检索结果-内蒙古大学图书馆

国际输血及血液学杂志 2014年第3期37卷 271-275页

作者：周俊(综述) 曹江(审校) 徐开林(审校) 徐州医学院附属医院血液科徐州医学院移植免疫实验室江苏徐州221002

抗凋亡转录因子（AATF）作为一种RNA聚合酶Ⅱ结合蛋白,在真核生物进化过程中均高度保守.在机体遭受应激或慢性损伤时,其通过激活监测点激酶对基因转录及细胞周期进行调控,以维持内环境的稳态.同时,AATF通过发挥抗凋亡或抑制细胞增殖作用... 详细信息

抗凋亡转录因子（AATF）作为一种RNA聚合酶Ⅱ结合蛋白,在真核生物进化过程中均高度保守.在机体遭受应激或慢性损伤时,其通过激活监测点激酶对基因转录及细胞周期进行调控,以维持内环境的稳态.同时,AATF通过发挥抗凋亡或抑制细胞增殖作用,在肿瘤发生发展过程中有重要意义.笔者拟就在机体损伤过程中AATF与相关因子或蛋白间的作用机制,以及AATF在肿瘤中的研究进展进行综述如下.

关键词：抗凋亡转录因子损伤肿瘤

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酪氨酸激酶抑制剂治疗Ph＋急性淋巴细胞白血病的研究进展

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国际输血及血液学杂志 2014年第6期37卷 547-550页

作者：马莎陈翀徐开林徐州医学院移植免疫重点实验室徐州医学院附属医院血液科 221000

在急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中,约20％成年及50％老年患者表达Ph,统称为Ph＋ ALL.与Ph ALL相比,Ph＋ ALL的完全缓解率（CR）低、预后极差.近年,应用酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗Ph＋ ALL,可明显提高患者的缓解率,然而复发率仍然很... 详细信息

在急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中,约20％成年及50％老年患者表达Ph,统称为Ph＋ ALL.与Ph ALL相比,Ph＋ ALL的完全缓解率（CR）低、预后极差.近年,应用酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗Ph＋ ALL,可明显提高患者的缓解率,然而复发率仍然很高.目前,异基因造血干细胞移植是治愈CR1期Ph＋ ALL患者的最佳手段.Ph＋ ALL的进一步的治疗策略包括移植后TKI的应用及新一代TKI的研发.

关键词：费城染色体淋巴细胞白血病,急性造血干细胞移植酪氨酸激酶抑制剂

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白血病干细胞的新型标志蛋白IL1RAP和慢性髓系白血病临床分期的相关性研究

白血病干细胞的新型标志蛋白IL1RAP和慢性髓系白血病临床分期的相...

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第四届全国血液肿瘤学术大会暨第七届全国淋巴肿瘤诊治进展研讨会

作者：尹玲玲阮素红田宇徐开林赵恺徐州医学院移植免疫实验室徐州医学院附属医院血液科

目的探讨IL-1受体辅助蛋白(IL1RAP)和慢性髓系白血病(CML)临床分期的相关性。方法采用人淋巴细胞分离液从CML患者的外周血和骨髓中分离出单个核细胞,流式细胞仪检测CD34+,CD34+CD38+,CD34+CD38-细胞亚群上IL1RAP的表达水平。分别应用RT-... 详细信息

目的探讨IL-1受体辅助蛋白(IL1RAP)和慢性髓系白血病(CML)临床分期的相关性。方法采用人淋巴细胞分离液从CML患者的外周血和骨髓中分离出单个核细胞,流式细胞仪检测CD34+,CD34+CD38+,CD34+CD38-细胞亚群上IL1RAP的表达水平。分别应用RT-PCR、荧光原位杂交技术、染色体核型分析检测新鲜分离的骨髓单个核细胞的BCR-ABL融合基因及Ph染色体。结果流式细胞术检测CML患者干、祖细胞亚群(CD34+、CD34+CD38-)上的IL1RAP表达水平明显高于正常人。IL1RAP作为白血病干细胞(LSC)的表面标志,和CML胞内标志BCR-ABL融合基因及Ph染色体密切相关。分析不同分期CML患者IL1RAP表达情况发现,无论治疗前、治疗后(治疗方案:造血干细胞移植、酪氨酸激酶抑制剂、羟基脲)IL1RAP蛋白随着CML疾病进展表达上调。IL1RAP表达和血常规及年龄、性别的相关性分析结果显示,IL1RAP除了和中性粒细胞呈负相关以外,和其他指标无统计学相关性。结论 IL1RAP作为LSC的新型标志蛋白,和CML临床分期密切相关。

