检索结果-内蒙古大学图书馆

徐州医学院学报 2010年第5期30卷 309-313页

作者：程娜娜桑威陈翀徐开林徐州医学院移植免疫实验室江苏徐州221002 徐州医学院附属医院血液科实验室江苏徐州221002

目的探讨编码针对小鼠CD28的短发卡状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒载体对小鼠T细胞CD28基因表达的影响。方法设计并合成3对靶向小鼠CD28的特异性干扰序列和1对非特异性干扰序列,亚克隆入慢病毒载体pLB中,构建出重组慢病毒干扰... 详细信息

目的探讨编码针对小鼠CD28的短发卡状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒载体对小鼠T细胞CD28基因表达的影响。方法设计并合成3对靶向小鼠CD28的特异性干扰序列和1对非特异性干扰序列,亚克隆入慢病毒载体pLB中,构建出重组慢病毒干扰质粒,行PCR鉴定并进一步测序证实。分别将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞,生产慢病毒颗粒,并依据绿色荧光蛋白(GFP)表达水平检测病毒滴度。慢病毒感染小鼠脾淋巴细胞,实时荧光定量RT-PCR和Western blot技术分别从mRNA水平和蛋白水平检测CD28的表达。结果PCR鉴定及测序结果证实4种重组慢病毒质粒均构建成功,重组慢病毒滴度均达1×1011U/L。感染T细胞后,CD28基因mRNA和蛋白表达量均有明显下降。结论成功构建了CD28 shRNA慢病毒载体,可有效下调小鼠T细胞CD28基因的表达,其为进一步研究体内沉默CD28基因控制移植物抗宿主病奠定了基础。

关键词： shRNA 慢病毒载体 CD28 移植物抗宿主病

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造血干细胞移植预处理中内皮损伤与修复启动研究

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国际输血及血液学杂志 2010年第2期33卷 116-119页

作者：鹿群先丁爽徐开林闫志凌贾路许世娟曾令宇徐州医学院附属医院血液科实验室徐州221002

目的探索异基因造血干细胞移植预处理过程中，照射在摧毁造血系统的同时，对组织器官血管内皮的损伤及修复的启动。方法将20只6～8周龄雌性BALB／C小鼠随机分2组：对照组（n=10），为未照射小鼠；单纯照射组（n=10），小鼠经8．5Gy照... 详细信息

目的探索异基因造血干细胞移植预处理过程中，照射在摧毁造血系统的同时，对组织器官血管内皮的损伤及修复的启动。方法将20只6～8周龄雌性BALB／C小鼠随机分2组：对照组（n=10），为未照射小鼠；单纯照射组（n=10），小鼠经8．5Gy照射，剂量率为0．57Gy／min，距离为2．33m。照射后，两组分别取小鼠外周血，用流式细胞术分析两组小鼠外周血的内皮细胞（ECs，CD31＋CD133-CD45-）和内皮祖细胞（EPCs，CD31＋CD133＋CD4510w／-）细胞比例。照射后第5天HE切片观察两组小鼠组织结构损伤，电子显微镜观察损伤的超微结构变化。结果①照射组的ECs和EPCs细胞比例升高，第3～5天达峰值，且可维持4天高水平，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。②HE切片中照射组的肝细胞有广泛炎症浸润，而内皮损伤不明显。电子显微镜下肝窦状间隙损伤，血小板聚集到暴露的胶原纤维上，ECs和基底膜的连接被破坏。结论异基因造血干细胞移植中预处理因素照射可引起内皮损伤，该损伤可引起EPCs动员至外周，参与内皮损伤的修复。

关键词：照射内皮细胞内皮祖细胞动员

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转化生长因子-β1与CD4^+CD25^+调节T细胞

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徐州医学院学报 2010年第4期30卷 275-277页

作者：张建军潘秀英徐州医学院附属医院血液科实验室江苏徐州221002

转化生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)是一种高度保守且具有多功能生物学活性的细胞因子,不仅在调节细胞的生长、分化、凋亡、组织损伤和修复等方面发挥功效,而且在免疫调节中也有重要作用。CD4^+CD25^+调节T细... 详细信息

