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微生物学报 2025年第2期65卷 629-643页

作者：尚爽婕陈卫国张晓奎朱健鹏白松陈晓婷武有聪大理大学基础医学院病原生物学综合实验室云南大理大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理

【目的】探究VraSR通过CidA-LrgAB系统调控表皮葡萄球菌的生物学功能。【方法】构建重组质粒pKOR1-ΔlrgAB,并将其转化至表皮葡萄球菌SE1457ΔvraSR突变株中。通过同源重组技术,在ΔvraSR突变株上进一步敲除lrgAB基因。利用PCR、RT-PCR... 详细信息

【目的】探究VraSR通过CidA-LrgAB系统调控表皮葡萄球菌的生物学功能。【方法】构建重组质粒pKOR1-ΔlrgAB,并将其转化至表皮葡萄球菌SE1457ΔvraSR突变株中。通过同源重组技术,在ΔvraSR突变株上进一步敲除lrgAB基因。利用PCR、RT-PCR和测序技术鉴定表皮葡萄球菌ΔvraSR-lrgAB疑似突变株,并检测其生长特性、药物敏感性、自溶能力以及生物被膜形成能力。【结果】成功构建了表皮葡萄球菌ΔvraSR-lrgAB突变株。与表皮葡萄球菌SE1457、ΔvraSR和ΔlrgAB菌株相比,ΔvraSR-lrgAB突变株生长迟缓,特别是在25℃和40℃下尤为明显(P<0.001)。该突变株的药物敏感性增强(P<0.01),自溶能力显著增强(P<0.001),生物被膜形成能力降低(P<0.01)。【结论】VraSR可能部分通过LrgAB调控表皮葡萄球菌的生长、药物敏感性、自溶能力和生物被膜的形成。

关键词： VraSR LrgAB 同源重组表皮葡萄球菌

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细胞与分子免疫学杂志 2025年第2期41卷 97-104页

作者：杜文雅代禹美乐林芝马涛吴利先大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的miR-207被发现在自然杀伤(NK)细胞外泌体中表达,参与疾病进展,但暂无与结核病(TB)有关的研究。方法生物信息学方法预测并用双荧光素酶报告实验检测溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)是否与miR-207有靶向关系。使用脂质体转染法将实验分为四... 详细信息

目的miR-207被发现在自然杀伤(NK)细胞外泌体中表达,参与疾病进展,但暂无与结核病(TB)有关的研究。方法生物信息学方法预测并用双荧光素酶报告实验检测溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)是否与miR-207有靶向关系。使用脂质体转染法将实验分为四组(OP-LAMP2组:共转染miR-207 mimics和LAMP2过表达质粒;EP组:共转染mimics NC和空载质粒;siLAMP2组:转染siLAMP2;siLAMP2-NC组:转染siLAMP2-NC)。使用H37Ra感染Ana-1细胞建立结核感染模型。结核菌落形成单位计数评估LAMP2对胞内分枝杆菌负荷的影响以及对胞外残留分枝杆菌的清除作用。流式细胞术检测细胞总凋亡率。实时荧光定量PCR检测LAMP2、细胞凋亡基因、焦亡基因及自噬基因相对表达量。Western blot法检测LAMP2蛋白、细胞凋亡、焦亡、自噬蛋白的相对表达量。结果双荧光素酶报告实验检测显示miR-207与LAMP2存在靶向关系,实时荧光定量PCR、Western blot结果统计分析和显微镜下观察证明成功建立感染模型。菌落形成单位计数发现OP-LAMP2组的菌落数低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。流式细胞术检测发现OP-LAMP2组总凋亡率低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。实时荧光定量PCR及Western blot法检测发现对照组凋亡、焦亡相关蛋白和基因相对表达量趋势为OP-LAMP2低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。实时荧光定量PCR检测自噬正调节基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)和重组人自噬效应蛋白(Beclin1)在OP-LAMP2组相对表达量高于EP组,siLAMP2组低于siLAMP2-NC组,负调节自噬基因相对表达量与自噬正调节基因趋势相反。自噬相关蛋白相对表达量与自噬基因趋势一致。结论miR-207通过靶向自噬相关蛋白LAMP2促进巨噬细胞凋亡、细胞焦亡、抑制自噬,促进结核分枝杆菌(Mtb)的存活,为TB提供新的治疗方向。