关键词：慢性髓系白血病白血病干细胞 IL1RAP 标志蛋白临床分期 RAP 相关性研究

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NLRP3炎性复合体在异基因造血干细胞移植不同预处理方案所致肝损伤中的作用比较

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国际输血及血液学杂志 2014年第6期37卷 501-506页

作者：黄玉金房婷付金玉吴进燕化静刘迷迷郭娜徐开林曾令宇新沂市人民医院血液科 221400 徐州医学院附属医院血液科实验室 221002

目的探讨NOD样受体蛋白（NLRP）3炎性复合体在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）不同预处理方案中所致肝损伤的作用.方法选择50只无特殊病原体（SPF）级BALB/c（H-2Kd）雄性小鼠作为研究对象.将其采用计算机随机分组法分为实验组（n... 详细信息

目的探讨NOD样受体蛋白（NLRP）3炎性复合体在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）不同预处理方案中所致肝损伤的作用.方法选择50只无特殊病原体（SPF）级BALB/c（H-2Kd）雄性小鼠作为研究对象.将其采用计算机随机分组法分为实验组（n=40）和对照组（n=10）,再按照allo-HSCT前预处理方案不同,将实验组受鼠分为白消安/环磷酰胺（BU/CY）预处理组（n=20）和全身照射（TBI）预处理组（n=20）.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.于移植后第15天处死各组受鼠,收取其骨髓及肝脏标本,检测骨髓嵌合率和白细胞计数,并计算肝脏指数.将肝脏标本分成二部分,一部分通过苏木精-伊红（HE）染色、免疫组织化学染色及Masson 3色染色分析肝脏组织的形态学变化,进行肝静脉闭塞病（HVOD）病理学评分;另一部分采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术检测各组受鼠肝脏组织中炎性细胞因子白细胞介素（IL）-1β、-18的相对表达量,评价细胞因子在移植后肝脏损伤中的作用;并检测细胞因子水解酶半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1与NLRP3炎性复合体在各移植受鼠肝脏组织中的相对表达量,分析其在不同预处理方案所致HVOD中的作用.结果 ①实验组受鼠骨髓细胞均成功植入,在移植后第15天,嵌合率均大于98.0％.②BU/CY预处理组受鼠并发HVOD的病理损伤程度较TBI预处理组严重,BU/CY预处理组受鼠的肝脏指数水平低于TBI预处理组;TBI预处理组受鼠中,5只受鼠的HVOD病理评分为中度,5只为重度,而BU/CY预处理组10只受鼠为重度.③BU/CY预处理组受鼠炎性细胞因子IL 1β、-18的相对表达量是TBI预处理组的13.9倍和5.5倍,两组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.④BU/CY预处理组受鼠caspase-1的相对表达量为TBI预处理组的19.5倍,二者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;BU/CY预处理组受鼠NLRP3的相对表达量为TBI预处理组的1.2倍,二者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 NLRP3在BU/CY预处理组中的表达量明显高于TBI预处理组,与肝损伤的严重程度一致,表明NLRP3在allo-HSCT后肝损伤中发挥重要作用.

关键词： NLRP3蛋白,人类细胞因子白消安环磷酰胺全身照射肝静脉闭塞病

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内皮祖细胞对异基因造血干细胞移植小鼠造血重建的影响

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中华血液学杂志 2013年第6期34卷 516-521页

作者：化静房婷刘迷迷黄玉金付金玉吴进燕徐开林曾令宇徐州医学院移植免疫实验室徐州医学院附属医院血液科221002

目的探讨内皮祖细胞（EPC）输注对异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）小鼠造血重建的影响。方法白消安（BU）／环磷酰胺（CY）预处理后建立C57BL／6供BABL／c小鼠allo—HSCT模型。受鼠随机分为4组：未处理组、BU／CY预处理组、单纯移... 详细信息

