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脊髓趋化因子CXCL12在大鼠骨癌痛形成中的作用：与小胶质细胞活化的关系

中华麻醉学杂志 2014年第1期34卷 40-42页

作者：刘彦楠申文胡学铭陈立平曹守斌张婷江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州市221002 徐州医学院附属医院疼痛科

目的评价脊髓趋化因子CXCL12在大鼠骨癌痛形成中的作用及其与小胶质细胞活化的关系.方法清洁级成年雌性SD大鼠32只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法分为4组（n=8）：假手术组（S组）、骨癌痛组（B组）、骨癌痛＋ CXCL12中和抗体组... 详细信息

目的评价脊髓趋化因子CXCL12在大鼠骨癌痛形成中的作用及其与小胶质细胞活化的关系.方法清洁级成年雌性SD大鼠32只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法分为4组（n=8）：假手术组（S组）、骨癌痛组（B组）、骨癌痛＋ CXCL12中和抗体组（BC组）和骨癌痛＋IgG对照抗体组（BI组）.B组、BC组和B组大鼠右侧胫骨骨髓腔注入Walker 256乳腺癌细胞5μl（4×105个/ml）；S组大鼠右侧胫骨骨髓腔注入5μl生理盐水；于注射乳腺癌细胞后第12、13和14天,BC组鞘内注射CXCL12中和抗体（10 μg/15μl,1次/d）,BI组鞘内注射IgG对照抗体（10 μg/15μl,1次/d）.于注射乳腺癌细胞前（T0）、注射后3、5、7、10、12和14 d（T1-6）时测定机械痛阈,于T6时痛阈测定结束后取大鼠L45脊髓,采用免疫荧光技术检测脊髓背角小胶质细胞标记物Iba-1的表达.结果与S组比较,B组、BC组和BI组T2-6时机械痛阈降低,T6时脊髓背角Iba-1表达上调（P＜0.01）；与B组比较,BC组T56时机械痛阈升高,T6时脊髓背角Iba-1表达下调（P＜0.01）.结论脊髓趋化因子CXCL12参与了大鼠骨癌痛的形成,其机制与小胶质细胞活化有关.

关键词：骨肿瘤疼痛脊髓趋化因子CXCL12 小神经胶质细胞

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金刚烷胺对创伤性脑损伤幼鼠行为学及脑内TH表达的影响

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神经解剖学杂志 2014年第1期30卷 103-108页

作者：吴宇刘阳唐素林宋亮陈幽婷马传响徐州医学院江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州221000 徐州医学院人体解剖学教研室徐州221000

目的:探讨金刚烷胺(amantadine,AMA)长期注射对创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)幼鼠脑内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的影响,为深入探讨AMA药理学效应和指导临床儿童颅脑外伤的治疗提供实验学依据。方法:昆明幼年小... 详细信息

目的:探讨金刚烷胺(amantadine,AMA)长期注射对创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)幼鼠脑内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的影响,为深入探讨AMA药理学效应和指导临床儿童颅脑外伤的治疗提供实验学依据。方法:昆明幼年小鼠(P10)80只,性别不拘,随机分为对照组、AMA组、TBI组及TBI+AMA组。TBI模型在第10 d(P10)应用自由落体重力打击制作成轻中度闭合型TBI模型,再连续给药10 d,停药后第10 d(P30)进行自发活动观察和被动回避性跳台实验检测;其中停药后第1 d(P21)和第3 d(P23)取脑;应用Western blot技术检测前脑内相关脑区TH的含量变化;应用冰冻切片的免疫组织化学染色技术检测小鼠脑内酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化。结果:(1)行为学检测:旷场实验中,AMA组和TBI组幼鼠自发活动均明显低于对照组(P<0.05),但TBI+AMA组幼鼠自发活动增加,与TBI组的差别有统计学意义(P<0.05)。被动回避性跳台实验中,AMA组与对照组之间的差别无统计学意义(P>0.05),但TBI组比对照组幼鼠学习记忆时间明显延长,差别有统计学意义(P<0.05);TBI+AMA组与TBI组幼鼠学习记忆能力无明显改变。(2)Western Blot结果显示:AMA组幼鼠杏仁核+杏仁周皮质、前额皮质内TH蛋白的含量在1 d时高于对照组(P<0.05),3 d时AMA组与对照组之间TH蛋白含量的差异无统计学意义(P>0.05)。TBI+AMA组幼鼠隔区和前额皮质TH蛋白的含量在1 d时高于TBI组(P<0.05),3 d时仅TBI+AMA组隔区TH蛋白含量高于TBI组(P<0.05)。(3)免疫组织化学染色结果显示:TBI+AMA组幼鼠黑质、腹侧被盖区、蓝斑的TH阳性神经元数量明显高于TBI组,光密度值分析两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AMA长期注射可提高TBI幼鼠脑内杏仁核和前额皮质等脑区多巴胺的浓度,进而改善创伤性脑损伤幼鼠的行为学症状。

