检索结果-内蒙古大学图书馆

第一军医大学学报 2002年第2期22卷 171-173页

作者：龚小卫秦清和王静珍姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515

目的构建在哺乳动物细胞中表达的p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)红色荧光蛋白(RFP)融合表达载体.方法将克隆在pcDNA3上的FLAG标记的p38 MAPK亚克隆到红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1上,随后转染HeLa细胞.在荧光显微镜下观察结果.结果重组质粒... 详细信息

目的构建在哺乳动物细胞中表达的p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)红色荧光蛋白(RFP)融合表达载体.方法将克隆在pcDNA3上的FLAG标记的p38 MAPK亚克隆到红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1上,随后转染HeLa细胞.在荧光显微镜下观察结果.结果重组质粒经酶切、PCR和测序证明正确无误,并在HeLa细胞中得到高量表达.融合蛋白发出的红色荧光表明p38 MAPK弥散分布于细胞质中,细胞核中也有一定的分布.结论成功构建了p38 MAPK红色荧光蛋白融合载体,该载体能在哺乳动物细胞中进行表达,为研究p38MAPK的细胞内定位提供了一个重要的工具.

关键词：丝裂原活化蛋白激酶红色荧光蛋白载体构建基因表达

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应用细菌同源重组法快速构建和制备重组腺病毒

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中国病理生理杂志 2002年第11期18卷 1451-1454页

作者：李红乐秦清和王静珍邓鹏李树浓姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515 中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080 第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515 中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080

目的:利用大肠杆菌细菌同源重组构建重组腺病毒载体并在293细胞制备高滴度重组病毒.方法:自细胞周期相关激酶真核表达载体pCR3.1-CCRK中酶切出CCRK基因,亚克隆至带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形... 详细信息

目的:利用大肠杆菌细菌同源重组构建重组腺病毒载体并在293细胞制备高滴度重组病毒.方法:自细胞周期相关激酶真核表达载体pCR3.1-CCRK中酶切出CCRK基因,亚克隆至带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移质粒pAdTrack-CMV-CCRK, 采用电穿孔或化学转化法在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd-CCRK.以pAd-CCRK为模板,经DNA测序正确后,用PacI酶切线性化pAd-CCRK,转染293细胞,包装成重组病毒颗粒,荧光显微镜观察转染细胞EGFP的表达,采用PCR的方法对重组腺病毒进行鉴定.将重组病毒上清感染RAW细胞,荧光显微镜下观察感染细胞重组病毒的表达.结果:成功地构建了携带CCRK基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒,重组病毒能在体外高效表达.结论:应用细菌内同源重组能够快速构建腺病毒载体,可高效制备均一的高滴度重组病毒,为CCRK基因功能的研究奠定了基础.

关键词：腺病毒同源重组荧光蛋白

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L-精氨酸对应激性大鼠血压的影响

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中国临床药理学与治疗学 2002年第6期7卷 529-531页

作者：尹艳茹柏林第一军医大学分校生理学教研室广州510315

目的 :研究L 精氨酸 (L ARG)对应激性大鼠血压 (BP)的影响。方法 :给SD大鼠的饮水中添加L ARG ,并给予间断性足底电刺激 15d ,隔日监测尾动脉BP 1次 ,观察其尾动脉BP的变化情况和血浆一氧化氮 (NO)浓度变化。并与单纯应激组和正常对照... 详细信息

目的 :研究L 精氨酸 (L ARG)对应激性大鼠血压 (BP)的影响。方法 :给SD大鼠的饮水中添加L ARG ,并给予间断性足底电刺激 15d ,隔日监测尾动脉BP 1次 ,观察其尾动脉BP的变化情况和血浆一氧化氮 (NO)浓度变化。并与单纯应激组和正常对照组比较。结果 :单纯应激组在d 9、d 11、d 13、d15 ,BP升高 ,与正常对照组相比 ,差异有显著的统计学意义 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;血中NO的浓度低于正常对照组 (P <0 .0 5 )。L ARG +应激组隔日测得BP与对照组相比 ,其差异无统计学意义 ,d 15BP低于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,BP呈下降趋势 ,NO明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :L

关键词： L-精氨酸应激血压

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大鼠面神经后核内侧区传入 /传出纤维投射(英文)

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中国神经科学杂志 2002年第1期18卷 396-399页

作者：王宁黔吴中海第一军医大学生理学教研室广东广州510515

实验在 2 0只成年SD大鼠上进行。面神经后核内侧区 (mNRF)内微量注射辣根过氧化物酶 (HRP ,0 .5～ 1.0 μl,30 % ,13例。对照组 2例 ) /麦芽凝集素辣根过氧化物酶 (WGA HRP ,0 .0 2～ 0 .0 6 μl,5 % ,5例 ) ,逆行 /顺行追踪mNRF的传入... 详细信息

