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中国分子心脏病学杂志 2008年第5期8卷 269-276页

作者：裴汉军宋光远王浩吴伟春刘峻豪吴永健中国医学科学院北京协和医学院心血管病研究所阜外心血管病医院冠心病诊治中心 100037 中国医学科学院北京协和医学院超声科 100037 中国医学科学院北京协和医学院中德实验室 100037

目的研究STZ诱导的血糖不加控制的糖尿病大鼠急性心肌梗死(AMI)后易发心力衰竭(HF)的机制。方法217只SD大鼠随机分组,糖尿病组经腹腔内注射链脲酶素(STZ,65 mg/ kg)诱导糖尿病,10周后所有AMI组结扎冠状动脉左前降支建立AMI模型。确定AM... 详细信息

目的研究STZ诱导的血糖不加控制的糖尿病大鼠急性心肌梗死(AMI)后易发心力衰竭(HF)的机制。方法217只SD大鼠随机分组,糖尿病组经腹腔内注射链脲酶素(STZ,65 mg/ kg)诱导糖尿病,10周后所有AMI组结扎冠状动脉左前降支建立AMI模型。确定AMI前和AMI后1天,7天,14天,28天,56天做为实验观察时间点,观察大鼠的生存率,心肌超微结构的变化,进行心脏超声检测、心肌纤维化测定及左心肥厚的评估。结果结扎左冠状动脉前降支后,糖尿病大鼠的死亡率、左心功能恶化及左室重构的速度均较非糖尿病大鼠显著。在早期阶段,糖尿病与非糖尿病大鼠心肌纤维化相似,而1月后却出现显著差别。结论糖尿病加速了STZ诱导的糖尿病大鼠AMI后心脏重构的进展。

关键词： STZ糖尿病急性心肌梗死左室重构左心功能

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血管紧张素Ⅱ对小鼠心脏特异新基因CARK转录活性的影响

血管紧张素Ⅱ对小鼠心脏特异新基因CARK转录活性的影响

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：王虎腾思勇宋晓东孙凯王晓健高硕张禅那惠汝太中国医学科学院北京协和医学院(清华大学医学部) 阜外心血管病医院中德实验室

心脏是胚胎发育过程中最重要的功能器官之一,许多研究已经证明心脏特异基冈对于心脏的发育、成熟以及功能的维持具有重要作用。CARK基因是我们研究组从心脏组织中克隆的高度特异表达的新基因,初步研究显示其功能与心肌肥厚过程密切相关... 详细信息

心脏是胚胎发育过程中最重要的功能器官之一,许多研究已经证明心脏特异基冈对于心脏的发育、成熟以及功能的维持具有重要作用。CARK基因是我们研究组从心脏组织中克隆的高度特异表达的新基因,初步研究显示其功能与心肌肥厚过程密切相关。本研究拟通过鉴定小鼠CARK基因的核心调控区并观察血管紧张素Ⅱ对CARK基因转录活性的影响来更好的理解心脏特异基因的表达调控机制。通过物种间同源比对获得小鼠CARK基因保守启动子区,删节实验构建不同长度启动子片段的双荧光素酶报告载体,转染心肌细胞后检测各启动子片段转录活性的大小,鉴定其核心启动子区。用1×10mol/L血管紧张素Ⅱ刺激共转染了荧光素酶报告载体及内参质粒的心肌细胞,同时设置对照组,观察血管紧张素Ⅱ对启动子活性的影响。删节实验和双荧光素酶报告实验确定CARK基因核心启动子区位于+79 bp至-151 bp区域（以转录起始位点为+1）且其转录活性仅存在于心肌细胞中。血管紧张素Ⅱ刺激后,启动子的转录活性显著增加。CARK基因的核心启动子区以及该区域内的转录因子结合位点对基因的转录活性有至关重要的作用。血管紧张素Ⅱ能够显著增加CARK基因转录活性。

关键词：心脏特异转录调控启动子血管紧张素Ⅱ

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心脏肌球蛋白结合蛋白C基因4229T＞C新突变致肥厚型心肌病