关键词：金刚烷胺创伤性脑损伤酪氨酸羟化酶幼鼠

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肺动脉高压大鼠肺小动脉增殖内膜缺氧诱导因子-1α表达的变化

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中华麻醉学杂志 2014年第12期34卷 1471-1474页

作者：孙青申艳颜洁李冰冰徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室 221004 江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室南京大学医学院附属鼓楼医院麻醉科 210008 南京医科大学附属妇幼保健院麻醉科

目的评价肺动脉高压大鼠肺小动脉增殖内膜缺氧诱导因子-1α （HIF-1α）表达的变化.方法成年雄性SD大鼠32只,2月龄,体重200 - 230 g,采用随机数字表法,将其分为4组（n=8）：假手术组（S组）、左肺切除术组（P组）、野百合碱组（M组）... 详细信息

目的评价肺动脉高压大鼠肺小动脉增殖内膜缺氧诱导因子-1α （HIF-1α）表达的变化.方法成年雄性SD大鼠32只,2月龄,体重200 - 230 g,采用随机数字表法,将其分为4组（n=8）：假手术组（S组）、左肺切除术组（P组）、野百合碱组（M组）和野百合碱联合左肺切除术组（PM组）.M组和PM组于术后7d皮下注射野百合碱60 mg/kg.于术后35 d测定平均肺动脉压（mPAP）和右室收缩压（RVSP）,并计算右心室肥厚指数（RVHI）、肺小动脉中膜厚度（MT）百分比,进行血管阻塞评分（VOS）,并测定肺小动脉HIF-1α、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达.结果与S组比较,P组MT百分比升高,肺小动脉α-SMA表达上调,M组mPAP、RVSP、RVHI和MT百分比升高,PM组mPAP、RVSP、RVHI、MT百分比和VOS评分升高,M组和PM组肺小动脉HIF-1α、α-SMA和PCNA表达上调（P＜0.05）;与p组比较,M组和PM组mPAP、RVSP、RVHI、MT百分比升高,肺小动脉HIF-1α、α-SMA和PCNA表达上调（P＜0.05）;与M组比较,PM组RVSP、RVHI、MT百分比和VOS评分升高,肺小动脉HIF-1α、α-SMA和PCNA表达上调（P＜0.05）.结论肺动脉高压大鼠肺小动脉内膜增殖的机制与HIF-1α表达上调,促进血管平滑肌细胞增殖有关.

关键词：高血压,肺性缺氧诱导因子1,α亚基肺动脉细胞增殖

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线粒体抗氧化肽对脓毒性脑病小鼠认知功能和线粒体功能的影响

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临床麻醉学杂志 2014年第8期30卷 788-791页

作者：吴晶张明强贾敏杨娇娇纪木火杨建军南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科 210002 江苏省麻醉学重点实验室江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室

目的观察线粒体抗氧化肽SS-31对脓毒性脑病小鼠认知功能和线粒体功能的影响。方法成年雄性C57BL/6小鼠60只随机分为四组:假手术+生理盐水组(SN组,n=10)、假手术+SS-31组(SS组,n=10)、盲肠结扎穿孔(CLP)+生理盐水组(CN组,n=20)和CLP+SS-3... 详细信息

目的观察线粒体抗氧化肽SS-31对脓毒性脑病小鼠认知功能和线粒体功能的影响。方法成年雄性C57BL/6小鼠60只随机分为四组:假手术+生理盐水组(SN组,n=10)、假手术+SS-31组(SS组,n=10)、盲肠结扎穿孔(CLP)+生理盐水组(CN组,n=20)和CLP+SS-31组(CS组,n=20)。术毕每天腹腔注射5mg/kg SS-31(SS、CS组)或等容生理盐水(SN、CN组),连续6d。术后第7、8天,行条件性恐惧实验;行为学测试后处死小鼠,取海马组织检测活性氧自由基(ROS)及三磷酸腺苷(ATP)水平,提取线粒体检测线粒体电子传递链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ酶活性及线粒体膜电位(MMP)水平。结果与CN组比较,SN、SS和CS组24h场景实验僵直时间明显增加(P<0.05),ROS水平明显降低,ATP、MMP及复合物Ⅰ和Ⅲ酶活性明显升高(P<0.05)。与CS组比较,SN和SS组ROS水平明显降低,ATP、MMP及复合物Ⅰ和Ⅲ酶活性明显升高(P<0.05)。结论线粒体抗氧化肽SS-31可改善脓毒性脑病小鼠认知功能,其机制可能与减轻线粒体损伤有关。

