检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2022年第24期26卷 3858-3864页

作者：吴霜邹星星高杰胡蓉苏敏贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州省贵阳市550025

背景:角膜病移植手术面临着角膜供者严重缺乏、术后发生免疫排异反应等诸多问题。在大力倡导角膜捐献的同时,急需找到一种新的替代性的治疗手段。目的:通过优化骨髓间充质干细胞培养条件,探讨转录因子配对盒基因6对骨髓间充质干细胞向... 详细信息

背景:角膜病移植手术面临着角膜供者严重缺乏、术后发生免疫排异反应等诸多问题。在大力倡导角膜捐献的同时,急需找到一种新的替代性的治疗手段。目的:通过优化骨髓间充质干细胞培养条件,探讨转录因子配对盒基因6对骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞样细胞分化的影响。方法:根据细胞形态、成骨成脂分化能力、细胞表面抗原表达鉴定骨髓间充质干细胞及过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞。按照培养细胞和培养基不同进行分组:对照组(骨髓间充质干细胞+完全培养基)、实验组A(骨髓间充质干细胞+条件培养基)、实验组B(骨髓间充质干细胞+条件培养基+细胞因子)、实验组C(过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞+条件培养基+细胞因子)。诱导5,10 d时采用免疫荧光、流式细胞术检测p63、k14和k12的表达,流式细胞术检测细胞增殖指标Ki-67的表达和细胞凋亡率,Western blot法和RT-PCR法检测配对盒基因6的蛋白和mRNA表达。结果与结论:①诱导培养前,两组细胞均具有骨髓间充质干细胞的特性。②诱导培养后,均出现球型或卵圆形的细胞,呈悬浮生长。4组细胞的角膜缘干细胞样细胞特异性分子p63、k14表达阳性,实验组荧光表达量高于对照组(P<0.05),而角膜上皮分子k12表达阴性。随着培养条件的优化,实验组C的细胞增殖更明显,凋亡细胞更少。诱导5 d时,实验各组配对盒基因6的蛋白及mRNA表达量呈递增变化。③结果表明,条件培养基联合细胞因子诱导可加快骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞样细胞分化。过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞样细胞定向分化的速度和比例更具有优越性,且其能促进细胞增殖、抑制细胞凋亡。

关键词：干细胞骨髓间充干细胞角膜缘干细胞配对盒基因6 细胞因子条件培养基

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自身免疫调节因子在小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞分化中的表达

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中国组织工程研究 2020年第25期24卷 3994-3999页

作者：马静怡杨文江李远迪黄佑娇高杰李红胡蓉苏敏贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州省贵阳市550025

背景:自身免疫性疾病主要是由于胸腺内自身组织特异性抗原持续表达缺失而引起强烈免疫应答的一类疾病,而胸腺功能减退和胸腺内组织特异性抗原的不稳定表达会限制治疗效果。胸腺组织主要由胸腺上皮细胞组成,但胸腺内成熟胸腺上皮细胞和... 详细信息

背景:自身免疫性疾病主要是由于胸腺内自身组织特异性抗原持续表达缺失而引起强烈免疫应答的一类疾病,而胸腺功能减退和胸腺内组织特异性抗原的不稳定表达会限制治疗效果。胸腺组织主要由胸腺上皮细胞组成,但胸腺内成熟胸腺上皮细胞和胸腺上皮祖细胞有限的数量来源极大限制了相关研究。目的:研究小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞分化过程中自身免疫调节因子的表达变化。方法:采用两步分化方法定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为内胚层再分化为胸腺上皮祖细胞,分别收集定向诱导分化第0,3,13天细胞,采用细胞免疫荧光、流式细胞术、Western blot、Real-Time PCR检测相关基因及蛋白的表达变化。结果与结论:①诱导分化第0天,免疫荧光检测OCT4、SSEA1表达阳性;诱导分化第3天,免疫荧光检测SOX17、FoxA2呈双阳性表达;诱导分化第13天,流式细胞术检测EpCAM1、K5、K8表达阳性;②Real-time PCR检测小鼠胚胎干细胞定向分化过程中PAX1、PAX9、FOXN1、PLET1基因表达逐渐增高;③Real-time PCR检测分化第0,3,13天AIRE基因表达升高,INS2、GAD67基因表达也升高;④Western blot检测分化第0,3,13天AIRE蛋白表达降低,胰岛素蛋白、GAD67蛋白均无表达;⑤结果表明,小鼠胚胎干细胞成功分化为胸腺上皮祖细胞,且分化而来的胸腺上皮祖细胞中AIRE基因表达很高,促进了INS2、GAD67基因的表达,为细胞移植治疗自身免疫性疾病提供评价依据。

