检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2021年第4期48卷 1423-1430页

作者：王盛万丽军谢芝勋谢丽基罗思思范晴张艳芳曾婷婷黄娇玲张民秀谢志勤邓显文广西大学动物科学技术学院南宁 530004 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁 530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁 530001

为了解干扰素(interferon,IFN)和干扰素刺激基因在禽呼肠孤病毒(ARV)感染DF1细胞后的表达情况,试验将ARV病毒感染DF1细胞,观察细胞病变,收集感染后0、6、12、24、36、48、72、96 h的细胞样品,抽提反转录成cDNA,通过实时荧光定量PCR技术... 详细信息

为了解干扰素(interferon,IFN)和干扰素刺激基因在禽呼肠孤病毒(ARV)感染DF1细胞后的表达情况,试验将ARV病毒感染DF1细胞,观察细胞病变,收集感染后0、6、12、24、36、48、72、96 h的细胞样品,抽提反转录成cDNA,通过实时荧光定量PCR技术检测干扰素IFN-α和IFN-β及9种禽源常见干扰素刺激基因在感染后不同时间点在转录水平表达量的动态变化规律.结果显示,在ARV感染DF1细胞后,DF1细胞出现典型的细胞病变,感染后12 h病毒开始快速增殖,在36～96 h维持在较高的水平;IFN-α和IFN-β在转录水平的表达量在感染后均表现为显著下调(P<0.05;P<0.01);IFI6、OAS、IFIT5、ISG12在转录水平表达量变化规律相似,均呈现显著上调表达(P<0.05;P<0.01),在感染后96 h达到峰值;其中IFIT5的上调幅度最大,感染后96 h的表达量是0 h的19.62倍(P<0.01);而Mx、IFITM3、PKR、Viperin、ZAP的表达量变化规律相似,均表现为显著下调表达(P<0.05;P<0.01),其中Mx、IFITM3、Viperin的下调幅度较大,PKR和ZAP下调幅度很小.说明在ARV感染DF1细胞后,干扰素及多种干扰素刺激基因在转录水平呈现规律性变化,与病毒在DF1细胞中复制存在一定的联系.结果表明,ARV感染后可以诱导多种干扰素刺激基因的表达,这些干扰素刺激基因在抵御ARV病毒的入侵,抑制ARV的复制、释放及病毒的清除中发挥着重要作用.本研究为今后深入研究ARV的致病机理和宿主的抗病毒免疫应答提供了参考.

关键词：禽呼肠孤病毒(ARV) DF1细胞干扰素干扰素刺激基因转录水平

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禽源NME/NM23核苷二磷酸激酶2(NME2)基因的克隆及表达鉴定

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畜牧与兽医 2021年第4期53卷 113-116页

作者：谢丽基谢芝勋王盛黄娇玲邓显文谢志勤罗思思曾婷婷张艳芳张民秀范晴广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

参照GenBank中禽源核苷二磷酸激酶2(NME2)基因序列,设计了NME2基因的特异性引物.采用RT-PCR扩增NME2基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-NME2.将构建好的重组质粒pEFlα-Myc-NME2转染DF1细胞后,采用... 详细信息

参照GenBank中禽源核苷二磷酸激酶2(NME2)基因序列,设计了NME2基因的特异性引物.采用RT-PCR扩增NME2基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-NME2.将构建好的重组质粒pEFlα-Myc-NME2转染DF1细胞后,采用间接免疫荧光和Western blot技术对目的蛋白进行验证.结果表明,Myc-NME2融合蛋白在DF1细胞内得到了正确表达.本研究为后续研究禽源NME2基因的功能奠定了基础.

