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亲环素D介导的线粒体通透性转换孔开放对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响

郑州大学学报（医学版） 2024年第5期59卷 602-607页

作者：刘一夏德佳赵柔王旭彤赵岳马玉芳王文军张玲华北理工大学公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学教研室河北唐山063000 济宁医学院护理学院妇儿护理学教研室山东济宁272000 济南大家医学检验有限公司临床实验室济南250104 济宁医学院附属医院医学检验科山东济宁272000 滨州医学院公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学教研室山东烟台264003 潍坊护理职业学院党政办公室山东潍坊262500

目的:探讨干扰线粒体关键蛋白亲环素D(CypD)对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响。方法:构建3种转染不同siRNA的MG63细胞系,分别为CypD-siRNA1、CypD-siRNA2和CypD-siRNA3组,采用qRT-PCR和Western blot检测3组细胞中Cyp... 详细信息

目的:探讨干扰线粒体关键蛋白亲环素D(CypD)对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响。方法:构建3种转染不同siRNA的MG63细胞系,分别为CypD-siRNA1、CypD-siRNA2和CypD-siRNA3组,采用qRT-PCR和Western blot检测3组细胞中CypD的表达水平,筛选用于后续实验的CypD-siRNA。将MG63细胞分为阴性对照组(转染siRNA-NC)和敲减组(转染CypD-siRNA2)。采用CCK-8法和平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的迁移能力;采用MitoSOX Red检测线粒体活性氧(mROS)水平,钙黄绿素-钴评价线粒体通透性转换孔的开放状态;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞迁移和凋亡相关蛋白的表达。结果:与CypD-siRNA1组和CypD-siRNA3组相比,CypD-siRNA2组中CypD mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05)。与阴性对照组相比,敲减组细胞克隆形成数和迁移数减少,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率升高,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase 3/Caspase 3以及E-cadherin和细胞色素C蛋白表达水平升高(P<0.05)。敲减组细胞mROS水平高于阴性对照组,而线粒体通透性转换孔开放程度低于阴性对照组(P<0.05)。结论:敲减CypD表达可上调MG63细胞氧化应激水平,抑制其增殖、迁移能力,并通过线粒体途径诱导其凋亡。

关键词：骨肉瘤亲环素D 线粒体通透性转换孔生物学行为 MG63细胞

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酰胺单核苷酸在多囊卵巢综合征中的作用研究进展

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中南医学科学杂志 2023年第1期51卷 150-153页

作者：汤瑾如伍枫刘慧晴易康王彩霞彭翠英李素云南华大学衡阳医学院应用解剖与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生物教研室湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院组织学与胚胎学教研室湖南衡阳421001

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄妇女常见的一种复杂的内分泌及代谢异常所致的疾病,其病因及病理生理机制仍不清楚。烟酰胺单核苷酸(NMN)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)生物合成的前体,增加卵巢组织NAD+水平可改善PCOS的临床症状。NMN有非常... 详细信息

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄妇女常见的一种复杂的内分泌及代谢异常所致的疾病,其病因及病理生理机制仍不清楚。烟酰胺单核苷酸(NMN)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)生物合成的前体,增加卵巢组织NAD+水平可改善PCOS的临床症状。NMN有非常广泛的生物药理学活性,在细胞生化功能、抗衰老、抗炎症、心脏保护、糖尿病、阿尔茨海默病和肥胖相关并发症中都起到了良好的作用。本文就NMN在PCOS患者炎症、肥胖、糖尿病及胰岛素抵抗中作用的研究进展进行综述。

关键词：烟酰胺单核苷酸多囊卵巢综合征 NAD+

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妊娠期糖尿病对母鼠肠道菌群的影响

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中国微生态学杂志 2024年第4期36卷 408-413页

作者：曹少锋范青杰李明王业忠梅璐郑州大学第五附属医院消化内科河南郑州450014 大连医科大学基础医学院微生态学教研室

目的探究母鼠妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)对其肠道微生态的影响,从微生物角度对GDM的早期预防与早期治疗提供参考。方法利用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素构建GDM模型,采用16S rRNA基因高通量测序技术剖析GDM... 详细信息

目的探究母鼠妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)对其肠道微生态的影响,从微生物角度对GDM的早期预防与早期治疗提供参考。方法利用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素构建GDM模型,采用16S rRNA基因高通量测序技术剖析GDM对妊娠期母鼠肠道微生态的影响。结果 GDM造模后,母鼠肠道菌群发生显著改变,肠道菌群物种多样性显著增加,肠道中厚壁菌门和拟杆菌门比例显著降低,乳杆菌和链球菌相对丰度有下降的趋势,Dubosiella、 Lachnospiraceae_NK4A136_group和Allobaculum等多种条件致病菌丰度有增加的趋势。结论 GDM会导致妇女肠道微生态失衡,增加机体血糖代谢负担,需及时监测和采取有效的干预措施。