转化生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)是一种高度保守且具有多功能生物学活性的细胞因子,不仅在调节细胞的生长、分化、凋亡、组织损伤和修复等方面发挥功效,而且在免疫调节中也有重要作用。CD4^+CD25^+调节T细胞(CD4^+CD25^+ regulatory T cells,CD4^+CD25^+Treg)是一种免疫调节细胞,[第一段]

关键词：转化生长因子-β1 CD4+CD25+调节T细胞免疫调节

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小鼠异基因造血干细胞移植中清髓照射对供者来源内皮祖细胞归巢的影响

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四川大学学报（医学版） 2009年第2期40卷 250-254页

作者：丁爽徐开林闫志凌陈翀潘秀英曾令宇徐州医学院附属医院血液科实验室徐州221002

目的研究异基因造血干细胞移植预处理因素——清髓照射对供者来源内皮祖细胞（EPCs）归巢的影响。方法密度梯度离心和差速贴壁法获取小鼠骨髓单个核细胞，EGM-2培养基培养，5～7d检测CD133^＋CD31^＋CD45^k/w表面标记及吸食Dil-Ac-LDL... 详细信息

目的研究异基因造血干细胞移植预处理因素——清髓照射对供者来源内皮祖细胞（EPCs）归巢的影响。方法密度梯度离心和差速贴壁法获取小鼠骨髓单个核细胞，EGM-2培养基培养，5～7d检测CD133^＋CD31^＋CD45^k/w表面标记及吸食Dil-Ac-LDL和结合FITC-UEA-1鉴定，并行羟基荧光素一醋酸盐琥珠酰亚胺酯（CFSE）标记。实验分组：正常组，正常＋EPCs移植组，照射组，照射＋EPCs移植组。流式细胞术（FCM）分析外周血、脾脏和骨髓中内皮细胞（ECs）、EPCs和CFSE阳性细胞比例；病理、电镜和免疫荧光分析各组织的损伤情况及CFSE标记EPCs的分布。结果流式细胞术鉴定内EPCs为CD45^k/wCD133^＋CD31^＋；Dil-ac-LDL^＋、FITC-UEA-1^＋。照射后短时间内循环中ECs即开始升高，第5d达高峰，持续到第7d，与正常组相比差异有统计学意义（P〈0．05）；循环中EPCs照射后短时间内也增加，于第4d达到峰值，随后下降至正常水平，其增加与正常组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。照射后3d光镜下肝脏弥漫性的炎症浸润，小肠大量炎症细胞浸润；电镜下肝脏中血小板聚集到内皮下暴露的胶原上，小肠中ECs和基底膜间被损坏。照射＋EPCs移植组，荧光显微镜下观察，移植后3h见CFSE阳性细胞归巢至损伤的肝脏和小肠，细胞少且不连续；36h细胞较多，且呈连续性。结论移植预处理中的清髓照射可引起严重的内皮损伤，该损伤启动了EPCs的动员，并驱动外源性EPCs归巢至损伤比较重的组织中。

关键词：照射损伤内皮祖细胞归巢

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造血干细胞移植预处理药物对小鼠血管内皮作用的研究

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中华血液学杂志 2009年第11期30卷 761-763页

作者：曾令宇闫志凌贾路丁爽许世娟徐州医学院附属医院血液科实验室 221002

造血干细胞移植（HSCT）是治疗难治性血液系统及一些非血液系统疾病的有效手段。移植并发症是影响移植成功和预后的重要因素。血管内皮损伤是引起HSCT并发症的重要因素，并且影响造血干细胞的归巢。我们采用环磷酰胺（Cy）和白消安（Bu... 详细信息

造血干细胞移植（HSCT）是治疗难治性血液系统及一些非血液系统疾病的有效手段。移植并发症是影响移植成功和预后的重要因素。血管内皮损伤是引起HSCT并发症的重要因素，并且影响造血干细胞的归巢。我们采用环磷酰胺（Cy）和白消安（Bu）为预处理方案，观察在清髓时药物对小鼠组织器官血管内皮的影响，从而探索发生HSCT并发症的又一可能机制。

关键词：造血干细胞移植血管内皮损伤移植预处理小鼠药物非血液系统疾病移植并发症 HSCT

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一氧化氮对大鼠脑缺血再灌注后JNK3、Bad(ser128)和c-Jun磷酸化的影响

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中国现代医学杂志 2009年第12期19卷 1817-1820页

