检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2022年第12期49卷 5321-5330页

作者：陈兆芳张维娜孟勇刁德睿李骁原武有聪大理大学基础医学院病原生物学综合实验室云南大理671000 大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

葡萄球菌生物膜引起的持续性感染及耐药性问题一直是临床治疗的难题,围绕生物膜形成分子机制的研究成为防治葡萄球菌生物膜相关感染的关键。建立葡萄球菌感染动物模型有利于研究体内生物膜形成、扩散、致病机制及药物的体内抗生物膜效... 详细信息

葡萄球菌生物膜引起的持续性感染及耐药性问题一直是临床治疗的难题,围绕生物膜形成分子机制的研究成为防治葡萄球菌生物膜相关感染的关键。建立葡萄球菌感染动物模型有利于研究体内生物膜形成、扩散、致病机制及药物的体内抗生物膜效果评估等。然而,动物体内生物膜形成的影响因素多,如动物种类、植入材料、接种部位、感染剂量、观察时间及评估方法等均会影响体内生物膜形成。结合本课题研究,系统地总结了近40年来葡萄球菌生物膜感染动物模型,重点综述动物模型的建立方法、适用范围及优缺点,为葡萄球菌生物膜感染的防治提供理论依据。

关键词：生物膜感染模型葡萄球菌

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IL-15/NKG2D轴参与CD8^(+)T细胞旁路激活在病毒感染性疾病中的作用研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第12期38卷 1138-1142页

作者：张希越王萌张宇丝唐康张春梅庄然金伯泉张赟马樱延安大学基础医学院病原生物学教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

近年来研究发现机体免疫系统中CD8^(+)T细胞可在细胞因子诱导下,通过T细胞受体(TCR)非依赖的方式被活化,这种活化方式被称为旁路激活。参与CD8^(+)T细胞旁路激活的可能途径之一是由白细胞介素15(IL-15)介导并通过自然杀伤细胞2组成员D(N... 详细信息

近年来研究发现机体免疫系统中CD8^(+)T细胞可在细胞因子诱导下,通过T细胞受体(TCR)非依赖的方式被活化,这种活化方式被称为旁路激活。参与CD8^(+)T细胞旁路激活的可能途径之一是由白细胞介素15(IL-15)介导并通过自然杀伤细胞2组成员D(NKG2D)激活记忆性CD8^(+)T细胞发挥杀伤功能,被称为“固有样细胞毒作用”。目前发现IL-15/NKG2D轴可通过旁路激活CD8^(+)T细胞参与急性甲型肝炎、丙型肝炎和获得性免疫缺陷综合征等多种病毒感染性疾病的发病过程,研究IL-15/NKG2D轴参与介导CD8^(+)T细胞旁路激活的作用及分子机制是阐明多种感染性疾病免疫发病机制的重要方向之一。

关键词： CD8^(+)T细胞旁路激活 IL-15 NKG2D 免疫记忆性病毒感染性疾病综述

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数字化赋能在病原生物学教学改革中的实践

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基础医学教育 2024年第10期26卷 875-880页

作者：杨权邱怀娜黄俊马长玲广州医科大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室广州511436

随着信息技术的飞速发展,数字化教育已成为推动医学教育改革的重要力量。文章基于病原生物学课程建设的实际案例,探讨了数字化赋能在教学改革中的实践与成效。通过整合医学微生物学与人体寄生虫学内容,构建线上线下混合式教学模式,引入... 详细信息

随着信息技术的飞速发展,数字化教育已成为推动医学教育改革的重要力量。文章基于病原生物学课程建设的实际案例,探讨了数字化赋能在教学改革中的实践与成效。通过整合医学微生物学与人体寄生虫学内容,构建线上线下混合式教学模式,引入虚拟仿真实验、在线数字人云平台等现代教学技术,不仅丰富了教学资源,还显著提升了教学质量与学生综合素质。研究结果表明,数字化赋能有效促进了教学内容的深化、学生主体性的发挥、科研与教学的融合以及课程思政的深入实施,对培养具有创新精神和社会责任感的医学人才具有重要意义。

关键词：病原生物学教学改革课程建设考核方式教学实践

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白纹伊蚊唾液蛋白Alb-AG5-3的基因特征分析及真核表达

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中国病原生物学杂志 2023年第9期18卷 1039-1046页

作者：高敏吴家红程金芝张霞牟小会聂映彭哲慧李志强赵久刚商正玲刘磊蓝静刘红美贵州医科大学生物与工程学院/健康医药现代产业学院生物技术教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学基础医学院免疫学教研室

