检索结果-内蒙古大学图书馆

医学研究生电镜取材实验课教学探讨

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解剖学杂志 2016年第1期39卷 125-126页

作者：董富兴于红丽刘亚萍董红燕姚瑞芹徐州医学院神经生物学研究中心徐州221004 徐州医学院形态学实验教学中心徐州221004 徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室徐州221004

在进行电镜科研样品及医院电镜外检标本观察时，常发现最终得不到理想的电镜超微结构图片，究其原因大都是电镜样品取材时出了问题，送检者没有经过规范的电镜取材培训，操作不当，最终导致电镜观察结果不理想甚至失败。

关键词：电镜超微结构实验课教学医学研究生取材电镜样品操作不当电镜观察

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诱导心脏肌成纤维细胞向心肌样细胞转分化的miRNA

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中国组织工程研究 2013年第45期17卷 7924-7931页

作者：张成章少中张亚洲张国恒王韵茹董红燕张中明徐州医学院心血管病研究所江苏省徐州市221002 徐州医学院徐州医学院生物学教研室神经生物学研究中心实验室江苏省徐州市221002

背景:微小RNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA,miRNA参与调控基因表达,在促进前体细胞增殖与分化中发挥了重要的作用。miRNA是否可促进前体细胞向心肌细胞的分化则鲜见报道。目的:验证转入特定miRNA(miRNA-1、miRNA-499)诱导新生小鼠心脏... 详细信息

背景:微小RNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA,miRNA参与调控基因表达,在促进前体细胞增殖与分化中发挥了重要的作用。miRNA是否可促进前体细胞向心肌细胞的分化则鲜见报道。目的:验证转入特定miRNA(miRNA-1、miRNA-499)诱导新生小鼠心脏肌成纤维细胞转分化为心肌样细胞的可行性。方法:体外培养新生小鼠心脏成纤维细胞,常氧培养传代至P2;37℃低氧(体积分数3%O2)培养48 h;免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞特异性标记物波形蛋白的表达,免疫荧光染色、流式细胞技术检测心脏成纤维细胞向心脏肌成纤维细胞表型转化的标记物α-平滑肌激动蛋白的表达。实验分为4组:miRNA-1转染组、miRNA-499转染组、miRNA-1/miRNA-499共转染组及空白对照组,采用miRNA芯片检测心脏肌成纤维细胞与心肌细胞中微小RNA的表达差异;real-time qPCR方法验证芯片检测结果。结果与结论:心脏肌成纤维细胞中过表达miR-1、miR-499后,心脏发育不同阶段特异性因子发生不同程度的表达变化,与空白对照组相比,其余3组GATA4、Tbx5、Mef-2c、α-MHC表达明显增高,Mesp1、Isl1表达均无显著变化。结果表明,特定miRNAs可诱导心脏肌成纤维细胞表达心肌细胞特异性性标志物,具备诱导心脏肌成纤维细胞向心肌细胞直接转分化的潜力。

关键词：干细胞干细胞培养与分化 miR-1 miR-499 微小RNA 心脏成纤维细胞心脏肌成纤维细胞转分化心肌细胞波形蛋白 α-平滑肌激动蛋白国家自然科学基金干细胞图片文章

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新生大鼠海马神经干细胞的离体培养及细胞连接的超微结构观察

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重庆医学 2013年第11期42卷 1201-1203,1206页

作者：董富兴胡莹莹刘亚萍于红丽赵玉段现花董红燕徐铁军徐州医学院神经生物学研究中心电镜室江苏徐州221004 徐州医学院人体解剖与组织胚胎学教研室江苏徐州221004 徐州医学院形态学实验教学中心江苏徐州221004 伊利诺依理工大学生命科学学院美国芝加哥伊利诺依60616

目的观察体外培养的新生大鼠海马神经干细胞球的超微结构特点。方法取处于指数期的原代培养7d的新生大鼠海马神经干细胞,常规制备透射电镜样品后,用日立H-600透射电镜观察并摄片。结果光镜下神经干细胞呈克隆球散在悬浮于培养基中,Nesti... 详细信息

目的观察体外培养的新生大鼠海马神经干细胞球的超微结构特点。方法取处于指数期的原代培养7d的新生大鼠海马神经干细胞,常规制备透射电镜样品后,用日立H-600透射电镜观察并摄片。结果光镜下神经干细胞呈克隆球散在悬浮于培养基中,Nestin免疫荧光阳性;电镜下观察到神经干细胞相互间排列比较松散、核浆比例高,细胞间胞膜增厚,形成特化的结构,有的胞膜上可见胞吞/胞吐小泡。结论体外培养的新生大鼠海马神经干细胞间的细胞连接有间隙连接样结构,并可出现胞吞/胞吐功能,提示细胞间可进行相互交流,传递化学递质或电兴奋活动。