目的探讨内皮祖细胞（EPC）输注对异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）小鼠造血重建的影响。方法白消安（BU）／环磷酰胺（CY）预处理后建立C57BL／6供BABL／c小鼠allo—HSCT模型。受鼠随机分为4组：未处理组、BU／CY预处理组、单纯移植组和EPC联合移植组。移植后动态观察受鼠骨髓病理变化，MECA32抗体免疫组化染色观察骨髓窦内皮和微血管的变化；流式细胞术分析骨髓内干、祖细胞比例及血清细胞因子；并行外周血血细胞计数。结果①联合EPC输注组小鼠骨髓中造血组织、骨髓窦内皮及微血管的损伤较单纯移植组轻。②予EPC输注后，受鼠骨髓中造血干细胞比例在移植后21天（＋21d）内明显增高，联合移植组小鼠HSC于＋14d达高峰，明显高于单纯移植组（0．1743对0．0787）（P〈0．05），骨髓造血祖细胞移植后持续增高，＋21d时联合EPC组显著高于单纯移植组（0．4550对0．3905）（P〈0．05）。③联合移植组外周血白细胞计数早期始终高于单纯移植组，＋14d达到高值，（0．74×10^9／L对0．47×10^9／L）（P〈0．05），外周血血小板计数于＋14d升至最高，联合EPC移植组显著高于单纯移植组（1228．9×10^9／L对977．12×10^9／L）（P〈0．05）。结论allo—HSCT联合EPC输注可促进小鼠移植后的造血重建。

关键词：内皮祖细胞造血干细胞移植造血重建

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慢病毒介导RNAi干扰β-catenin对小鼠骨髓间充质干细胞生物学行为的影响

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中国实验血液学杂志 2013年第6期21卷 1546-1551页

作者：付成娟李振宇李德鹏闫志凌陈伟陈翀吴庆运潘秀英徐开林徐州医学院附属医院血液科徐州医学院移植免疫实验室江苏徐州221002

本研究通过构建β-连环蛋白(β-catenin)特异的RNAi慢病毒表达载体,探讨阻断Wnt/β-catenin信号通路对骨髓间充质干细胞(MSC)生物学行为的影响。设计3对针对β-catenin mRNA不同位点的shRNA编码序列,分别连接到慢病毒载体质粒PLB中,构建... 详细信息

本研究通过构建β-连环蛋白(β-catenin)特异的RNAi慢病毒表达载体,探讨阻断Wnt/β-catenin信号通路对骨髓间充质干细胞(MSC)生物学行为的影响。设计3对针对β-catenin mRNA不同位点的shRNA编码序列,分别连接到慢病毒载体质粒PLB中,构建PLB-β-catenin/shRNA1,PLB-β-catenin/shRNA2和PLB-β-catenin/shRNA3;将重组质粒与慢病毒包装质粒及包膜蛋白质粒共转染293FT细胞,收获病毒颗粒,浓缩后测定病毒滴度,感染MSC细胞,并应用流式细胞术分选GFP阳性细胞,Western blot和RT-PCR验证其对细胞内β-catenin基因表达的抑制效果,筛选干扰效率最高质粒;CCK-8法检测细胞增殖,Annexin-V/7-AAD法检测干扰后细胞凋亡情况,细胞划痕实验及Transwell实验检测MSC迁移能力。结果表明:构建的特异性慢病毒siRNA干扰组(PLB-β-catenin/shRNA2)能有效抑制β-catenin的mRNA和蛋白表达,并抑制细胞的增殖;而空载体对照组(PLB group)和正常对照组(control group)细胞增殖无明显变化,两组之间无显著的统计学差异(P>0.05);流式细胞术检测结果显示,采用血清饥饿法处理后,干扰组细胞的凋亡率明显增加,但两对照组之间无统计学差异(P>0.05);细胞划痕和Transwell实验显示,干扰组MSC的迁移能力明显降低,对照组细胞迁移能力无明显变化。结论:构建的特异RNAi慢病毒能够有效抑制β-catenin基因的表达,减少细胞内目的基因mRNA和蛋白的水平,从而对MSC细胞的增殖、凋亡和迁移能力产生重要影响。

关键词： RNA干扰慢病毒载体 wnt信号 β-catenin 间充质干细胞生物学行为

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不同治疗方案对原发免疫性血小板减少症患者外周血调节性T细胞水平的影响

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中华血液学杂志 2013年第6期34卷 478-481页

作者：李振宇李德鹏闫志凌邢伟伟刘凯歌曹江何徐彭潘秀英徐开林徐州医学院附属医院血液科 221002 徐州医学院移植免疫实验室

目的观察原发免疫性血小板减少症（ITP）患者治疗前后外周血调节性T细胞（Treg）水平变化，初步探讨Treg细胞在ITP发病中的作用。方法选取138例新诊断ITP患者，男57例、女81例，中位年龄40（18～70）岁。按治疗方案随机分为①泼尼松组... 详细信息