关键词： NME/NM23核苷二磷酸激酶2 克隆表达

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H10亚型和N8亚型禽流感病毒双重RT-PCR检测方法的建立

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畜牧与兽医 2017年第1期49卷 91-93页

作者：罗思思谢芝勋谢志勤黄莉谢丽基邓显文范晴黄娇玲张艳芳王盛曾婷婷广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

根据Gen Bank中H10亚型和N8亚型禽流感病毒(AIV)的HA和NA基因保守序列,分别设计筛选出2对特异性引物,用于H10亚型和N8亚型AIV的检测,优化引物之间的浓度,建立了同时检测H10亚型和N8亚型AIV的双重RT-PCR检测方法。该方法对H10N8亚型AIV... 详细信息

根据Gen Bank中H10亚型和N8亚型禽流感病毒(AIV)的HA和NA基因保守序列,分别设计筛选出2对特异性引物,用于H10亚型和N8亚型AIV的检测,优化引物之间的浓度,建立了同时检测H10亚型和N8亚型AIV的双重RT-PCR检测方法。该方法对H10N8亚型AIV可特异性扩增出267 bp(H10亚型)和464 bp(N8亚型)目的条带,对H10Ny(y≠8)亚型AIV仅扩增出267 bp目的条带,对HXN8(x≠10)亚型AIV仅扩增出464 bp目的条带,对其他亚型AIV和常见禽病病原体均未扩增出任何条带。该方法对H10亚型和N8亚型AIV检测下限均为104拷贝数/μL。本研究建立的H10亚型和N8亚型AIV双重RT-PCR特异性强、灵敏度高,可同时快速检测H10亚型和N8亚型AIV,为其感染的快速鉴别诊断提供一种简便、快速和有效的方法。

关键词：禽流感病毒 H10亚型 N8亚型双重RT-PCR

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混合益生菌发酵桃金娘的工艺优化及其抗氧化性研究

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饲料研究 2020年第10期43卷 60-63页

作者：银慧慧孟菲赵武姜源明覃振华刘伟广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

试验以植物乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌4种混合益生菌发酵桃金娘,采用单因素试验和正交试验优化桃金娘的发酵工艺。在桃金娘发酵过程中控制含水量、接种量、发酵时间,采用比色法,测定其发酵后总黄酮的含量... 详细信息

试验以植物乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌4种混合益生菌发酵桃金娘,采用单因素试验和正交试验优化桃金娘的发酵工艺。在桃金娘发酵过程中控制含水量、接种量、发酵时间,采用比色法,测定其发酵后总黄酮的含量。结果表明,最佳发酵工艺为含水量40%、接种量5%、发酵时间48 h。在此条件下发酵桃金娘水浴提取得到总黄酮含量为417.26 mg/L,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率较低而对2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除率较高。

关键词：桃金娘混合益生菌黄酮发酵抗氧化性

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竹鼠源致病性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定

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中国兽医杂志 2017年第7期53卷 35-37,I0004页

作者：唐海波陈凤莲饶桂波姜佳佳孟菲白安斌杨磊吴健敏广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

为确定南宁隆安县某竹鼠养殖场发生竹鼠死亡的原因,从发病的竹鼠肝、肺及肾脏中分离得到2株可疑细菌,经形态观察及16S rRNA序列分析,鉴定两株细菌均为雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)。经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。... 详细信息

为确定南宁隆安县某竹鼠养殖场发生竹鼠死亡的原因,从发病的竹鼠肝、肺及肾脏中分离得到2株可疑细菌,经形态观察及16S rRNA序列分析,鉴定两株细菌均为雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)。经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。测序结果显示,该菌16S rRNA与雷氏普罗威登斯菌(AB680422)同源性高达99.9%。药敏试验显示,对头孢吡肟、头孢唑林、头孢氨苄等药物高度敏感;对青霉素、氯霉素、氟苯尼考、复方新诺明等药物有抗性。这些研究结果表明,雷氏普罗威登斯菌是隆安县某竹鼠养殖场竹鼠致死的病原菌。本文在国内外首次报道了雷氏普罗威登斯菌对竹鼠有较强的致病性。

