检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2024年第21期46卷 2415-2423页

作者：董子晗王海萍吕洋刘洋河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000 河北北方学院干细胞与生殖生物学实验室河北张家口075000

目的探究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibro-blast growth factor,FGF-2)和三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)单独或联合诱导对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向心肌细胞(cardiomyocytes,CMs)分化的影响以及PNS和FGF-2促分化的作用机制。方法全骨髓贴壁法分离20~30 g 3周龄SD大鼠的骨髓间充质干细胞,通过流式细胞术鉴定骨髓间充质干细胞的纯度。鉴定纯度合格后通过PNS和FGF-2单独或联合诱导以及PNS和FGF-2分别与LY294002(phosphatidylinositol 3 kinase抑制剂)联用诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化。根据培养的相应时间点,分为对照组、三七总皂苷组(PNS组)、碱性成纤维细胞生长因子组(FGF-2组)、三七总皂苷+碱性成纤维细胞生长因子组(PNS+FGF-2组)。通过免疫组织化学检测诱导后Desmin和Cx43的表达水平;Western blot检测心肌特异性蛋白、有关通路蛋白及细胞凋亡有关蛋白的表达水平;采用RT-qPCR检测心肌转录因子表达水平。结果各单独诱导组(FGF-2组、PNS组)或联合诱导组(PNS+FGF-2组)均提高心肌特异性蛋白和基因表达水平(P<0.05),且最高表达水平出现在联合组。PNS和FGF-2分别与LY294002联用,相较于两单独诱导组降低了心肌特异性蛋白和基因的表达水平,降低通路相关蛋白Akt的磷酸化水平,且Bcl-2水平降低,Bax水平升高,Bcl-2/Bax比值减小(P<0.05)。结论PNS和FGF-2均可使骨髓间充质干细胞诱导后向心肌细胞定向分化,且二者的联合诱导是一种更高效的诱导方法。PI3K/Akt信号通路参与了PNS和FGF-2促进骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的过程,且PNS和FGF-2起到减少细胞凋亡的作用。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子三七总皂苷骨髓间充质干细胞心肌细胞心肌梗死 PI3K/Akt通路

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bFGF和IGF-1对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化促进作用及相关机制探讨

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中国药理学通报 2023年第4期39卷 715-722页

作者：王巧敏刘洋吕洋郭蕊高京马聪聪王海萍河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000 河北北方学院干细胞与生殖生物学实验室河北张家口075000

目的探讨成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)单独或联合使用对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)向心肌细胞(cardiomyocytes, CMs)分化的影响,以及IGF-1和bFGF促分化的作用机制。方法 IGF-1和bFGF单独或联合使用,以及IGF-1和bFGF分别与LY294002联用,诱导4周后,采用免疫细胞化学、免疫荧光检测心肌特异性蛋白表达水平;Western blot检测心肌特异性蛋白和通路相关蛋白表达水平;透射电镜观察细胞的超微结构。诱导1、2和4周后,采用RT-qPCR检测心肌转录因子表达水平。结果 IGF-1和bFGF单独或联合组,均提高心肌特异性蛋白和基因表达水平,且最高表达水平出现在IGF-1和bFGF联合组。IGF-1和bFGF联用组,透射电镜可观察到平行排列的肌丝,以及线粒体和内质网等丰富细胞器。IGF-1和bFGF分别与LY294002联用组,相较于IGF-1和bFGF单独诱导组降低心肌特异性蛋白和基因的表达水平,降低通路相关蛋白Akt磷酸化水平。结论 IGF-1和bFGF均可诱导BMSCs向CMs的定向分化,且两种生长因子的联合是一种更加高效的诱导方法。PI3K/Akt信号通路参与了IGF-1和b FGF促进BMSCs向CMs分化的过程。

关键词：成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞心肌细胞胰岛素样生长因子-1 心肌梗死 PI3K/Akt

