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中南大学学报（医学版） 2019年第8期44卷 864-870页

作者：叶明佶范刚朱帅韩惟青谢宇中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院湖南省肿瘤医院泌尿外科长沙410013 柏林洪堡大学夏洛特医学院德国柏林13125

目的:探讨EHD2和E-cadherin蛋白在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达情况及其临床意义。方法:采用蛋白质印迹法检测4对新鲜的ccRCC组织和癌旁组织中EHD2蛋白和E-cadherin蛋白的表达。选取65例ccRCC患者的石... 详细信息

目的:探讨EHD2和E-cadherin蛋白在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达情况及其临床意义。方法:采用蛋白质印迹法检测4对新鲜的ccRCC组织和癌旁组织中EHD2蛋白和E-cadherin蛋白的表达。选取65例ccRCC患者的石蜡切片标本,采用免疫组织化学技术检测标本中EHD2与E-cadherin的表达情况,分析两者表达相关性及与ccRCC各临床及病理指标的关系,并进一步探讨EHD2和E-cadherin蛋白与ccRCC患者预后的关系。结果:蛋白质印迹法实验结果显示EHD2和E-cadherin蛋白在4对ccRCC癌组织中呈低表达,在癌旁组织中呈高表达。免疫组织化学结果显示:EHD2与E-cadherin蛋白在局限性ccRCC癌组织中表达水平明显高于转移性ccRCC癌组织。两种蛋白表达水平随着临床TNM分期及Fuhrman病理分级的升高而显著降低(分别为P<0.01和P<0.05)。Spearman分析结果显示:EHD2与E-cadherin蛋白在ccRCC中的表达水平呈正相关(r=0.390,P<0.01)。生存分析显示EHD2和E-cadherin蛋白同时低表达的ccRCC患者其生存率明显低于二者单独或同时高表达ccRcc患者(P<0.05)。结论:EHD2和E-cadherin蛋白低表达与ccRCC的预后不良相关。

关键词： EHD2 E-cadherin 肾透明细胞癌预后

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N-酰基葡糖胺衍生物对GABA转运体功能的影响

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中国药科大学学报 2016年第2期47卷 228-234页

作者：胡静樊华尹健江南大学无锡医学院无锡214122 柏林自由大学夏洛特医学院柏林13353 江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室无锡214122

为筛选GAT蛋白活性抑制剂,以稳定表达GAT1蛋白的人胚胎肾细胞(HEK-293)为模型,利用GABA摄取定量测试测定N-酰基葡糖胺衍生物对该蛋白功能的影响。同时,由于GAT1蛋白的功能与其N-糖链结构尤其是末端唾液酸密切相关,再通过定量该蛋白糖链... 详细信息

为筛选GAT蛋白活性抑制剂,以稳定表达GAT1蛋白的人胚胎肾细胞(HEK-293)为模型,利用GABA摄取定量测试测定N-酰基葡糖胺衍生物对该蛋白功能的影响。同时,由于GAT1蛋白的功能与其N-糖链结构尤其是末端唾液酸密切相关,再通过定量该蛋白糖链末端唾液酸的表达分析衍生物对蛋白糖链修饰的作用。结果显示,10 mmol/L 3-O-甲基-N-乙酰基葡糖胺(3-O-Met-Glc NAc)通过抑制GAT1蛋白的唾液酸化(降至66.8%)将GABA摄取活性减弱到到53%(P<0.01);而10 mmol/L N-丙酰基葡糖胺(Glc NProp),N-环丙甲酰基葡糖胺(Glc NCyclo),N-己酰基葡糖胺(Glc NHex),N-乙酰氨基乙酰基葡糖(Glc NAc-acetamido)则通过抑制蛋白糖链末端修饰分别将GABA摄取活性减弱到54%、63%、63%和67%(P<0.01)。因此,N-酰基葡糖胺衍生物可用于进一步筛选研究GAT蛋白活性抑制剂或唾液酸生物合成抑制剂。

