检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2015年第5期23卷 1272-1276页

作者：尹玲玲阮素红田宇赵恺徐开林徐州医学院附属医院血液科江苏徐州221002 徐州医学院血液病研究所骨髓干细胞重点实验室江苏徐州221002

目的:克隆抗人IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)单克隆抗体(McAb)可变区基因及构建嵌合抗原受体(CAR)重组质粒。方法:采用RACE、重叠延伸PCR技术,从3H6E10、10D8A7杂交瘤细胞总RNA中克隆扩增IL1RAP McAb的重链可变区(VH)和轻链... 详细信息

目的:克隆抗人IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)单克隆抗体(McAb)可变区基因及构建嵌合抗原受体(CAR)重组质粒。方法:采用RACE、重叠延伸PCR技术,从3H6E10、10D8A7杂交瘤细胞总RNA中克隆扩增IL1RAP McAb的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)段DNA,并连接成IL1RAP特异性单链抗体可变区基因片段(scFv)。将hCD8α跨膜段、hCD137胞内段、hTCRζ链、hCD8α引导肽(Signal peptide)、scFv-anti-IL1RAP连入载体LV-Lac,并与辅助载体pMD2.G、psPAX2共同转染293FT细胞,包装获得病毒颗粒。结果:获得了两种抗人IL1RAP McAb的VH及VL基因,3H6E10 VH和VL基因全长402 bp和393 bp,可分别编码134、131个氨基酸;10D8A7 VH和VL基因全长423 bp和381 bp,可分别编码141、127个氨基酸。构建重组表达载体LV-3H6E10 scFv-ICD、LV-10D8A7 scFv-ICD(ICD:CD8α跨膜段-CD137胞内段-TCRζ链)后,经测序证实目的片段序列正确。重组质粒转染293FT细胞获得慢病毒颗粒。结论:本实验成功构建了能特异性结合人IL1RAP蛋白的嵌合受体,为以后制备IL1RAP-CAR杀伤性T细胞疫苗打下基础。

关键词： IL1RAP 基因克隆嵌合受体重组质粒

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IL1RAP单克隆抗体的制备与鉴定

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中国实验血液学杂志 2015年第4期23卷 962-965页

作者：尹玲玲阮素红田宇徐开林赵恺徐州医学院血液病研究所骨髓干细胞重点实验室江苏徐州221002 徐州医学院附属医院血液科江苏徐州221002

目的:制备针对白血病干细胞(LSC)表面标志蛋白IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。方法:杂交瘤细胞3H6E10、10D8A7种植BALB/c小鼠腹腔,收获腹水,纯化后得到特异性抗人IL1RAP的单克隆抗体。分别... 详细信息

目的:制备针对白血病干细胞(LSC)表面标志蛋白IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。方法:杂交瘤细胞3H6E10、10D8A7种植BALB/c小鼠腹腔,收获腹水,纯化后得到特异性抗人IL1RAP的单克隆抗体。分别应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Nondenaturing-PAGE)、ELISA和Western blot法对纯化单克隆抗体分别进行抗体纯度、效价和敏感性检测。结果:获得了两种IL1RAP纯化单克隆抗体,命名为3H6E10 Mc Ab和10D8A7 Mc Ab,其纯度分别为95%和94%;两种纯化的单克隆抗体效价为1∶81000,且能特异性识别IL1RAP纯化蛋白、正常人及白血病病人的细胞内源性蛋白。结论:本研究成功制备了能特异性结合人IL1RAP的纯化单克隆抗体,为将来有效清除体内LSC提供了新途径。

关键词： IL1RAP 单克隆抗体白血病干细胞

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食管癌细胞株TE-1 microRNA表达谱研究

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中国公共卫生 2015年第12期31卷 1623-1625页

作者：董国凯朱正秋孙晓明李周儒李姗姗程言博蔡红星徐州医学院法医学教研室江苏徐州221002 徐州医学院附属医院肿瘤内科

目的研究食管癌细胞株TE-1的微小核糖核酸(miRNAs)表达谱,为食管癌的早期诊断提供参考依据。方法常规方法培养食管癌细胞TE-1和正常细胞HET-1A,提取其总RNA,经Cy3荧光标记后进行片段化、芯片杂交,应用扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用软... 详细信息

