检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验外科杂志 2012年第12期29卷 2452-2454页

作者：任泽强雍红梅张秀忠张蓬波白津时梅林郑骏年徐州医学院附属医院普外科江苏221002 江苏省肿瘤生物治疗重点实验室

目的探讨下调Cullin1（Cull）基因对乳腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法利用脂质体将靶向Cull基因小干扰RNA（siRNA）、对照siRNA分别转染人乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，Westernblot技术检测Cull基因表达，细胞计数试剂盒（CCK-8... 详细信息

目的探讨下调Cullin1（Cull）基因对乳腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法利用脂质体将靶向Cull基因小干扰RNA（siRNA）、对照siRNA分别转染人乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，Westernblot技术检测Cull基因表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）比色法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期变化，Westernblot检测细胞周期蛋白（Cyclin）A、CyclinD1、CyclinE以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21和p27表达。结果与对照组比较，转染CullsiRNA48h后MDA—MB-231和BT-549细胞Cull蛋白表达明显降低；细胞增殖明显减慢，72h和96h更加明显（P〈0．01）；Cull基因干涉6h后2种细胞G，期细胞比例[（29．49±0．75）％、（24．86％±0．52）％]增加，与对照组[（17．39±0．56）％、（t2．73％±0．41）％]比较差异有统计学意义（P〈0．01）。Cull基因干涉后2种细胞CyclinA、CyclinD1及CyclinE表达明显减少，而p21和p27表达明显增加，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论Cull基因干涉后能通过影响细胞周期蛋白及其依赖性激酶抑制因子的表达，使乳腺癌细胞停滞在G1期，最终抑制其增殖。

关键词： Cul1基因乳腺癌增殖细胞周期

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Rap2B在肾癌中的表达及其意义

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中华实验外科杂志 2012年第9期29卷 1799-1801页

作者：陈仁富渠德宝底洁卉李连涛陈菲菲刘俊杰温儒民李望郑骏年徐州医学院附属医院泌尿外科 221002 江苏省肿瘤生物治疗重点实验室

目的探讨Rap2B在肾透明细胞癌中的表达及其意义。方法Westernblot法检测。肾透明细胞癌Caki-1、786-O细胞及人胚肾细胞株HEK293、人肾小管细胞株HK2的Rap2B表达。收集30例手术切除的肾癌组织与癌旁组织标本，Westernblot法、免疫组织化... 详细信息

目的探讨Rap2B在肾透明细胞癌中的表达及其意义。方法Westernblot法检测。肾透明细胞癌Caki-1、786-O细胞及人胚肾细胞株HEK293、人肾小管细胞株HK2的Rap2B表达。收集30例手术切除的肾癌组织与癌旁组织标本，Westernblot法、免疫组织化学法检测Rap2B表达。免疫组织化学检测75例肾透明细胞癌组织芯片的Rap2B表达，并分析其与病理分期的相关性。结果肾透明细胞癌细胞株的Rap2B蛋白表达显著高于正常肾小管细胞株（P〈0．05）；肾癌组织Rap2B表达水平明显高于癌旁组织（P〈0．05）；免疫组织化学显示，Rap2B主要定位于癌细胞胞膜上，正常细胞中很少。肾癌组织和芯片中Rap2B表达均显著高于癌旁组织（P〈0．05），组织芯片显示Rap2B表达与病理分期无相关性。结论肾透明细胞癌Rap2B表达水平增高。

关键词： Rap2B 肾透明细胞癌

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胶质瘤中GDNF基因启动子Ⅱ区甲基化修饰发生变化

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中国现代医学杂志 2012年第30期22卷 21-25页

作者：王建村任庆先高殿帅徐州医学院附属医院神经外科江苏徐州221002 苏州大学附属第一医院神经外科江苏苏州215006 徐州医学院神经生物实验室江苏徐州221002

目的检测胶质瘤组织中神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)基因启动子Ⅱ区甲基化修饰水平,以期探讨其与目的基因在胶质瘤组织中高转录的关系。方法基因测序技术检测胶质瘤组织中GDNF基因启动子Ⅱ区碱基序列是否发生突变;采用BSP检测G... 详细信息

