检索结果-内蒙古大学图书馆

神经解剖学杂志 2022年第3期38卷 287-292页

作者：韩晶晶张英姚瑞芹曲学彬徐州医科大学附属医院神经内科徐州221000 徐州医科大学第一临床医学院神经内科学教研室徐州221000 徐州医科大学生命科学学院细胞生物学与神经生物学教研室徐州221000

目的:研究toll样受体4(TLR4)在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的作用。方法:C57BL/6野生型(WT)和Tlr4敲除(Tlr4)小鼠注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG)建立EAE模型。定期记录神经功能评分及体重变化;苏木素-伊红(HE)和劳... 详细信息

目的:研究toll样受体4(TLR4)在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的作用。方法:C57BL/6野生型(WT)和Tlr4敲除(Tlr4)小鼠注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG)建立EAE模型。定期记录神经功能评分及体重变化;苏木素-伊红(HE)和劳克坚牢蓝(LFB)染色观察脊髓组织内炎症细胞浸润及髓鞘脱失情况;免疫荧光染色检测髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达。结果:MOG免疫后,与WT组相比,Tlr4小鼠体重下降程度较轻、发病时间延迟、神经功能评分降低、炎性细胞浸润减少、髓鞘脱失减轻、MBP表达增加。结论:敲除Tlr4可减轻EAE小鼠的病理症状。

关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎脱髓鞘病变 toll样受体4 小鼠

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多模块化的医学研究生细胞生物学教学改革

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继续医学教育 2017年第10期31卷 10-12页

作者：曲学彬李风张宝乐陈彦姚瑞芹徐州医科大学基础医学院细胞生物学与神经生物学教研室江苏徐州221009

《细胞生物学》作为一门专业基础课,是生命科学领域发展迅速的前沿学科,与各基础和临床学科的教育教学环节密切相关,在医学研究及临床应用方面发挥了重要作用。以解决本校医学研究生教学过程中"多专业、多类型、多层次、少课时&qu... 详细信息

《细胞生物学》作为一门专业基础课,是生命科学领域发展迅速的前沿学科,与各基础和临床学科的教育教学环节密切相关,在医学研究及临床应用方面发挥了重要作用。以解决本校医学研究生教学过程中"多专业、多类型、多层次、少课时"的问题为出发点,建立了包含基础知识、研究热点、临床案例和实验技能的多模块化《细胞生物学》教学内容和综合性成绩评价体系。通过问卷调查的方式,对此次教学改革在满意度、授课内容、考核方式等方面进行评价,以期进一步完善教学体系、提高教学效果。

关键词：细胞生物学多模块化医学研究生教学改革

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对胶质瘤干细胞的研究进展

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当代医药论丛 2017年第4期15卷 97-98页

作者：符海华张宇琼孔志敏卜鑫磊经历李风徐州医科大学江苏徐州221004 徐州医科大学基础医学院细胞生物学与神经生物学教研室江苏徐州221004

胶质瘤是临床上最为常见的一种侵袭性颅内原发性肿瘤。此病是最难治愈的中枢神经系统疾病之一。近年来,临床上常联合应用胶质瘤切除术、放疗和化疗对胶质瘤患者进行治疗,虽取得了一定的疗效,但患者的预后仍较差,且极易出现病情复发的情... 详细信息

胶质瘤是临床上最为常见的一种侵袭性颅内原发性肿瘤。此病是最难治愈的中枢神经系统疾病之一。近年来,临床上常联合应用胶质瘤切除术、放疗和化疗对胶质瘤患者进行治疗,虽取得了一定的疗效,但患者的预后仍较差,且极易出现病情复发的情况。接受上述联合治疗患者的生存期约为15个月[1]。有研究指出,胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)是导致胶质瘤患者病情复发的根源。这一理论的提出为临床上治疗胶质瘤提供了新的思路。GSC已成为目前临床上胶质瘤研究中的热点之一。最新的临床研究证实,GSC介导了胶质瘤肿瘤细胞的异质性、耐药性,且与患者的预后密切相关。