作者：宋远见刘红芝裴冬生孙亚峰张璞张芳徐州医学院基础学院江苏徐州221004 徐州医学院肿瘤生物治疗实验室江苏徐州221002 徐州医学院附属医院血液科江苏徐州221002

目的探讨一氧化氮对大鼠脑缺血再灌注后JNK3、Bad(ser128)和c-Jun磷酸化的影响。方法90只健康SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(对照组)、硝普钠组、硝普钠+阻断剂组(阻断剂组)和溶剂组。以大鼠四动脉结扎脑缺血... 详细信息

目的探讨一氧化氮对大鼠脑缺血再灌注后JNK3、Bad(ser128)和c-Jun磷酸化的影响。方法90只健康SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(对照组)、硝普钠组、硝普钠+阻断剂组(阻断剂组)和溶剂组。以大鼠四动脉结扎脑缺血模型为基础,应用焦油紫染色法检测海马CA1区神经元凋亡,采用免疫印迹和免疫沉淀法检测JNK3、Bad(ser128)和c-Jun的磷酸化。结果硝普钠组脑海马CA1区神经元凋亡显著少于对照组、阻断剂组及溶剂组(P<0.05),对照组、阻断剂组及溶剂组之间差异无显著性(P>0.05);硝普钠组JNK3、Bad(ser128)和c-Jun的磷酸化显著低于对照组、阻断剂组及溶剂组(P<0.05),对照组、阻断剂组及溶剂组之间差异无显著性(P>0.05)。结论一氧化氮供体硝普钠能显著减轻脑缺血再灌注后脑海马CA1区神经元凋亡,明显抑制JNK3、Bad(ser128)和c-Jun的磷酸化水平,对脑缺血再灌注损伤起到保护作用。

关键词：脑缺血一氧化氮海马 JNK3

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大肠杆菌表达的人源性抗CTLA4单链抗体三种复性方法比较

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生物医学工程学杂志 2006年第2期23卷 388-391页

作者：黄强陈利弘曾令宇万琳李胜富卢晓风程惊秋四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室成都610041 徐州医学院附属医院血液科徐州221002

比较表达于大肠杆菌中的人源性抗细胞毒性T淋巴细胞抗原4单链抗体(A n ti-CTLA 4 scFv)的三种体外复性方法的复性效率。稀释、透析和亲和柱上三种复性方式复性A n ti-CTLA 4 scFv,采用B rad ford法分析蛋白复性得率,采用间接细胞EL ISA... 详细信息

比较表达于大肠杆菌中的人源性抗细胞毒性T淋巴细胞抗原4单链抗体(A n ti-CTLA 4 scFv)的三种体外复性方法的复性效率。稀释、透析和亲和柱上三种复性方式复性A n ti-CTLA 4 scFv,采用B rad ford法分析蛋白复性得率,采用间接细胞EL ISA法检测所得蛋白的活性。透析复性蛋白得率最高,稀释复性蛋白得率其次,亲和柱上复性蛋白得率最低;透析复性所得蛋白结合活性是稀释复性的1.95倍,是亲和柱上复性所得蛋白活性的4.13倍(无谷胱甘肽氧化还原对G SH/G SSH)及3.63倍(有G SH/G SSH)。结论:采用含0.15 m o l/L N aC、l1 mm o l/L G SSH和3 mm o l/L G SH的50 mm o l/L T ris-HC l(pH 8.0)缓冲液作为A n ti-CTLA 4 scFv的复性液,4℃下透析复性48 h,可获得较高复性得率和结合活性。

关键词：单链抗体包涵体复性

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造血干细胞移植后巨细胞病毒感染临床分析

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徐州医学院学报 2006年第6期26卷 543-546页

作者：孙海英李振宇徐开林何祎何徐彭潘秀英张言超徐州医学院附属医院血液科江苏徐州221002 徐州医学院附属医院传染科实验室

目的观察各种类型的造血干细胞移植(HSCT)后巨细胞病毒(CMV)感染的发生情况及疗效。方法选择我院59例异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)和自体造血干细胞移植(auto-HSCT)患者移植后不同时期血和尿标本,检测CMV-pp65抗原及(或)CMV-DNA(荧... 详细信息

