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解剖学研究 2002年第2期24卷 138-140,I008页

作者：沈伟哉郭国庆邢旭光余菁暨南大学医学院解剖学教研室广州510630

目的　观察大鼠脑干神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的分布 ,为探讨nNOS的作用提供形态学资料。方法　用ABC免疫细胞化学方法显示脑干nNOS免疫阳性神经元。结果　大鼠脑干nNOS免疫阳性神经元以中脑和脑桥分布丰富 ,延髓较稀... 详细信息

目的　观察大鼠脑干神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的分布 ,为探讨nNOS的作用提供形态学资料。方法　用ABC免疫细胞化学方法显示脑干nNOS免疫阳性神经元。结果　大鼠脑干nNOS免疫阳性神经元以中脑和脑桥分布丰富 ,延髓较稀少 ;在中脑 ,nNOS免疫阳性神经元主要分布于中脑水管周围灰质的背侧部、被盖背外侧核、中缝背核、上下丘灰质等部位 ;在脑桥 ,主要分布于被盖背外侧核、脑桥中缝核、被盖脚桥核、蓝斑、臂旁核、斜方体核 ,以及脑桥网状结构 ;与中脑和脑桥相比 ,延髓nNOS免疫阳性神经元较少 ,主要分布于延髓网状结构、三叉神经脊束核和孤束核等核团。结论　分布于脑干内丰富的nNOS免疫阳性神经元可能通过其生成的NO调节其他神经递质的分泌 ,共同参与内脏活动、感觉和运动的传导 ,以及睡眠和觉醒等脑的高级整合功能的调节。

关键词：脑干神经元一氧化氮神经元型一氧化氮合酶脑干免疫阳性神经元形态学 ABC免疫细胞化学方法

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不同组织学类型人肺癌细胞系的维甲酸受体表达

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临床与实验病理学杂志 2002年第3期18卷 316-318页

作者：蔡小强谢作煊暨南大学医学院病理学教研室广州510632

目的 :观察来源于不同组织学类型的人肺癌细胞系 (肺巨细胞癌细胞系PLA 80 1,肺鳞状上皮细胞癌细胞系C 5 7,个旧肺腺癌细胞系GLC 82和肺腺癌细胞系PC 840 45 )的维甲酸受体的含量和分布特征。方法 :用ELISA和免疫组化显色计算机图像分... 详细信息

目的 :观察来源于不同组织学类型的人肺癌细胞系 (肺巨细胞癌细胞系PLA 80 1,肺鳞状上皮细胞癌细胞系C 5 7,个旧肺腺癌细胞系GLC 82和肺腺癌细胞系PC 840 45 )的维甲酸受体的含量和分布特征。方法 :用ELISA和免疫组化显色计算机图像分析方法 ,对 4株具有不同侵袭潜能、不同组织学类型的肺癌细胞系的维甲酸受体 (RARs、RARβ和RXRs)进行检测。结果 :4株细胞系的RARβ表达极少 ,甚至缺如 ;RARs主要分布在癌细胞质中 ,但RXRs主要位于细胞核内 ,表达水平较高 ;RARs和RXRs在PLA 80 1细胞中表达最低。结论 :肺癌中普遍存在着RARβ的缺失与RARs的表达分布异常 ,这些改变可能与肺癌的异常分化有关 ,也可能是肺癌细胞对维甲酸诱导分化不敏感的重要原因。RXRs较高水平的表达主要位于核内 ,提示用 9

关键词：组织学类型肺癌细胞系维甲酸受体肺肿瘤

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载脂蛋白B-100 3500精氨酸→色氨酸突变的简便快速诊断

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岭南心血管病杂志 2002年第1期8卷 10-12页

作者：冯铮狄静芳曾山冯建生暨南大学组织移植免疫中心广州市510632 暨南大学医学院生化教研室广州市510632

目的　建立一个简便快速方法 ,用于诊断家族性载脂蛋白B 10 0缺陷症R35 0 0W。方法　设计一对寡核苷酸引物 ,其上游引物为突变引物。以PCR扩增目的DNA顺序 ,产物用限制酶Nco1酸解 ,酶解体系中加入含Nco1切口的DNA片段作内参照物 ,以排... 详细信息