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微小RNA-874-3p通过靶向调控斑菲素蛋白3影响肺腺癌细胞生物学行为及机制

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解剖学报 2025年第2期56卷 188-201页

作者：陈帆滕召虎房涛任君旭张静李雪王怡璇林旭吴靖芳河北北方学院形态学实验室河北张家口075000 河北张家口市第一医院胸外科河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

目的探讨微小RNA-874-3p(miR-874-3p)靶向调控斑菲素蛋白3(PKP3)对肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测肺腺癌组织芯片与肺腺癌细胞系A549细胞PKP3的表达水平,并分析与肺腺癌患者临... 详细信息

目的探讨微小RNA-874-3p(miR-874-3p)靶向调控斑菲素蛋白3(PKP3)对肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测肺腺癌组织芯片与肺腺癌细胞系A549细胞PKP3的表达水平,并分析与肺腺癌患者临床病理特征之间的关系。细胞实验分A549细胞组(空白对照组)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-mimics组(转染miR-874-3p mimics)、sh-NC组(转染PKP3沉默质粒的对照组)、sh-PKP3组(转染PKP3沉默质粒)、miR+pcDNA-PKP3组(转染miR-874-3p mimics+pcDNA-PKP3,挽救组)、miR+pcDNA-NC组(转染miR-874-3p mimics+pcDNA-NC),分别对各组细胞的增殖、侵袭、迁移以及凋亡能力进行检测。用ENCORI数据库预测PKP3的上游基因,双荧光素酶实验检测miR-874-3p与PKP3靶向关系。Western blotting检测MAPK/mTOR通路相关蛋白。结果PKP3在肺腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,PKP3高表达与临床分期、肿瘤大小及淋巴结转移有关(P<0.05),A549细胞中PKP3表达水平显著增高,miR-874-3p表达降低(P<0.05)。过表达miR-874-3p使PKP3表达水平下降(P<0.05)。与对照组相比,过表达miR-874-3p与沉默PKP3均能抑制A549细胞克隆及侵袭能力,引起细胞周期阻滞,降低A549细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白(cyclin)D1、cyclin E1的表达水平(P<0.05),上调Bax蛋白及Caspase-3蛋白表达(P<0.05),增加细胞凋亡。过表达PKP3可以逆转过表达miR-874-3p产生的生物学行为。过表达miR-874-3p与沉默PKP3均显著降低P38 MAPK、mTOR磷酸化蛋白的表达水平。结论MiR-874-3p能够靶向负调控PKP3表达并通过MAPK/mTOR通路抑制A549细胞恶性生物学行为。

关键词：微小RNA-874-3p 斑菲素蛋白3 肺腺癌增殖侵袭免疫印迹法人

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5-氮胞苷联合骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

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中国组织工程研究 2022年第19期26卷 2958-2963页

作者：王文华刘洋王巧敏吕洋赵亚如王海萍河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北省张家口市075000 河北北方学院干细胞与生殖生物学实验室河北省张家口市075000

背景:干细胞已成为组织工程中理想的种子细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了研究方向。目的:探讨骨形态发生蛋白2联合5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的可行性。方法:采用全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞,将第3代... 详细信息

背景:干细胞已成为组织工程中理想的种子细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了研究方向。目的:探讨骨形态发生蛋白2联合5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的可行性。方法:采用全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞进行分组诱导,分别为对照组(普通IMDM培养基)、骨形态发生蛋白2组(200 ng/L)、5-氮胞苷组(10μmol/L)、5-氮胞苷+骨形态发生蛋白2组。诱导3 d后更换正常培养基继续培养4周,免疫细胞化学法检测cTnI的表达,免疫荧光化学法检测Desmin、cTnT的表达,Western blot检测cTnT和cTnI的表达;诱导3 d后更换正常培养基继续培养1,2,4周,采用RT-qPCR检测心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达。结果与结论:(1)Western blot检测诱导组均表达cTnT、cTnI,联合诱导组cTnT、cTnI的表达高于单独诱导组(P<0.01);(2)免疫细胞化学法检测诱导组cTnI均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);免疫荧光细胞化学法检测诱导组Desmin、cTnT均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);(3)RT-qPCR检测诱导组均有GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);(4)结果表明,骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷和骨形态发生蛋白2联合诱导后可以提高心肌样细胞的分化效率。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞心肌样细胞骨形态发生蛋白2 5-氮胞苷 SD大鼠