关键词：胚胎干细胞自身免疫调节因子胸腺上皮祖细胞自身组织特异性抗原

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包皮成纤维细胞作为饲养层对人胚胎生殖细胞生长的影响

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解剖学报 2010年第6期41卷 876-879页

作者：黎晓莉王璐吴宏张雁关雪晶姜蓉重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的以人包皮成纤维细胞为饲养层体外培养人胚胎生殖细胞,观察饲养层对其生长的影响,并对人胚胎生殖细胞进行鉴定。方法分离培养4～5岁小儿包皮成纤维细胞,取P3～P30代细胞用丝裂霉素灭活后铺板备用,酶联免疫吸附测定(ELISA)-双抗夹心... 详细信息

目的以人包皮成纤维细胞为饲养层体外培养人胚胎生殖细胞,观察饲养层对其生长的影响,并对人胚胎生殖细胞进行鉴定。方法分离培养4～5岁小儿包皮成纤维细胞,取P3～P30代细胞用丝裂霉素灭活后铺板备用,酶联免疫吸附测定(ELISA)-双抗夹心法检测其分泌物成纤维细胞生长因子(FGF)的含量;分离培养5～11周人胚胎原始生殖细胞,在不添加任何细胞因子的人包皮成纤维细胞饲养层上培养人胚胎生殖细胞;细胞化学法检测人胚胎生殖细胞碱性磷酸酶的活性,免疫细胞化学法检测其胚胎表面特异性抗原SSEA-1及SSEA-4的表达,RT-PCR法检测Oct-4的表达。结果包皮成纤维细胞可以传60代以上,P3～P30代均适宜作饲养层;P3～P30代包皮成纤维细胞上清液中FGF含量在(172.09±2.66)pg/L～(245.25±1.66)pg/L之间波动。分离培养的人胚胎生殖细胞在饲养层上可形成典型的胚胎生殖细胞集落,体外连续培养超过3代,其碱性磷酸酶活性呈强阳性,集落未分化标志检测显示SSEA-l、SSEA-4呈阳性,Oct-4表达阳性。结论用人包皮成纤维细胞作为饲养层能支持人胚胎生殖细胞的生长并维持未分化状态。

关键词：包皮成纤维细胞胚胎生殖细胞饲养层酶联免疫吸附测定-双抗夹心法免疫组织化学反转录-聚合酶链式反应人

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BMSCs移植通过T细胞免疫抑制缓解1型糖尿病小鼠发病实验研究

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中国临床解剖学杂志 2020年第6期38卷 668-673页

作者：余佳珊杨文江彭丽娟高杰李红苏敏胡蓉贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550025

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植缓解1型糖尿病小鼠(T1DM)发病及机制。方法 BMSCs分离培养及鉴定;第3代培养的上清作为条件培养基,与2周龄NOD小鼠脾细胞共培养,FACS检测CD4+和CD8+T细胞... 详细信息

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植缓解1型糖尿病小鼠(T1DM)发病及机制。方法 BMSCs分离培养及鉴定;第3代培养的上清作为条件培养基,与2周龄NOD小鼠脾细胞共培养,FACS检测CD4+和CD8+T细胞增殖及活化;2周龄雌性NOD小鼠随机分为BMSCs组、PBS组、对照组,每组6只,对照组2周处死;BMSCs组和PBS组12周分别腹腔注射100μl(2×107细胞)BMSCs或等体积PBS,监测小鼠血糖和体重至26周;HE、免疫组化、免疫荧光染色观察胰腺炎性细胞浸润;FACS检测CD4+和CD8+T细胞增殖及活化。结果成功分离培养BMSCs;BMSCs条件培养基抑制CD4+及CD8+T细胞的增殖及活化(P<0.05);BMSCs组小鼠体重高于PBS组(P<0.05),糖尿病发病率降低,炎性浸润减少(P<0.05),脾脏CD4+和CD8+T细胞增殖及活化降低(P<0.05)。结论 BMSCs移植可能通过T细胞免疫抑制缓解T1DM小鼠发病。

关键词：骨髓间充质干细胞 NOD/ShiLtJ小鼠 1型糖尿病免疫抑制 T细胞

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精子蛋白32研究进展

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解剖学杂志 2007年第4期30卷 503-505页

作者：范蓉罗彬谢小薰广西医科大学基础医学院组组织学与胚胎学教研室南宁530021

1989年,Baba等从猪精子中分离出一种相对分子质量为32000的蛋白,该蛋白能特异性地结合顶体素原和顶体素中问体,参与顶体素的形成,称其为精子蛋白32(spermprotein32,sp32)。本文从sp32生物学特性、基因表达和生物功能等方面的研究进展作... 详细信息