关键词：脓毒症认知线粒体抗氧化剂小鼠

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脊髓sigma-1受体在大鼠骨癌痛维持中的作用：与ERK的关系

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中华麻醉学杂志 2014年第7期34卷 796-799页

作者：王晨晨朱珊珊韩园李晓马文文徐州市儿童医院麻醉科 221006 徐州市肿瘤医院麻醉科徐州医学院附属医院麻醉科无锡市妇幼保健院麻醉科江苏省麻醉学重点实验室江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室

目的评价脊髓sigma-1受体在大鼠骨癌痛维持中的作用及其与细胞外信号调节激酶（ERK）的关系.方法实验一健康雌性SD大鼠24只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法分为2组：假手术组（S组,n=4）和骨癌痛组（BCP组,n=20）.采用右侧胫骨... 详细信息

目的评价脊髓sigma-1受体在大鼠骨癌痛维持中的作用及其与细胞外信号调节激酶（ERK）的关系.方法实验一健康雌性SD大鼠24只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法分为2组：假手术组（S组,n=4）和骨癌痛组（BCP组,n=20）.采用右侧胫骨骨髓腔内接种Walker 256乳腺癌肿瘤细胞的方法制备大鼠骨癌痛模型.S组于接种后第10天,BCP组于接种后第3、5、7、10、14天分别处死4只大鼠,取L4-6脊髓组织,采用Western blot法测定sigma-1受体的表达.实验二健康雌性SD大鼠40只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法分为4组（n=10）：假手术组（S组）、sigma-1受体拮抗剂BD1047组（BD组）、骨癌痛组（BCP组）和骨癌痛＋BD1047组（BCP＋ BD组）.于接种后第10～ 14天,S组和BCP组鞘内注射生理盐水20μl,BD组和BCP＋ BD组鞘内注射BD1047 120 nmol/20μl,1次/d.于接种前1d及接种后第3、5、7天和第10、12、14天给药后测定机械痛阈,接种后第14天行为学测试结束后处死大鼠,取L4-6脊髓组织,采用Western blot法测定磷酸化ERK（p-ERK）蛋白表达.结果实验一：与S组相比,BCP组脊髓sigma-1受体表达上调,并在术后第10天达到高峰（P＜0.05）.实验二：与S组相比,BD组各时点机械痛阈和脊髓p-ERK蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）,BCP组和BCP＋ BD组机械痛阈降低,脊髓p-ERK蛋白表达上调（P＜0.05）;与BCP组相比,BCP＋ BD组鞘内注射BD1047后机械痛阈升高,脊髓p-ERK蛋白表达下调（P＜0.05）.结论脊髓sigma-1受体可能通过促进ERK的磷酸化参与大鼠骨癌痛的维持.

关键词：骨肿瘤疼痛受体,Σ 脊髓 MAP细胞外信号调节激酶

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脊髓小胶质细胞参与大鼠功能性慢性内脏痛的维持

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中国疼痛医学杂志 2014年第10期20卷 708-712页

作者：陈自洋周田田喻乐赵冰雪花嵘张咏梅徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州221002 中国人民解放军第九七医院急诊科徐州221004

目的：探讨脊髓小胶质细胞对大鼠功能性慢性内脏痛维持的影响.方法：新生雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30只,随机分成2组（n=15）：假手术组（S组）,新生期结直肠扩张组（CRD组）.CRD组大鼠出生后第8、10、12天,每天给予两次结直肠扩张... 详细信息

目的：探讨脊髓小胶质细胞对大鼠功能性慢性内脏痛维持的影响.方法：新生雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30只,随机分成2组（n=15）：假手术组（S组）,新生期结直肠扩张组（CRD组）.CRD组大鼠出生后第8、10、12天,每天给予两次结直肠扩张.出生后第6、8、12周,检测腹壁撤退反射（AWR）评分、痛阈以及腹外斜肌放电（EMG）幅度.HE染色观察结直肠病理改变,取脊髓L2～S4节段,通过免疫荧光计数脊髓背角活化的小胶质细胞,计算小胶质细胞活化率.结果：第6、8、12周两组大鼠结直肠无明显病理改变;与S组相比,CRD组大鼠在20、40、60、80 mmHg结直肠压力下AWR评分、EMG幅度明显增加,痛阈降低（P＜0.05）;且小胶质细胞活化数及活化率明显增加（P＜0.05）.结论：脊髓小胶质细胞活化参与大鼠功能性慢性内脏痛的维持过程.