心脏肌球蛋白结合蛋白C基因4229T＞C新突变致肥厚型心肌病

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：孙凯王虎邹玉宝宋雷王继征宋晓东张禅那惠汝太中国医学科学院北京协和医学院(清华大学医学部) 阜外心血管病医院中德实验室

肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)以不对称性的左和/或右室肥厚为特点,室间隔最常受累,是一种以常染色体显性遗传为主要方式的遗传性心肌疾病。肥厚型心肌病从无症状的良性病程到严重的心力衰竭、猝死,其临床表现差异很大... 详细信息

肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)以不对称性的左和/或右室肥厚为特点,室间隔最常受累,是一种以常染色体显性遗传为主要方式的遗传性心肌疾病。肥厚型心肌病从无症状的良性病程到严重的心力衰竭、猝死,其临床表现差异很大,也是造成青年人猝死的重要原因。本研究通过寻找中国人肥厚型心肌病的致病基因突变位点,鉴定国人特有的热点突变并分析基因型与临床表型的相互关系。在100例肥厚型心肌病患者以及120例健康对照者中进行心脏型肌球蛋白结合蛋白C基因(MYBPC3)突变筛查,聚合酶链式反应(PCR)扩增基因功能区外显子片段并对PCR产物进行测序分析。在3例HCM患者中发现MYBPC3基因第6号外显子第4229位碱基由T转换为C,结果导致第236位的丝氨酸(Ser,S)转变为半胱氨酸(Cvs,C),正常对照组相同位置未发现异常。三例HCM患者心肌肥厚程度不重(左室平均厚度为15.7 mm),但两例患者有左室流出道梗阻,其中之一出现过晕厥。心电图均显示ST-T改变,皆无异常Q波。发病年龄变异大,最小发病年龄为20岁,最大为56岁。该突变在西方人中未见报道。我们首次在中国人肥厚型心肌病患者中发现MYBPC3基因S236C突变,该突变在中国人肥厚型心肌病患者中所占比例约为3%,是中国人HCM的热点突变之一。

关键词：心脏型肌球蛋白结合蛋白C 肥厚型心肌病突变

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氧化低密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞脂质蓄积、亲脂素与过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达及蛋白激酶Cα活性的影响

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1172-1176页

作者：王中群袁中华黄谙非曾德星赵琪杨永宗王佐唐雅玲新乡医学院病理学教研室新乡453003 南华大学心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室衡阳421001 深圳市南山区西丽医院病理科深圳518000 龙岩市第二医院心内科龙岩364000 南阳市第一人民医院外科南阳473010

目的:以THP-1巨噬细胞为研究对象,观察氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对细胞内脂质蓄积、亲脂素(adi-pophilin)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达以及蛋白激酶Cα(PKCα)活性的影响。方法:用0、10、20、40、80 mg/L oxLDL与THP-1巨... 详细信息

目的:以THP-1巨噬细胞为研究对象,观察氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对细胞内脂质蓄积、亲脂素(adi-pophilin)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达以及蛋白激酶Cα(PKCα)活性的影响。方法:用0、10、20、40、80 mg/L oxLDL与THP-1巨噬细胞共孵育24 h,油红O染色和高效液相色谱检测细胞内脂质蓄积情况;半定量RT-PCR和Western blot检测adipophilin、PPARγ和PKCα表达的变化情况;PepTag(非放射性蛋白激酶检测法对荷脂细胞胞膜PKCα活性进行定量检测。结果:随着oxLDL浓度的增加,THP-1巨噬细胞内脂滴增加变大,胆固醇酯/总胆固醇比值升高,adipophilin、PPARγ和PKCα表达增强(与0 mg/L oxLDL处理组比较,P均<0.05),胞膜PKCα活性由(0.07±0.01)kU/L增至(0.14±0.02)kU/L(P<0.05)。结论:oxLDL可增强巨噬细胞PKCα活性,上调PKCα、PPARγ和adipophilin的表达,促进THP-1巨噬细胞中脂质的蓄积;oxLDL、PKCα、PPARγ和adipophilin之间可能存在着某种调控机制。