目的观察各种类型的造血干细胞移植(HSCT)后巨细胞病毒(CMV)感染的发生情况及疗效。方法选择我院59例异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)和自体造血干细胞移植(auto-HSCT)患者移植后不同时期血和尿标本,检测CMV-pp65抗原及(或)CMV-DNA(荧光定量PCR法)进行动态观察分析。CMV感染的预防采用更昔洛韦(DHPG)5~10 mg/kg,1次/12 h,分别在移植前第8天至移植当天及当CMV血清学检测阳性或发生CMV病时应用2~4周,并可同时应用大剂量丙种球蛋白。结果CMV感染在allo-HSCT后好发,非亲缘性移植CMV感染率高,9例allo-HSCT出现CMV感染发生在移植后+42^+68天,其中5例均存在不同程度的移植物抗宿主病(GVHD),尤其是Ⅱ~Ⅳ度急性GVHD,2例进展为巨细胞间质性肺炎(CMV-IP);多为既往CMV感染被激活,对CMV-DNA阳性而无症状者进行预防治疗可使CMV-DNA阴转,可降低CMV病的发生。结论CMV病是allo-HSCT的常见并发症及主要致死原因之一;因此积极防治GVHD的发生及发展、定期监测CMV血清学阳性患者、早期干预性治疗可以提高移植的成功率。

关键词：造血干细胞移植巨细胞病毒感染

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急性淋巴细胞性白血病IL-3Rα基因表达的意义

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徐州医学院学报 2006年第6期26卷 502-504页

作者：宋玉华徐开林潘秀英东南大学医学院附属南京市第二医院细胞实验室江苏南京210003 徐州医学院附属医院血液科江苏徐州221002

目的探讨白细胞介素-3受体α亚基(IL-3Rα)在急性淋巴细胞性白血病(ALL)中的表达及意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测54例ALL患者IL-3RαmRNA的表达。结果①10例正常人和12例ALL缓解患者未检测到IL-3Rα的表达。42例初治... 详细信息

目的探讨白细胞介素-3受体α亚基(IL-3Rα)在急性淋巴细胞性白血病(ALL)中的表达及意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测54例ALL患者IL-3RαmRNA的表达。结果①10例正常人和12例ALL缓解患者未检测到IL-3Rα的表达。42例初治和复发的ALL患者中IL-3Rα阳性表达12例,占28.57%。其中13例T-ALL患者未检测到IL-3Rα的表达,而B-ALL患者IL-3Rα的表达率为41.38%。②ALL患者IL-3Rα的阳性表达与外周血白细胞计数、骨髓中原始细胞比例及CD34阳性表达有关(P<0.05)。③ALL患者中IL-3Rα阳性表达的患者CR率低于阴性者(P<0.05)。结论IL-3Rα在ALL发生发展中起一定作用,检测IL-3Rα有助于ALL的T、B两型的鉴别,IL-3Rα基因表达可能是B-ALL的一个不良预后因素。

关键词：白细胞介素3 受体 α亚基基因表达急性淋巴细胞性白血病

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猪血细胞表面多糖抗原α-Gal与人ABO血型抗原的比较

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徐州医学院学报 2005年第6期25卷 495-498页

作者：曾令宇李幼平李胜富程惊秋徐州医学院附属医院血液科江苏徐州221002 四川大学华西医院移植工程与移植免疫卫生部重点实验室四川成都610041

目的探讨猪血细胞表面多糖抗原α-Gal与人ABO血型抗原的相似性。方法人全血A、B、O、AB 4种血型的健康人的新鲜血,肝素抗凝,1 800 r/min离心,取白细胞富集层,利用confocal及流式细胞技术(FCM)检测猪及人ABO 4种血型血细胞与BSI-B4-FITC... 详细信息

目的探讨猪血细胞表面多糖抗原α-Gal与人ABO血型抗原的相似性。方法人全血A、B、O、AB 4种血型的健康人的新鲜血,肝素抗凝,1 800 r/min离心,取白细胞富集层,利用confocal及流式细胞技术(FCM)检测猪及人ABO 4种血型血细胞与BSI-B4-FITC结合的情况。结果以A型血细胞为阴性对照,4种血型血小板、RBC、单个核细胞均为阴性,而粒细胞,B型有14%为(+),AB型约有8%为(+),O型约有2%为(+)。结论4种ABO血型抗原中B抗原与α-Gal的结构最为相似。

关键词： α-Gal 多糖抗原血型抗原

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