关键词：胶质瘤胶质瘤干细胞异质性耐药性疗效

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IL-2抑制小鼠CD4^+ CD62L^+ T细胞分化为Th17细胞

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基础医学与临床 2016年第1期36卷 19-23页

作者：周骏王婷姚瑞芹曲学彬徐州医学院基础医学院细胞生物学与神经生物学教研室江苏徐州221009

目的研究IL-2对小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞在体外向Th17细胞分化的作用。方法免疫磁珠法分选C57BL/6小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞,于抗体包被的培养板中培养3 d,实验分为对照组和IL-2处理组。对照组为经典Th17诱导分化培养基,IL-2处理组在对... 详细信息

目的研究IL-2对小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞在体外向Th17细胞分化的作用。方法免疫磁珠法分选C57BL/6小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞,于抗体包被的培养板中培养3 d,实验分为对照组和IL-2处理组。对照组为经典Th17诱导分化培养基,IL-2处理组在对照组基础上于培养体系中添加IL-2。CFSE染色检测细胞增殖,Annexin V-PI法检测细胞凋亡,ELISA检测培养上清中IL-17A的浓度,荧光定量PCR检测Rorγt mRNA的表达,流式细胞术检测CD4^+IL-17^+Th17的生成比例以及Rorγt的表达。结果磁珠分选的小鼠脾脏CD4+CD62L+nave T细胞纯度高于95%。与对照组相比,IL-2处理组细胞数目明显增多,增殖能力明显增强(P<0.05),细胞凋亡比例降低(P<0.05);IL-2处理组培养上清中IL-17A的浓度明显降低(P<0.05),且CD4+IL-17+细胞比例下降,其特异性转录因子Rorγt的表达水平也显著降低(P<0.05)。结论 IL-2在CD4+CD62L+T细胞分化为Th17的过程中,能够促进T细胞的增殖并且抑制Th17的分化。

关键词： IL-2 Th17 增殖分化

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医学研究生电镜取材实验课教学探讨

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解剖学杂志 2016年第1期39卷 125-126页

作者：董富兴于红丽刘亚萍董红燕姚瑞芹徐州医学院神经生物学研究中心徐州221004 徐州医学院形态学实验教学中心徐州221004 徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室徐州221004

在进行电镜科研样品及医院电镜外检标本观察时，常发现最终得不到理想的电镜超微结构图片，究其原因大都是电镜样品取材时出了问题，送检者没有经过规范的电镜取材培训，操作不当，最终导致电镜观察结果不理想甚至失败。

关键词：电镜超微结构实验课教学医学研究生取材电镜样品操作不当电镜观察

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CEP55慢病毒表达载体构建和U251-CEP55细胞株的建立

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现代生物医学进展 2017年第33期17卷 6422-6426,6421页

作者：金丹李风高玥姬广全高殿帅徐州医科大学附属医院江苏徐州221004 徐州医科大学细胞生物学与神经生物学教研室江苏徐州221004 徐州医科大学基础医学院江苏徐州221004 徐州医科大学临床医学院江苏徐州221004 徐州医科大学解剖学和神经生物学教研室江苏徐州221004

目的:构建CEP55慢病毒表达载体,建立稳定表达CEP55的人脑胶质瘤U251细胞株。方法:使用PCR扩增方法将CEP55基因序列进行扩增,转入质粒中,并整合到载体上,构建重组质粒GV358-CEP55载体。与p Helper 1.0和p Helper 2.0质粒共转染293T细胞... 详细信息