关键词：海马神经干细胞细胞连接超微结构

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Ro25-6981对脑缺血-再灌注后神经发生的影响

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江苏医药 2012年第6期38卷 648-650,F0003页

作者：董富兴刘亚萍徐铁军徐州医学院神经生物学研究中心江苏省221002 徐州医学院形态学实验教学中心江苏省221002 徐州医学院人体解剖与神经生物学教研室江苏省221002

目的探讨NR2B特异性拮抗剂Ro25-6981对大鼠脑缺血-再灌注(I-R)后海马齿状回颗粒下层(SGZ)神经发生的作用。方法 64只SD大鼠随机均分为对照组(A组)、假手术组(B组)、脑I-R组(C组)和Ro25-6981 0.6、1.2、2.4、4.8和9.6μg/kg组(分别为D1... 详细信息

目的探讨NR2B特异性拮抗剂Ro25-6981对大鼠脑缺血-再灌注(I-R)后海马齿状回颗粒下层(SGZ)神经发生的作用。方法 64只SD大鼠随机均分为对照组(A组)、假手术组(B组)、脑I-R组(C组)和Ro25-6981 0.6、1.2、2.4、4.8和9.6μg/kg组(分别为D1、D2、D3、D4和D5组)。术后7d取脑,各组大鼠处死前2h侧脑室注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),免疫组织化学染色观察SGZ中BrdU阳性细胞变化。结果与A、B组相比,C组SGZ的BrdU阳性细胞数明显增加(P<0.01);而D1、D2、D3、D4和D5组BrdU阳性细胞数均较C组减少(P<0.05或P<0.01)。结论Ro25-6981能抑制大鼠脑I-R后海马齿状回SGZ神经发生。

关键词： Ro25-6981 脑缺血-再灌注神经发生

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心肌微环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化(英文)

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中国组织工程研究 2012年第32期16卷 5920-5925页

作者：胡波高攀马志峰张志峰张中明袁红花董红燕徐州医学院附属医院胸心外科江苏省徐州市221006 商丘市第一人民医院心血管外科河南省商丘市476100 徐州医学院神经生物学研究中心实验室/生物学教研室江苏省徐州市221006

背景:骨形态发生蛋白、Wnt、Notch、FGF及Hedgehog等信号通路是否参与诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化还不清楚。目的:探讨心肌微环境中,不同刺激因素诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞及其分化的机制。方法:利用Transwell培... 详细信息

背景:骨形态发生蛋白、Wnt、Notch、FGF及Hedgehog等信号通路是否参与诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化还不清楚。目的:探讨心肌微环境中,不同刺激因素诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞及其分化的机制。方法:利用Transwell培养装置建立心肌微环境,骨髓间充质干细胞在此环境中培养并加入Wnt11、骨形态发生蛋白抑制剂诱导其向心肌细胞分化;应用RT-PCR、Western blot方法检测骨形态发生蛋白、Wnt、Notch、FGF和Hedgehog信号通路关键信号分子的表达。同时检测心肌特异性转录因子(Nkx2.5、GATA4、Mef2c)和成熟心肌细胞特异性基因(cTnI、ANP、α-MHC、β-MHC)的表达。结果与结论:骨髓间充质干细胞经过与大鼠心肌细胞共培养诱导后,Wnt、骨形态发生蛋白、Notch、Hedgehog信号通路关键信号分子的表达较未诱导的阴性对照组明显升高(P<0.01)。在骨髓间充质干细胞与大鼠心肌细胞共培养体系中加入骨形态发生蛋白信号通路的抑制剂Noggin,心肌特异性转录因子或结构蛋白的表达明显降低(P<0.01)。提示心肌细胞构成的微环境可以诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞;Wnt、骨形态发生蛋白、Notch、FGF、Hedgehog信号通路共同参与了诱导分化过程。

关键词：心肌微环境骨髓间充质干细胞 Wnt11 骨形态发生蛋白2 诱导分化心肌样细胞

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MN9D多巴胺能细胞损伤模型的建立

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徐州医学院学报 2010年第5期30卷 301-304页

作者：钮洪艳张学文刘淮东高殿帅徐州医学院附属淮安市第二人民医院中心实验室江苏淮安223002 徐州医学院神经生物学研究中心江苏徐州221002

目的建立离体多巴胺(dopamin,DA)能神经细胞系MN9D细胞损伤模型。方法离体细胞培养条件下,于培养液中加入不同浓度6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)作用于MN9D细胞30 min。24 h后,MTT比色法检测MN9D细胞的存活率、Hoechst 33258... 详细信息