目的　建立一个简便快速方法 ,用于诊断家族性载脂蛋白B 10 0缺陷症R35 0 0W。方法　设计一对寡核苷酸引物 ,其上游引物为突变引物。以PCR扩增目的DNA顺序 ,产物用限制酶Nco1酸解 ,酶解体系中加入含Nco1切口的DNA片段作内参照物 ,以排除酶切时假阴性的出现。结果　所设计引物能成功地用于PCR以扩增目的DNA片段 ,长 14 4碱基对。产物与限制酶Nco1保温 ,正常基因产物不被切割 ,突变基因产物则由于引入一个人工限制酶切口而被切割 ,产生 117碱基对的片段 ,这两长度不同的片段可被 2 %琼脂糖凝胶电泳所分离。利用这一方法 ,于 16 2例高血浆胆固醇患者中检出两例杂合R35 0 0W突变基因携带者。结论　本突变引物PCR法成功地检出ApoB 10 0R35 0 0W突变基因 ,方法可靠。

关键词：载脂蛋白B 高胆固醇血症聚合酶链反应基因诊断家族性载脂蛋白B-100缺陷症 3500精氨酚突变色氨酸

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中性粒细胞抑制人单个核细胞释放TNF-α及其机理的研究

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中国病理生理杂志 2002年第7期18卷 737-740页

作者：李浩威颜亮潘剑波杨皓庄张穗梅王彦平付咏梅中山医科大学病理生理教研室广东广州510080 暨南大学医学院病理生理教研室广东广州510632 广州市第二人民医院广东广州510150

目的 :探讨人中性粒细胞 (PMNs)对人外周血单个核细胞 (PBMCs)释放TNF -α的影响及其作用机理。方法 :采集健康供血者的新鲜外周静脉血 ,以葡聚糖沉淀和密度梯度离心法分离其PMNs和PBMCs ,将PMNs细胞与PBMCs细胞按 2 :1的数量比与脂多... 详细信息

目的 :探讨人中性粒细胞 (PMNs)对人外周血单个核细胞 (PBMCs)释放TNF -α的影响及其作用机理。方法 :采集健康供血者的新鲜外周静脉血 ,以葡聚糖沉淀和密度梯度离心法分离其PMNs和PBMCs ,将PMNs细胞与PBMCs细胞按 2 :1的数量比与脂多糖共同培育后 ,分别采用酶联免疫吸附法测定培养上清的TNF -α浓度 ,并用流式细胞术测定结合荧光标记脂多糖的单核细胞的百分率及单核细胞表面平均荧光强度。结果 :PMNs在细菌脂多糖刺激下不释放TNF -α,PMNs可以抑制PBMCs释放TNF -α ,其抑制作用具有细胞特异性 ;经多聚甲醛固定的PMNs仍具有上述的抑制作用。流式细胞术结果显示PMNs并不影响单核细胞与脂多糖结合。结论 :PMNs可抑制人PBMCs释放TNF -α ,其机理可能是PMNs干扰脂多糖激活PBMCs的信号转导过程 ,抑制细菌脂多糖对其的活化 ,从而下调TNF

关键词：中性粒细胞单核细胞脂多糖类肿瘤坏死因子-α

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牛bFGF-pcDNA_3在人脐静脉内皮细胞中的表达及鉴定

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中国病理生理杂志 2002年第10期18卷 1228-1232,T001页

作者：曹开源崔蕴霞徐霖郭琳洁张胜宁波中山大学中山医学院免疫学教研室广东广州510089 暨南大学生命科学院广东广州510632 中山大学中山眼科中心广东广州510089

目的 :研究牛bFGF -pcDNA3 在体外培养人脐静脉内皮细胞中的表达与活性 ,及对该细胞生物学特性的影响。方法 :脂质体法将bFGF -pcDNA3 真核表达载体转染体外培养的人脐静脉内皮细胞 ,经G4 18筛选阳性克隆。通过免疫细胞化学法检测bFGF... 详细信息

目的 :研究牛bFGF -pcDNA3 在体外培养人脐静脉内皮细胞中的表达与活性 ,及对该细胞生物学特性的影响。方法 :脂质体法将bFGF -pcDNA3 真核表达载体转染体外培养的人脐静脉内皮细胞 ,经G4 18筛选阳性克隆。通过免疫细胞化学法检测bFGF的表达部位及Ⅷ因子相关抗原的表达。应用化学发光Westernblotting法检测bFGF在转染细胞与未转染细胞中的表达。绘制细胞的生长曲线并计算倍增时间 ,采用MTT法对bFGF的生物活性进行估计。结果 :bFGF -pcDNA3 转染人脐静脉内皮细胞后 ,细胞呈梭形者增多。免疫细胞化学证实转染前后细胞均为血管内皮来源细胞 ,转染与未转染细胞均在胞浆内表达bFGF。Westernblotting证实细胞转染前后均表达 17kDbFGF ,但转染后表达量增高 ,细胞生长曲线上移 ,倍增时间缩短。MTT法证实转染细胞产生的bFGF其生物学活性约相当于持续添加外源性bFGF 5 71 4ng/L。结论 :转染bFGFcDNA的人脐静脉内皮细胞能在体外增殖 ,并具有表达与分泌活性bFGF的功能。bFGF -pcDNA3 可引起内源性bFGF表达增高 ,对血管内皮细胞产生相应的生物学活性。