关键词：妊娠期糖尿病肠道菌群母鼠 16S rRNA高通量测序

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珍珠水解液对肝窦内皮细胞活力及肝窦毛细血管化的干预作用

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中国医学科学院学报 2023年第2期45卷 185-192页

作者：彭岳杨妙林江赵铁建刘鹏刘茜玉郭伟倩广西中医药大学基础医学院病理生理教研室南宁530000 广西中医药大学研究生学院南宁530000 广西中医药大学基础医学院方剂学教研室南宁530000 广西中医药大学基础医学院生物化学教研室南宁530000

目的探讨珍珠水解液对肝纤维化时肝窦毛细血管化病变的干预作用及机制。方法合浦珍珠水解液与肝窦内皮细胞(HSEC)和肝星状细胞(HSC-LX2)共同孵育,采用MTT比色法测定HSEC和HSC-LX2的细胞增殖抑制率,流式细胞术测定HSC-LX2的细胞周期及细... 详细信息

目的探讨珍珠水解液对肝纤维化时肝窦毛细血管化病变的干预作用及机制。方法合浦珍珠水解液与肝窦内皮细胞(HSEC)和肝星状细胞(HSC-LX2)共同孵育,采用MTT比色法测定HSEC和HSC-LX2的细胞增殖抑制率,流式细胞术测定HSC-LX2的细胞周期及细胞凋亡情况,透射电镜观察HSEC的窗孔及基底膜等微结构的变化情况。结果瘦素激活后,HSC-LX2细胞活性显著增高(P=0.041),HSEC则出现细胞活性显著降低(P=0.004)、窗孔数量减少、窗孔直径下降、连续基底膜形成等肝窦毛细血管化现象。瘦素干预后给予低、中、高不同浓度珍珠水解液治疗,各浓度组均可使缩小及消失了的HSEC窗孔发生增多和扩大(低浓度组:P=0.020;中浓度组:P=0.028;高浓度组:P=0.032),使HSEC外成片的基膜变得稀薄甚至消失(低浓度组:P=0.020;中浓度组:P=0.028;高浓度组:P=0.032);使活化的HSC-LX2活力下降(低浓度组:P=0.018;中浓度组:P=0.013;高浓度组:P=0.009),并诱导其发生细胞凋亡(低浓度组:P=0.012;中浓度组:P=0.006;高浓度组:P=0.005)。随着珍珠水解液给药浓度上升,干预肝窦毛细血管化的效果有梯度增高,具有剂量依赖性(低浓度组:P=0.020;中浓度组:P=0.028;高浓度组:P=0.032)。高浓度珍珠水解液干预肝窦毛细血管化的效果强于治疗剂量的秋水仙碱(P=0.034)和丹参酚酸B(P=0.038)。结论合浦珍珠水解液可使HSEC细胞的活性增加、窗孔面积恢复、基底膜消失,使激活的HSC-LX2细胞丧失活力并发生凋亡,具有针对HSEC及HSC-LX2的显著的抗肝窦毛细血管化药理学作用。

关键词：珍珠水解液抗肝纤维化肝窦毛细血管化窗孔基底膜

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浅谈虚拟仿真技术在“人体解剖学”实验教学中的应用

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科技风 2023年第10期 131-133页

作者：李芬方安宁安徽医学高等专科学校人体解剖与组织胚胎学教研室安徽合肥230061

“人体解剖学”是高职高专医学院校的必修课程,其中实验教学是课程实施的重要环节,是提高学生学习兴趣的关键所在,也是检验学生学习效果的主要手段。传统的实验教学模式、教学手段与表现形式相对单一,对于伴随着互联网成长起来的现代大... 详细信息

“人体解剖学”是高职高专医学院校的必修课程,其中实验教学是课程实施的重要环节,是提高学生学习兴趣的关键所在,也是检验学生学习效果的主要手段。传统的实验教学模式、教学手段与表现形式相对单一,对于伴随着互联网成长起来的现代大学生来说,难免有些“格格不入”。故采用虚拟仿真技术与传统教学相结合的教学方式应用于“人体解剖学”实验课教学中,可有效提升学生学习积极性,改善学习氛围,有利于开发学生实验创新思维,值得推广应用。

关键词：虚拟仿真传统教学人体解剖学

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甘草黄酮调节糖脂代谢作用的研究进展

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中草药 2024年第23期55卷 8301-8310页

作者：陈竞苗秦虹郑温雅中南大学湘雅公共卫生学院营养与食品卫生学教研室湖南长沙410006

甘草Glycyrrhizae Radixet Rhizoma药材是我国常用的中药,甘草黄酮是从甘草中提取出来的一类小分子植物黄酮类化学成分,根据其结构的不同,可将甘草黄酮分为黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、异黄酮和查耳酮。甘草黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤... 详细信息