关键词：结核分枝杆菌(Mtb) miR-207 LAMP2 自噬凋亡焦亡

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巨噬细胞来源外泌体抗肿瘤作用的研究进展

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中国生物制品学杂志 2025年第4期38卷 496-501,507页

作者：杜文雅代禹美(综述) 吴利先(审校) 大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

肿瘤是一种高度异质性的疾病,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)是肿瘤微环境中重要的免疫细胞,具有高度异质性及可塑性,肿瘤复发转移是导致癌症患者发病和死亡的重要原因。巨噬细胞来源的外泌体(macrophage-derived e... 详细信息

肿瘤是一种高度异质性的疾病,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)是肿瘤微环境中重要的免疫细胞,具有高度异质性及可塑性,肿瘤复发转移是导致癌症患者发病和死亡的重要原因。巨噬细胞来源的外泌体(macrophage-derived exosome,MDE)作为细胞间信号传递的信使,携带有母细胞的多种成分。大量研究表明,巨噬细胞的极化状态对肿瘤的进展转归发挥着调控作用,MDE与肿瘤的进展和巨噬细胞极化密切相关。MDE作为一种新的抗肿瘤策略,为肿瘤治疗提供了新的思路。本文对近年来工程化MDE在抗肿瘤方面的研究,以及M1和M2 MDE如何介导肿瘤的发生发展作一综述,以期为肿瘤治疗提供参考。

关键词：肿瘤巨噬细胞外泌体微小RNA

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沙参麦冬汤通过调控PI3K-AKT通路及JUN表达治疗食管癌

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皖南医学院学报 2025年第1期44卷 11-15页

作者：陈田田杨晶晶徐佳倩储博文陈冰董博翰余方流皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002

目的:采用网络药理学与实验验证探究沙参麦冬汤治疗食管癌的作用靶点与相关机制。方法:检索TCMSP和SymMap数据库获取沙参麦冬汤的化学成分与作用靶点,借助Gene Cards数据库获取食管癌相关作用靶点,运用Venny 2.1.0平台获取沙参麦冬汤复... 详细信息

目的:采用网络药理学与实验验证探究沙参麦冬汤治疗食管癌的作用靶点与相关机制。方法:检索TCMSP和SymMap数据库获取沙参麦冬汤的化学成分与作用靶点,借助Gene Cards数据库获取食管癌相关作用靶点,运用Venny 2.1.0平台获取沙参麦冬汤复方与食管癌疾病的交集靶点,利用STRING数据库和Cytoscape 3.9.1软件构建蛋白相互作用(PPI)网络,使用DAVID数据库进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。通过GEPIA 2.0对核心基因氨基末端激酶JUN进行免疫浸润分析。采用分子对接技术进行验证,建立食管癌小鼠移植瘤模型,药物干预4周后,观察小鼠肿瘤体积变化,采用qRT-PCR检测脾脏中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的mRNA表达水平。结果:沙参麦冬汤抑制食管癌小鼠肿瘤的生长(P<0.01);经数据分析得到沙参麦冬汤活性成分67个,对应靶点1190个,食管癌相关靶点446个,药物与疾病交集靶点56个,其中JUN为核心靶点。主要富集于PI3K-AKT信号通路。相关分子对接显示核心靶点与其所对应的活性成分均有较好的结合能力(结合能<-5 J/moL),核心基因JUN高表达与效应性的Treg细胞、耗竭性T细胞浸润均呈正相关(P<0.01);与模型组相比,PI3K、AKT的mRNA表达水平均降低(P<0.05)。结论:沙参麦冬汤对食管癌具有明显的治疗效果,其主要机制可能与抑制PI3K-AKT信号通路及JUN的表达并旁路激活机体抗肿瘤免疫密切相关。