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奥沙利铂促进过表达GSDME的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡

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中国肿瘤生物治疗杂志 2020年第8期27卷 884-888页

作者：陈婧王策张伟华张春泽任君旭河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000 天津市人民医院肛肠外科天津300121

目的:观察过表达Gasdermin蛋白E(gasdermin E,GSDME)基因的结直肠癌Lovo细胞经奥沙利铂处理后发生细胞焦亡的现象。方法:通过qPCR检测结直肠癌细胞株Lovo、正常结直肠上皮细胞HCOEPIC中GSDME基因的表达水平,构建过表达野生型和突变型GS... 详细信息

目的:观察过表达Gasdermin蛋白E(gasdermin E,GSDME)基因的结直肠癌Lovo细胞经奥沙利铂处理后发生细胞焦亡的现象。方法:通过qPCR检测结直肠癌细胞株Lovo、正常结直肠上皮细胞HCOEPIC中GSDME基因的表达水平,构建过表达野生型和突变型GSDME的GSDME-WT和GSDME-D270A重组质粒,包装为相应慢病毒后感染Lovo细胞构建GSDME稳定高表达细胞株,Western blotting检测WT、D270A和空载体组中GSDME表达水平。用不同浓度奥沙利铂(0、4、8、16、32、64µg/ml)作用于WT、D270A组Lovo细胞和HCOEPIC细胞,显微镜下观察细胞的形态变化。结果:GSDME在HCOEPIC细胞中表达显著高于Lovo细胞(P<0.01)。成功构建GSDME-WT和GSDME-D270A高表达重组质粒和相应的Lovo细胞株,与空载体组相比,WT和D270A组Lovo细胞中GSDME表达水平明显升高(均P<0.05)。镜下观察发现,64µg/ml奥沙利铂处理各组细胞9和12 h时,WT组的Lovo细胞和HCOEPIC细胞体积逐渐增大并向一侧“吹泡”,表现出明显的细胞焦亡现象,细胞焦亡率显著高于无奥沙利铂处理的对照组[Lovo细胞:(7.405±1.010)%vs(3.441±0.401)%,P<0.05;HCOEPIC细胞:(7.203±1.020)%vs(4.201±0.302)%,P<0.05]。结论:奥沙利铂促进过表达GSDME基因的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡。

关键词：细胞焦亡 GSDME 奥沙利铂结直肠癌生物标志物

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Smad2/3与Smad7在大鼠化疗性卵巢早衰卵泡中的表达和意义

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解剖学报 2018年第4期49卷 497-505页

作者：丁艳陶然张静陈婧任君旭河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

目的探讨顺铂对大鼠卵巢结构和功能损伤的影响及其可能的分子机制。方法 3月龄SD雌性大鼠随机分为对照组(C组,5只)和化疗组(H组,5只)。H组给予每只大鼠腹腔注射顺铂2 mg/(kg.d),C组给予腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d后检测大鼠卵... 详细信息