实验在 2 0只成年SD大鼠上进行。面神经后核内侧区 (mNRF)内微量注射辣根过氧化物酶 (HRP ,0 .5～ 1.0 μl,30 % ,13例。对照组 2例 ) /麦芽凝集素辣根过氧化物酶 (WGA HRP ,0 .0 2～ 0 .0 6 μl,5 % ,5例 ) ,逆行 /顺行追踪mNRF的传入和传出纤维联系。发现 :HRP标记神经元胞体主要位于延髓孤束核 (NTS)、疑核 (AMB)、巨细胞网状核 (Gi)、中缝核群 (raphenuclei)、脑桥臂旁核 (PB)、K F核、脊髓中间带 (intermediatezone)、延髓及脑桥网状结构 ;WGA HRP标记神经纤维主要存在于孤束核、疑核、脊髓中间带、延髓网状结构。结果提示 :mNRF神经元与脑干后部一些核团之间具有比较广泛的纤维联系。

关键词：面神经后核内侧区基本呼吸节律辣根过氧化物酶麦芽凝集素辣根过氧化物酶大鼠传入纤维/传出纤维投射

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肺癌组织中结核杆菌的间接原位巢式PCR法检测

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第一军医大学学报 2002年第11期22卷 992-993页

作者：宋兰英闫文生赵彤第一军医大学病理教研室广东广州510515 中山大学肿瘤防治中心广东广州510060

目的明确结核杆菌在肺癌组织中的细胞定位。方法采用敏感特异的间接原位巢式PCR对15个经液相巢式PCR检测示TB-DNA阳性的肺癌组织蜡块进行再次检测。结果结核杆菌典型的杆菌型主要位于癌组织周围间质或部分吞噬细胞胞质内;变异体L型则呈... 详细信息

目的明确结核杆菌在肺癌组织中的细胞定位。方法采用敏感特异的间接原位巢式PCR对15个经液相巢式PCR检测示TB-DNA阳性的肺癌组织蜡块进行再次检测。结果结核杆菌典型的杆菌型主要位于癌组织周围间质或部分吞噬细胞胞质内;变异体L型则呈现颗粒状,主要位于癌组织周围增生的肺泡上皮细胞胞质、炎症细胞胞质和吞噬细胞胞质,且呈片状或灶状分布。结论结核杆菌感染可能在肺癌的发病过程中起重要作用。

关键词：肺癌结核杆菌免疫学间接原位巢式聚合酶链反应细胞定位

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从全身炎症反应综合征到脓毒性休克

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中国危重病急救医学 2002年第8期14卷 500-503页

作者：郭爱华姜勇第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室广东广州510515

脓毒症(sepsis)是由感染所致的临床综合征,表现为发热或低热、白细胞增多或减少、心动过速、呼吸急促等[1].由严重的细菌感染所引起的脓毒症迄今仍然是世界范围内非心脏病重症监护患者的首位死亡原因[2].据统计,在美国,每年有逾40万例... 详细信息

脓毒症(sepsis)是由感染所致的临床综合征,表现为发热或低热、白细胞增多或减少、心动过速、呼吸急促等[1].由严重的细菌感染所引起的脓毒症迄今仍然是世界范围内非心脏病重症监护患者的首位死亡原因[2].据统计,在美国,每年有逾40万例脓毒症患者,病死率可达35%以上[3].预计未来脓毒症的发生将有进一步增加的趋势.下面试就脓毒症发病机制和治疗方面取得的一些新理论和新进展进行综述.

关键词：全身炎症反应脓毒症患者重症监护患者心动过速细菌感染死亡原因非心脏病发病机制病死率白细胞治疗统计面试美国临床理论呼吸发热低热

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丝裂原活化蛋白激酶通路对脂多糖诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α基因表达的协同调节作用

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中华医学杂志 2002年第20期82卷 1410-1414页

作者：姜勇刘爱华秦清和殷志敏 510515 广州第一军医大学病理生理教研室全军休克微循环重点实验室南方医院呼吸内科南京师范大学生命科学学院

目的探讨脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达过程中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的协同调节作用及其分子机制.方法用蛋白激酶活性测定分析LPS刺激RAW264.7细胞引起的激酶活性变化;用报告基因技术和反转录聚合... 详细信息