关键词：氧化低密度脂蛋白蛋白激酶Cα 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 亲脂素脂滴动脉粥样硬化 THP-1巨噬细胞

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经冠状动脉内移植骨髓间充质干细胞在体示踪及体内再分布的实验研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2008年第3期15卷 195-199页

作者：何庚戌要彤张浩胡盛寿宋鹏张晓玲解放军第251医院胸心血管外科河北张家口075000 河北北方学院附属第一医院心外科河北张家口075000 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室北京100037

目的探讨利用心脏磁共振成像(MRI)对经冠状动脉内注射的超顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)标记的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)进行在体示踪的可行性,观察移植细胞在体内的再分布情况。方法从猪的髂骨处抽取骨髓... 详细信息

目的探讨利用心脏磁共振成像(MRI)对经冠状动脉内注射的超顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)标记的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)进行在体示踪的可行性,观察移植细胞在体内的再分布情况。方法从猪的髂骨处抽取骨髓,分离、培养BMMSCs。用SPIO和CM-DiI(Cell TrackerTMC-7001,Molecular Probe)对细胞进行双重标记。通过导管将标记的细胞注射到冠状动脉左前降支内,分别在细胞移植后当天、移植后1周、3周通过MRI检查对移植细胞进行在体示踪;并分别取不同器官的组织标本进行组织病理学检查。结果冠状动脉内注射的SPIO标记的BMMSCs可在心脏MRI上显影,表现为散在分布的点状信号缺失或低密度影像,并可持续3周。病理检查发现移植细胞较为均匀的分布在移植冠状动脉相关的心肌组织内,在移植后1周可见细胞进入冠状静脉系统内。移植细胞在体内能分布至肺、脾和肾,而在肝组织中很少见。结论用MRI技术可对经冠状动脉内注射的SPIO标记的BMMSCs进行在体示踪;移植细胞在体内有向非靶器官再分布的情况,相关器官组织形态学未见明显的改变。

关键词：骨髓间充质干细胞细胞移植冠状动脉磁共振成像超顺磁性氧化铁颗粒

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巨细胞病毒感染的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化发生的可能机制

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中国动脉硬化杂志 2008年第8期16卷 589-592页

作者：陈瑞珍熊思东许从峰杨英珍邹云增葛均波陈灏珠复旦大学附属中山医院上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室上海市200032 复旦大学免疫学系上海市200032

目的研究巨细胞病毒感染引起的免疫损伤导致动脉粥样硬化发生的可能机制.方法栽脂蛋白E基因敲除的8周龄C57BL/6雌性小鼠,随机分成对照组、高脂饮食组、鼠巨细胞病毒感染组和高脂饮食+鼠巨细胞病毒感染组.在不同时间段分别处死小鼠,截... 详细信息

目的研究巨细胞病毒感染引起的免疫损伤导致动脉粥样硬化发生的可能机制.方法栽脂蛋白E基因敲除的8周龄C57BL/6雌性小鼠,随机分成对照组、高脂饮食组、鼠巨细胞病毒感染组和高脂饮食+鼠巨细胞病毒感染组.在不同时间段分别处死小鼠,截取主动脉,利用逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学等方法检测主动脉单核细胞趋化因子1、生长相关癌基因α、Fractalkine和调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子的表达.结果第8周时,巨细胞病毒感染后可显著提高生长相关癌基因α在主动脉的表达,并可诱导Fractalkine、活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子和单核细胞趋化因子1的表达,而在高脂饮食+巨细胞病毒感染的小鼠主动脉组织中,Fractaline的表达较其它组明显升高.第12周时,高脂饮食+巨细胞病毒感染组中Fractalkine和活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子和单核细胞趋化因子1的表达较其它组更高些.免疫组织化学结果发现,高脂饮食后,生长相关癌基因α、Fractalkine和单核细胞趋化因子1的表达均有明显升高,但Fractalkine的表达较局限,单核细胞趋化因子1和生长相关癌基因α在整个血管壁都存在,但以内膜较高.单纯巨细胞病毒感染组与高脂饮食组相似,可诱导单核细胞趋化因子1、生长相关癌基因α和Fractalkine的表达,但不同的是Fractalkine的表达广泛存在.而高脂饮食+巨细胞病毒感染组单核细胞趋化因子1、生长相关癌基因α和Fractalkine表达的升高更为明显,尤其是斑块部位.结论巨细胞病毒感染后通过调节趋化因子表达水平的改变,从而促进炎症细胞的迁移,促进动脉粥样硬化的发生.

