目的 探讨以生物合成途径结合高分辨液质联用技术,为近亲缘稀少植物星毛冠盖藤自建成分数据库,实现其化学成分的快速发现。方法 以星毛冠盖藤为研究对象,根据京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)...
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目的 探讨以生物合成途径结合高分辨液质联用技术,为近亲缘稀少植物星毛冠盖藤自建成分数据库,实现其化学成分的快速发现。方法 以星毛冠盖藤为研究对象,根据京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)生物合成基因挖掘、BioNavi-NP生物逆合成预测及同属植物化学成分研究等手段获得星毛冠盖藤中潜在的化学成分,并自建成分数据库。将自建成分数据库与高分辨质谱数据进行比对,统计整理满足质量误差小于6×10^(-6)的化合物,对其进行裂解规律分析及二级碎片离子比对。对鉴定得到的未知化合物采用reaxys网站进行检索。结果 星毛冠盖藤转录组Unigenes次生代谢KEGG通路主要包括苯丙素生物合成、氨酰-tRNA生物合成、N-聚糖生物合成及萜类骨架生物合成等通路;从瑶药星毛冠盖藤中快速鉴定出76个成分,其中包括1个香豆素类新化合物。结论 以生物合成关联性结合LC-MS技术,能快速高效、低成本的对瑶药星毛冠盖藤中潜在的化学成分进行分析鉴定,一定程度上解决近亲缘稀少植物药的化学成分库建库难的问题,为植物药的化学成分快速发现提供一种新思路及方法。
为了探讨柠檬酚对人肝癌HepG_2细胞增殖的影响,本文利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、细胞生长曲线以及细胞克隆形成实验检测了柠檬酚对细胞生长和克隆形成的影响,并应用HE、吖啶橙染色、流式细胞术以及激光扫描共聚焦显微镜分别观察和检测了不同浓度柠檬酚作用后细胞形态、细胞周期和细胞骨架蛋白F-actin的变化。结果显示,柠檬酚能明显抑制人HepG_2细胞生长,且呈浓度依赖性,其IC50值为79.14μmol/L,柠檬酚给药组细胞克隆率明显明显低于空白对照组;不同浓度的柠檬酚在作用HepG_2细胞24h后,细胞均出现了明显的皱缩、胞浆空泡化和细胞核固缩的形态学改变;同时,70μmol/L和80μmol/L的柠檬酚处理组G2/M期细胞比例显著高于对照组(22.72±1.07,28.68±1.36 vs 16.34±0.66,P<0.01);而共聚焦显微镜观察发现,柠檬酚能引起HepG_2细胞骨架蛋白F-actin的解聚和断裂。综上,推测柠檬酚可能是通过破坏细胞的Actin骨架,阻止细胞有丝分裂,细胞周期阻滞在G2/M期,从而抑制人肝癌HepG_2细胞的增殖。
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