目的探讨顺铂对大鼠卵巢结构和功能损伤的影响及其可能的分子机制。方法 3月龄SD雌性大鼠随机分为对照组(C组,5只)和化疗组(H组,5只)。H组给予每只大鼠腹腔注射顺铂2 mg/(kg.d),C组给予腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d后检测大鼠卵巢指数(卵巢湿重/体重);酶联免疫吸附法检测血清雌二醇(E2)和促卵泡刺激素(FSH)水平;苏木素-伊红染色观察卵泡发育并计数各级卵泡;免疫组织化学和Real-time PCR法检测各组Smad2、磷酸化Smad2(p-Smad2)、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad4和Smad7的蛋白和mRNA表达。结果与C组相比,H组大鼠卵巢体积减小,生长卵泡数明显减少(P<0.05),大鼠卵巢指数下降(P<0.05),血清中E2水平降低和FSH水平上升(P<0.05)。免疫组织化学和Real-time PCR结果显示,Smad2(p-Smad2)、Smad3(p-Smad3)、Smad4和Smad7蛋白在卵巢各级卵泡均有表达,H组Smad2蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),Smad2磷酸化水平(p-Smad2)表达增高(P<0.05);Smad3、Smad4和Smad7蛋白和mRNA表达减少(P<0.05),p-Smad3表达降低(P<0.05)。结论顺铂诱导大鼠卵泡损伤并促进卵巢早衰,引起卵泡细胞内Smad2表达增加,Smad3、Smad7表达降低,Smad细胞内信号通路参与了化疗性卵巢损伤的过程。

关键词：顺铂卵巢早衰 Smad2(p-Smad2)/Smad3(p-Smad3) Smad4 Smad7 免疫组织化学实时定量聚合酶链反应大鼠

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转化生长因子-β和Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达

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解剖学报 2018年第1期49卷 108-112页

作者：袁丽娟任君旭姬宏宇张静张娟丁艳河北北方学院硕士研究生3年级河北张家口075000 河北北方学院基础医学院组织学胚胎学教研室河北张家口075000 河北北方学院附属第一医院妇产科河北张家口075000

目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)、Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达,分析其与卵巢功能衰退的关系。方法雌性SD大鼠分为对照组(C组,6月龄,阴道涂片筛选,n=9)、绝经过渡期组(MT组,12~14月龄,阴道涂片筛选,n=8),大鼠麻醉处死... 详细信息

目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)、Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达,分析其与卵巢功能衰退的关系。方法雌性SD大鼠分为对照组(C组,6月龄,阴道涂片筛选,n=9)、绝经过渡期组(MT组,12~14月龄,阴道涂片筛选,n=8),大鼠麻醉处死后迅速取出卵巢,采用机械分离方法释放卵泡颗粒细胞,于CO2培养箱中培养,利用免疫细胞化学法检测促卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白的表达,鉴定卵巢颗粒细胞;免疫细胞化学法检测TGF-β、Smad4蛋白在两组卵巢颗粒细胞的表达;采用Real-time PCR的方法检测各组颗粒细胞中TGF-β、Smad4 mRNA的表达。结果免疫细胞化学显示分离培养的颗粒细胞纯度>95%,MT组TGF-β、Smad4蛋白表达水平低于对照组(P<0.05);Real-time PCR结果显示,两组均有TGF-β、Smad4 mRNA的表达,MT组TGF-β、Smad4 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05)。结论 TGF-β、Smad4参与绝经过渡期大鼠卵巢功能的衰退过程,绝经过渡期大鼠功能衰退的部分原因可能与卵巢颗粒细胞中TGF-β、Smad4的表达降低有关。

关键词：绝经过渡期卵巢颗粒细胞转化生长因子-β Smad4 免疫组织化学实时定量聚合酶连反应大鼠

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顺铂治疗导致卵巢早衰的研究进展

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基础医学与临床 2018年第6期38卷 845-848页

作者：丁艳张静陶然任君旭河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

顺铂作为临床癌一线化疗药物,由于其治疗选择性较差,在杀灭病变靶细胞的同时对正常的组织细胞产生细胞毒性作用,可以导致育龄女性癌患者卵巢功能损伤,引起卵巢早衰、不孕等并发症。顺铂通过多种因素相互作用,激活卵巢内细胞凋亡、氧化... 详细信息