关键词：新生期结直肠扩张脊髓小胶质细胞功能性慢性内脏痛

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Rho/ROCK通路参与内毒素急性肺损伤的研究进展

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医学信息 2015年第35期 392-392页

作者：江泽宇傅婕封光刘功俭江苏省麻醉学重点实验室，江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室，徐州医学院附属医院麻醉科，江苏徐州 221000

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是指由心源性以外的各种肺内外致病因素所导致的急性低氧性呼吸功能衰竭,是临床常见的呼吸系统急危重症。Rho/ROCK信号通路是体内普遍存在的一条信号通路,通过结合GTP激活或... 详细信息

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是指由心源性以外的各种肺内外致病因素所导致的急性低氧性呼吸功能衰竭,是临床常见的呼吸系统急危重症。Rho/ROCK信号通路是体内普遍存在的一条信号通路,通过结合GTP激活或者结合GDP失活来发挥'分子开关'的作用,广泛参与细胞形态维持、粘附与迁移、血管生成等多种生物学行为。本文就目前对Rho/ROCK通路的了解及其与血管通透性、炎症相关的研究进展进行综述。

关键词： Rho/ROCK 肺损伤通透性炎症反应

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钙黏蛋白在突触发育和突触可塑性调节中的作用

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国际麻醉学与复苏杂志 2014年第9期35卷 860-864页

作者：王存金庞君宋歌李莉曹俊平张励才王红军江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室221004

背景钙黏蛋白（cadherin）是一类存在于细胞表面的跨膜糖蛋白,最初被认为是一种钙离子依赖性的细胞黏附分子,主要参与调节细胞黏附、促进细胞增殖、维持细胞极性等过程.近几年对cadherin调节突触发育和突触可塑性的研究取得了较大进展.... 详细信息

背景钙黏蛋白（cadherin）是一类存在于细胞表面的跨膜糖蛋白,最初被认为是一种钙离子依赖性的细胞黏附分子,主要参与调节细胞黏附、促进细胞增殖、维持细胞极性等过程.近几年对cadherin调节突触发育和突触可塑性的研究取得了较大进展. 目的围绕cadherin在突触发育和突触可塑性过程中的作用及其相关分子机制简要作一综述,旨在为神经系统疾病的治疗提供理论依据. 内容 Cadherin的概述,cadherin在突触发育和突触可塑性调节中的作用以及相关分子机制,cadherin与神经疾病. 趋向随着cadherin在调节突触发育和突触可塑性过程中的研究不断深入,cadherin将成为治疗神经疾病的一个新型的靶点.

关键词：钙黏蛋白突触发育突触可塑性

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丙泊酚对大鼠心肌缺血／再灌注损伤中微管相关蛋白1轻链3变化的影响

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国际麻醉学与复苏杂志 2014年第3期35卷 198-202页

作者：王平许鹏程刘琨张可璇徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室&江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室 221004

目的观察丙泊酚（propofol，P）对大鼠急性心肌缺血／再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）损伤中微管相关蛋白1轻链3（micmtubule-associated protein 1 light3，LC3）的影响，探讨P心肌保护的可能机制。方法采用大鼠在体心肌I／R损... 详细信息