关键词：竹鼠雷氏普罗威登斯菌分离鉴定

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1例红颊竹鼠化脓性肺炎病原菌的分离鉴定

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畜牧与兽医 2017年第8期49卷 107-110页

作者：唐海波陈凤莲白安斌杨磊刘金凤霍孔林陆晨阳吴健敏广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

为确定南宁金陵镇某竹鼠养殖场发生竹鼠化脓性肺炎的原因,从发病竹鼠肺中分离得到可疑细菌,经形态观察、生理生化特性测定及16S rRNA序列分析,鉴定该分离菌为大肠杆菌,经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。该菌16S rRNA与大肠杆菌(DQ... 详细信息

为确定南宁金陵镇某竹鼠养殖场发生竹鼠化脓性肺炎的原因,从发病竹鼠肺中分离得到可疑细菌,经形态观察、生理生化特性测定及16S rRNA序列分析,鉴定该分离菌为大肠杆菌,经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。该菌16S rRNA与大肠杆菌(DQ337503,FJ418574,KR189581)同源性高达100%。药敏试验显示对头孢克肟、卡那霉素、大观霉素、奈替米星、氟苯尼考和米诺环素等药物高度敏感,对氨苄西林、阿莫西林、亚胺培南、头孢唑啉、头孢氨苄、四环素、红霉素和克拉霉素等药物有抗性。结果表明:大肠杆菌是南宁金陵镇某竹鼠养殖竹鼠致死的病原菌。该菌的分离鉴定为其感染引起的传染病防治提供了试验依据。

关键词：红颊竹鼠化脓性肺炎大肠杆菌分离鉴定

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鸡传染性贫血病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立

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中国兽医杂志 2021年第4期57卷 21-24页

作者：张艳芳谢芝勋邓显文谢志勤张民秀罗思思谢丽基范晴曾婷婷黄娇玲王盛刘加波广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

为研究一种可同时检测鸡传染性贫血病毒(CIAV)和鸡细小病毒(ChPV)的双重PCR方法,本试验根据GenBank中CIAV的VP基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为219 bp和384 bp的特异性引物,通过对反应条件的优化,特异性和... 详细信息

为研究一种可同时检测鸡传染性贫血病毒(CIAV)和鸡细小病毒(ChPV)的双重PCR方法,本试验根据GenBank中CIAV的VP基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为219 bp和384 bp的特异性引物,通过对反应条件的优化,特异性和敏感性试验,建立和评价双重PCR检测方法。结果显示,该方法最佳引物比例为CIAV上下游引物各0.4μL(20μmol/L),ChPV上下游引物各0.6μL(20μmol/L);最佳退火温度为56.1℃;灵敏度可达到66 fg(CIAV)和78 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性。结果表明,本试验所建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定等优点和优势,可用于同时快速鉴别诊断CIAV和ChPV的混合感染。

关键词：鸡传染性贫血病毒鸡细小病毒多重PCR

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应用正交试验优化猪细小病毒N株在IBRS-2细胞转瓶培养

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西南农业学报 2017年第2期30卷 470-473页

作者：卢冰霞何颖赵武梁家幸段群棚蒋冬福卢敬专闭炳芬周英宁秦毅斌李斌苏乾莲陈忠伟广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

利用正交试验对猪细小病毒(PPV)N株在IBRS-2细胞转瓶培养中的培养条件进行优化,为PPV N株弱毒疫苗的大量培养工艺提供参考。设细胞培养液pH值(7.0、7.2和7.4)、接毒时间(0、24和48 h)、接毒剂量(0.10%、1.00%和10.00%)、收毒时间(48、72... 详细信息