目的建立离体多巴胺(dopamin,DA)能神经细胞系MN9D细胞损伤模型。方法离体细胞培养条件下,于培养液中加入不同浓度6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)作用于MN9D细胞30 min。24 h后,MTT比色法检测MN9D细胞的存活率、Hoechst 33258核染色和流式细胞仪检测MN9D细胞的凋亡变化。结果6-OHDA以浓度依赖性的方式引起MN9D细胞的凋亡,导致细胞存活率降低。200μmol/L浓度的6-OH-DA作用30 min、培养24 h后,MN9D细胞的存活率降低至68.8%左右,凋亡率增高至约37.8%。结论6-OH-DA能够引起MN9D细胞的存活率降低,而凋亡率增高,产生类似帕金森病时的DA能神经细胞损伤的表现。

关键词：多巴胺能神经细胞 6-羟基多巴胺 MN9D细胞帕金森病

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电刺激小脑顶核对大鼠胃缺血-再灌注损伤的神经调控

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生理学报 2009年第5期61卷 451-457页

作者：蒋信伟杜东书张建福张咏梅周晓燕马小波徐州医学院机能学实验室徐州医学院生理学教研室徐州医学院神经生物学研究中心

本实验采用夹闭大鼠腹腔动脉30min后松开动脉夹血流复灌1h的方法建立胃缺血-再灌注(gastric ischemia-reperfusion,GI-R)损伤模型,在此模型基础上观察电刺激小脑顶核(fastigial nucleus,FN)对大鼠GI-R损伤的影响,并对其可能的神经调控... 详细信息

本实验采用夹闭大鼠腹腔动脉30min后松开动脉夹血流复灌1h的方法建立胃缺血-再灌注(gastric ischemia-reperfusion,GI-R)损伤模型,在此模型基础上观察电刺激小脑顶核(fastigial nucleus,FN)对大鼠GI-R损伤的影响,并对其可能的神经调控机制进行初步的探讨。胃黏膜损伤检测显示,电刺激小脑FN使GI-R损伤显著减轻,且有强度-效应依赖关系;另外,电刺激小脑FN使胃黏膜细胞的凋亡率降低。预先化学损毁小脑FN,则可消除电刺激对GI-R损伤的减轻作用。内脏大神经放电检测分析显示,电刺激小脑FN使内脏大神经放电频率减少和放电幅度降低,而化学损毁双侧下丘脑外侧区(lateral hypothalamic area,LHA),再电刺激FN,内脏大神经的放电频率、幅度与刺激FN前相比都无明显变化。剪断双侧内脏大神经,再电刺激小脑FN,同样可使GI-R损伤减轻。化学损毁双侧LHA能取消电刺激小脑FN对GI-R损伤的减轻作用。氧化应激方面,电刺激小脑FN使缺血-再灌注的胃黏膜内超氧化物歧化酶(SOD)活性升高、丙二醛(MDA)含量降低。以上结果提示:电刺激小脑FN对大鼠缺血-再灌注的胃黏膜具有保护作用,小脑FN可能是对大鼠GI-R损伤具有调控作用的中枢部位,其神经机制可能是通过LHA介导,降低了交感神经的兴奋性实现的,此外可能还与其抗氧化作用有关。

关键词：大鼠小脑顶核下丘脑外侧区胃缺血-再灌注内脏大神经凋亡

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全脑常规照射对血脑屏障功能影响的实验研究

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中华放射医学与防护杂志 2008年第3期28卷 245-249页

作者：曹远东章龙珍陈勇董红燕于红丽于常州东南大学附属中大医院肿瘤中心南京210009 徐州医学院肿瘤防治研究所放射治疗科徐州医学院神经生物学研究中心实验室徐州医学院麻醉学中心实验室

目的探讨全脑常规照射对大鼠血脑屏障（BBB）功能的影响。方法采用^60Coγ射线对SD大鼠进行不同剂量的全脑常规外照射，照射后16h，静脉给予甲氨蝶呤（MTX）后监测血液及脑脊液（CSF）中的MTX浓度；同时镧示踪法电镜观察大鼠新鲜脑组织... 详细信息