关键词：成纤维细胞生长因子碱性脐静脉内皮细胞

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FK506在同种异体兔角膜缘移植中的应用

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第2期23卷 74-78页

作者：周清陈剑徐锦堂赵松滨王彦平暨南大学医学院第一附属医院眼科广东广州510632 暨南大学医学院眼科教研室广东广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的 :研究FK5 0 6对同种异体兔角膜缘移植术后免疫排斥反应的抑制效应。方法 :建立 4 8只新西兰白兔角膜缘干细胞缺陷症动物模型 ,随机分成FK5 0 6治疗组、环孢霉素A治疗组和非治疗组 ,同种异体角膜缘移植术后分别给予质量分数为 0 5... 详细信息

目的 :研究FK5 0 6对同种异体兔角膜缘移植术后免疫排斥反应的抑制效应。方法 :建立 4 8只新西兰白兔角膜缘干细胞缺陷症动物模型 ,随机分成FK5 0 6治疗组、环孢霉素A治疗组和非治疗组 ,同种异体角膜缘移植术后分别给予质量分数为 0 5 %FK5 0 6滴眼液、1%环孢霉素A滴眼液和生理盐水点眼 ,用药 4周。术后持续观察 10周 ,以角膜缘植片水肿、混浊程度、排斥反应发生时间、角膜新生血管和假性胬肉作为眼表评估指标。结果 :观察期内 ,FK5 0 6组上皮排斥反应发生率、移植排斥指数均低于环孢霉素A组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;而两组在新生血管和假性胬肉指数方面 ,无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :同种异体角膜缘移植术后早期应用FK5 0 6眼液点眼可以抑制排斥反应发生。

关键词：同种异体角膜缘移植兔他罗利姆 FK506

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大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的分布

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第2期23卷 15-18页

作者：沈伟哉余菁郭国庆邢旭光暨南大学医学院解剖学教研室广东广州510632

目的 :观察大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的分布。方法 :ABC免疫细胞化学法显示大鼠端脑nNOS阳性神经元。结果 :nNOS阳性神经元呈棕褐色 ,胞体的形态多样化 ,呈梭形、三角形、圆形等多种形状 ,突起有一个或多个 ;... 详细信息

目的 :观察大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的分布。方法 :ABC免疫细胞化学法显示大鼠端脑nNOS阳性神经元。结果 :nNOS阳性神经元呈棕褐色 ,胞体的形态多样化 ,呈梭形、三角形、圆形等多种形状 ,突起有一个或多个 ;阳性纤维呈棕色串珠状 ,个别脑区阳性纤维相互交织成网。端脑nNOS免疫阳性神经元主要分布于嗅结节 (包括海马回 )、梨状区 (包括梨状皮质和梨状核 )、斜角带、隔区、杏仁复合体、海马结构、尾壳核和苍白球 ,以及大脑皮质等各个部位 ,其中以大脑皮质、梨状区和斜角带、尾壳核等部位最为丰富。结论 :大鼠端脑内分布有丰富的nNOS阳性神经元 ,它们可能通过调节神经递质的分泌 ,参与脑的高级整合功能。

关键词：一氧化氮神经元经一氧化氮合酶端脑大鼠

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山茱萸总甙滴眼液眼内药代动力学及药效学的实验研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第4期23卷 5-10页

作者：孟晶李辰陈建苏赵松滨狄静芳杨皓庄张穗梅暨南大学医学院第一附属医院眼科广东广州510630 暨南大学组织移植与免疫研究中心暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的 :研制出山茱萸总甙 (COG)滴眼液 ,对该滴眼液的药代动力学进行研究 ,并观察其局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :用高效液相色谱法对该滴眼液的药代动力学参数进行研究。建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,随机分为 4组 :A... 详细信息