目的初探白纹伊蚊唾液蛋白Antigen5-3(Alb-AG5-3)的结构与功能特征,并采用果蝇S2真核表达体系表达Alb-AG5-3。方法采取同源比对的方式,从NCBI数据库中钓取Antigen5-3序列,根据白纹伊蚊分泌蛋白Antigen5-3基因参考序列(GenBank:AY82610... 详细信息

目的初探白纹伊蚊唾液蛋白Antigen5-3(Alb-AG5-3)的结构与功能特征,并采用果蝇S2真核表达体系表达Alb-AG5-3。方法采取同源比对的方式,从NCBI数据库中钓取Antigen5-3序列,根据白纹伊蚊分泌蛋白Antigen5-3基因参考序列(GenBank:AY826105.1)设计特异性引物,从白纹伊蚊安顺株中扩增基因全长。经序列比对后利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Expasy)以及生物信息学在线软件SignalP、TMHMM、SOPMA、SWISS-MODEL、AlphaFold等对该蛋白进行生物信息学分析。Trizol法提取白纹伊蚊雌蚊与雄蚊整蚊以及吸血前后雌蚊唾液腺RNA,qRT-PCR检测Alb-AG5-3在RNA相对表达量;以白纹伊蚊整蚊cDNA为模板,特异性扩增除信号肽外的Alb-AG5-3编码区,PCR产物经切胶回收纯化后与昆虫真核表达载体pMT/BiP/V5连接,构建真核重组质粒pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3。随后转入果蝇S2细胞中,500μmol/L CuSO4诱导重组蛋白Alb-AG5-3的表达。收集上清,采用Western blot鉴定V5表达标签,镍柱亲和层析纯化重组蛋白Alb-AG5-3。结果生物信息学分析该基因CDS(Coding sequence)区扩增全长为768 bp,编码255个氨基酸,二、三级结构预测以无规则卷曲和a-螺旋为主,具CAP超家族经典的PR-1结构域,该基因编码的蛋白是一种强亲水性(GRAVY:-0.864)的富含半胱氨酸的分泌蛋白。Alb-AG5-3 mRNA在雌蚊中表达量高于雄蚊且吸血后的表达量显著下调。成功构建了白纹伊蚊唾液蛋白pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3真核表达质粒并通过果蝇S2表达体系表达出真核蛋白,镍柱亲和纯化后的Alb-AG5-3经Western blot检测能被V5标签蛋白抗体识别。结论成功构建白纹伊蚊Alb-AG5-3真核质粒并在果蝇S2细胞中表达真核蛋白Alb-AG5-3,镍柱亲和纯化后获得单一的Alb-AG5-3蛋白以备后续分析。

关键词：白纹伊蚊唾液腺 Alb-AG5-3蛋白真核表达

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鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ1受体结合蛋白gp37的克隆表达

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中国病原生物学杂志 2023年第7期18卷 799-802,807页

作者：王小亭张向前张改王书伟李振江陈松建刘肖李亚辉王山梅王中全靳静河南省医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室河南郑州451193 惠州市第二妇幼保健院新生儿疾病筛查中心河南省人民医院检验科郑州大学基础医学院病原生物学教研室

目的为进一步了解噬菌体与宿主菌之间的相互作用机制,对鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ1受体结合蛋白gp37进行克隆表达。方法原核表达噬菌体ZZ1重组受体结合蛋白gp37,从分子质量、抗原性以及对ZZ1吸附竞争干扰的功能等对表达的重组受体结合蛋白g... 详细信息

目的为进一步了解噬菌体与宿主菌之间的相互作用机制,对鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ1受体结合蛋白gp37进行克隆表达。方法原核表达噬菌体ZZ1重组受体结合蛋白gp37,从分子质量、抗原性以及对ZZ1吸附竞争干扰的功能等对表达的重组受体结合蛋白gp37进行鉴定。结果PCR扩增ZZ1gp37基因后,成功诱导表达了含6×His标签的ZZ1重组受体结合蛋白gp37,SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量约为140×10^(3);使用0.5 mmol/L IPTG 16℃诱导过夜较37℃诱导4 h,蛋白可溶性表达增多;Western blot显示纯化蛋白可分别被his标签抗体和小鼠抗ZZ1多克隆抗体识别;竞争吸附试验显示,在重组ZZ1gp37蛋白存在的情况下,ZZ1对鲍曼不动杆菌AB09V的吸附效率与对照组的63.5%相比下降39.5%。结论成功表达了噬菌体ZZ1的重组受体结合蛋白gp37,蛋白的分子质量、反应原性以及对ZZ1吸附的竞争干扰作用均符合预期,为噬菌体ZZ1与宿主菌相互作用机制研究奠定了基础。