关键词： γ-氨基丁酸 GABA转运蛋白 N-糖基化唾液酸 N-酰基葡糖胺衍生物中枢神经系统疾病

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肿瘤坏死因子基因微卫星与术后并发严重感染患者的易感性及预后的相关研究

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中华医学杂志 2002年第13期82卷 903-906页

作者：舒强方向明 Frank Stueber 浙江大学医学院附属儿童医院心胸外科杭州310003 浙江大学邵逸夫临床医学研究所分子生物实验室德国Bonn大学医学院ICU病房

目的　调查肿瘤坏死因子 (TNF)基因微卫星TNFa、TNFb与术后并发严重感染的易感性及预后的相关性。方法　采用改良巢式聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色测定 12 2例术后并发严重感染患者和 138名健康献血员 (对照组 )的微卫星... 详细信息

目的　调查肿瘤坏死因子 (TNF)基因微卫星TNFa、TNFb与术后并发严重感染的易感性及预后的相关性。方法　采用改良巢式聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色测定 12 2例术后并发严重感染患者和 138名健康献血员 (对照组 )的微卫星TNFa、TNFb的基因型。结果　微卫星TNFa、TNFb分别含有 14种等位基因 (TNFa1 14 )和 5种等位基因 (TNFb1,3 5 ,7)。等位基因TNFa6分布频率在术后并发严重感染患者中显著高于对照组 (分别为 2 0 .1%和 10 .5 % ,P <0 0 5 ) ,等位基因TNFa2分布频率在术后并发严重感染患者中显著低于对照组 (分别为 2 1.3%和 31.5 % ,P <0 .0 5 )。在术后并发严重感染患者中 ,等位基因TNFa10的分布频率在死亡组中显著高于存活组 (分别为 19.5 %和 9.5 % ,P <0 .0 5 )。微卫星TNFb的等位基因分布频率在严重感染组与对照组、严重感染死亡组与存活组间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　微卫星TNFa与术后并发严重感染的易感性及预后有关。

关键词：基因微卫星术后易感性预后感染肿瘤坏死因子相关性 TNFa TNFb

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lncRNA-Z38通过调控TGF-β通路促进胃癌的发生发展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2021年第12期28卷 1174-1178页

作者：王阳徐文广董艳赵春武徐有超赵浩钧单宝强孙西文孙钰凯潍坊市人民医院普通外科山东潍坊261041 潍坊市人民医院耳鼻喉科山东潍坊261041 潍坊医学院临床医学系山东潍坊261041 夏洛特医学院马克斯·德尔布吕克分子医学中心德国柏林13125

目的:探讨lncRNA-Z38对胃癌细胞恶性生物学行为的影响及其可能的调控机制。方法:构建lncRNA-Z38稳定过表达的胃癌细胞系(AGS、MKN74细胞),通过细胞成球实验检测过表达lncRNA-Z38对胃癌细胞肿瘤特征的影响。对过表达lncRNA-Z38的AGS细胞... 详细信息

目的:探讨lncRNA-Z38对胃癌细胞恶性生物学行为的影响及其可能的调控机制。方法:构建lncRNA-Z38稳定过表达的胃癌细胞系(AGS、MKN74细胞),通过细胞成球实验检测过表达lncRNA-Z38对胃癌细胞肿瘤特征的影响。对过表达lncRNA-Z38的AGS细胞及对照细胞进行高通量测序,对差异表达基因进行KEGG富集分析,筛选出可能参与调控胃癌发生发展的信号通路,采用WB等技术验证lncRNA-Z38通过调控该信号通路参与提高胃癌细胞的干性。结果:成功构建lncRNA-Z38过表达细胞株,细胞成球实验提示lncRNA-Z38过表达细胞的成球能力显著高于对照细胞(P<0.05)。通过测序筛选出lncRNAZ38过表达胃癌细胞中的1999个差异表达基因,其中上调基因1238个、下调基因761个;经KEGG富集分析得到其中变化最显著的通路为TGF-β信号通路(P<0.05)。WB实验结果提示,lncRNA-Z38高表达胃癌细胞中TGF-β信号通路组成基因编码蛋白ID3、BMP6显著上调(均P<0.05)、GDF-5、WNT8B显著下调(P<0.05)。结论:在胃癌中高度表达的lncRNA-Z38通过调控TGF-β信号通路提高胃癌细胞的干性。

