光热治疗作为一种新型的抗肿瘤治疗策略，单独用于抗肿瘤治疗时靶向性不足，穿透能力有限，无法实现长期抑制。本研究将M1型巨噬细胞外泌体（MEVs）修饰于搭载有CSF1R-siRNA和光热剂的载体表面制备多功能基因递送载体MEVs@RNPs，可诱导巨噬细胞由M2型重编程为抗肿瘤的M1型，实现三阴性乳腺癌（TNBC）的高效光热-免疫治疗。采用纳米粒度仪、紫外-可见分光光度计、荧光分光光度计和测温热成像仪对纳米颗粒的理化性质进行测定。以TNBC细胞4T1、内皮细胞Bend3和巨噬细胞RAW264.7为体外实验细胞模型，考察了MEVs@RNPs体外靶向肿瘤细胞、杀伤肿瘤细胞和诱导巨噬细胞重编程的能力。选择Balb/c小鼠建立皮下移植瘤模型，测定不同处理组肿瘤体积和体重的变化。分离小鼠血液和肿瘤组织，采用苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin(HE)）染色、原位末端转移酶标记（Terminal deoxynucleotidyl transferase d UTP nick end labeling, TUNEL）、酶联免疫吸附分析（Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）法测定肿瘤细胞的凋亡和细胞因子分泌情况。结果表明，MEVs@RNPs可优先靶向至肿瘤细胞，并在光热条件下诱导更强的TNBC细胞杀伤效果。流式细胞术和ELISA法测定结果显示，MEVs@RNPs可以促进巨噬细胞由M2型向抗肿瘤的M1型转化，并显著提高抗肿瘤细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-12(IL-12)的分泌水平。MEVs@RNPs的体内抗肿瘤治疗效果评估结果显示，在激光照射条件下，MEVs@RNPs组可以显著诱导肿瘤细胞病理性坏死和凋亡，促进巨噬细胞重编程和CD4+/CD8+T细胞向肿瘤部位浸润，提高TNF-α和IL-12的分泌水平，从而全面提高TNBC的治疗效果。
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