关键词：鲍曼不动杆菌噬菌体噬菌体受体结合蛋白尾丝蛋白

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人5-脂氧合酶重组蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备

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医学理论与实践 2024年第11期37卷 1805-1807,1817页

作者：王晓玲郭明飞史铁伟高丽枫王文涛赤峰学院基础医学院病原生物学与免疫学教研室内蒙古自治区赤峰市024000

目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体。方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pET30a(+)质粒中,重组质粒pET30a-... 详细信息

目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体。方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pET30a(+)质粒中,重组质粒pET30a-5LO△112转化大肠杆菌Rosetta(DE3),培养至OD_(600)为0.4时加入IPTG以诱导5LO△112重组蛋白表达,目的蛋白经纯化后免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体。结果:使用BugBuster蛋白提取试剂裂解细菌并获得纯度较高的包涵体,包涵体用含6mol/L盐酸胍的溶液变性溶解,再经Ni-NTA agarose亲和纯化得到高纯度的5LO△112重组蛋白。用该蛋白免疫新西兰大白兔获得5-LO的特异性抗体,该抗体的效价为1∶51200。结论:使用6mol/L盐酸胍溶解包涵体蛋白结合Ni-NTA agarose亲和纯化的方法成功获得了纯度较高的5LO△112重组蛋白,并用此蛋白制备了高效价的多克隆抗体。

关键词：人5-脂氧合酶包涵体蛋白亲和纯化多克隆抗体制备

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案例教学法在临床医学专业医学微生物学教学中的应用

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中国继续医学教育 2024年第12期16卷 6-9页

作者：卢颖张轶博杨宝玲张佩田晶锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院免疫学教研室辽宁锦州121001

医学微生物学是医学院校重要的专业基础课,其教学内容繁杂孤立抽象,教师授课过程中面临学生普遍学习动力不足,教学效果欠佳的困境。为提高授课质量,使学生扎实地掌握本学科专业知识,培养临床思维能力,作为传统教学模式的补充,锦州医科... 详细信息

医学微生物学是医学院校重要的专业基础课,其教学内容繁杂孤立抽象,教师授课过程中面临学生普遍学习动力不足,教学效果欠佳的困境。为提高授课质量,使学生扎实地掌握本学科专业知识,培养临床思维能力,作为传统教学模式的补充,锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室以临床医学专业本科生为研究对象,通过演绎式、启发研讨式和小组讨论式3种模式实施了案例教学法,并从学生的课堂表现、课后反馈和调查问卷3个方面对教学效果进行了评估,实践证明该教学模式能提高学生参与度和活跃度,增强自主学习能力,加深学生对教学内容的理解和记忆,学生的分析解决临床问题、团队协作能力和沟通表达能力得到了锻炼。案例教学法应用于临床医学专业医学微生物学教学能提高教学满意度及授课质量,拉近基础与临床实践的距离。

关键词：医学微生物学教学模式案例教学自主学习教学改革临床医学

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基于“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛的医学基础类创新人才培养模式

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继续医学教育 2025年第1期39卷 37-40页

作者：孙芬芬孔德龙汤仁仙潘伟徐州医科大学基础医学国家级实验教学示范中心江苏徐州221004 徐州医科大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004

“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛是新时期下深化大学生素质教育的重要平台,对于培育青年创新人才具有显著成效,其因在中国大学生科技创新与创业领域的卓越贡献,被誉为科技创新创业的“奥林匹克”盛事。文章对医学生参加“挑... 详细信息

“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛是新时期下深化大学生素质教育的重要平台,对于培育青年创新人才具有显著成效,其因在中国大学生科技创新与创业领域的卓越贡献,被誉为科技创新创业的“奥林匹克”盛事。文章对医学生参加“挑战杯”竞赛的重要性进行了分析,并以徐州医科大学为案例,讨论了依托“挑战杯”的医学基础类创新人才培养策略;并通过“中国流行弓形虫株致认知障碍及其药物研究”这一创新案例,证实了“挑战杯”在推动创新人才培养方面的有效性,以及徐州医科大学利用“挑战杯”等竞赛的创新人才培养模式的成效。

