酸组侧脑室周围的阳性细胞数量多,而且在皮质和尾壳核检测到大量的阳性细胞。结论:丹参素和丹酚酸均具有诱导胎鼠脑神经干细胞迁移的作用,且丹酚酸的作用优于丹参素。

关键词：脑干细胞神经系统细胞学中间丝蛋白质类细胞运动

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胎儿发育中水通道蛋白的免疫组化观察

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解剖学研究 2007年第6期29卷 425-428,F0004页

作者：陈侠黄中新暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632

目的观察胎儿器官和组织发育过程中水通道蛋白(AQPs)的表达特征,初步探讨AQPs对胎儿发育进程的生物意义。方法14～38周胎儿共12例,取用肾脏、肺脏、唾液腺、甲状腺和胃等器官,常规固定、石蜡包埋和切片;用免疫组化S-P法,检测AQPs(AQP1、... 详细信息

目的观察胎儿器官和组织发育过程中水通道蛋白(AQPs)的表达特征,初步探讨AQPs对胎儿发育进程的生物意义。方法14～38周胎儿共12例,取用肾脏、肺脏、唾液腺、甲状腺和胃等器官,常规固定、石蜡包埋和切片;用免疫组化S-P法,检测AQPs(AQP1、AQP2和AQP4)在胎儿不同胎龄器官组织中的表达。结果胎儿肾脏中AQPs定位于近端小管和集合管系统;胎肺中AQPs的表达随肺泡发育分化而迁移,始终定位于肺泡上皮;晚期胎肺中AQPs于肺泡及呼吸道上皮均有表达;胎16周起检出AQPs反应于唾液腺、胃腺和胰腺等消化腺,同时甲状腺中AQPs在滤泡上皮也有活跃表达。结论胎肾中AQPs的表达与肾的重吸收功能直接相关;胎肺内AQPs的表达反映肺泡上皮分化的轨迹,其调节水分的作用为肺泡发育提供空间;AQPs介导细胞内外水分的转运不但调节消化腺的分泌还参与调节甲状腺滤泡的激素合成和分泌过程。表明AQPs在胎儿发育过程,对各器官中水转运功能的成熟起重要作用。

关键词：水通道蛋白胎儿发育免疫组化

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应用胎鼠脑源性神经干细胞条件培养液诱导胚胎干细胞的分化

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第28期11卷 5489-5493页

作者：张嘉晴吴昊项鹏暨南大学医学院生物化学教研室广东省广州市510632 暨南大学附属第一医院华侨医院骨科广东省广州市510632 中山大学干细胞与组织工程中心广东省广州市510632

目的:为克服类胚体和视黄酸诱导体系的不足,实验使用胎鼠脑源性神经干细胞条件培养液定向诱导分化胚胎干细胞,观察是否可以获得大量具有高度增殖和进一步分化能力的神经干/祖细胞。方法:实验于2005-06/2006-09在中山大学干细胞与组织工... 详细信息

目的:为克服类胚体和视黄酸诱导体系的不足,实验使用胎鼠脑源性神经干细胞条件培养液定向诱导分化胚胎干细胞,观察是否可以获得大量具有高度增殖和进一步分化能力的神经干/祖细胞。方法:实验于2005-06/2006-09在中山大学干细胞与组织工程中心实验室完成。①取孕12.5d的C57BL/6J小鼠胚胎脑组织,放入含有神经干细胞培养液(含B27、肝素5mg/L、碱性成纤维细胞生长因子20μg/L、表皮生长因子20μg/L、100U/mL青霉素、0.1g/L链霉素的DMEM/F12)的离心管内,接种后37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中饱和湿度培养。3～5d后可见团状细胞球出现,即为原代的神经干细胞。取P5～10代神经干细胞消化成单细胞悬液,以5×104/cm2密度接种于神经干细胞培养液中,4～5d离心后收集上清液,即为胎鼠脑源性神经干细胞条件培养液。②P30代SC1002鼠胚胎干细胞消化成单个细胞后,移入上述制备的条件培养液中,5d后消化细胞,再重新接种于条件培养液中培养5d。常规消化后接种于神经干细胞培养液中,培养4～5d,即得到胚胎干细胞来源的神经干/祖细胞。对照组用神经干细胞培养液代替条件培养液。③所得细胞进行特异性抗原免疫细胞化学染色,并计数免疫染色阳性细胞率。RT-PCR检测标志性基因的表达。结果:①胚胎干细胞分化为神经干/祖细胞的比例:当消化成单个细胞的胚胎干细胞接种到神经干细胞条件培养液后,24h内聚集成细胞球并悬浮生长。免疫细胞化学检测少部分细胞表达nestin,在随后的培养过程中nestin阳性细胞逐渐增多。第4天细胞球周围的细胞几乎全部呈nestin阳性。当消化后重新接种于神经干细胞条件培养液中,可见部分细胞贴壁生长,10d后再常规消化接种于神经干细胞培养液中,呈典型的双极外形,nestin及RC2检测均呈阳性。RT-PCR检测显示Oct-4不再表达,而sox2,sox3,nestin,fabp7及bHLH转录因子均有显著表达。另一方面,当单个胚胎干细胞直接培养在神经干细胞培养液中,大量细胞死亡,仅10%存活,存活细胞表达Oct-4和nestin。②胚胎干细胞来源的神经干/祖细胞向神经元和胶质细胞的分化:经过10～12d的诱导分化,微管相关蛋白2和胶质纤维酸性蛋白细胞阳性率分别为(27.6±9.2)%和(29.7±11.6)%。结论:不需要共培养或添加诱导因子,应用胎鼠脑源性神经干细胞条件培养液成功地将胚胎干细胞定向诱导分化为大量高纯度的神经前体细胞,并进一步得到神经元和神经胶质细胞。