关键词：沙参麦冬汤食管癌网络药理学磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B 氨基末端激酶

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以学生为中心的医学免疫学教学探索与实践

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基础医学教育 2025年第3期27卷 191-195页

作者：吴瑗米娜王欣赵汉宁赵祖国广东医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

医学免疫学是联系基础医学与临床医学的桥梁课程，为后续临床医学课程的学习夯实基础。文章针对课程教学中的痛点问题，探索“一心三环四融”的教学模式在医学免疫学教学中的应用。该教学模式以学生为中心，把BOPPPS模式贯穿课前、课中... 详细信息

医学免疫学是联系基础医学与临床医学的桥梁课程，为后续临床医学课程的学习夯实基础。文章针对课程教学中的痛点问题，探索“一心三环四融”的教学模式在医学免疫学教学中的应用。该教学模式以学生为中心，把BOPPPS模式贯穿课前、课中及课后三个环节中，在教学中结合对分课堂模式，实现线上与线下、理论与实践、基础与临床、课程与思政的深度融合，通过问卷调查和成绩分析等方法评估教学效果。结果显示：该教学模式有效提升了免疫学的教学质量，提高了学生自主学习能力，培养了临床思维能力和综合应用能力，有效实现了知识传授、能力培养及价值引领的一体化，进一步推动免疫学课程建设。

关键词：医学免疫学教学改革 BOPPPS 对分课堂以学生为中心

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结核分枝杆菌RpfB及RpfE蛋白的生物信息学分析

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微生物学杂志 2025年第1期45卷 106-116页

作者：杨雨婷杨国平王艳龚丽坤楚雄州中医医院检验科云南楚雄675000 楚雄州彝族医药研究院云南楚雄675000 大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

运用生物信息学方法预测RpfB和RpfE蛋白的生物学特性及抗原表位,并分析其作为新型结核疫苗候选抗原的潜力。从NCBI数据库中获取Rv1009、Rv2450c基因的碱基序列,从Uniprot数据库中获取Rv1009基因编码蛋白RpfB及Rv2450c基因编码蛋白RpfE... 详细信息

运用生物信息学方法预测RpfB和RpfE蛋白的生物学特性及抗原表位,并分析其作为新型结核疫苗候选抗原的潜力。从NCBI数据库中获取Rv1009、Rv2450c基因的碱基序列,从Uniprot数据库中获取Rv1009基因编码蛋白RpfB及Rv2450c基因编码蛋白RpfE的氨基酸序列,运用生物信息学分析软件ORFfinder、ProtParam、ProtScale、TMPRED、TMHMM、SignalP 5.0、NetNGlyc 1.0、YinOYang 1.2、NetPhos 3.1、STRING、SOPMA、SWISS-MODEL、DNAStar、SYFPEITHI、NetCTL 1.2及Net MHCII pan 4.0对RpfB及RpfE蛋白的理化性质、亲疏水性、结构、信号肽、糖基化/磷酸化位点、跨膜结构、互作蛋白及抗原表位进行分析。结果表明,Rv1009基因全长1089 bp,有5个开放阅读框,其编码蛋白RpfB由362个氨基酸组成,为含有信号肽的疏水性跨膜蛋白,其二级结构以无规则卷曲为主,该蛋白含有1个N-糖基化位点、29个磷酸化位点、8个优势CTL细胞抗原表位、14个优势Th细胞抗原表位及10个优势B细胞抗原表位;Rv2450c基因全长519 bp,有1个开放阅读框,其编码蛋白RpfE由172个氨基酸组成,为含有信号肽的亲水性蛋白,无跨膜结构,其二级结构以无规则卷曲为主,该蛋白含有2个N-糖基化位点、9个磷酸化位点、4个优势CTL细胞抗原表位、6个优势Th细胞抗原表位及7个优势B细胞抗原表位。RpfB及RpfE蛋白具有较好的免疫原性及多个优势T、B细胞抗原表位,可作为Mtb多肽疫苗研制的候选优势蛋白。