关键词：挑战杯医学生大学生科创活动科技创新人才培养素质教育

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线上线下混合式教学方法在医学微生物学教学中的探索

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沈阳医学院学报 2024年第1期26卷 104-107页

作者：孙冶刘光焱杨彪肖纯凌车雨辰李新鸣李舒音沈阳医学院基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110034 沈阳医学院基础医学院研究生院辽宁沈阳110034 沈阳医学院基础医学院免疫学教研室辽宁沈阳110034 沈阳医学院基础医学院人事处辽宁沈阳110034

目的:优化教学方法、调整教学内容及改革考核模式,提高医学微生物学的教学质量。方法:将同专业的2020级和2021级学生分为对照组和教改组,对照组采用传统教学法,教改组采用“线上+线下”混合式教学模式,融入线上学习资源和课程思政到理... 详细信息

目的:优化教学方法、调整教学内容及改革考核模式,提高医学微生物学的教学质量。方法:将同专业的2020级和2021级学生分为对照组和教改组,对照组采用传统教学法,教改组采用“线上+线下”混合式教学模式,融入线上学习资源和课程思政到理论内容,全过程考核体系联合应用到教学方法。采用全过程考核成绩和问卷调查相结合的形式进行教学质量评价。结果:通过考试成绩分析,与对照组相比,教改组的学生成绩显著提高(P<0.01);问卷调查结果显示,学生对线上线下混合式教学模式满意度达到97.5%,融入微生物热点问题和课程思政显著启发了学生学习兴趣,有更多的学生未来想从事微生物相关领域的工作。结论:实践结果表明,优化教学方法、调整教学内容及改革考核模式,可以激发学生的学习兴趣,提高学生的自主学习能力,提升教学质量。

关键词：混合式教学线上教学雨课堂课程优化教学改革

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白纹伊蚊唾液源34ku-1基因的克隆表达及鉴定

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中国病原生物学杂志 2022年第3期17卷 308-313页

作者：陈素素吴家红程金芝赵久刚商正玲聂映牟荣贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学基础医学院免疫学教研室

目的克隆表达白纹伊蚊唾液腺34ku-1蛋白(Aalb_34 ku-1),并制备鼠抗34ku-1多克隆抗体,用于蚊唾液34ku-1蛋白的检测。方法根据白纹伊蚊罗马株(GenBank:AY826117.1)34ku去除信号肽后的基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR技术从白纹伊蚊安... 详细信息

目的克隆表达白纹伊蚊唾液腺34ku-1蛋白(Aalb_34 ku-1),并制备鼠抗34ku-1多克隆抗体,用于蚊唾液34ku-1蛋白的检测。方法根据白纹伊蚊罗马株(GenBank:AY826117.1)34ku去除信号肽后的基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR技术从白纹伊蚊安顺株雌蚊体内扩增获得34ku-1基因。利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)、瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASy)等对该蛋白进行生物信息学分析。将该基因构建到原核表达质粒pET-32a(+)中,转染大肠埃希菌BL21(DE3)后经异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析表达结果。镍柱纯化34ku-1重组蛋白,采用Western blot验证纯化蛋白的免疫反应性。用纯化的34ku-1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫血清,采用间接ELISA法检测血清抗体效价,采用Western blot方法对抗体的特异性进行鉴定。收集雌蚊唾液,采用Western blot方法用制备的多克隆抗体检测蚊唾液34ku-1蛋白。结果成功克隆获得34ku-1基因,生物信息学分析该基因全长888 bp,编码295个氨基酸。编码蛋白的理论分子质量单位为33.6 ku,等电点为5.54。重组质粒pET-32a(+)-34ku-1经PCR、双酶切及测序验证构建正确。经IPTG诱导的BL21重组菌表达产物主要以包涵体形式存在。经亲和层析法获得高纯度的34ku-1重组蛋白,浓度为0.71 mg/mL。Western blot显示重组蛋白可被抗6-His tag抗体识别,制备的鼠抗34ku-1血清抗体效价为1∶625000,且特异性良好,用34ku-1多克隆抗体Western blot可检测到蚊虫唾液中的34ku-1蛋白。结论成功克隆并表达了白纹伊蚊34ku-1原核蛋白,制备了高效价、高特异性的鼠抗34ku-1多克隆抗体,应用该抗体可检测到雌蚊唾液中的34ku-1蛋白。

关键词：白纹伊蚊唾液腺 34ku-1重组蛋白原核表达多克隆抗体

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