关键词：胚胎干细胞条件培养液分化神经干细胞

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形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质c-fos表达的研究

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中华神经医学杂志 2007年第6期6卷 613-615页

作者：周清陈剑刘珏徐锦堂王彦平赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632

目的研究双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况。方法缝合14日龄SD大鼠双侧眼睑建立双眼形觉剥夺性弱视模型9只,正常对照组5只。饲养至100日龄两组成年大鼠均暴露于外界自然光线中0.5 h后取材,对两组视皮质... 详细信息

目的研究双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况。方法缝合14日龄SD大鼠双侧眼睑建立双眼形觉剥夺性弱视模型9只,正常对照组5只。饲养至100日龄两组成年大鼠均暴露于外界自然光线中0.5 h后取材,对两组视皮质组织进行Nissl染色和c-fos蛋白免疫组化染色,并对染色结果进行计算机图像分析。结果弱视组大鼠视皮质表达c-fos蛋白阳性神经元较正常对照组多,两组差异有显著性(P<0.05)。结论双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质经光刺激诱导c-fos表达增加,提示已过视觉发育敏感期成年大鼠的视皮质仍存留一定程度的视觉可塑性。

关键词：形觉剥夺性弱视 SD成年大鼠 c-fos

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含谷氨酰胺双肽的肠外营养对危重病的改善作用

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中国药业 2007年第14期16卷 31-32页

作者：姜海平刘春安王达安暨南大学医学院第一附属医院普外科广东广州510630 暨南大学医学院病理生理教研室广东广州510630

目的了解谷氨酰胺双肽(Gln)增强的肠外营养(parenteral nutrition,PN)对普外科危重病患者病情的改善作用。方法将40例符合诊断标准的普外科危重和大手术后患者随机分成治疗组和对照组,各20例,均给予常规外科治疗,并于术后第1～3天后开... 详细信息

目的了解谷氨酰胺双肽(Gln)增强的肠外营养(parenteral nutrition,PN)对普外科危重病患者病情的改善作用。方法将40例符合诊断标准的普外科危重和大手术后患者随机分成治疗组和对照组,各20例,均给予常规外科治疗,并于术后第1～3天后开始肠外营养,连续7d,其中治疗组的氮量由20%L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液供给[0.5g/(kg.d)],其余部分由7%～11.4%的氨基酸溶液供给。两组患者分别于肠外营养前和营养后7d抽取外周血测量血红蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)、转铁蛋白(TRF)、免疫球蛋白G(IgG),IgA,IgM,并进行急性生理和慢性健康评分系统(APACHEⅡ)评分。结果治疗组经肠外营养治疗后IgG和TR F分别由治疗前(9.2±3.1)g/L和(1.17±0.3)g/L增高至(14±2.8)和(1.36±0.7)g/L,差异显著(P<0.05),且治疗组APACHEⅡ评分又较对照组下降(P<0.05)。结论G ln增强的肠外营养能改善普外科危重病患者蛋白质代谢,提高机体免疫功能,减轻病情的危重程度。

关键词：谷氨酰胺肠外营养全身炎症反应综合征

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