目的 研究肿瘤坏死因子α诱导相互作用蛋白3(TNIP3)对脓毒症小鼠心房颤动(简称房颤)的影响及其潜在的机制。方法 40只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:对照+9型腺相关病毒(AAV9)-绿色荧光蛋白(GFP)组(CTL+AAV9-GFP组)、对照+AAV9-TNIP3组(CTL+AAV9-TNIP3组)、脂多糖(LPS)+AAV9-GFP组(LPS+AAV9-GFP组)、脂多糖+AAV9-TNIP3组(LPS+AAV9-TNIP3组),每组10只小鼠。按分组于尾静脉注射携带TNIP3或仅空载GFP的AAV9,4周后按分组于腹腔注射LPS 10 mg/kg或等量生理盐水连续3天。以心脏超声检测左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)。以右房Burst刺激检测房颤诱发率。对心房肌组织切片行Masson染色进行心房肌纤维化检测。以免疫组化法检测TNIP3在心房肌的表达,免疫荧光法检测巨噬细胞标志物CD68在心房肌的表达,及Western-blot法检测TNIP3、Toll样受体4(TLR4)、P65总蛋白(T-P65)及其磷酸化蛋白(P-P65)的表达。结果 与CTL+AAV9-GFP组相比,CTL+AAV9-TNIP3组心房组织TNIP3增加显著(3.02±0.39 vs 0.46±0.04,P<0.05)。LPS+AAV9-GFP组与CTL+AAV9-GFP组比较,心房肌组织中TNIP3蛋白表达亦升高(1.44±0.09 vs 0.54±0.08,P<0.05),免疫组化TNIP3阳性细胞占比增加[(17.43±1.68)%vs (5.67±0.60)%,P<0.05]。LPS+AAV9-TNIP3组与LPS+AAV9-GFP组相比房颤诱发率低(10%vs 80%,P<0.05),LVEF和LVSF均增加(0.72±0.046 vs 0.40±0.02,0.37±0.015 vs 0.28±0.021,P<0.05);心房肌纤维化减轻,纤维化面积占比减小[(9.97±1.57)%vs (18.43±0.71)%,P<0.05]。LPS+AAV9-TNIP3组与LPS+AAV9-GFP组相比,炎症浸润明显减轻,CD68阳性细胞占比显著减小[(7.77±0.61)%vs (17.03±1.22)%,P<0.05];TLR4蛋白、P-P65蛋白以及P-P65/T-P65蛋白表达下调。结论 过表达TNIP3通过抑制脓毒症相关的心脏纤维化和炎症细胞浸润,降低房颤易感性,其机制与TLR4/NF-κB信号通路相关,TNIP3可能是防治脓毒症相关房颤的新靶点。
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