检索结果-内蒙古大学图书馆

华支睾吸虫感染新西兰兔转化生长因子β1和白细胞介素17的动态变化及其意义

中国病原生物学杂志 2014年第5期9卷 400-402页

作者：华慧徐江涛张波颜超李向阳刘瀛刘转转付琳琳汤仁仙郑葵阳徐州医学院病原生物学与免疫学教研室感染与免疫实验室江苏徐州221002

目的分析华支睾吸虫感染新西兰兔转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素17(IL-17)的变化及意义。方法选择健康新西兰兔8只,经口灌胃华支睾吸虫囊蚴800个;于感染0、1、3、7、14、21、28和42d耳缘静脉采血,分离血清,用ELISA法检测血清中T... 详细信息

目的分析华支睾吸虫感染新西兰兔转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素17(IL-17)的变化及意义。方法选择健康新西兰兔8只,经口灌胃华支睾吸虫囊蚴800个;于感染0、1、3、7、14、21、28和42d耳缘静脉采血,分离血清,用ELISA法检测血清中TGF-β1、IL-17水平;于42d剖杀感染兔,取肝脏制作组织切片,HE染色观察病理变化。结果实验兔感染0d时TGF-β1为(706.08±60.72)pg/ml,感染42d时为(1106.26±60.35)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.01)。IL-17水平自感染开始持续增高,在感染3d时[(68.69±6.04)pg/ml]达到最高峰,与感染0d[(50.04±4.16)pg/ml]时相比,差异有统计学意义(P<0.05);此后逐渐降低,至21d时降至感染前水平。结论新西兰兔感染华支睾吸虫早期IL-17高表达,感染42d时TGF-β1高表达。提示TGF-β1/IL-17在华支睾吸虫致病过程中发挥重要作用。

关键词：华支睾吸虫新西兰兔 TGF-β1 IL-17

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TRAIL联合水飞蓟素对人肝癌Huh7细胞凋亡的影响

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免疫学杂志 2014年第6期30卷 562-565页

作者：徐志辉赵金金尤红娟胡磊罗文雅李向阳郑葵阳陈明汤仁仙徐州医学院病原生物学与免疫学教研室徐州医学院感染与免疫实验室 221004 徐州医学院附属医院感染科 221002

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合水飞蓟素(Sili)对人肝癌Huh7细胞凋亡的影响。方法 CCK8法检测细胞增殖抑制;分光光度法检测细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9相对活性;Western blot检测细胞表面死亡受体4(DR4)、... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合水飞蓟素(Sili)对人肝癌Huh7细胞凋亡的影响。方法 CCK8法检测细胞增殖抑制;分光光度法检测细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9相对活性;Western blot检测细胞表面死亡受体4(DR4)、死亡受体5(DR5)的表达。结果 Sili与TRAIL联合作用Huh7细胞后,联合用药组与对照组及单独用药组相比,Huh7细胞的增殖率明显下降;caspase-3、caspase-8、caspase-9的相对活性明显提高。Sili作用Huh7细胞后能明显提高DR4、DR5蛋白表达。结论 Sili可通过上调死亡受体DR4、DR5表达而促进TRAIL诱导的Huh7细胞凋亡,为肝细胞癌的临床治疗提供了新的思路和方法。

关键词： TRAIL 水飞蓟素肝细胞癌凋亡

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人T淋巴细胞活化后羟甲基化的变化

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免疫学杂志 2014年第11期30卷 975-978页

作者：张庆史震李小翠刘晓梅汤仁仙郑葵阳周峰徐州医学院病原生物学与免疫学教研室感染与免疫实验室 221004 徐州市肿瘤医院检验科 221002

目的初步探讨人T淋巴细胞活化后细胞内5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)和5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-mC)的含量变化。方法成年健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)分别经刀豆蛋白(ConA)或CD3抗体和CD28抗体处理72 h后,采用免疫荧光法观察5-hmC和5-mC的变化,Real-time PCR检测TETs的mRNA转录水平。结果免疫荧光结果显示无论是经ConA非特异性刺激还是经CD3抗体和CD28抗体处理的人T淋巴细胞细胞核内,5-hmC水平明显高于5-mC,且后者从核内转位到胞浆;CD3抗体和CD28抗体处理后的TET2 mRNA转录水平显著高于非处理组。结论活化的T淋巴细胞中5-mC转变是由TET2调控的。