1989年,Baba等从猪精子中分离出一种相对分子质量为32000的蛋白,该蛋白能特异性地结合顶体素原和顶体素中问体,参与顶体素的形成,称其为精子蛋白32(spermprotein32,sp32)。本文从sp32生物学特性、基因表达和生物功能等方面的研究进展作一综述。[第一段]

关键词：精子蛋白相对分子质量生物学特性顶体素 Baba 生物功能基因表达

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当归补血汤对内皮细胞增殖和粘附分子表达的影响

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华西医科大学学报 2001年第4期32卷 593-595页

作者：吴岩祝彼得华西医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室成都610041 成都中医药大学解剖学教研室

目的　了解当归补血汤对内皮细胞增殖及分泌粘附分子 (ICAM- 1)的影响 ,探讨当归补血汤对造血调控的机理。方法　建立人脐静脉内皮细胞体外培养模型 ,将 HU VEC与当归补血汤不同剂量 (0、4、40、40 0和40 0 0 μg/ m l)一起培养 ,以流... 详细信息

目的　了解当归补血汤对内皮细胞增殖及分泌粘附分子 (ICAM- 1)的影响 ,探讨当归补血汤对造血调控的机理。方法　建立人脐静脉内皮细胞体外培养模型 ,将 HU VEC与当归补血汤不同剂量 (0、4、40、40 0和40 0 0 μg/ m l)一起培养 ,以流式细胞分析术测定内皮细胞增殖周期 ,同时对粘附分子进行测定。结果　当归补血汤能够促进内皮细胞分泌粘附分子 ,对照组 CD5 4(ICAM- 1)仅有少量表达 ,而实验组 CD5 4(ICAM- 1)表达明显较对照组增多 (P<0 .0 5 )。细胞周期分析结果表明 ,实验组与对照组相比 ,有更多的细胞处于 S期 (P<0 .0 5 )。提示当归补血汤能够促进细胞由静止期进入增殖期。结论　当归补血汤能够促进内皮细胞的增殖以及细胞粘附分子的表达。

关键词：当归补血汤内皮细胞细胞粘附分子细胞增殖

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脑源性神经营养因子对神经干细胞增殖和分化的影响

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解剖学杂志 2010年第5期33卷 648-651页

作者：赵昱赵文杰赵静陈炜李莉李陈莉河北医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室石家庄050017

目的：通过不同浓度脑源性神经营养因子（BDNF）对神经干细胞（NSCs）增殖与分化的影响,探讨合适的诱导时间和诱导浓度.方法：按照BDNF的浓度分为对照组,实验组2、20和200ng/ml ***法检测不同浓度BDNF在诱导后不同的时间点（1、3、5、7... 详细信息

目的：通过不同浓度脑源性神经营养因子（BDNF）对神经干细胞（NSCs）增殖与分化的影响,探讨合适的诱导时间和诱导浓度.方法：按照BDNF的浓度分为对照组,实验组2、20和200ng/ml ***法检测不同浓度BDNF在诱导后不同的时间点（1、3、5、7d）对细胞增殖的影响,免疫细胞化学法检测神经元的标记物-神经元特异性烯醇化酶（NSE）,并计算各组在不同时间点的神经元分化率.结果：不同浓度的BDNF实验组在诱导后不同时间（1、3、5、7d）MTT法所测OD值与对照组相比差异均无统计学意义.随着BDNF浓度的增加,神经干细胞分化为神经元的比率呈增高的趋势,差异有统计学意义.在分化的时间上,各组均在第3天时达到最高,其中实验组最高接近80%,而对照组仅为35%.结论：BDNF对NSCs的增殖无明显作用,BDNF能促进NSCs向神经元方向分化,其分化的比率在一定范围内呈剂量依赖性.