甘草Glycyrrhizae Radixet Rhizoma药材是我国常用的中药,甘草黄酮是从甘草中提取出来的一类小分子植物黄酮类化学成分,根据其结构的不同,可将甘草黄酮分为黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、异黄酮和查耳酮。甘草黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性,近年来,许多研究发现其对于调节糖脂代谢的作用显著,具有较好的开发前景,但目前尚缺少针对甘草黄酮调节糖脂代谢作用及其机制的总结归纳。对甘草黄酮类化合物对糖脂代谢的影响以及作用机制进行综述,旨在为糖脂代谢紊乱相关疾病的中医防治提供参考。

关键词：甘草黄酮糖代谢脂代谢抗氧化抗炎抗肿瘤

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表达绿色荧光蛋白的重组耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第9期38卷 789-793页

作者：李敏英王楚彤袁美丽卢思彤钱中清李柏青许涛汪洪涛慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030

目的建立表达绿色荧光蛋白(GFP)的耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型,对耻垢分枝杆菌进行快速定位和直观检测,为探究结核发病机制以及研制新型结核疫苗提供一种示踪工具。方法以pEGFP-N1质粒为模板采用PCR扩增出增强型绿色荧光蛋白(EG... 详细信息

目的建立表达绿色荧光蛋白(GFP)的耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型,对耻垢分枝杆菌进行快速定位和直观检测,为探究结核发病机制以及研制新型结核疫苗提供一种示踪工具。方法以pEGFP-N1质粒为模板采用PCR扩增出增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因序列,获得EGFP的编码基因,将扩增产物克隆到载体pALACE上,建立重组质粒pALACE-EGFP。利用电穿孔技术将pALACE-EGFP转化到耻垢分枝杆菌中,通过潮霉素抗性筛选重组耻垢分枝杆菌克隆,扩大培养后涂片观察,并进行荧光显微镜镜检。再用重组耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞,观察是否有GFP表达。结果正确构建重组质粒pALACE-EGFP;荧光显微镜下观察重组耻垢分枝杆菌,证实EGFP在重组耻垢分枝杆菌中表达,并且THP-1巨噬细胞被感染后发出绿色荧光。结论表达EGFP蛋白的重组耻垢分枝杆菌的成功建立,为结核分枝杆菌的感染和致病机制研究奠定基础。

关键词：绿色荧光蛋白(GFP) 耻垢分枝杆菌结核病

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基于PINK1/Parkin通路探讨灵芝孢子对糖尿病肾病模型大鼠肾脏细胞凋亡的影响

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中国老年学杂志 2022年第11期42卷 2805-2811页

作者：周广旭齐亚灵周少波吴可佳张莹石瑞平秦丽微王淑湘付宏扬张欣王淑秋佳木斯大学基础医学院黑龙江佳木斯154007 海南医学院组织学与胚胎学教研室贝德福德大学生命科学学院生物与环境科学与技术研究所佳木斯大学附属第一医院

目的基于PTEN诱导假定激酶(PINK)1/帕金森病蛋白(Parkin)通路研究灵芝孢子对糖尿病肾病(DN)模型大鼠的肾脏细胞凋亡的影响。方法32只SPF级雄性SD大鼠(180~200 g),随机分成正常对照(NC)组、高脂高糖(HF)组、DN模型(DN)组和灵芝孢子(GLSP... 详细信息