目的研究食管癌细胞株TE-1的微小核糖核酸(miRNAs)表达谱,为食管癌的早期诊断提供参考依据。方法常规方法培养食管癌细胞TE-1和正常细胞HET-1A,提取其总RNA,经Cy3荧光标记后进行片段化、芯片杂交,应用扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用软件对扫描图像进行数字化处理和分析,筛选出差异表达miRNA;挑选芯片检测中上调和下调最明显的miRNA各5条,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测予以验证。结果筛选出差异表达的miRNA 676条,其中113条差异均有统计学意义(均P<0.05),包括76条上调表达和37条下调表达;挑选差异显著且信号强度较高的10条miRNA进行荧光定量RT-PCR检测,其结果与芯片检测一致。结论采用基因芯片方法筛选到食管癌细胞株TE-1与正常细胞株HET-1A差异表达的miRNAs,为进一步寻找新的食管癌分子标志物奠定基础。

关键词：食管癌鳞癌基因芯片

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探讨脾切除术治疗特发性血小板减少性紫癜疗效

探讨脾切除术治疗特发性血小板减少性紫癜疗效

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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：李护君闫志凌刘凯歌李振宇徐开林徐州医科大学附属医院血液科徐州医科大学附属医院血液科徐州医学院移植免疫实验室

目的：探讨脾切除术应用于治疗免疫性血小板减少症(ITP)的疗效。方法：回顾分析2007年12月至2012年12月就诊于该院的ITP患者48例，对激素治疗有效但反复复发患者32例，激素治疗无效患者16例，对两组患者均进行脾切除术，观察其疗效，术... 详细信息

目的：探讨脾切除术应用于治疗免疫性血小板减少症(ITP)的疗效。方法：回顾分析2007年12月至2012年12月就诊于该院的ITP患者48例，对激素治疗有效但反复复发患者32例，激素治疗无效患者16例，对两组患者均进行脾切除术，观察其疗效，术后随访2-5年。

关键词：脾切除术免疫性血小板减少症激素

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P-cadherin和HSP27蛋白在胃癌组织的表达及临床意义

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南京医科大学学报（自然科学版） 2015年第1期35卷 26-30页

作者：胡风兰何秋瑜李祥佩刘清华刘莹朱祖安徐州医学院病理教研室江苏徐州221000 徐州医学院附属医院消化内科江苏徐州221000

目的:探讨P钙黏蛋白(P-cadherin)与热休克蛋白27(HSP27)在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系,进而探讨其作为预后指标的意义。方法:建立组织芯片,通过免疫组化SP法检测75例无术前放化疗史的胃癌手术标本和75例正常胃组织中P... 详细信息

目的:探讨P钙黏蛋白(P-cadherin)与热休克蛋白27(HSP27)在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系,进而探讨其作为预后指标的意义。方法:建立组织芯片,通过免疫组化SP法检测75例无术前放化疗史的胃癌手术标本和75例正常胃组织中P-cadherin、HSP27的表达情况,并对随访患者进行生存分析。结果 :在胃癌组织及正常胃组织中,Pcadherin、HSP27的表达率分别为40.0%、82.7%(P<0.001)和64.0%、30.7%(P<0.001)。P-cadherin低表达和HSP27高表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05),HSP27高表达还与肿瘤大小相关(P<0.05)。Pearson相关分析显示,P-cadherin与HSP27在胃癌中的表达呈负相关(P<0.05)。单因素Kaplan-Meier回归分析显示P-cadherin和HSP27与预后相关(P<0.05)。Cox单因素回归分析显示P-cadherin、HSP27、临床分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移与患者预后相关(P<0.05);Cox多因素回归模型分析显示HSP27、临床分期与患者预后相关(P<0.05)。结论:在胃癌中,P-cadherin低表达、HSP27高表达与胃癌临床病理特征和生物学行为密切相关。P-cadherin与HSP27的表达在胃癌组织中呈负相关。P-cadherin和HSP27可作为判断患者预后的候选指标。