目的探讨脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达过程中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的协同调节作用及其分子机制.方法用蛋白激酶活性测定分析LPS刺激RAW264.7细胞引起的激酶活性变化;用报告基因技术和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法研究LPS诱导的TNF-α基因转录的分子机制.结果 LPS刺激RAW264.7细胞可引起细胞外信号调节激酶1(ERK1)、c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)和p38 MAPK的一过性激活;用MAPK上游激酶的活性突变体分别转染RAW264.7均可不同程度地诱导TNF-α启动子转录活性;而且,这些MAPK通路激活诱导的TNF-α启动子转录活性表现出明显的协同效应;三种MAPK的无活性突变体均显示出对LPS刺激引起的TNF-α启动子转录激活的抑制效应;RT-PCR的结果证实,ERK、JNK和p38 MAPK的特异性抑制剂对TNF-α mRNA表达具有不同程度的抑制作用.结论 LPS刺激引起的TNF-α启动子转录活性增加,可能涉及了ERK、p38和JNK三条通路的激活;这些通路通过协同效应共同发挥对TNF-α基因表达的调控.

关键词：蛋白激酶类脂多糖类肿瘤坏死因子基因表达调控

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诱导型一氧化氮合酶介导β淀粉样蛋白在体神经毒性

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中国应用生理学杂志 2002年第4期18卷 329-332页

作者：刘辉陈俊抛张万琴大连医科大学生理教研室辽宁大连116027 第一军医大学珠江医院神经内科广东广州510282

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)及一氧化氮 (NO)在 β淀粉样蛋白 (Aβ)神经毒性和Alzheimer病 (AD)发病机制中的介导作用。方法 :应用行为学及病理学方法 ,观察海马内注射Aβ1-40 对大鼠Y迷宫学习记忆的影响及对局部神经元的损伤作用 ;... 详细信息

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)及一氧化氮 (NO)在 β淀粉样蛋白 (Aβ)神经毒性和Alzheimer病 (AD)发病机制中的介导作用。方法 :应用行为学及病理学方法 ,观察海马内注射Aβ1-40 对大鼠Y迷宫学习记忆的影响及对局部神经元的损伤作用 ;观察特异性诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂胍氨酸 (AG)及特异性神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)抑制剂 7 硝基吲哚 (7 NI)腹腔注射对海马内注射Aβ1-40 神经毒性的干预。结果 :海马注射Aβ1-40 后 ,大鼠Y迷宫学习记忆能力及海马局部神经元明显受损 ,特异性iNOS抑制剂AG能够阻止Aβ1-40 海马注射对大鼠学习记忆和局部神经元的损伤作用 ,而特异性nNOS抑制剂 7 NI无此干预效应。结论 :iNOS/NO参与了在体条件下对Aβ神经毒性的介导。

关键词：诱导型一氧化氮合酶介导 β淀粉样蛋白体神经毒性 Alzheimer病

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作思路的引导者——病理生理学教学改革的思考

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2002年第1期4卷 6-7页

作者：周翔朱浩金春华第一军医大学病理生理学教研室

本文通过分析病理生理学课程的特点,着重探讨了该门课程课堂教学应以引导思路作为重点,以建立严谨、灵活的思维模式为目标,探索深化教改的途径.

关键词：病理生理学课堂教学教学改革教学方法

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改良EC液低温灌注犬肺离体肺组织形态学变化的研究

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第一军医大学学报 2002年第10期22卷 898-901页

作者：孟辉高玲申洪陈钢蔡瑞君穆峰赵菲第一军医大学南方医院胸心外科广东广州510515 解放军第4医院呼吸内科青海西宁810014 第一军医大学病理学教研室广东广州510515

目的观察犬肺移植中供体离体保存后肺组织随时间延长而产生的结构变化。方法4℃改进型EC液灌注6只健康成年杂种犬肺,灌注结束后离体保存30、60、120、180、240 min。取材制作组织标本,观察不同时间点肺组织结构变化,以灌注前作为对照组... 详细信息

目的观察犬肺移植中供体离体保存后肺组织随时间延长而产生的结构变化。方法4℃改进型EC液灌注6只健康成年杂种犬肺,灌注结束后离体保存30、60、120、180、240 min。取材制作组织标本,观察不同时间点肺组织结构变化,以灌注前作为对照组。结果0 min时肺组织结构清晰完整,肺泡上皮细胞线粒体轻微肿胀;30 min时肺泡壁、血管周围组织轻微水肿;60 min时肺泡壁结构轻度破损,肺泡上皮细胞肿胀,线粒体肿胀较明显;120 min时部分肺泡壁断裂,肺泡腔融合;180 min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成少量肺大泡;240 min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成多个肺大泡,肺泡上皮细胞泡浆空泡变,Ⅱ型肺泡细胞板层小体模糊不清, 空泡变明显,微绒毛已消失。结论改进型EC液离体保存4 h内对离体保存肺组织细胞无明显损伤,4 h后肺损伤较为严重。

关键词：低温肺病理学肺移植器官保存心麻痹液

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