目的基于PTEN诱导假定激酶(PINK)1/帕金森病蛋白(Parkin)通路研究灵芝孢子对糖尿病肾病(DN)模型大鼠的肾脏细胞凋亡的影响。方法32只SPF级雄性SD大鼠(180~200 g),随机分成正常对照(NC)组、高脂高糖(HF)组、DN模型(DN)组和灵芝孢子(GLSP)组。除NC组外,其余各组均采用高脂、高糖饲养,同时DN组和GLSP组均联合腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ,50 mg/kg)。GLSP组每日灌胃给予灵芝孢子〔300 mg/(kg•d)〕持续3个月,其余组均灌胃给予等量生理盐水〔10 ml/(kg•d)〕。每周测定各组空腹血糖。12 w后评估肾脏功能,用试剂盒检测尿素氮、血清肌酐、24 h尿蛋白等生化指标。苏木素-伊红(HE)、过碘酸希未反应(PAS)和Masson染色用于检查肾脏病理学。通过TUNEL法观察大鼠肾脏组织凋亡细胞的分布及凋亡率情况。通过免疫组化检测肾脏组织中P62、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。Western印迹检测PINK1/Parkin通路涉及的关键蛋白PINK1、Parkin及微管相关蛋白1轻链(LC)3、P62、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved)-Caspase3、Bax、Bcl-2表达水平。结果与NC组相比,DN组尿中出现大量尿蛋白,血清肌酐及尿素氮水平明显升高(P<0.01),肾小体直径增大、肾小囊腔变小、肾小球内细胞数增多并有糖原累积、肾小球内含有大量的胶原纤维,肾组织中PINK1、Parkin、LC3的蛋白表达显著降低、P62表达显著升高,凋亡相关蛋白Caspase3、Cleaved-Caspase3表达明显升高,Bcl-2/Bax表达明显降低(P<0.01),肾脏凋亡荧光强度明显增加(P<0.01)。与DN组相比,GLSP组肾脏滤过功能明显改善(P<0.01),肾脏病理损伤缓解,肾小球体积有明显减小、肾组织胶原纤维覆盖面积明显降低、糖原明显减少;肾组织中PINK1、Parkin表达明显升高、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显增加,P62表达明显下降,且凋亡相关蛋白Caspase3、Cleaved-Caspase3表达明显下降,Bcl-2/Bax表达明显升高(P<0.01),肾脏凋亡荧光强度明显降低(P<0.01)。结论灵芝孢子可能调控PINK1/Parkin途径,激活肾脏细胞自噬有关,抑制重要的促凋亡蛋白的表达,减轻高糖水平对肾脏的损害,抑制细胞凋亡。

关键词：灵芝孢子 PTEN诱导假定激酶(PINK)1/帕金森病蛋白(Parkin)通路糖尿病肾病自噬凋亡

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卷积神经网络的原理及其在医学影像诊断中的应用

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中国医学物理学杂志 2022年第12期39卷 1485-1489页

作者：王霄朱恩照艾自胜同济大学医学院医学统计学教研室上海200092

利用卷积神经网络快速高效地对医学影像数据进行分析和处理可以实现医学影像数据快速分类、定位等操作,提高医学诊疗的效率。本研究从卷积神经网络的背景和原理入手,介绍各种类型的卷积神经网络的应用场景和一些常用的卷积神经网络模型... 详细信息

利用卷积神经网络快速高效地对医学影像数据进行分析和处理可以实现医学影像数据快速分类、定位等操作,提高医学诊疗的效率。本研究从卷积神经网络的背景和原理入手,介绍各种类型的卷积神经网络的应用场景和一些常用的卷积神经网络模型,包括残差卷积神经网络、U-net、循环卷积神经网络等及其在医学影像诊断中的应用,最后针对卷积神经网络和人工智能技术讨论了其未来的展望和挑战。

关键词：人工智能卷积神经网络医学影像医学诊断综述

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AXIN2罕见变异与人类神经管畸形的相关性研究

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陆军军医大学学报 2023年第24期45卷 2503-2511页

作者：徐雪冰李建婷包怡华郭金王芳张霆杨淑艳潍坊医学院临床医学院儿科学教研室山东潍坊261053 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030001 首都儿科研究所生化免疫研究室北京100020

目的探索AXIN2基因变异与神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生的相关性。方法收集2004年6月-2013年12月山西省9家医院引产的100例NTDs胎儿肌肉组织样本,对其全基因组测序结果中的AXIN2基因的变异进行生物信息学分析,在相应的样本... 详细信息

目的探索AXIN2基因变异与神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生的相关性。方法收集2004年6月-2013年12月山西省9家医院引产的100例NTDs胎儿肌肉组织样本,对其全基因组测序结果中的AXIN2基因的变异进行生物信息学分析,在相应的样本中利用Sanger测序证实变异结果。在NE-4C细胞系中转染AXIN2野生型及AXIN2变异型质粒,利用免疫荧光和蛋白免疫印迹实验进行基因功能验证,对携带AXIN2变异的人NTDs样本进行分析。结果在100例NTDs样本中发现AXIN2基因上有5种变异,对其中3种变异[c.959A>T(p.D320V)、c.1250C>T(p.A417V)和c.1634G>A(p.G545E)]进行功能验证。细胞蛋白免疫印迹实验表明,D320V(P<0.05)和G545E(P<0.001)变异下调AXIN2蛋白表达,但3种变异均不影响β-catenin蛋白表达水平;免疫荧光实验表明,3种变异不影响AXIN2蛋白的亚细胞定位。在携带D320V及G545E变异的NTDs胚胎肌肉组织中,AXIN2的蛋白表达水平显著低于对照[D320V(P<0.05),G545E(P<0.01)]。结论NTDs样本中鉴定到的AXIN2变异D320V及G545E下调AXIN2蛋白表达量,可能通过引起Wnt信号通路异常激活而导致神经管畸形的发生。

关键词：神经管畸形 AXIN2 遗传变异 Wnt信号通路

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