关键词： 5-羟甲基胞嘧啶 5-甲基胞嘧啶 TETs T淋巴细胞

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猪囊尾蚴特异性抗原cC1重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建与鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2014年第3期26卷 287-291页

作者：王雪梅骆江坤李倩李江艳陈勇陶志勇夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院免疫学教研室

目的构建表达猪囊尾蚴cC1抗原的重组耻垢分枝杆菌疫苗。方法提取pET28a-cC1质粒DNA,用xho I和BamH I双酶切,用Klenow酶补平xho I酶切末端,同时提取pMV261穿梭质粒载体,用Hind III和BamH I双酶切,用Klenow酶补平Hind III酶切末端,纯化后... 详细信息

目的构建表达猪囊尾蚴cC1抗原的重组耻垢分枝杆菌疫苗。方法提取pET28a-cC1质粒DNA,用xho I和BamH I双酶切,用Klenow酶补平xho I酶切末端,同时提取pMV261穿梭质粒载体,用Hind III和BamH I双酶切,用Klenow酶补平Hind III酶切末端,纯化后的酶切产物通过T4连接酶连接,构建pMV261-cC1穿梭质粒,测序验证正确后,将pMV261cC1穿梭质粒经电穿孔法转化耻垢分枝杆菌,构建重组耻垢分枝杆菌,经热诱导后,以猪囊尾蚴病患者血清为一抗进行Western-blotting鉴定。此外,比较正常耻垢分枝杆菌和重组cC1耻垢分枝杆菌生长状态并绘制生长曲线。结果构建的重组穿梭载体经酶切、测序验证正确。构建的重组耻垢分枝杆菌经热诱导后,SDS-PAGE电泳分析显示,在40 kDa处有外源性蛋白表达,与预期值相符。Western-blotting显示其可被猪囊尾蚴病患者血清识别,表明cC1抗原基因在耻垢分枝杆菌中表达成功。重组耻垢分枝杆菌与正常耻垢分枝杆菌的增殖特性无明显差异。结论成功构建了表达猪囊尾蚴特异性抗原cC1的重组耻垢分枝杆菌疫苗。

关键词：猪囊尾蚴 cC1 耻垢分枝杆菌疫苗

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Nrf2和Trx1在华支睾吸虫感染小鼠肝脏中表达的初步研究

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中国热带医学 2014年第11期14卷 1299-1301,1334页

作者：韦艳霞于倩李阳刘宜升王庆苓汤仁仙郑葵阳徐州医学院病原生物学与免疫学教研室感染与免疫实验室江苏徐州221004

目的分析华支睾吸虫感染小鼠肝脏中Nrf2和Trx1编码基因的表达情况,初步探讨Nrf2及Trx1在华支睾吸虫致病过程中的作用。方法选用健康Balb/c小鼠建立华支睾吸虫感染模型,分别在实验第0、3、5、7、10、14、21、28和35d摘除小鼠眼球采血,分... 详细信息

目的分析华支睾吸虫感染小鼠肝脏中Nrf2和Trx1编码基因的表达情况,初步探讨Nrf2及Trx1在华支睾吸虫致病过程中的作用。方法选用健康Balb/c小鼠建立华支睾吸虫感染模型,分别在实验第0、3、5、7、10、14、21、28和35d摘除小鼠眼球采血,分离血清,检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;颈椎脱臼处死小鼠取肝脏,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏中Nrf2和Trx1的m RNA表达情况。结果与对照组相比,感染组小鼠在感染第5、7、10、14、21和35d血清ALT活性显著升高(P<0.05);分别为(19.9332±1.98180)U/L、(64.3699±14.53874)U/L、(46.7455±6.27572)U/L、(99.0038±25.34329)U/L、(46.7590±8.85478)U/L和(50.3374±14.19886)U/L。感染组小鼠抗氧化应激通路上游基因Nrf2和下游Trx1的m RNA表达升高;其中Nrf2在感染第5天升高显著(P<0.05);Trx1在感染第21d升高显著(P<0.05)。结论 Nrf2和Trx1 m RNA在华支睾吸虫感染过程中表达升高,提示Nrf2/Trx1通路可能在华支睾吸虫致病过程中发挥一定的作用。