目的探讨全脑常规照射对大鼠血脑屏障（BBB）功能的影响。方法采用^60Coγ射线对SD大鼠进行不同剂量的全脑常规外照射，照射后16h，静脉给予甲氨蝶呤（MTX）后监测血液及脑脊液（CSF）中的MTX浓度；同时镧示踪法电镜观察大鼠新鲜脑组织标本。结果①CSF中MTX浓度在10Gy组与对照组、30与40Gy组比较差异无统计学意义（P〉0．05），其余各组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。②对照组镧颗粒仅局限分布在血管腔内；10Gy组紧密连接处见镧颗粒沉积；20Gy组镧颗粒弥漫性地分布于神经细胞间隙；30Gy组镧颗粒进入神经细胞内，并分布于线粒体、内质网等细胞器的表面；40Gy组镧颗粒弥漫分布于脑组织细胞间和细胞内，可见毛细血管内皮细胞及神经细胞失去正常形态，结构破坏。结论放射线具有增加BBB通透性的作用；照射30Gy后BBB通透性达最高，提示全脑常规照射30Gy后可能为最佳化疗时机；40Gy后不宜继续进行全脑照射，否则会导致不可逆性放射性脑损伤的发生，对临床治疗可能有指导意义。

关键词：放射治疗血脑屏障甲氨蝶呤超微结构药物浓度

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镧示踪法观察常规分割外照射后血脑屏障的超微结构改变

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国际放射医学核医学杂志 2007年第6期31卷 373-376页

作者：章龙珍曹远东董红燕于红丽庄明徐州医学院附属医院放射治疗科 221002 东南大学附属医院放疗科南京210009 徐州医学院神经生物学研究中心实验室 221000 徐州医学院实验动物中心 221000

目的观察Sprague—Dawley（SD）大鼠全脑常规外照射后血脑屏障（BBB）的超微结构变化特点及其规律。方法SD大鼠20只，分为5个实验组，^60Coγ射线全脑常规分割外照射，各组受照后16h以硝酸镧为示踪剂，用透射电镜观察BBB超微结构变化。... 详细信息

目的观察Sprague—Dawley（SD）大鼠全脑常规外照射后血脑屏障（BBB）的超微结构变化特点及其规律。方法SD大鼠20只，分为5个实验组，^60Coγ射线全脑常规分割外照射，各组受照后16h以硝酸镧为示踪剂，用透射电镜观察BBB超微结构变化。结果对照组镧颗粒分布在血管腔内，BBB结构完整；10Gy组少量镧颗粒通过开放的毛细血管内皮细胞间的紧密连接，沉积于基底膜，但未入脑组织；20Gy组见大部分紧密连接开放，镧颗粒弥漫性分布于神经细胞间隙，细胞内无镧颗粒沉积；30Gy神经细胞质内见大量、核内见少量镧颗粒沉积；40Gy组部分毛细血管内皮细胞及神经细胞失去正常形态，结构破坏，大量镧颗粒沉积在细胞核内、外。结论放射线具有降低及破坏BBB功能的作用，且与照射剂量呈正相关；30Gy后BBB完全开放，此时进行化疗为最佳时机；照射40Gy后不易再全脑追加剂量，否则会导致不可逆性放射性脑损伤。

关键词：血脑屏障放射疗法硝酸镧

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全脑常规照射开放血脑屏障动物模型的建立

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中华放射医学与防护杂志 2006年第2期26卷 148-150页

作者：章龙珍曹远东唐天友陈勇董红燕于红丽庄明徐州医学院肿瘤研究所放射治疗科 221002 徐州医学院肿瘤研究所神经生物学研究中心实验室 221002 徐州医学院肿瘤研究所实验动物中心 221002

目的建立全脑常规照射开放血脑屏障(blood brainbarrier,BBB)的鼠动物模型。方法100只SD大鼠随机分为5组,依次为假照射组、10、20、30和40Gy组,每组20只,60Coγ射线全脑常规照射,2Gy次,5次周,每日观察大鼠饮食、自主活动、并记录照射区... 详细信息

目的建立全脑常规照射开放血脑屏障(blood brainbarrier,BBB)的鼠动物模型。方法100只SD大鼠随机分为5组,依次为假照射组、10、20、30和40Gy组,每组20只,60Coγ射线全脑常规照射,2Gy次,5次周,每日观察大鼠饮食、自主活动、并记录照射区皮肤与毛发、体重及神经系统症状变化,照射后16h每组随机选取4例用镧示踪电镜化学技术观察大鼠BBB超微结构的变化。结果实验大鼠均未出现可评价的异常神经行为及体征;各组的饮食、自主活动、皮肤与毛发无可评价的异常改变;体重增加无统计学意义(P>0.05)。透射电镜观察显示照射后随照射剂量的增加出现BBB功能的改变,且与照射剂量呈正相关。结论该模型能较好地模拟临床放射治疗过程,易于操作,成功率高,是全脑常规照射后从病理生理学及分子生物学等方面研究BBB功能变化规律的良好模型。

关键词：放射治疗动物模型血脑屏障模型建立

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