顺铂作为临床癌一线化疗药物,由于其治疗选择性较差,在杀灭病变靶细胞的同时对正常的组织细胞产生细胞毒性作用,可以导致育龄女性癌患者卵巢功能损伤,引起卵巢早衰、不孕等并发症。顺铂通过多种因素相互作用,激活卵巢内细胞凋亡、氧化应激反应等多种信号途径,诱导卵巢损伤。如何有效防治或消除化疗药物对卵巢的损害,已经引起了医疗界广泛的关注和研究的热潮。

关键词：顺铂化疗卵巢早衰

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PFT-α与BMP-2联合诱导大鼠BMMSCs分化为心肌样细胞

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基础医学与临床 2018年第8期38卷 1088-1093页

作者：陈晓依王浩宇吕洋王海萍孙微李柔河北北方学院基础医学院河北张家口075000 河北北方学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

目的探讨p53抑制剂(PFT-α)与骨形态发生蛋白2(BMP-2)联合诱导对骨髓间充质干细胞(BMMSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法分离大鼠BMMSCs进行培养、传代及纯化,分别应用PFT-α、BMP-2及两者联合对第2代BMMSCs定向诱导,不加诱导剂为对照... 详细信息

目的探讨p53抑制剂(PFT-α)与骨形态发生蛋白2(BMP-2)联合诱导对骨髓间充质干细胞(BMMSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法分离大鼠BMMSCs进行培养、传代及纯化,分别应用PFT-α、BMP-2及两者联合对第2代BMMSCs定向诱导,不加诱导剂为对照组。倒置显微镜下观察并记录对数增殖期细胞的形态变化;流式细胞计数法鉴定BMMSCs表面联合标记物;免疫组化法检测c Tn I、Cx43及TPM的表达;免疫荧光检测技术对c Tn I和Cx43进行荧光标记;透射电镜观察分化细胞的超微结构变化。结果经诱导后的BMMSCs以梭形为主,细胞体积变大。CD45、CD29和CD90的阳性率分别为0.3%、86.5%和84.7%。诱导组细胞的c Tn I、Cx43及TPM均呈阳性表达,对照组为阴性。诱导组细胞胞质内Cx43免疫荧光染色表达呈红色,c Tn I则呈绿色,胞核椭圆位于细胞中央,胞质内可见平行排列的肌丝、线粒体和糖原等。结论 PFT-α和BMP-2均可单独诱导BMMSCs分化为心肌样细胞,两者联合应用更加高效、安全。

关键词：骨髓间充质干细胞 PFT-α BMP-2 心肌细胞

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TGF-β/Smad途径在肿瘤进展中的研究进展

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河北北方学院学报（自然科学版） 2017年第12期33卷 55-60页

作者：丁艳陈婧陶然张静任君旭河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

转化生长因子-β(TGF-β)超家族信号通路调控着复杂的基因表达反应,并因不同生理和病理环境而变化,其在多个水平上广泛地调节维持着体内平衡。TGF-β信号通过与膜上特异性受体结合发生信号级联反应,依次激活并磷酸化胞内Smad蛋白形成TGF... 详细信息

转化生长因子-β(TGF-β)超家族信号通路调控着复杂的基因表达反应,并因不同生理和病理环境而变化,其在多个水平上广泛地调节维持着体内平衡。TGF-β信号通过与膜上特异性受体结合发生信号级联反应,依次激活并磷酸化胞内Smad蛋白形成TGF-β-Smad复合物,随后移入细胞核调节相关靶基因转录反应。调节过程中任何信号转导因子发生异常可导致或促进肿瘤的发生和发展。综述了对近年来TGF-β/Smad信号通路在肿瘤发生过程中的作用,阐述TGF-β/Smad调控肿瘤进展过程,以期为其在肿瘤治疗中的应用提供参考。

关键词： TGF-β/Smad 肿瘤微环境变化肿瘤转移

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