关键词：胃癌 AGS细胞 MKN74细胞 lncRNA-Z38 高通量检测 TGF-β信号通路

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野生蓝莓总花青素生物活性研究

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食品与机械 2016年第7期32卷 132-135,195页

作者：景志行吕留庄许剑锋汪雯翰樊华上海海洋大学食品学院海洋生物制药教研室上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 德国柏林大学和洪堡大学夏洛特实验医学医学院临床医学和病理生物化学研究所德国柏林13353

从野生蓝莓中提取总花青素,并采用XAD-7大孔树脂进行纯化,用超氧阴离子和双氧水自由基清除进行体外抗氧化、小白鼠耳肿足肿模型进行抗炎、Alamar Blue法进行体外抗肿瘤等生物活性评价。结果表明:野生蓝莓花青素抗氧化能力显著,与浓度梯... 详细信息

从野生蓝莓中提取总花青素,并采用XAD-7大孔树脂进行纯化,用超氧阴离子和双氧水自由基清除进行体外抗氧化、小白鼠耳肿足肿模型进行抗炎、Alamar Blue法进行体外抗肿瘤等生物活性评价。结果表明:野生蓝莓花青素抗氧化能力显著,与浓度梯度呈正相关关系;在浓度800μg/m L时对超氧阴离子的清除率达到86.86%,浓度为100μg/m L时对双氧水自由基的清除率达到73.93%;并且具有良好的抗炎能力,在100μg/g剂量灌胃时,对耳廓肿胀抑制率为47.04%,足肿抑制在第4小时达到最大作用;体外抗肿瘤活性也十分显著,对白血病细胞K562增殖抑制的IC50为79.01μg/m L,以上结果表明野生蓝莓具有多种生物活性,为其深入研究和开发利用提供了理论依据。

关键词：野生蓝莓总花青素抗氧化抗炎抗肿瘤

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小鼠髓母细胞瘤细胞系的建立与鉴定

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基础医学与临床 2009年第7期29卷 737-741页

作者：王月圆高云周汪兆琦沈岩佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室德国耶纳07745 Leibniz衰老研究所德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院实验动物中心北京100005

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用... 详细信息

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用Western blot法检测PARP-1蛋白的表达,用含有PARP-1蛋白功能区域的重组质粒pEGFP-C1-Hparp-1和绿色荧光蛋白空质粒pEGFP-C1转染细胞进行检测。结果新建立的小鼠髓母细胞瘤细胞系呈多角形、短梭形,免疫荧光分析可见未成熟神经元标志性蛋白Vimentin、Dcx、βⅢ-Tubulin等表达阳性,Western blot检测PARP-1蛋白阴性,导入外源PAPR-1基因后呈阳性。结论成功建立了DNA损伤修复蛋白功能缺陷的小脑神经源性髓母细胞瘤细胞系,有助于深入研究髓母细胞瘤的病因及发病机制。

关键词：基因敲除 PARP—I 髓母细胞瘤细胞神经标记物

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新疆石河子地区犬细小病毒的分离鉴定与基因型分析

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中国兽医杂志 2010年第8期46卷 44-46页

作者：刘志强张小莺黄新王光雷努尔赵军明薄新文王新华钟发刚新疆建设兵团绵羊繁育基因工程重点实验室新疆石河子832000 新疆畜牧科学院兽医研究所新疆乌鲁木齐830000 德国柏林洪堡大学夏洛特医学院药理所德国柏林10117

犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)是一种引起犬出血性肠炎或心肌炎的病毒[1].欧洲首先在1976年和1977年,在美国1978年都鉴定出存在CPV阳性血清.至1979年病例已蔓及世界各地[2-3].1982年10月,我国报道在暴发传染性出血性腹泻的病犬粪... 详细信息

犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)是一种引起犬出血性肠炎或心肌炎的病毒[1].欧洲首先在1976年和1977年,在美国1978年都鉴定出存在CPV阳性血清.至1979年病例已蔓及世界各地[2-3].1982年10月,我国报道在暴发传染性出血性腹泻的病犬粪便提取物中,发现细小病毒颗粒,其大小和形态结构具有典型的细小病毒特征,从而首次证实该病在我国的存在[4-5].随后,在我国各地陆续有本病发生的报道.近年来随着城市宠物热的兴起, 该病广泛的传播蔓延.据石河子市兽医防疫站初步统计,在犬的各种传染病中,犬细小病毒性肠炎发病率、死亡率均为最高,为当前犬的主要传染病之一.本实验室从病死犬的内脏中分离到1株犬细小病毒,初步命名为CPV-SHZ毒株.

关键词：犬细小病毒分离鉴定新疆石河子地区基因型分析出血性肠炎出血性腹泻阳性血清病毒颗粒

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远志皂苷通过UPP通路清除AD大鼠脑神经细胞代谢废物积聚的作用机制研究

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中国中西医结合杂志 2015年第3期35卷 327-332页

作者：陈勤陈逸青叶海燕于剑奇施其权黄炎安徽大学生命科学学院安徽省中药研究与开发重点实验室合肥230601 德国海德堡大学曼海姆医学院德国曼海姆68167

目的探讨远志皂苷(tenuigenin,TEN)对AD大鼠脑内β淀粉样蛋白(amyloidβprotein,Aβ)沉积、异常磷酸化Tau浓度积聚的清除作用及其作用机制。方法大鼠右侧海马CA1区注射Aβ1-40建立AD模型,透模成功的大鼠分为模型组、TEN低、中、高剂量组... 详细信息

目的探讨远志皂苷(tenuigenin,TEN)对AD大鼠脑内β淀粉样蛋白(amyloidβprotein,Aβ)沉积、异常磷酸化Tau浓度积聚的清除作用及其作用机制。方法大鼠右侧海马CA1区注射Aβ1-40建立AD模型,透模成功的大鼠分为模型组、TEN低、中、高剂量组,并用远志皂苷(18.5、37.0、74.0 mg/kg)对大鼠进行灌胃治疗,另设假手术组;免疫组织化学法观察大鼠脑海马神经元中Aβ621-40、Tau p-Ser2蛋白的表达;Western blot检测大脑神经元中泛素蛋白(ubiquitin,Ub)和泛素连接酶E3(ubiquitin-protein ligase E3)的表达水平。ELISA法检测大脑神经元中26S蛋白酶体的含量。结果免疫组化显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元中Aβ、Tau p-Ser262蛋白阳性反应的神经元数量显著增多(P<0.01);Western blot检测显示,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中Ub表达水平上调,而E3表达下调(P<0.01)。ELISA检测显示,AD大鼠脑内的26S蛋白酶体含量显著减少(P<0.01)。与模型组比较,TEN各组大鼠海马神经元中Aβ1-40、Tau p-Ser262和Ub表达水平下降明显,泛素连接酶E3表达水平和26S蛋白酶体含量也明显升高,以37.0 mg/kg和74.0 mg/kg剂量组效果最佳(P<0.05,P<0.01)。结论 UPP通路参与了AD的发生过程,远志皂苷能明显降低AD大鼠脑内Aβ1-40沉积和tau异常磷酸化水平。

关键词：远志皂苷老年性痴呆 β-淀粉样蛋白 Tau蛋白磷酸化泛素蛋白酶体通路代谢废物积聚

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高密度脂蛋白和载脂蛋白AⅠ促进单核细胞源性巨噬细胞产生前列腺素E_2

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华中科技大学学报（医学版） 2002年第3期31卷 284-286页