关键词：结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb) RpfB RpfE 生信分析抗原表位多肽疫苗

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HMGB1藉由NF-κB通路诱导肺癌细胞增殖并抑制免疫细胞功能

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中国免疫学杂志 2025年第3期41卷 628-633页

作者：王耀辉孟宇钱一可陈文利厉荣玉董博翰皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241000 皖南医学院生物化学教研室芜湖241000 皖南医学院药学院芜湖241000

目的:探究肺癌细胞HMGB1通过NF-κB通路影响肺癌细胞本身和免疫细胞功能的分子机制。方法:Western blot检测LLC细胞、Raw264.7细胞、小鼠脾细胞中的HMGB1表达,同时用甘草酸(GA)抑制肺癌细胞中HMGB1表达,制备低HMGB1的肿瘤细胞裂解物(TC... 详细信息

目的:探究肺癌细胞HMGB1通过NF-κB通路影响肺癌细胞本身和免疫细胞功能的分子机制。方法:Western blot检测LLC细胞、Raw264.7细胞、小鼠脾细胞中的HMGB1表达,同时用甘草酸(GA)抑制肺癌细胞中HMGB1表达,制备低HMGB1的肿瘤细胞裂解物(TCL);流式细胞术和CCK-8检测内源性HMGB1抑制或低HMGB1的TCL对肺癌细胞凋亡和增殖的影响;通过反复冻融的方法制备正常HMGB1的TCL或低HMGB1的TCL,然后用其干预Raw264.7细胞和小鼠脾细胞48 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡和CD69表达,并采用ELISA检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α和TNF-β的分泌;Western blot检测肺癌细胞或免疫细胞中NF-κB信号通路关键信号分子的蛋白表达。结果:HMGB1在LLC细胞、Raw264.7细胞、小鼠脾细胞中都有表达,其中,LLC细胞HMGB1的表达最高,并且30μg/ml的GA对LLC细胞中HMGB1表达的抑制效果最佳。LLC细胞内源性HMGB1可以促进细胞增殖。TCL中外源的HMGB1则诱导肺癌细胞凋亡,抑制免疫细胞活化增殖。肺癌细胞中内源性HMGB1的抑制会导致NF-κB信号通路中凋亡诱导因子CASP9的激活,而在低HMGB1的TCL作用后的肺癌细胞或免疫细胞中,CASP9会被抑制。结论:肿瘤细胞HMGB1对肺癌的发生具有双重作用,促进肺癌细胞增殖的同时抑制免疫细胞的功能,进而引起肺癌的发生,该过程与不同细胞中NF-κB信号通路的激活有关。

关键词：抗肿瘤免疫细胞凋亡 NF-κB信号通路巨噬细胞小鼠脾细胞肺癌

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教育数字化背景下医学融合实验教学体系探索

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基础医学教育 2025年第2期27卷 177-181页

作者：刘仙琦云齐乐木格殷兆丽纳仁高娃包丽丽内蒙古医科大学基础医学院蒙医学虚拟仿真实验教学中心呼和浩特010000 内蒙古医科大学基础医学院病原生物与免疫学实验室内蒙古医科大学基础医学院生理学教研室内蒙古医科大学基础医学院微生物学教研室

教育数字化是当前医学教育发展的主流趋势。基础医学实验教学作为培养医学生综合实践能力的重要途径,是医学教育不可或缺的部分,如何顺应教育发展、提升医学实验教学质量是当下面临的重要课题。文章以培养具备综合素质的医学人才为目标... 详细信息