利用正交试验对猪细小病毒(PPV)N株在IBRS-2细胞转瓶培养中的培养条件进行优化,为PPV N株弱毒疫苗的大量培养工艺提供参考。设细胞培养液pH值(7.0、7.2和7.4)、接毒时间(0、24和48 h)、接毒剂量(0.10%、1.00%和10.00%)、收毒时间(48、72和96 h)等因子和水平。结果表明,PPV N株转瓶培养的最佳培养条件组合为细胞培养液pH值7.2,采用同步接毒,接毒剂量为0.10%,收毒时间为接毒后96 h。其中收毒时间是影响PPV N株毒价的最主要因素。

关键词：猪细小病毒转瓶培养优化正交试验

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饲料和不同生活时期对人工饲养大壁虎肠道菌群的影响

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野生动物学报 2022年第1期43卷 151-158页

作者：赵成坚全琛宇霍娟徐永莉姜建萍广西壮族自治区药用植物园南宁530023 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001

为了优化人工饲养大壁虎(Gekko gecko)的膳食结构及养殖程序,研究了蝗虫(Locusta migratoria manilensis)、黄粉虫(Tenebrio molitor)、土鳖虫(Eupolyphaga sinensis)及大麦虫(Zophobas morio)4种昆虫饲料对大壁虎生长速度的影响,并通过16S rDNA高通量测序技术比对了大壁虎胃肠道微生物菌群差异及冬眠期与捕食期的大壁虎胃肠道微生物菌群差异。结果表明:饲喂不同昆虫饲料对大壁虎的增重效果不同。单一昆虫饲料组中,蝗虫组对大壁虎的增重效果最佳。饲喂混合昆虫饲料对大壁虎的增重效果优于单一昆虫饲料组。对各组肠道菌群的分析结果显示,Bacteroides菌属为最主要的肠道优势菌群,与大壁虎生长存在一定的关联。冬眠期与捕食期大壁虎肠道菌群结构高度相似,差异最显著的菌群为放线菌门(Actinobacteria),表明冬眠期大壁虎患放线菌病的概率会明显增高,需注意防范。

关键词：大壁虎肠道菌群 16S rDNA 拟杆菌属

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血清4型禽腺病毒感染SPF鸡体内各组织中病毒的动态分布及排毒规律

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中国兽医学报 2021年第3期41卷 463-468页

作者：栾勇娇谢芝勋王盛罗思思张蕾谢丽基谢志勤邓显文张民秀张艳芳曾婷婷范晴广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

为探究血清4型禽腺病毒(FAdV-4)感染SPF鸡后体内各组织中病毒的动态分布及排毒规律,将FAdV-4人工感染3周龄SPF鸡,在感染后不同时间点采集11种组织器官,RT-PCR检测病毒的动态分布,同时定期检测感染鸡的呼吸道和泄殖腔的排毒情况.结果显示... 详细信息

为探究血清4型禽腺病毒(FAdV-4)感染SPF鸡后体内各组织中病毒的动态分布及排毒规律,将FAdV-4人工感染3周龄SPF鸡,在感染后不同时间点采集11种组织器官,RT-PCR检测病毒的动态分布,同时定期检测感染鸡的呼吸道和泄殖腔的排毒情况.结果显示,SPF鸡感染后1～21 d胸肌、肝脏、心脏、脾脏、肺脏、腺胃、胰腺、法氏囊、肾脏、胸腺和脑均能够连续检测到病毒,但不同组织器官中病毒载量存在差异,肝脏的病毒载量要高于其他组织器官,表明该病毒主要的靶器官是肝脏.感染后1～21 d呼吸道和泄殖腔能够连续检测到病毒,表明感染的SPF鸡可以通过呼吸道和泄殖腔排毒.感染后SPF鸡的组织器官病毒载量的变化规律和排毒规律具有一定的平行关系,都是先增后减,在感染后5～6 d达到最大值.本试验系统研究FAdV-4感染SPF鸡体内各组织病毒载量的分布以及排毒情况的动态变化规律,为今后深入研究FAdV-4对SPF鸡的致病性和致病机制奠定基础.

关键词： SPF鸡血清4型禽腺病毒病毒载量动态分布排毒规律

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