关键词：组织芯片 P钙黏素热休克蛋白27

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OXO-Ses对小鼠神经病理性疼痛的镇痛作用研究

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中国疼痛医学杂志 2016年第10期22卷 743-748页

作者：张梅王永杰左振兴严敏李相尧徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室徐州221000 西安交通大学前沿科学技术研究院线粒体生物医学研究中心生物医学信息工程教育部重点实验室西安710049 浙江大学医学院脑科学研究所神经科学与合作创新中心杭州310058 西安交大医学院第一附属医院神经外科西安710061 浙江大学医学院附属第二医院麻醉科杭州310000

目的：研究毒蕈碱受体（muscarinic acetylcholine receptors,m ACh Rs）非选择性激动剂氧化震颤素半富马酸盐（oxotremorine sesquifumarate,OXO-Ses）对神经病理性疼痛的镇痛作用。方法：6~8周雄性C57BL/6小鼠,体重20~25 g。随机分为对照组、腓总神经（common peroneal nerve,CPN）损伤组。两组分别于造模前、后测定小鼠缩足反射阈值（paw withdraw thresholds,PWTs）和静态负重实验（static weight bearing,SWB）值。CPN后3天、14天腹腔注射OXO-Ses,浓度分别为0.01 mg/kg,0.05 mg/kg,0.10 mg/kg,在注射前、注射后0.5小时和2小时检测PWTs和SWB值。结果：与对照组相比,OXOSes能够显著提高实验组小鼠的PWTs（P〈0.05）,并改变小鼠的后足重量分布状况（P〈0.05）,呈现出剂量依赖性。结论：OXO-Ses非选择性的激活m ACh Rs可以减轻慢性痛小鼠的机械性触诱发痛,对神经损伤小鼠的慢性痛有一定的镇痛作用。

关键词：氧化震颤素半富马酸盐毒蕈碱受体慢性痛触诱发痛

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丰富环境对创伤后应激障碍样大鼠自发活动和海马c—Fos、5-HT表达的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2015年第1期24卷 8-11页

作者：张玉静周焱许艳王虎胡燕谭迎春耿德勤徐州医学院研究生学院徐州221002 徐州医学院神经精神病学教研室徐州221002 徐州医学院附属医院徐州221002

目的观察丰富环境对单次延长应激（singleprolongedstress，SPS）大鼠的自发活动和海马5-羟色胺（5-HT）、c—Fos蛋白表达的影响，探讨环境因素对创伤后应激障碍（posttraumaticstressdisorder，PTSD）是否产生影响及可能机制。方法Spra... 详细信息

目的观察丰富环境对单次延长应激（singleprolongedstress，SPS）大鼠的自发活动和海马5-羟色胺（5-HT）、c—Fos蛋白表达的影响，探讨环境因素对创伤后应激障碍（posttraumaticstressdisorder，PTSD）是否产生影响及可能机制。方法SpragueDawley雄性大鼠48只按随机数字表法分为对照＋应激组（CS），独居＋应激组（IS），丰富环境＋应激组（ES），空白对照组（C），独居对照组（Ic），丰富环境对照组（EC）。Cs组、Is组和Es组采用SPS方法制作PTSD模型。造模后立即给予各自环境干预，CS组和C组给予群居环境，ES组和EC组给予丰富环境（4h／d），IS组和Ic组给予独居环境，共干预14d10实验前及实验后7d、14d进行自发活动测试观察行为学改变，并用免疫组织化学染色法测定大鼠海马区5-HT和c—Fos的表达。结果（1）自发活动实验结果实验前六组大鼠穿行格数和穿行距离的差异无统计学意义（P〉0．05），SPS7d时Is组大鼠穿行格数[（27．38±12．96）格]，明显低于CS组[（54．38±16．51）格，（P〈0．05）]，SPS14d时Is组穿行格数和总路程[（12．12±9．64）格，（2．71±1．99）m]明显低于CS组[（45．25±8．37）格，（6．37±1．18）m，（P〈0．05）]；SPS14d时ES组的穿行格数和总路程[（69．75±10．05）格，（10．69±1．50）in]明显高于cs组（P〈0．05）；（2）免疫组化结果5-HT：SPS14d时Es组的平均光密度值（0．0495±0．0074）低于CS组[（0．6138±0．0059），（P〈0．05）]，IS组的平均光密度值（0．1125±0．0095）高于CS组（P〈0．05）；（3）免疫组化结果c—Fos：SPS14d时ES组的平均光密度值（0．2613±0．0063）低于CS组[（0．3108±0．0074）（P〈0．05）]，Is组（0．3585±0．0150）高于CS组（P〈0．05）。结论丰富环境可以改善PTSD大鼠的活动水平，并减少海马区5-HT、c—Fos的表达。

