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中国植物学会第十四届全国药用植物及植物药学术研讨会

作者：曾军英胡兴李胜华伍贤进李孟云俞文靓洪玲玲怀化学院生物与食品工程学院民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室/湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

胰腺癌恶性程度高,预后差,5 年生存率低于5％,是恶性程度最高和预后最差的肿瘤之一。肿瘤干细胞是具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的细胞,是导致癌症异常顽固、难以根治的原因之一。

关键词：野百合碱胰腺癌肿瘤干细胞 AuroraB 复制灾变

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药用植物鱼腥草的转录组学研究

药用植物鱼腥草的转录组学研究

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第八届中国民族植物学学术研讨会暨第七届亚太民族植物学论坛

作者：魏麟黎晓英姚元枝付明伍贤进怀化学院生物与食品工程学院民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室

目的首次构建药用植物鱼腥草均一化cDNA文库,识别鱼腥草药用活性物质的关键基因序列,阐释鱼腥草重要药用成分生物合成的遗传基础。方法采用新一代高通量测序技术Illumina Hiseq2000对鱼腥草转录组进行测序,结合生物信息学方法开展基因... 详细信息

目的首次构建药用植物鱼腥草均一化cDNA文库,识别鱼腥草药用活性物质的关键基因序列,阐释鱼腥草重要药用成分生物合成的遗传基础。方法采用新一代高通量测序技术Illumina Hiseq2000对鱼腥草转录组进行测序,结合生物信息学方法开展基因表达谱研究和功能基因预测。结果获得了56,668,324个序列读取片段(reads),包含了4,677,576,300个碱基序列(bp)信息。对(reads进行序列组装,获得63,954个单基因簇(unigene),平均长度679bp,序列信息达到了43,395,361bp。另外从长度分布、GC含量、表达水平等方面对unigene进行评估,数据显示测序质量好,可信度高。数据库中的序列同源性比较表明,41,094个unigene与其他生物的己知基因具有不同程度的同源性。鱼腥草转录组中的unigene根据GO功能大致可分为细胞组分、分子功能和生物学过程三大类58个分支,其中有大量unigene与代谢进程、结合活性和细胞进程相关。将unigene与COG数据库进行比对,根据其功能大致可分为25类。KEGG数据库作为参考,依据代谢途径可将umigene定位到128个代谢途径分支,包括苯丙氨酸代谢通路、植物与病原物互作、植物激素生物合成和信号转导、黄酮类化合物合成、萜类骨架生物合成、脂类代谢、RNA降解等。SSR位点查找发现,从63954个unigene中共找到4800个SSR位点。SSRs位点中三核苷酸重复是主要类型,不同重复基序类型中,出现频率最高的为A/T。结论本研究首次对药用植物鱼腥草转录组进行了分析,为其重要药用成分研究提供了宝贵的基因组数据来源。

关键词：鱼腥草转录组高通量测序基因注释 SSR

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药用葛高产种质资源筛选研究

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怀化学院学报 2016年第5期35卷 1-5页

作者：刘良科贺安娜张崇华怀化学院生物与食品工程学院湖南怀化418008 民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湖南怀化418008 湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008 湖南省张葛老葛根产业有限公司湖南会同418300

为筛选适合当地种植的高产药用葛种质资源,对15份葛种质资源进行了种植试验、生物学性状调查、光合特性、相对叶绿素含量测定,并对其产量与光合特性、相对叶绿素含量进行了相关性分析.结果表明:横峰2号粉葛、湖南5号粉葛和湖南3号粉葛... 详细信息

为筛选适合当地种植的高产药用葛种质资源,对15份葛种质资源进行了种植试验、生物学性状调查、光合特性、相对叶绿素含量测定,并对其产量与光合特性、相对叶绿素含量进行了相关性分析.结果表明:横峰2号粉葛、湖南5号粉葛和湖南3号粉葛产量较高,其产量均在1 800 kg/667 m^2以上;产量与净光合速率呈正相关,而与相对叶绿素含量呈负相关.怀化地区适合种植的粉葛品种是横峰2号粉葛、湖南5号粉葛和湖南3号粉葛.