教育数字化是当前医学教育发展的主流趋势。基础医学实验教学作为培养医学生综合实践能力的重要途径,是医学教育不可或缺的部分,如何顺应教育发展、提升医学实验教学质量是当下面临的重要课题。文章以培养具备综合素质的医学人才为目标,探讨教育数字化背景下,基础医学实验教学改革的策略,从基础医学实验教学模式优化改革入手,以虚拟实验体验为支撑、以临床案例讨论为线索、以实验技能培训为核心、以数据分析比较为重点,构建了基础医学融合实验教学体系。通过该体系的实施,培养学生的自主学习能力、综合分析能力和临床思维能力。

关键词：基础医学实验教学教学改革教育数字化数字技术虚拟仿真

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基于课程思政的多元化教学设计与应用

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黑龙江医药科学 2025年第4期48卷 94-96页

作者：杨春佳石晶宫梓琳张燕张慧明孙妍程谕张涛苏菊香佳木斯大学基础医学院寄生虫学、微生物学、免疫学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学附属第一医院心内一科黑龙江佳木斯154002 佳木斯大学附属第一医院妇产科黑龙江佳木斯154002

目的:为提高医学寄生虫学的教学质量及立德树人的教育教学宗旨,本文探讨医学寄生虫学课程思政改革的应用效果。方法:以佳木斯大学2021级本科临床医学专业4个大班为研究对象,1~2班为教改组138人,3~4班为非教改组134人。教改组实施课程思... 详细信息

目的:为提高医学寄生虫学的教学质量及立德树人的教育教学宗旨,本文探讨医学寄生虫学课程思政改革的应用效果。方法:以佳木斯大学2021级本科临床医学专业4个大班为研究对象,1~2班为教改组138人,3~4班为非教改组134人。教改组实施课程思政教学改革,结合线上线下混合式教学模式和形成性评价方案等进行实践;非教改组按照传统教学模式授课。通过成绩评定和问卷调查评价教学改革效果。结果:教改组期末总成绩平均分为(86.12±6.55)分,非教改组为(74.22±8.34)分,教改组成绩明显高于非教改组成绩(P<0.05)。问卷调查回收率为96.7%(96/99),其中89.6%(86/96)的学生对于课程思政改革总体评价为“优”,96.9%(93/96)的学生认为课程思政改革优于传统教学模式。结论:课程思政改革能提高学生多方面的综合能力,改变学生的学习方式,实现知识传授、价值塑造和能力培养的多元统一,落实“立德树人”根本任务。

关键词：新医科医学寄生虫学课程思政立德树人

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新医科背景下医学寄生虫学课程思政改革实践——以日本血吸虫为例

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黑龙江医药科学 2025年第4期48卷 133-134页

作者：孙妍宫梓琳石晶张燕张慧明杨春佳张涛程谕苏菊香佳木斯大学基础医学院寄生虫学、微生物学、免疫学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学附属第一医院心内一科黑龙江佳木斯154003 佳木斯大学附属第一医院妇产科黑龙江佳木斯154003

目的:为落实立德树人的教育教学宗旨,本文探讨课程思政在医学寄生虫学教学中的实践效果。方法:以佳木斯大学2022级医学检验技术专业学生作为研究对象,1班为试验组进行课程思政改革,2班为对照组未进行课程思政改革,课程内容为日本血吸虫... 详细信息

目的:为落实立德树人的教育教学宗旨,本文探讨课程思政在医学寄生虫学教学中的实践效果。方法:以佳木斯大学2022级医学检验技术专业学生作为研究对象,1班为试验组进行课程思政改革,2班为对照组未进行课程思政改革,课程内容为日本血吸虫。通过课后测试成绩和问卷调查评价教学改革效果。结果:试验组学生课堂测试高于对照组(P<0.05),问卷调查显示,试验组学生在学习满意度、思政目标达成度、教学模式满意度等方面均高于对照组学生(P<0.05)。结论:课程思政教学改革能更好的充分发挥思政与专业协同效应,培养有社会责任、有创新精神、有专门知识、有实践能力、有健康身心的医学专门人才。

关键词：新医科医学寄生虫学课程思政立德树人

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