关键词：创伤后应激障碍单次延长应激丰富环境独居 c—Fos 5-羟色胺

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新生鼠和胎鼠海马神经干细胞分离和培养方法的比较

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神经解剖学杂志 2015年第4期31卷 481-486页

作者：白连琴刘娜李腾腾张林庄亚飞袁宝强董红燕徐州医学院附属医院儿童神经与康复科徐州221000 徐州医学院神经生物学教研室徐州221000

目的：探索大鼠海马神经于细胞离体培养的实验条件和方法，并建立一种简便且获得率较高的实验方法。方法：分别随机选取新生1—3dsD大鼠和孕18—19dSD胎鼠，并提取海马组织，采用机械吹打结合胰蛋白酶消化的方法获得单细胞悬液，然后对... 详细信息

目的：探索大鼠海马神经于细胞离体培养的实验条件和方法，并建立一种简便且获得率较高的实验方法。方法：分别随机选取新生1—3dsD大鼠和孕18—19dSD胎鼠，并提取海马组织，采用机械吹打结合胰蛋白酶消化的方法获得单细胞悬液，然后对培养出的细胞进行鉴定和诱导分化，最后测定并分别比较两组原代细胞获得率和增殖率以及凋亡率之间的差异。结果：来源于两种不同发育阶段大鼠的海马组织培养出的细胞均呈Nestin阳性和BrdU阳性的神经球样结构，诱导分化后的细胞高表达βⅢ-tublin和GFAP。其中，胎鼠组原代细胞获得率较高、增殖能力较强，并有统计学差异（P〈0．05）；但两组神经干细胞的凋亡率无明显差异（P〉0．05）。结论：胎鼠和新生鼠海马组织均能培养出神经干细胞，而且胎鼠组细胞产出率更高。

关键词：海马神经干细胞细胞培养分化细胞增殖细胞凋亡新生鼠胎鼠

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Local administration of Thiamine Relieve Ongoing Pain in a New Rat Pain Model of Ⅱ Degree Burn injury

Local administration of Thiamine Relieve Ongoing Pain in a N...

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第十五次华东六省一市麻醉学年会、中国长江医学论坛—-2016麻醉学年会暨江苏省第二十一次麻醉学学术会议

作者：张茂银张联义岳冬梅齐敦益刘功俭刘苏徐州医学院附属医院徐州医学院附属医院徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室

来源：评论

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乳腺癌术后疼痛及镇痛方法的研究进展

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国际麻醉学与复苏杂志 2016年第6期37卷 543-546,558页

作者：苏明刘功俭徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州医学院附属医院麻醉科221004

背景乳腺癌为女性患者常见的一种恶性肿瘤,手术治疗是主要的治疗措施.乳腺癌术后疼痛具有独特的疾病特点,并且可以成为一种慢性疼痛长期影响患者的生活质量,一直是临床亟待解决的问题. 目的阐述乳腺癌术后疼痛及镇痛方法的研究进展,... 详细信息

背景乳腺癌为女性患者常见的一种恶性肿瘤,手术治疗是主要的治疗措施.乳腺癌术后疼痛具有独特的疾病特点,并且可以成为一种慢性疼痛长期影响患者的生活质量,一直是临床亟待解决的问题. 目的阐述乳腺癌术后疼痛及镇痛方法的研究进展,为疼痛的预防和治疗提供参考. 内容综述乳腺癌术后疼痛及其镇痛方法的研究现状. 趋向进一步探讨乳腺癌术后疼痛综合征的治疗方法,以明确有效的防治措施.

关键词：乳腺癌术后疼痛镇痛

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