目的:构建CEP55慢病毒表达载体,建立稳定表达CEP55的人脑胶质瘤U251细胞株。方法:使用PCR扩增方法将CEP55基因序列进行扩增,转入质粒中,并整合到载体上,构建重组质粒GV358-CEP55载体。与p Helper 1.0和p Helper 2.0质粒共转染293T细胞使其产生慢病毒,以GV358空载体包装的慢病毒作为对照。显微镜观察绿色荧光蛋白GFP表达强度,确定慢病毒的感染效率。采用病毒梯度稀释法测定病毒滴度。慢病毒感染人胶质瘤细胞株U251后,经嘌呤霉素筛选出稳定表达CEP55基因的细胞株U251-CEP55。q RT-PCR和Western blot两种方法分别检测CEP55 m RNA及蛋白的表达。结果:测序证实慢病毒表达载体GV358-CEP55构建成功;转染293T细胞获得高滴度的病毒。病毒感染U251细胞后,使用嘌呤霉素筛选得到稳定转染细胞株U251-CEP55;q RT-PCR和Western blot方法分别检测后发现,U251-CEP55细胞株中CEP55 m RNA和蛋白水平的表达明显高于对照组。结论:成功构建CEP55慢病毒表达载体,获得稳定表达CEP55的人胶质瘤U251细胞株,为CEP55基因功能的探究给予了一定的实验基础。

关键词： CEP55基因慢病毒载体 U251细胞

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MCT1在不同发育时期及缺血缺氧脑白质损伤大鼠胼胝体内的表达

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神经解剖学杂志 2016年第2期32卷 179-184页

作者：江红艳刘守正张智慧程冉张振中余浩姚瑞芹沭阳县人民医院康复科沭阳223600 徐州医学院细胞生物学及神经生物学教研室徐州221009

目的:观察单羧酸转运体-1(monocarboxylate transporter-1,MCT1)在不同发育时期及缺血缺氧(hypoxia-ischemia,HI)损伤模型大鼠胼胝体内的表达。方法:采用多聚甲醛灌注固定7 d、14 d、21 d和28 d SD大鼠脑组织,冰冻切片后进行MCT1/CNPase... 详细信息

目的:观察单羧酸转运体-1(monocarboxylate transporter-1,MCT1)在不同发育时期及缺血缺氧(hypoxia-ischemia,HI)损伤模型大鼠胼胝体内的表达。方法:采用多聚甲醛灌注固定7 d、14 d、21 d和28 d SD大鼠脑组织,冰冻切片后进行MCT1/CNPase和MCT1/GFAP免疫荧光双标,观察胼胝体内MCT1在少突胶质细胞和星形胶质细胞的表达;另选生后3 d的SD大鼠,右侧颈总动脉结扎及缺氧处理以建立HI性脑白质损伤模型,至生后28d观察胼胝体MCT1的表达。结果:MCT1分别与CNPase和GFAP免疫荧光双标显示,生后早期,正常大鼠胼胝体内MCT1主要在GFAP阳性细胞表达,随生长时间延长,MCT1在CNPase阳性细胞的表达增加,而在GFAP阳性细胞的表达逐渐减少;HI损伤后28 d,MCT1/GAFP免疫荧光强度较对照组显著升高(P<0.01),而MCT1/CNPase的表达较对照组显著降低(P<0.01)。结论:在成年SD大鼠胼胝体,MCT1主要在CNPase阳性的少突胶质细胞表达,而HI脑白质损伤后,MCT1主要在星形胶质细胞表达。

关键词：单羧酸转运体-1 胼胝体发育少突胶质细胞缺血缺氧

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缺氧对少突胶质前体细胞内NLRP3炎症小体表达的影响

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神经解剖学杂志 2016年第4期32卷 513-517页

作者：马丽吴明凤江红艳武秀香董富兴曲学彬姚瑞芹徐州医学院细胞生物学及神经生物学教研室徐州2210092 沭阳县人民医院康复科沭阳223600

目的:观察缺氧对少突胶质前体细胞(preOL)内Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达的影响。方法:将体外分离纯化的preOL分为正常组和缺氧组,1%O25%CO2、37℃缺氧培养箱培养9 h建立preOL缺氧损伤模型... 详细信息

目的:观察缺氧对少突胶质前体细胞(preOL)内Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达的影响。方法:将体外分离纯化的preOL分为正常组和缺氧组,1%O25%CO2、37℃缺氧培养箱培养9 h建立preOL缺氧损伤模型。TUNEL法检测细胞凋亡,免疫荧光染色、qRT-PCR及Western Blot检测NLRP3表达,Western Blot检测ASC表达。结果:preOL缺氧损伤后胞质内出现空泡,胞膜破裂,突起出现肿胀、断裂;凋亡率较正常组增加(P<0.05);缺氧组NLRP3阳性细胞数和平均荧光强度均较正常组增加(P<0.05),NLRP3的mRNA及蛋白水平也均较正常组增加(P<0.05);ASC蛋白的表达在缺氧后上调(P<0.05)。结论:preOL的缺氧损伤可能与激活NLRP3炎症小体有关。