关键词：野葛粉葛种质资源产量筛选

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徐长卿化学成分研究

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中药材 2015年第1期38卷 97-100页

作者：付明王登宇胡兴郭孟齐民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室/湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室/怀化学院生命科学系湖南怀化418008

目的:研究徐长卿的化学成分。方法:运用多种色谱技术分离徐长卿中的化学成分,根据波谱数据和理化性质确定化合物结构。结果:从徐长卿全草中共分离得到15个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、β-胡萝卜苷(2)、牡丹酚苷A(3)、丹皮酚原苷(4)... 详细信息

目的:研究徐长卿的化学成分。方法:运用多种色谱技术分离徐长卿中的化学成分,根据波谱数据和理化性质确定化合物结构。结果:从徐长卿全草中共分离得到15个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、β-胡萝卜苷(2)、牡丹酚苷A(3)、丹皮酚原苷(4)、santamarin(5)、丹皮酚(6)、annobraine(7)、落叶松脂醇(8)、α-细辛醚(9)、7-angelyheliotridine(10)、β-香树酯醇(11)、尿苷(12)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(13)、山柰酚-7-O-(4″,6″-二对羟基肉桂酰基-2″,3″-二乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、(2S,E)-N-[2-羟基-2-(4-羟基苯)乙酯]阿魏酰胺(15)。结论:其中,化合物5、14为首次从该属植物中分离得到,化合物4、6、8、11、12、15为首次从该植物中分离得到。

关键词：徐长卿化学成分

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鱼腥草乙酰辅酶A酰基转移酶基因克隆、表达及生物信息学分析

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中草药 2015年第1期46卷 107-111页

作者：姚元枝黎晓英魏麟伍贤进刘胜贵唐玉莲怀化学院生命科学系民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

目的通过克隆鱼腥草乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-Co A C-acetyltransferase,AACT)基因c DNA全长,并展开生物信息学分析和表达分析,为解析鱼腥草萜类次生代谢产物的生物合成机制奠定基础。方法采用RT-PCR方法获得AACT基因c DNA序列并进... 详细信息

目的通过克隆鱼腥草乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-Co A C-acetyltransferase,AACT)基因c DNA全长,并展开生物信息学分析和表达分析,为解析鱼腥草萜类次生代谢产物的生物合成机制奠定基础。方法采用RT-PCR方法获得AACT基因c DNA序列并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法检测了AACT基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果克隆获得的AACT基因c DNA全长为1 218 bp,编码405个氨基酸。生物信息学预测AACT蛋白不含跨膜区,不含信号肽。AACT基因在鱼腥草地上茎中的表达量最高,达到1.49,其次是地下茎0.96,花和叶中的表达量相对较低,分别为0.20和0.10。结论首次从鱼腥草中克隆了AACT基因,为进一步阐明该基因在鱼腥草萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础。

关键词：鱼腥草乙酰辅酶A酰基转移酶 RT-PCR cDNA序列差异表达

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接骨草HMGR基因cDNA克隆、不同器官中的差异表达及生物信息学分析

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中草药 2015年第16期46卷 2449-2453页

作者：姚元枝黎晓英郭文博刘宇魏麟怀化学院生物与食品工程学院民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

目的克隆接骨草Sambucus chinensis 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达。方法采用RT-PCR方法获得HMGR基因c DNA序列,并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三级结构预测分析,并预测该蛋白功能;利用实时荧... 详细信息