作者：周小琴 Arnold von Eckardstein 华中科技大学同济医学院附属协和医院内科德国明斯特大学临床化学与实验医学研究所德国明斯特D-48149

前列腺素 E2 (PGE2 )是巨噬细胞产生的二十烷酸代谢的主要产物之一。为探讨高密度脂蛋白 (HDL )和载脂蛋白 A (apo A )抗动脉硬化的作用机制 ,观察了二者对单核细胞源性巨噬细胞产生 PGE2 的影响。培养的人外周血单核细胞源性巨噬细胞... 详细信息

前列腺素 E2 (PGE2 )是巨噬细胞产生的二十烷酸代谢的主要产物之一。为探讨高密度脂蛋白 (HDL )和载脂蛋白 A (apo A )抗动脉硬化的作用机制 ,观察了二者对单核细胞源性巨噬细胞产生 PGE2 的影响。培养的人外周血单核细胞源性巨噬细胞先经过脂质负载 ,再分别与 HDL3和 apo A 孵育 ;利用酶联免疫测定法检测细胞培养物上清液中的 PEG2 含量。结果显示 :孵育 2 4 h后 HDL3组细胞合成与分泌的 PGE2 是对照组的 370 % ,apo A 也增加巨噬细胞 PGE2的产生。HDL3的作用明显大于 apo A ,且呈时间依赖性。表明 HDL3和无脂质 apo A 都可以促进巨噬细胞产生 PGE2 ,这可能参与 HDL和 apo A

关键词：动脉粥样硬化高密度脂蛋白载脂蛋白AⅠ 单核细胞源性巨噬细胞前列腺素E2

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螺杆菌感染与NF—κB p65蛋白表达相关性在人食管癌发生中的意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第3期27卷 234-239页

作者：张丽叶嗣颖 Ulrich Bohr 陈新山田拥军张小兵华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物系武汉430030 华中科技大学同济医学院基础医学院法医病理学系武汉430030 华中科技大学同济医学院基础医学院附属同济医院分子生物学实验中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科武汉430030 暨南大学医学院微生物学和免疫学教研室广州510632 德国马格德堡大学医学院胃肠病学肝病学和传染病学系

目的研究人食管癌是否存在螺杆菌感染及其与NF-κB p65蛋白的关系，从而探讨在人食管癌发生中的意义。方法随机收集食管癌标本40例和正常食管标本10例，采用聚合酶链反应（PCR）扩增螺杆菌16SrRNA，随机选4例测序及同源比较。阳性者再... 详细信息

目的研究人食管癌是否存在螺杆菌感染及其与NF-κB p65蛋白的关系，从而探讨在人食管癌发生中的意义。方法随机收集食管癌标本40例和正常食管标本10例，采用聚合酶链反应（PCR）扩增螺杆菌16SrRNA，随机选4例测序及同源比较。阳性者再扩增幽门螺杆菌（***,Hp）的特异基因相对分子质量（Mr）26×10^3的种特异性抗原和相关功能基因（GagA，VacA）。并采用免疫组化法检测食管癌组织中NF-κB p65蛋白的表达情况。结果32．5％（13／40）的食管癌组织中发现有螺杆菌16SrRNA基因存在，正常人食管组织无一例阳性。4例测序及同源比较，食管癌组织中螺杆菌序列与***的16SrRNA序列有99％～100％同源性。阳性标本均扩增出脚特异基因M，26×10^3种特异性抗原，但仅2例扩增出G田弘基因，3例扩增出VacA基因。免疫组化法染色显示，16SrRNA阳性的食管癌组织中NF-κB p65蛋白表达率为100％（13／13），而16SrRNA阴性食管癌组织表达率仅占18．5％（5／27），二者差异有统计学意义（P〈0．01）。结论食管癌患者食管组织存在螺杆菌感染，该螺杆菌可能为脚。螺杆菌感染导致食管黏膜NF-κB p65蛋白表达的增加，可能在食管癌生成中作为信号传导机制之一。

关键词：食管癌螺杆菌 PCR NF-κB p65蛋白免疫组化染色

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