关键词：华支睾吸虫核因子相关因子-2 硫氧还蛋白-1 天冬氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶

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TLR5在华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠肝脏中表达的初步分析 TLR5在华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠肝脏中表达的初步分析

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徐州医学院学报 2014年第6期34卷 380-383页

作者：徐江涛张波王林王艳红张曼曼华慧颜超刘相叶刘转转汤仁仙郑葵阳徐州医学院病原生物学与免疫学教研室感染与免疫实验室江苏徐州221004

目的分析小鼠华支睾吸虫感染后小鼠肝脏中Toll样受体5（TLR5）的表达情况.方法随机选取C3H/HeN雌性小鼠,经口感染35个华支睾吸虫囊蚴建立感染模型.分别在感染0（对照组）、1、7、28、56、84天处死小鼠,取肝脏组织行如下处理：①苏木精... 详细信息

目的分析小鼠华支睾吸虫感染后小鼠肝脏中Toll样受体5（TLR5）的表达情况.方法随机选取C3H/HeN雌性小鼠,经口感染35个华支睾吸虫囊蚴建立感染模型.分别在感染0（对照组）、1、7、28、56、84天处死小鼠,取肝脏组织行如下处理：①苏木精-伊红（H-E）染色观察小鼠肝脏病变;②采用免疫组织化学染色观察小鼠肝脏组织TLR5表达情况;③采用逆转录聚合酶链反应（RT-PC R）检测肝脏中TLR5的表达水平.结果 ①肝脏病理结果显示,与对照组小鼠相比,感染第1、7天小鼠肝脏汇管区出现炎症细胞浸润,第28天可观察到肝细胞排列紊乱,出现纤维组织增生和胆管增生;②免疫组织化学染色显示,TLR5在感染华支睾吸虫第1天、7天、28天的小鼠肝内表达增高,其主要表达于汇管区肝细胞、肝胆管上皮细胞和纤维化区域的成纤维细胞;③RT-PCR结果显示,小鼠肝脏中TLR5 mRNA表达量在感染第1天、7天、28天明显高于对照组.结论 C3H/HeN小鼠感染华支睾吸虫可上调肝脏组织TLR5的表达,提示TLR5可能在宿主抵抗华支睾吸虫感染中起着一定的作用。

关键词： TLR5 华支睾吸虫 C3H/HeN小鼠

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黄连等中药对多重耐药性鲍曼不动杆菌的筛选研究

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右江民族医学院学报 2015年第4期37卷 610-612页

作者：覃艳春陆钢周伟杰黄衍强黄干荣韦连登李晓华潘勇韦红玉黄小凤右江民族医学院病原生物学与免疫学教研室桂西微生物感染研究重点实验室广西百色533000 右江民族医学院附属医院广西百色533000 广西百色市人民医院右江民族医学院附属西南医院广西百色533000 右江民族医学院药学院广西百色533000

目的研究黄连等11种中药水溶液和醇溶液对多重耐药鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)的敏感程度,为中药用于治疗多重耐药Ab感染提供实验依据。方法分别采用K-B药敏纸片法和琼脂稀释法检测黄连等中药对65株鲍曼不动杆菌的最低抑... 详细信息

目的研究黄连等11种中药水溶液和醇溶液对多重耐药鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)的敏感程度,为中药用于治疗多重耐药Ab感染提供实验依据。方法分别采用K-B药敏纸片法和琼脂稀释法检测黄连等中药对65株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)值。结果黄连、木蝴蝶、马蹄金水提液和醇提液对Ab有明显的抑制作用,MIC为1g/ml、0.5g/ml、0.5g/ml、1g/ml、1g/ml、0.5g/ml。结论初步认定黄连和木蝴蝶、马蹄金水提液和醇提液对Ab有明显的抗菌作用。

关键词：黄连鲍氏不动杆菌多重耐药药物筛选

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结核分枝杆菌H37Ra菌株ESAT6基因的克隆及序列分析

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蚌埠医学院学报 2014年第10期39卷 1324-1326页

作者：王英薛玉芹王雪梅陈勇李江艳李倩唐洁夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的:从结核分枝杆菌H37Ra菌株克隆早期分泌性抗原靶6(ESAT6)基因并进行序列分析。方法:以结核分枝杆菌H37Ra菌株基因组DNA为模版,用PCR方法扩增ESAT6基因,将扩增产物连接到克隆载体pTG19-T中,并用PCR、单双酶切和测序进行鉴定,以BLAST... 详细信息