目的检测胶质瘤组织中神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)基因启动子Ⅱ区甲基化修饰水平,以期探讨其与目的基因在胶质瘤组织中高转录的关系。方法基因测序技术检测胶质瘤组织中GDNF基因启动子Ⅱ区碱基序列是否发生突变;采用BSP检测GDNF基因启动子Ⅱ区的甲基化修饰水平;通过qPCR检测胶质瘤组织中GDNF基因mRNA的表达水平。结果胶质瘤组织中GDNF基因启动子Ⅱ区没有发生有意义的突变位点;启动子Ⅱ区总甲基化修饰率在正常组、低级别、高级别胶质瘤中分别为:25.57%,15.42%,42.19%,各组间比较均有明显差异(P<0.05);在低级别组中增强子的甲基化水平最低,而高级别组中沉默子甲基化水平最高;qPCR结果显示胶质瘤组织中GDNF mRNA水平较正常脑组织显著升高。结论在胶质瘤组织中,GDNF基因启动子Ⅱ区甲基化修饰水平发生显著变化,此甲基化修饰形式的变化可能参与目的基因在胶质瘤组织中的高表达机制。

关键词：胶质瘤细胞胶质细胞源性神经营养因子启动子甲基化顺式作用元件转录因子

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加巴喷丁减轻骨癌痛大鼠的机械痛敏

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中华行为医学与脑科学杂志 2012年第8期21卷 693-695页

作者：陈立平岳冬梅胡学铭柳娇马正良申文袁燕徐州医学院江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州221000 南京市鼓楼医院麻醉科徐州医学院附属医院疼痛科徐州221000

目的观察不同剂量加巴喷丁对胫骨癌痛大鼠机械痛敏的影响.方法雌性SD大鼠42只,随机分为7组（n=6）,即空白对照组（N组）、假手术＋生理盐水组（SN组）、假手术＋加巴喷丁200 mg ·kg-1·d-1组（SG200组）、骨癌痛＋生理盐水组... 详细信息

目的观察不同剂量加巴喷丁对胫骨癌痛大鼠机械痛敏的影响.方法雌性SD大鼠42只,随机分为7组（n=6）,即空白对照组（N组）、假手术＋生理盐水组（SN组）、假手术＋加巴喷丁200 mg ·kg-1·d-1组（SG200组）、骨癌痛＋生理盐水组（BN组）、骨癌痛＋加巴喷丁50mg·kg^-1·d^-1组（BG50组）、骨癌痛＋加巴喷丁100mg·kg^-1·d^-1组（BG100组）和骨癌痛＋加巴喷丁200mg· kg-1·d-1组（BG200组）.从术后第7天起,在保持正常饮水量的前提下,SG200组、BG50组、BG100组和BG200组每天分别按体重将加巴喷丁200mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg溶于5 ml生理盐水中饲喂,N组、SN 组和BN组仅给予同等量的生理盐水.分别在术前、术后1,3,5,7d和8,10,12,14d（分别对应为给药后1,3,5,7d）测定右后肢机械缩足阈值（MWT）和自由行走痛行为评分.结果术后第7天,骨癌痛大鼠MWT [ （3.78 ±0.38）g]和自由行走痛评分[（0.76 ±0.44）分]与空白对照组[（14.50 ±1.38）g,（0.00±0.00）分]和假手术组[（10.21±0.88）g,（0.00±0.00）分]比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）.在连续应用加巴喷丁的1周中,SN组和SG200组大鼠行为学的差异无统计学意义（P＞0.05）; BG50组与BN组比较,MWT无明显差异（P＞0.05）,自由行走痛行为评分相对降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;术后第10天,BG100组[（5.35±0.85）g]和BG200组[（5.71±0.72）g]与BN组[（2.61±0.40）g]和BG50组[（3.28±1.15）g]比较,MWT明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;直到术后14d,差异仍有统计学意义（P＜0.05）;从术后第8天起,BG100组和BG200组自由行走痛行为评分较BN组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论中到大剂量的加巴喷丁可以缓解骨癌痛大鼠的疼痛症状,但是随着肿瘤骨破坏的加重,加巴喷丁的止痛作用也随之降低.