关键词：病理学与病理生理学巨细胞病毒动脉粥样硬化趋化因子基因敲除

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HDL抑制人脐静脉内皮细胞NADPH氧化酶4表达和活性氧生成

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医学分子生物学杂志 2008年第1期5卷 16-21,30页

作者：王蕾国汉邦张小勇屈顺林丁莉满永王抒黎健卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京市100730 南华大学心血管病研究所湖南省衡阳市421001

目的分析HDL对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)内NAD-PH氧化酶4(NADPH oxidase4,NOX4)及其亚组分p22phox、p67phox、Rac1与活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响,研究HDL对LDL的拮抗作用。方法用Ⅱ型胶原酶消化法分离培养HUVEC;用RT-PCR、Western印迹观察NOX4、p22phox、p67phox、Rac1表达的变化;用流式细胞仪检测细胞内ROS的变化。结果HDL处理HUVEC能下调NOX4和p67phox mRNA和蛋白水平,但不影响p22phox和Rac1的表达。高浓度LDL刺激HUVEC时,NOX4表达上调,细胞内ROS生成增加,但p22phox、p67phox和Rac1的表达没有明显变化。用HDL预处理再加高浓度LDL刺激时,NOX4表达下调,ROS生成量减少;结论HDL可通过下调HUVEC NOX4表达降低ROS水平。

关键词： NADPH氧化酶4 活性氧人脐静脉内皮细胞高密度脂蛋白

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微囊化重组CHO细胞移植促进大鼠心肌梗死后血管新生的实验研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2008年第1期15卷 38-43页

作者：朱沈军张浩胡盛寿王为张虹李君魏英杰中国医学科学院中国协和医科大学卫生部心血管疾病再生医学研究重点实验室阜外心血管病医院外科北京100037 中国科学院大连化学物理研究所辽宁大连116023

目的在大鼠心肌梗死部位植入微囊化重组中华仓鼠卵巢(chinese hamster ovary,CHO)细胞,观察其分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)是否可以促进心肌梗死部位的血管新生,改善心功能。方法通过质粒转染的方法构建可以分泌VEGF的重组CHO细胞... 详细信息

目的在大鼠心肌梗死部位植入微囊化重组中华仓鼠卵巢(chinese hamster ovary,CHO)细胞,观察其分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)是否可以促进心肌梗死部位的血管新生,改善心功能。方法通过质粒转染的方法构建可以分泌VEGF的重组CHO细胞系,用微囊包裹,观察微囊内细胞的生长及分泌情况。制备大鼠心肌梗死模型,随机将48只8周龄SD雄性大鼠分成微囊化细胞移植组(MC-CHO组)、单纯细胞移植组(CHO组)、空微囊移植组(MC组)和无血清培养基移植组(对照组),每组12只。移植3周后检测心功能改善情况,病理切片观察微囊结构及囊内细胞存活情况,注射部位微血管计数比较促血管新生效果。结果体外检测可见重组CHO细胞在微囊生长迅速,第8d时培养上清中VEGF达3852pg/ml;移植3周后MC-CHO组左心室大小和心功能明显好于其它3组,差异有统计学意义(P<0.05);局部微血管密度MC-CHO组较CHO组、MC组和对照组明显增加(22.3±3.1vs.15.6±2.8,11.4±2.5和13.2±2.7个/每高倍视野,P<0.05);组织学检查可见微囊结构完整,内有存活且具有分泌功能的CHO细胞。结论微囊化重组CHO细胞移植可促进大鼠心肌梗死后血管新生,改善心功能。