目的:从结核分枝杆菌H37Ra菌株克隆早期分泌性抗原靶6(ESAT6)基因并进行序列分析。方法:以结核分枝杆菌H37Ra菌株基因组DNA为模版,用PCR方法扩增ESAT6基因,将扩增产物连接到克隆载体pTG19-T中,并用PCR、单双酶切和测序进行鉴定,以BLAST软件进行序列比对分析。结果:从结核分枝杆菌H37Ra株成功克隆了ESAT6基因,测序表明该片段由288 bp组成,与GenBank所报告的H37Rv基因相比同源性为100%。结论:成功克隆了H37Ra株ESAT6编码基因,其序列与H37Rv标准株ESAT6编码基因完全一致。

关键词：结核分枝杆菌 H37Ra株早期分泌性抗原靶6基因克隆序列分析

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IL-12加强BCG初免对小鼠抗结核免疫效果

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基础医学与临床 2014年第10期34卷 1412-1413页

作者：王婵王新敏章乐季榕吴江东吴芳张万江石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科新疆石河子832002 石河子大学医学院病理生理教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院感染科新疆石河子832002

长期以来各国一直使用卡介苗（Bacillus Calmette Gerin）来预防结核病,但BCG在不同地区的免疫保护效果差异显著,序贯免疫策略是单用一种疫苗产生的免疫效力不足时,使用相同或不同的疫苗来重复免疫接种可增强免疫效果[1-2].本研究利用... 详细信息

长期以来各国一直使用卡介苗（Bacillus Calmette Gerin）来预防结核病,但BCG在不同地区的免疫保护效果差异显著,序贯免疫策略是单用一种疫苗产生的免疫效力不足时,使用相同或不同的疫苗来重复免疫接种可增强免疫效果[1-2].本研究利用已经构建好的表达免疫调节因子的质粒（IL-12）作为在接种BCG后连续使用,以观察BCG初次免疫后IL-12进行免疫加强的免疫效果.

关键词： IL-12 免疫效果 BCG 抗结核小鼠初免免疫保护效果序贯免疫策略

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结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6的构建、鉴定及免疫效应评价

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南方医科大学学报 2013年第7期33卷 945-950页

作者：王雪梅王英薛玉芹陈勇陶志勇夏惠唐洁方强蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的构建结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6并探讨其诱导的免疫效应。方法将扩增自结核杆菌基因组的ESAT-6基因装入pVAX1载体构建pVAX1/ESAT-6重组质粒;经酶切、测序鉴定后,利用阳离子聚合物介导将重组质粒pVAX1/ESAT-6转染Hela细胞,分别以RT-... 详细信息

目的构建结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6并探讨其诱导的免疫效应。方法将扩增自结核杆菌基因组的ESAT-6基因装入pVAX1载体构建pVAX1/ESAT-6重组质粒;经酶切、测序鉴定后,利用阳离子聚合物介导将重组质粒pVAX1/ESAT-6转染Hela细胞,分别以RT-PCR法检测ESAT-6 mRNA的表达、间接免疫荧光法检测ESAT-6蛋白表达。重组质粒经体内电转染免疫小鼠后,采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ及抗ESAT-6特异性抗体IgG的水平;流式细胞术检测小鼠淋巴细胞增殖水平;ELISPOT检测产生IFN-γ的淋巴细胞频数。结果构建的重组质粒pVAX1/ESAT-6经双酶切于3000 bp和300 bp处各见1条带,测序结果显示插入序列与ESAT-6基因序列无差异。重组质粒转染Hela细胞后,RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳于约300 bp处见目的条带,间接免疫荧光检测显示特异性绿色荧光。重组质粒免疫小鼠后,血清中抗ESAT-6特异性抗体IgG水平较对照组(空质粒组和生理盐水对照组)明显升高;血清中IFN-γ水平、小鼠脾淋巴细胞增殖水平及产生IFN-γ的淋巴细胞数明显均高于对照组(空质粒组和生理盐水对照组)。结论成功构建了结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6,该疫苗可有效诱导小鼠产生特异性细胞免疫和体液免疫效应。

关键词：结核分枝杆菌 ESAT-6 DNA疫苗细胞免疫体液免疫

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