关键词：加巴喷丁骨癌痛机械缩足阈值自由行走痛行为评分

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趋化因子CCL2中和抗体在大鼠胫骨癌痛治疗中的作用

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临床麻醉学杂志 2012年第1期28卷 81-83页

作者：徐幼苗申文陈晏柳娇徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室徐州221006 秦皇岛市第一医院疼痛科徐州医学院附属医院疼痛科

目的观察鞘内注射趋化因子CCL2中和抗体在胫骨癌痛大鼠治疗中的作用,并探讨可能的机制。方法 40只雌性SD大鼠随机均分为五组:假手术组(Ⅰ组)、假手术+CCL2中和抗体组(Ⅱ组)、骨癌痛组(Ⅲ组)、骨癌痛+controlIgG组(Ⅳ组)和骨癌痛+CCL2中... 详细信息

目的观察鞘内注射趋化因子CCL2中和抗体在胫骨癌痛大鼠治疗中的作用,并探讨可能的机制。方法 40只雌性SD大鼠随机均分为五组:假手术组(Ⅰ组)、假手术+CCL2中和抗体组(Ⅱ组)、骨癌痛组(Ⅲ组)、骨癌痛+controlIgG组(Ⅳ组)和骨癌痛+CCL2中和抗体组(Ⅴ组)。Walker256乳腺癌细胞注入胫骨骨髓腔建立大鼠胫骨癌痛模型。术后10～12d鞘内注射CCL2中和抗体或对照IgG(10μg/15μl)。测定术前1d,术后1、3、5、7、10、14、21d各组大鼠自由行走痛评分。另取30只大鼠,分组同前(n=6),术后14d取材,免疫荧光染色法测定脊髓背角星形胶质细胞标志物(GFAP)的平均光密度值(MOD)。结果与Ⅲ组相比,Ⅴ组大鼠术后10、14和21d自由行走痛评分明显降低,术后14dMOD值明显降低(P<0.01),Ⅳ组对应时点各值无明显变化。结论胫骨癌痛大鼠鞘内注射CCL2中和抗体能显著减轻自由行走痛并抑制脊髓星形胶质细胞的活化。CCL2可能通过激活脊髓星形胶质细胞参与大鼠胫骨癌痛维持的调控。

关键词： CCL2 骨癌痛痛觉过敏星形胶质细胞

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抑制复制蛋白A1表达对食管癌细胞放射敏感性的影响

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中华实验外科杂志 2012年第3期29卷 478-480页

作者：顾玉明王洵辛勇章龙珍许伟裴冬生郑骏年徐州医学院附属医院介入放射科 221000 徐州医学彘附属医院介入放射治疗科 221000 江苏省肿瘤生物治疗重点实验室

目的观察抑制复制蛋白A1（RPA1）表达对食管癌细胞放射敏感性的影响。方法脂质体介导转染RPA1反义寡核苷酸及阴性对照寡核苷酸于人食管癌TE．1细胞中，设空白对照组（只加培养基）、Mock组（转染试剂组）、对照组（阴性对照寡核苷酸组... 详细信息

目的观察抑制复制蛋白A1（RPA1）表达对食管癌细胞放射敏感性的影响。方法脂质体介导转染RPA1反义寡核苷酸及阴性对照寡核苷酸于人食管癌TE．1细胞中，设空白对照组（只加培养基）、Mock组（转染试剂组）、对照组（阴性对照寡核苷酸组）及实验组（反义寡核苷酸组），分别以24、48、72、96h为转染时间点；通过逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）、实时荧光定量PCR法（qRT—PCR）和Westernblot法分别检测各组食管癌TE-1细胞RPAlmRNA及其蛋白表达；并给予6MVX射线单次照射6Gy，用细胞计数试剂盒（CCK）-8法检测各组食管癌细胞放射敏感性的差异。结果***、qRT-PCR及Westernblot法结果显示实验组食管癌TE-1细胞的RPAlmRNA及蛋白表达均降低；CCK-8结果显示实验组食管癌TE-1细胞的增殖率低于其他各组（P〈0．05）。结论抑制食管癌TE-1细胞RPAl表达，可增加食管癌TE-1细胞的放射敏感性。