关键词：脑源性神经营养因子神经干细胞增殖分化

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精子蛋白sp32/OY-TES-1 mRNA及其蛋白在正常组织表达的探讨

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解剖学报 2007年第6期38卷 675-680页

作者：范蓉余良肖绍文何少健罗彬黄绍明罗国容谢小薰广西医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室南宁530021 广西医科大学第一临床医院神经外科南宁530021 广西医科大学基础医学院解剖学教研室南宁530021

目的了解正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的表达量是否存在差异以及该蛋白的表达情况,为sp32/OY-TES-1表达谱增加更多信息。方法提取40例(19种)正常组织总RNA,逆转录-聚合酶合成cDNA,普通PCR检测cDNA质量;构建目的基因sp32/OY-FES-1及看... 详细信息

目的了解正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的表达量是否存在差异以及该蛋白的表达情况,为sp32/OY-TES-1表达谱增加更多信息。方法提取40例(19种)正常组织总RNA,逆转录-聚合酶合成cDNA,普通PCR检测cDNA质量;构建目的基因sp32/OY-FES-1及看家基因HPRT质粒,制备标准品,绘制标准曲线,建立实时定量PCR(TaqMan)方法和优化反应体系,检测组织中sp32/OY-TES-1和HPRT的表达,sp32/OY-TES-1 mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示。通过制备的OY-TES-1多克隆抗体,结合免疫组织化学检测sp32/OY-TES-1蛋白在多种正常组织中的表达。结果正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA阳性率为72.50%(29/40);2.非睾丸正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量值(目的基因/看家基因)为0.0001～0.4950,呈对数正态分布;3.睾丸组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量为44.9,是其他正常组织的91～1000倍;4.免疫组织化学(IHC)显示在所检测的多种正常组织和细胞中(10例睾丸组织、8例结肠、7例肝、6例骨骼肌、5例胃、5例晶状体、4例精子、3例外周血白细胞和1例肾),除4例精子和1例肾组织中的肾小管外,其余均未见OY-TES-1蛋白阳性反应。结论sp32/OY-TES-1 mRNA广泛地表达在各种正常组织,表达量因组织不同而异;睾丸组织是所检测的正常组织中其mRNA表达量最高的组织。而sp32/OY-TES-1蛋白比其mRNA更具有限制性表达的特点。

关键词：癌-睾丸抗原精子蛋白基因表达定量PCR 免疫组织化学人

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兔肋软骨膜间充质干细胞的分离与鉴定

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中国生物制品学杂志 2012年第7期25卷 911-914页

作者：李敏刘俊姜蓉汪维伟重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞研究室重庆400016

目的从兔肋软骨膜中分离间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs),并进行鉴定。方法取3～4周龄新西兰大白兔,采用机械消化法和酶消化法结合的两步消化法获取肋软骨膜细胞,体外培养观察其生长形态;免疫组化法鉴定其表型特征;并检测其... 详细信息

目的从兔肋软骨膜中分离间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs),并进行鉴定。方法取3～4周龄新西兰大白兔,采用机械消化法和酶消化法结合的两步消化法获取肋软骨膜细胞,体外培养观察其生长形态;免疫组化法鉴定其表型特征;并检测其诱导成骨、成脂的分化潜能。结果从肋软骨膜中分离的原代细胞聚集成团,以圆形和多角形为主,从第2代开始细胞形态均一,以梭形为主,呈漩涡状排列,并开始表达CD29和CD90,不表达CD34和Ⅱ型胶原,现已传至15代,生长良好;第3代细胞经诱导可分化为成骨细胞或脂肪细胞。结论从兔肋软骨膜中可获得干细胞,其具有与MSCs相似的特性。

关键词：肋软骨膜间质干细胞分离表型分化

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在组织学胚胎学PBL教学中早期培养学生对临床的兴趣

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解剖学杂志 2015年第3期38卷 367-369页

作者：梁非韩芳肖冰石玉秀中国医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室

目前,在高校医学教育中,很多院校都开展了教学模式的改革,以探讨适应我国现代教学改革的医学教育模式。基于问题的学习（problem-based learning,PBL）,简称 PBL,于20世纪60年代中后期产生于北美并在后来的教学实践中取得了较快的发展[1... 详细信息

目前,在高校医学教育中,很多院校都开展了教学模式的改革,以探讨适应我国现代教学改革的医学教育模式。基于问题的学习（problem-based learning,PBL）,简称 PBL,于20世纪60年代中后期产生于北美并在后来的教学实践中取得了较快的发展[1]。中国医科大学组织学与胚胎学教研室自2004年起至今在中国医科大学的 CMB03-793,08-935的国际合作 PBL 项目支持下在组织学胚胎学教学中进行教学改革的探索[2],连续10年在10个年级的临床医学专业开展 PBL 教学以培养学生的创新能力,取得了一系列的成果[3-5]。近些年来,我们在基础医学的教育中培养学生对临床的认知和兴趣,在 PBL 教学中进行了新的探索。

关键词：临床医学专业胚胎学教学教学模式早期培养 PBL 组织学学生医学教育模式

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