目的观察丙泊酚（propofol，P）对大鼠急性心肌缺血／再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）损伤中微管相关蛋白1轻链3（micmtubule-associated protein 1 light3，LC3）的影响，探讨P心肌保护的可能机制。方法采用大鼠在体心肌I／R损伤模型，84只雄性sD大鼠采用随机数字表法分为6组：假手术组（Sham组）、I／R组、脂肪乳组（Int组）、P低剂量组（P1组）、P中剂量组（P2组）、P高剂量组（P3组）。除Sham组外，其余各组均缺血30min，再灌注2h。Int、P1、P2、P3组分别依次经股静脉输注脂肪乳2．4ml·kg^-1·h^-1、P6、12、24mg·kg^-1·h^-1。连续记录功能学指标；2，3，5氯化三苯基四氮唑（2，3，5-trigIhenyhetrazoliumchloride，TYC）染色法检测心肌梗死面积，酶标仪法测定乳酸脱氢酶（1actatedehydrogenase，LDH）的活性，Westemblot分析LC3、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）和蛋白激酶B（Akt）的表达水平。结果与YR组比较，P1、P2、P3组心功能明显改善，心肌梗死面积[（33．8±2．7）％、（27．1±1．9）％和（36．2±312）％VS（50．3±4．2）％，P〈O．05]和血浆LDH水平都显著降低，心肌损伤减轻，LC3II／LC3I比率[（0．97±0．03）、（0．76±0．08）和（0．93±0．04）VS（1．15±0．07），P〈0．05]减低，P-Akt表达[（1．69±0．43）、（2．51±0．15）和（1．95±0．41）vs（1．00±0．13），P〈0．05]增加，而Int组则差异无统计学意义（P〉0．05）；与P1组比较，P2组心功能明显改善，心肌梗死面积[（27．1±1．9）％VS（33．8±2．7）％，P〈0．05]和血浆LDH水平均显著降低，心肌损伤更轻，LC311／LC3I比率[（0．76±0．08）vs（0．97±0．03），P〈0．05]减低，p-Akt表达[（2．51±0．15）vs（1．69±0．43），P〈0．05]增加，而P3组差异没有统计学意义（P〉0．05）。结论P通过抑制LC3的表达，对心肌发挥保护作用，且可能与磷脂酰肌醇-3激酶／蛋白激酶B（phosphatid3rlinositol3kinase／Akt。P13l（／Akt）信号通路有关。

关键词：丙泊酚心肌再灌注损伤自噬微管相关蛋白1轻链3 磷脂酰肌醇-3-激酶

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白细胞介素-10通过降低脂多糖诱导大鼠急性肺损伤高迁移率组蛋白1释放产生保护作用

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国际麻醉学与复苏杂志 2014年第9期35卷 791-795页

作者：张锋高鹏飞李紫薇武昊天王凯刘功俭江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室221004

目的旨在研究白细胞介素（interleukin,IL）-10对高迁移率组蛋白l（high mobility group protein 1,HMGB1）释放的影响及其肺保护作用,进而探讨IL-10在治疗急性肺损伤中的可能机制. 方法采用腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS... 详细信息

目的旨在研究白细胞介素（interleukin,IL）-10对高迁移率组蛋白l（high mobility group protein 1,HMGB1）释放的影响及其肺保护作用,进而探讨IL-10在治疗急性肺损伤中的可能机制. 方法采用腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致大鼠脓毒症急性肺损伤模型,健康SPF级雄性SD大鼠72只,体重180 g～220 g,采用随机数字表法,随机分为对照组即磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution,PBS）组（P组,6只）、急性肺损伤组即LPS组（L组,30只）、PBS＋IL-10组（PI组,6只）、LPS＋IL-10组（LI组,30只）.P组和PI组腹腔注射等体积PBS的同时分别经由气道滴注5 ml的PBS和IL-10,L组和LI组腹腔注射LPS的同时分别经由气道滴注等体积的PBS和IL-10.L组和LI组注射LPS后的4、8、16、24 h和48 h分别检测各组大鼠肺湿/干重比（wet/dry weight ratio,W/D）和支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中总蛋白浓度,酶联免疫吸附实验法检测BALF中炎性因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和IL-6水平,苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察肺组织的病理变化,Western Blot分析肺组织中HMGB1表达水平. 结果腹腔注射LPS后,L组大鼠肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.68±0.12） mg/L和（254±105） mg/L,与P组比较,分别增加了12％和297％（P＜0.05）,BALF中TNF-α和IL-6水平明显增加（P＜0.05）,HE染色显示在注射LPS后4h肺组织的细胞浸润达到峰值随后减少,肺组织中HMGB1水平升高（P＜0.05）;使用IL-10后,LI组肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.28±0.14） mg/L和（109±48） mg/L,与L组比较,分别降低了7％和57％（P＜0.05）,BALF中炎性因子水平降低（P＜0.05）,肺组织细胞浸润改善,HMGB1表达下调（P＜0.05）. 结论 IL-10对急性肺损伤具有保护作用,其机制可能为降低BALF中炎性因子的水平,下调晚期炎症介质HMGB1的表达,从而改善肺组织的细胞浸润实现的.

关键词：白细胞介素-10 脂多糖急性肺损伤高迁移率组蛋白1

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