目的观察原发免疫性血小板减少症（ITP）患者治疗前后外周血调节性T细胞（Treg）水平变化，初步探讨Treg细胞在ITP发病中的作用。方法选取138例新诊断ITP患者，男57例、女81例，中位年龄40（18～70）岁。按治疗方案随机分为①泼尼松组（49例）：泼尼松1．5mg·kg^-1·d-1口服；②地塞米松组（45例）：地塞米松40mg／d第1—4天口服；③地塞米松＋小剂量利妥昔单抗组（44例）：地塞米松40mg／d第1～4天口服，利妥昔单抗100mg第7、14、21、28天静脉滴注。各组患者于治疗前、治疗后14d和28d分别采取外周静脉血，采用流式细胞术检测CD4＋CD25^highCD127low细胞（Treg）水平。以30名健康体检者为正常对照组。结果治疗后第28天，泼尼松组、地塞米松组、地塞米松＋小剂量利妥昔单抗组的总有效率分别为69．4％、66．7％、79．5％，差异无统计学意义；随访12个月，地塞米松＋小剂量利妥昔单抗组持续有效率（66．7％）高于泼尼松组（37．8％）和地塞米松组（22．7％），差异有统计学意义（P〈0．05），泼尼松与地塞米松组之间差异无统计学意义。138例ITP患者治疗前外周血CD4＋CD25highCD127low细胞表达水平低于健康对照组[（1．67±0．70）％对（4．02±0．39）％，P〈0．05]；地塞米松＋／J,N量利妥昔单抗组治疗后14、28dCD4＋CD25highCD127low细胞水平[（4．28±1．09）％、（4．44±0．63）％]均高于治疗前[（1．68±0．68）％]，差异有统计学意义（P值均〈0．05）；泼尼松组、地塞米松组患者治疗后14dCD4＋CD25highCD127low细胞水平均高于治疗前[（3．47±0．77）％对（1．69±0．73）％、（3．23±0．78）％对（1．70±0．75）％，P值均〈0．05]；治疗后28d，泼尼松组、地塞米松组患者CD4’CD25highCD127low细胞水平[（2．69±0．64）％、（2．59±0．67）％]与治疗前比较差异无统计学意义。结论新诊断ITP患者外周血Treg细胞水平低于健康对照组；地塞米松联合小剂量利妥昔单抗提升Treg细胞数量及长期疗效方面优于泼尼松和地塞米松单药方案。

关键词：血小板减少症免疫性单克隆抗体 CD20 糖皮质激素调节性T细胞

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RNA干扰血管内皮钙黏蛋白表达对Ph＋急性淋巴细胞白血病细胞株Sup—B15甲磺酸伊马替尼敏感性的影响

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中华血液学杂志 2013年第6期34卷 522-526页

作者：张焕新闫志凌宋旭光吕超曹江李振宇曾令宇陈翀徐开林徐州医学院附属医院血液科 221000 徐州医学院移植免疫实验室

目的探讨下调Ph＋急性淋巴细胞白血病细胞血管内皮钙黏蛋白（CD144）表达对甲磺酸伊马替尼敏感性的影响及可能的机制。方法通过慢病毒载体介导的RNA干扰（RNAi）沉默急性淋巴细胞白血病株Sup—B15细胞的CD144表达，建立CD144表达稳定下... 详细信息

目的探讨下调Ph＋急性淋巴细胞白血病细胞血管内皮钙黏蛋白（CD144）表达对甲磺酸伊马替尼敏感性的影响及可能的机制。方法通过慢病毒载体介导的RNA干扰（RNAi）沉默急性淋巴细胞白血病株Sup—B15细胞的CD144表达，建立CD144表达稳定下调的细胞株Sup—B15／shVEC。用CCK-8法检测甲磺酸伊马替尼对细胞增殖的影响；用AnnexinV／7一AAD标记，流式细胞术检测细胞凋亡；用流式细胞术检测CD34＋CD38-细胞比例变化；荧光定量PCR检测细胞ALDHImRNA水平；Westernb1ot法检测细胞CD144、CD133、Bcr—ab1、B—catenin表达水平。结果不同浓度甲磺酸伊马替尼对Sup—B15、Sup—B15／shVEC细胞均有增殖抑制作用，其半数抑制浓度（IC50值）分别为25．1、18．7txmo1／L，两组细胞相比差异有统计学意义（P〈0．05）。20txmo1／L甲磺酸伊马替尼作用48h，Sup—B15及Sup—B15／shVEC细胞凋亡率分别为（3．03±0．72）％、（13．52±2．06）％，两组细胞相比差异有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞术检测结果显示Sup—B15细胞CD34＋CD38-细胞率明显高于Sup—B15／shVEC细胞[（2．39±0．28）％对（0．96±0．07）％]，两组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。Sup—B15／shVEC细胞与Sup—B15细胞相比，ALDH1转录水平明显下降（0．043±0．008对0．016±0．003），CD133蛋白、B—catenin总蛋白及核蛋白表达水平也明显下降，而bcr—ab1融合蛋白表达水平无明显变化。结论Sup—B15细胞CD144表达稳定下调后其对甲磺酸伊马替尼敏感性明显增高，该作用可能是通过降低p—catenin蛋白稳定性、减少p—catenin蛋白核转位实现的。