关键词：食管癌复制蛋白A1 放射敏感性

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转染增殖细胞核抗原表位肽融合白细胞介素-18基因的树突状细胞刺激的T细胞对结肠癌细胞凋亡的影响

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中华实验外科杂志 2012年第9期29卷 1756-1758页

作者：王磊王辉宋军李慧忠李连涛郑骏年徐为徐州医学院附属医院胃肠外科江苏221002 江苏省肿瘤生物治疗重点实验室

目的观察增殖细胞核抗原（PCNA）表佗肽融合白细胞介素18（IL-18）基㈥的树突状细胞（1）Cs）刺激的T淋巴细胞对结肠癌细胞凋亡的影响。方法实验分为DCs组、空载体组、PCNA表佗肽组、PCNA表化肽融合IL-18基因组。将空质粒（plRES—EGFP... 详细信息

目的观察增殖细胞核抗原（PCNA）表佗肽融合白细胞介素18（IL-18）基㈥的树突状细胞（1）Cs）刺激的T淋巴细胞对结肠癌细胞凋亡的影响。方法实验分为DCs组、空载体组、PCNA表佗肽组、PCNA表化肽融合IL-18基因组。将空质粒（plRES—EGFP）、PCNA表位肽质粒[pIRES—EGFP-PCNA（6）]和PCNA表位肽融合IL-18基因质粒[pIRES—EGFP—PCNA（6）／IL-18]分别转染DCs。

关键词：结肠癌树突状细胞增殖细胞核抗原白细胞介素-18 脱噬作用

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miR-155和miR-30a在胃癌组织中的表达及临床意义

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中华实验外科杂志 2012年第8期29卷 1550-1552页

作者：宋军王辉付海啸孟松徐溢新刘浩王磊白津徐为郑骏年徐州医学院附属医院胃肠外科江苏221002 江苏省肿瘤生物治疗重点实验室

目的探讨胃癌组织和癌旁组织miR-155和miR-30a的表达差异及其临床意义。方法收集手术切除的胃癌标本52例，采用实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应（RT—qPCR）检测癌及癌旁组织标本miR-155和miR-30a的表达水平，分析其与临床病理的关系... 详细信息

目的探讨胃癌组织和癌旁组织miR-155和miR-30a的表达差异及其临床意义。方法收集手术切除的胃癌标本52例，采用实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应（RT—qPCR）检测癌及癌旁组织标本miR-155和miR-30a的表达水平，分析其与临床病理的关系。结果miR-155在胃癌组织中表达量（0．844-2．27）显著高于其在配对癌旁组织中的表达值（0．28±0．56，P〈0．05）；miR-155高表达与淋巴结转移有关（P〈0．05）。miR-30a在胃癌组织中表达量（3．16±8．11）显著低于其在配对癌旁组织中的表达值（15．87±35．58，P〈0．05）。miR-30a的低表达与肿瘤侵犯层次、淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论miR-155和miR-30a与胃癌发生发展密切相关，可能成为胃癌的潜在诊断及治疗靶点。

关键词：胃癌 miR-155 miR-30a

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细胞核增殖抗原启动子调控荷载双基因RNA干扰的条件增殖腺病毒的构建

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中华实验外科杂志 2012年第10期29卷 1974-1976页

作者：陈仁富程伟松程乾李连涛方琳刘俊杰温儒民李望郑骏年徐州医学院附属医院泌尿外科江苏221002 江苏省肿瘤生物治疗重点实验室

目的构建细胞核增殖抗原（Ki-67）启动子调控表达Ki．67基因和人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因小干扰RNA（siRNA）的条件增殖腺病毒。方法（1）合成hTERT—siRNA插入pSilenc—er3．1，构建pShTERTsiRNA质粒。（2）分别酶切Ki-67启动子质... 详细信息