目的 :研制出山茱萸总甙 (COG)滴眼液 ,对该滴眼液的药代动力学进行研究 ,并观察其局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :用高效液相色谱法对该滴眼液的药代动力学参数进行研究。建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,随机分为 4组 :A组为空白对照组 ,B、C、D组分别为使用质量分数 0 5 %、1%和 2 %COG滴眼液组。用裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜排斥反应发生时间。结果 :COG滴眼液在新西兰白兔眼内为一室模型 ,主要药代动力学参数为 :A =4 316 μg/mL ,Ke=2 0 5 6h- 1,Ka=2 5 79h- 1,LagTime =0 198h ,t1/ 2 ,Ka=0 0 2 3h ,t1/ 2 ,Ke=0 2 5 7h ,Tmax=0 986h ,ρmax=1 2 94 μg/mL ,AUC =1 6 0 1μg·h/mL ,其拟合的动力学方程为 ρ(t) =10 6 0 5×Dose×(e- 2 0 56× (t- 0 198) -e- 2 579× (t- 0 198) )。术后各组发生角膜移植排斥时间 ,A组与B、C、D组、B组与C、D组、C组与D组间两两比较均有显著性差异 (P <0 0 1)。其中作用最强的为C组。结论 :COG滴眼液能有效地防治角膜移植免疫排斥反应。COG滴眼液眼内有效峰浓度出现在点药后 0 986h 。

关键词：实验研究山茱萸总甙滴眼液药代动力学角膜移植免疫排斥

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碱性成纤维细胞生长因子在乳腺良恶性病变细胞中的分布特征及其微血管密度的关系

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第3期23卷 116-120页

作者：叶玉清谢作煊等暨南大学医学院病理学教研室，广东广州510632

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在乳腺癌细胞中的表达特征 ,寻找有助于诊断乳腺癌的生物学标记 .方法 :收集乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌等的手术切除标本各 2 2例 ,常规石蜡包埋切片 (4μm) ,分别做HE染色和用ABC法进行bF... 详细信息

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在乳腺癌细胞中的表达特征 ,寻找有助于诊断乳腺癌的生物学标记 .方法 :收集乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌等的手术切除标本各 2 2例 ,常规石蜡包埋切片 (4μm) ,分别做HE染色和用ABC法进行bFGF(1∶2 0 0 )、血管标记抗体CD34(1∶10 0 )免疫组织化学染色 ,参考Weidner和Maeda方法进行微血管密度 (MVD)测定 .结果 :在乳腺腺病和乳腺纤维腺瘤中的肌上皮细胞、导管上皮细胞、血管内皮细胞、血管壁平滑肌细胞和纤维母细胞等均表达bFGF ,其阳性产物主要位于胞浆 ,肌上皮细胞和导管上皮细胞的阳性产物部分见于胞核 ,但乳腺癌细胞的阳性产物主要位于胞膜 ,少数位于胞浆 ;胞核阴性 ,与良性增生性病变形成鲜明的对照 .2 2例乳腺癌bFGF膜阳性者 17例 (占 77 3% ) ,其MVD =90 5 6± 2 3 6 2 .肿瘤直径 4cm(10 /2 2例 )时 ,MVD增高达 93 19± 2 0 75 .乳腺腺病MVD =4 2 0 5± 12 2 6 ,乳腺纤维腺瘤MVD =4 3 14± 18 2 1,与乳腺癌相比有显著差异 (P <0 0 1) .结论 :1)bFGF免疫染色阳性产物在乳腺癌细胞中主要分布在胞膜 ,在良性增生性病变细胞中主要位于胞浆和胞核 .乳腺癌的MVD明显高于良性增生性病变 .2 )质量好的免疫染色、bFGF反应产物的分布特征。

关键词：乳腺良恶性病变分布特征乳腺癌碱性成纤维细胞生长因子微血管密度肿瘤细胞生物学标记

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果糖定性及定量试验对无精子症患者的评价

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中国优生与遗传杂志 2002年第3期10卷 108-108,115页

作者：李菁朱伟杰梁蔚波卓育敏暨南大学医学院病理生理教研室暨南大学生殖免疫研究中心暨南大学医学院附一院泌尿外科广州510632

目的　探讨无精子症患者不同病因类型的精浆果糖水平。方法　果糖定性试验采用间苯二酚法 ,定量试验应用吲哚法。结果　先天性双侧输精管缺如患者组 (n =2 7)的果糖含量阴性 ,唯支持细胞综合征患者组 (n =2 )和生精阻滞患者组 (n =6 )... 详细信息

目的　探讨无精子症患者不同病因类型的精浆果糖水平。方法　果糖定性试验采用间苯二酚法 ,定量试验应用吲哚法。结果　先天性双侧输精管缺如患者组 (n =2 7)的果糖含量阴性 ,唯支持细胞综合征患者组 (n =2 )和生精阻滞患者组 (n =6 )的果糖含量在正常值范围 ,获得性精道梗阻患者组 (n =5 )的果糖水平有较大差别 ,其中 2例的果糖偏低。结论　果糖测定有助于诊断输精管缺如引起的无精子症或其它病因所致没有精子 ,果糖定性试验简便实用。

关键词：定量试验评价无精子症果糖

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