关键词：少突胶质前体细胞 Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3 凋亡相关斑点样蛋白 NLRP3炎症小体缺氧

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过表达Olig2和Nkx2.2人胚胎干细胞系的建立

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解剖学杂志 2015年第6期38卷 645-648页

作者：杨丽华王婷马丽罗梦娇曲学彬武秀香姚瑞芹第二军医大学细胞生物学教研室上海200433 徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室徐州221009

目的:建立过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞(hESCs)系.方法:利用RT-PCR从鼠N2A细胞克隆出Olig2和Nkx2.2的ORF片段,将Olig2和Nkx2.2基因编码序列分别和带有HA及Flag的载体连接,构建Olig2-HA和Nkx2.2-Flag重组载体.将构建的载体分别与2种病毒辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,制备并浓缩Olig2-HA和Nkx2.2-Flag慢病毒颗粒,感染hESCs,嘌呤霉素筛选的阳性克隆传代培养10代后鉴定细胞内Olig2和Nkx2.2的表达.结果:PCR扩增得到含Olig2和Nkx2.2基因编码序列的特异性条带;携带有Olig2和Nkx2.2基因的慢病毒能够同时感染hESCs,表达Olig2-HA和Nkx2.2-Flag融合蛋白,并稳定遗传.结论:成功构建了同时过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞系.

关键词： Olig2 Nkx2.2 过表达人胚胎干细胞克隆

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白介素10抑制幼稚T细胞分化为辅助性T细胞17的研究

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神经解剖学杂志 2015年第4期31卷 423-427页

作者：韩晶晶周骏王婷曲学彬徐州医学院临床学院神经病学实验室徐州221002徐州221009 徐州医学院基础医学院细胞生物学与神经生物学教研室徐州221009

目的:研究白介素10(interleukin,IL-10)在辅助性T细胞17(helper T cell,Th17)体外诱导分化中的作用。方法:分选小鼠脾脏CD4+幼稚T(nave T)细胞,在经典的Th17诱导条件中加入不同浓度的IL-10中和抗体(0、1、5、10μg/ml NA-IL-10),流式... 详细信息

目的:研究白介素10(interleukin,IL-10)在辅助性T细胞17(helper T cell,Th17)体外诱导分化中的作用。方法:分选小鼠脾脏CD4+幼稚T(nave T)细胞,在经典的Th17诱导条件中加入不同浓度的IL-10中和抗体(0、1、5、10μg/ml NA-IL-10),流式细胞术检测各组CD4+IL-17+细胞的生成比率,ELISA法检测各组培养上清中Th17特异细胞因子IL-17A和IL-17F的浓度,qRT-PCR及Western Blot检测各组细胞中表达转录因子维甲酸相关孤核受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptor gamma t,Rorγt)的表达水平。结果:在经典的诱导CD4+nave T细胞分化为Th17的过程中,IL-10的浓度随诱导天数的增加而逐渐上升。加入NA-IL-10后,IL-17+细胞的诱导比例随NA-IL-10浓度的增加而逐渐上升,在10μg/ml的NA-IL-10条件下,诱导生成的IL-17+细胞可达22.1%±4.5%,与无NA-IL-10组8.1%±1.9%相比差异有统计学意义(P<0.05)。10μg/ml NA-IL-10组IL-17A和IL-17F的浓度以及Rorγt的表达水平均明显高于无NA-IL-10组(P<0.05)。结论:降低培养条件中IL-10的水平能够有效地促进Th17的体外诱导分化,也进一步验证了IL-10对Th17分化的抑制作用。

关键词：辅助性T细胞17 白介素-10 幼稚T细胞中和抗体

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