关键词：微囊血管内皮生长因子心肌梗死细胞治疗血管新生

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洛伐他汀/烟酸治疗原发性高胆固醇血症的血浆蛋白质组学研究

洛伐他汀/烟酸治疗原发性高胆固醇血症的血浆蛋白质组学研究

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2008第十一次全国临床药理学学术大会

作者：华丛笑李一石刘红刘玉清高小晶陈国良边文彦顼志敏国家食品药品监督管理局药品审评中心北京协和医学院中国医学科学院阜外心血管病医院卫生部心血管药物临床研究重点实验室

目的比较蛋白质组学方法可应用于寻找疾病诊断的标记物或治疗靶。本研究旨在观察原发性高胆固醇血症用洛伐他汀/烟酸治疗前后的血浆差异表达的蛋白质。方法36名高胆固醇血症患者年龄在(58.1±7.8)岁之间,血清总胆固醇≥5.7 mmol/L,... 详细信息

目的比较蛋白质组学方法可应用于寻找疾病诊断的标记物或治疗靶。本研究旨在观察原发性高胆固醇血症用洛伐他汀/烟酸治疗前后的血浆差异表达的蛋白质。方法36名高胆固醇血症患者年龄在(58.1±7.8)岁之间,血清总胆固醇≥5.7 mmol/L,LDL胆固醇

关键词：原发性高胆固醇血症洛伐他汀组学研究

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大网膜联合组织工程心肌移植改善心肌梗死后大鼠心功能

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中国胸心血管外科临床杂志 2008年第6期15卷 432-437页

作者：周骐周建业胡盛寿胡平中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院外科卫生部心血管疾病再生医学研究重点实验室北京100037 清华大学化工系高分子材料研究所北京100084

目的将骨髓间充质干细胞(MSCs)种植于共聚乙交酯-丙交酯(PLGA)补片上构建组织工程心肌(EHT),在大鼠心肌梗死模型上观察大网膜增加EHT血供,改善微环境后对心脏间质胶原重塑及心功能的影响,为心肌梗死的外科治疗提供新的途径。方法结扎SD... 详细信息

目的将骨髓间充质干细胞(MSCs)种植于共聚乙交酯-丙交酯(PLGA)补片上构建组织工程心肌(EHT),在大鼠心肌梗死模型上观察大网膜增加EHT血供,改善微环境后对心脏间质胶原重塑及心功能的影响,为心肌梗死的外科治疗提供新的途径。方法结扎SD大鼠左冠状动脉,制作心肌梗死模型。以大鼠MSCs为种子细胞构建EHT,将符合心肌梗死标准的18只鼠随机分成3组,每组6只,A组:网膜包裹EHT;B组:单纯EHT移植;对照组:单纯心肌梗死;另设假手术组(n=6):仅开胸,不结扎冠状动脉及EHT移植。EHT植入后4周,用二维超声心动图检测心功能,彩色室壁运动(CK)方法检测梗死部位心室壁运动,取标本做天狼猩红染色在光学显微镜下观察心肌改变。结果A组EHT植入后4周部分PLGA纤维降解,梗死部位心肌间质胶原含量较B组和对照组明显减少(P<0.05)。CK检查显示A组梗死部位心室壁运动较B组和对照组明显改善(P<0.05);A组左心室收缩期末内径(LVESD)和左心室舒张期末内径(LVEDD)较对照组和B组明显减小(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)较对照组和B组明显增大(P<0.05)。结论大网膜包裹MSCs-PLGA构建的EHT覆盖于梗死心肌表面能改善心肌梗死后间质胶原重塑和梗死部位心室壁运动,有利于心功能的恢复。

关键词：骨髓间充质干细胞大网膜心肌梗死组织工程重塑

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