目的构建细胞核增殖抗原（Ki-67）启动子调控表达Ki．67基因和人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因小干扰RNA（siRNA）的条件增殖腺病毒。方法（1）合成hTERT—siRNA插入pSilenc—er3．1，构建pShTERTsiRNA质粒。（2）分别酶切Ki-67启动子质粒pZKi-67、***质粒pZD55-Ki-67-siRNA，获得Ki-67启动子片段和***片段并连接，构建质粒pZKi-67-ZD-Ki-67-siRNA。（3）以pShTERT—siRNA为模板，PCR获得hTERT—siRNA及H1启动子片段，克隆进pZKi-67-ZD—Ki-67-siRNA，构建质粒pZKi-67-ZD—***。（4）将其与腺病毒骨架质粒pBHGE3共转染293细胞，9～12d后出现病毒空斑。提取重组腺病毒DNA，行聚合酶链反应（PCR）鉴定。结果病毒ZKi-67-ZD—Ki-67-siRNA—hTERT—siRNA构建成功，其包含Ki-67启动子、Ki-67-siRNA、hTERT—siRNA片段。结论成功构建Ki-67启动子调控荷载Ki-67、hTERT双基因RNA干扰的条件增殖腺病毒，为研究靶向肿瘤治疗奠定基础。

关键词：条件增殖腺病毒细胞核增殖抗原启动子细胞核增殖抗原基因人端粒酶逆转录酶基因 RNA干扰

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丙泊酚对小鼠胃缺血/再灌注后细胞增殖及凋亡的影响

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世界华人消化杂志 2012年第17期20卷 1495-1501页

作者：刘河霞费素娟叶惠惠张姣丽张咏梅徐州医学院附属医院消化内科江苏省徐州市221004 江苏省麻醉学重点实验室徐州医学院麻醉生理学教研室江苏省徐州市221004

目的:观察丙泊酚对小鼠胃缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)后胃黏膜损伤程度及胃黏膜细胞增殖及凋亡的影响,探讨丙泊酚的胃保护作用及可能机制.方法:72只♂昆明小鼠随机分为4组:假手术组(sham,S组)、I/R组、脂肪乳组(fat emulsio... 详细信息

目的:观察丙泊酚对小鼠胃缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)后胃黏膜损伤程度及胃黏膜细胞增殖及凋亡的影响,探讨丙泊酚的胃保护作用及可能机制.方法:72只♂昆明小鼠随机分为4组:假手术组(sham,S组)、I/R组、脂肪乳组(fat emulsion,F组)、丙泊酚组(propofol,P组).通过夹闭小鼠腹腔动脉30min后松开动脉夹再灌注1h制作胃I/R模型.取胃观察大体形态变化、计算胃黏膜损伤指数,HE染色光镜下观察病理形态学变化,比色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,免疫组织化学方法和原位DNA末端标记(TUNEL)染色法分别检测胃黏膜细胞增殖和凋亡的表达情况,蛋白免疫印迹法(Westernblotting)测定胃黏膜组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果:腹腔注射25mg/kg丙泊酚后胃黏膜损伤明显减轻,具体表现为胃黏膜及黏膜下层的充血、水肿及糜烂均有明显改善;与I/R组相比,P组细胞内MDA含量明显降低,SOD活性增强(P<0.01);与I/R组相比,丙泊酚可明显抑制胃黏膜细胞凋亡(33.9%±1.3%vs60.8%±6.9%)、促进细胞增殖(16.0%±1.8%vs6.4%±1.2%)、下调Bax(0.453±0.025vs0.268±0.023)及上调Bcl-2蛋白(0.513±0.014vs0.752±0.015)的表达(均P<0.01).结论:丙泊酚能促进小鼠胃I/R后胃黏膜细胞增殖、抑制细胞凋亡,对胃I/R损伤有保护作用,其可能机制与其清除氧自由基、抑制脂质过氧化有关.

关键词：丙泊酚再灌注损伤丙二醛超氧化物歧化酶细胞增殖细胞凋亡

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