关键词： RNA干扰 Sup—B15细胞伊马替尼钙黏蛋白药物敏感性

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AMPK激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸对U937细胞增殖、分化和凋亡的影响

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中华血液学杂志 2013年第2期34卷 153-156页

作者：吕超曹江孟凡静曾令宇陈翀吴庆运徐开林徐州医学院附属医院血液科 221002 徐州医学院移植免疫实验室

目的探讨单磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸（AICAR）对急性单核细胞白血病细胞系U937细胞增殖、分化和凋亡的影响，并分析其可能的作用机制。方法用不同浓度AICAR处理U937细胞24、48h，用CCK-8法绘制... 详细信息

目的探讨单磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸（AICAR）对急性单核细胞白血病细胞系U937细胞增殖、分化和凋亡的影响，并分析其可能的作用机制。方法用不同浓度AICAR处理U937细胞24、48h，用CCK-8法绘制细胞增殖曲线；以细胞形态学、AnnexinV／7-氨基放线菌素D（7-AAD）双标记等分析细胞凋亡情况；用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CDllb表达。用实时定量PCR检测Bcl—xL、Bax、Bim、caspase-3mRNA表达的变化。结果AICAR对U937细胞增殖具有显著抑制作用，且作用呈时间和剂量依赖性，24、48h的半数抑制浓度（IC50）值分别为1．1和0．9mmoL／L。1．0mmol／LAICAR作用U937细胞24h，流式细胞术检测结果显示CDllb阳性细胞率无明显变化（P〉0．05），但细胞形态学出现典型的凋亡特征；AnnexinV／7-AAD标记的阳性细胞升高，细胞凋亡率为（6．81±1．16）％，高于对照组的（2．744-0．32）％（P〈0．05）。1．0mmol／LAICAR诱导U937细胞凋亡过程中Bcl—xL、Bax表达无明显变化，Bim、caspase-3表达显著增加（P〈0．05）。结论AICAR能有效抑制U937细胞增殖及促进细胞凋亡，但对U937细胞向髓系分化无明显影响，其促凋亡机制与上调Bim与caspase-3基因表达有关。

关键词：氨基咪唑类白血病细胞凋亡单磷酸腺苷激活的蛋白激酶 U937细胞

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靶向AATF基因shRNA表达载体的构建及其稳定表达的白血病U937细胞系的建立

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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 567-570页

作者：吕超曹江孟凡静曾令宇潘彬陈翀吴庆运宋旭光李振宇潘秀英徐开林徐州医学院移植免疫实验室江苏徐州221002 徐州医学院附属医院血液科

本研究旨在构建靶向AATF基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的人白血病U937细胞系。根据GenBank数据库提供的AATF mRNA序列,以228～249、303～324、443～464位序列作为RNA干扰位点,排除同源可能,合成3对互补并编... 详细信息

本研究旨在构建靶向AATF基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的人白血病U937细胞系。根据GenBank数据库提供的AATF mRNA序列,以228～249、303～324、443～464位序列作为RNA干扰位点,排除同源可能,合成3对互补并编码mRNA基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸,克隆至经BamHⅠ、HindⅢ双酶切线性化的pSilencer 3.1人H1启动子干扰载体中,利用测序鉴定所构建的重组载体是否正确,经电穿孔将3个重组载体(pSA-1、pSA-2、pSA-3)转染人白血病U937细胞系,G418(500 mg/L)有限稀释法持续筛选8周后,扩增获得稳定表达的细胞系;RT-PCR、Western blot分别检测稳定转染细胞系的AATF mRNA和AATF蛋白表达。结果表明,AATF干扰序列及读码框完全正确。稳定转染细胞AATF mRNA表达下调,AATF蛋白表达量下降(P<0.05)。结论:成功地构建AATF shRNA真核表达载体及AATF表达稳定抑制的白血病U937细胞系,为以AATF基因为靶点的人白血病进一步研究奠定了实验基础。

关键词： AATF 短发夹RNA 白血病基因表达载体构建

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