目的克隆接骨草Sambucus chinensis 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达。方法采用RT-PCR方法获得HMGR基因c DNA序列,并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三级结构预测分析,并预测该蛋白功能;利用实时荧光定量PCR方法检测HMGR基因在接骨草的根状茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果克隆获得的HMGR基因c DNA全长为1 626 bp,编码593个氨基酸。生物信息学预测HMGR蛋白含2个跨膜区,不含信号肽。HMGR基因主要在接骨草的花和地上茎中表达较高,其他器官表达相对较低。结论首次从接骨草中克隆了HMGR基因,为进一步阐明该基因在接骨草萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础。

关键词：接骨草 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶实时荧光定量PCR c DNA序列萜类化合物

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显脉旋覆花不同月份光合特性及药用成分含量比较

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中药材 2015年第10期38卷 2026-2030页

作者：贺安娜王李雪伍贤进何水平怀化学院生命科学系湖南怀化418008 怀化学院民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湖南怀化418008 湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

目的:比较显脉旋覆花不同月份光合特性及主要药用成分含量,为栽培及采收利用提供理论基础。方法:运用LI-6400便携式光合仪对显脉旋覆花4月、6月、8月、10月的光合特性进行测定,比较其主要形态特征,并采用紫外分光光度法对总酚和总黄酮... 详细信息

目的:比较显脉旋覆花不同月份光合特性及主要药用成分含量,为栽培及采收利用提供理论基础。方法:运用LI-6400便携式光合仪对显脉旋覆花4月、6月、8月、10月的光合特性进行测定,比较其主要形态特征,并采用紫外分光光度法对总酚和总黄酮含量进行了测定。结果:显脉旋覆花叶片净光合速率在6月最高,日变化平均值为8.50μmol/(m^2·s),呈单峰曲线;光响应曲线数据表明6月份显脉旋覆花叶片利用强光的能力最强;叶绿素荧光参数值也显示,6月份叶片光系统Ⅱ反映中心开放程度、光化学效率最高,电子传递速率最快。形态指标显示,6月份显脉旋覆花单叶叶面积及单株叶面积最高。显脉旋覆花中总酚含量远远高于总黄酮含量,且地下部分药用成分含量高于地上部分。结论:采挖显脉旋覆花地下部分应以入秋后、地下部分重量和有效成分积累较多时进行。

关键词：显脉旋覆花不同月份光合特性药用成分

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金银花黄酮对小鼠免疫调节作用的研究

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中国应用生理学杂志 2015年第1期31卷 89-92页

作者：皮建辉谭娟胡朝暾向德标怀化学院生命科学系民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

目的:探讨金银花黄酮对小鼠血清免疫酶活性与淋巴器官的抗氧化作用。方法:将50只昆明小鼠随机分为5组(n=10):正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。模型组和正常组小鼠生理盐水灌胃,低、中、高剂量组分别给予金银花黄酮100 mg... 详细信息

目的:探讨金银花黄酮对小鼠血清免疫酶活性与淋巴器官的抗氧化作用。方法:将50只昆明小鼠随机分为5组(n=10):正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。模型组和正常组小鼠生理盐水灌胃,低、中、高剂量组分别给予金银花黄酮100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg体重灌胃。连续灌胃7周后,除正常组注射生理盐水,其他各组小鼠均采用25 mg/kg体重的地塞米松连续3 d皮下注射,造成免疫抑制后继续灌胃1周,处死全部小鼠,取血和胸腺、脾脏,称重胸腺和脾脏,计算小鼠脏器指数,测定血浆中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)活力,以及胸腺和脾脏匀浆中单胺氧化酶(MAO)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果:金银花黄酮能显著提高免疫抑制小鼠的脏器指数,增加免疫抑制小鼠血清ACP、AKP和LSZ活力,提高免疫抑制小鼠的脾脏、胸腺组织T-AOC和SOD活性,而明显降低MAO和MDA含量。结论:金银花黄酮能显著调节小鼠血清免疫酶活性,提高淋巴器官的抗氧化功能,表明具其有良好的免疫调节功能。

关键词：金银花黄酮脏器指数免疫酶活性抗氧化作用

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鱼腥草糖基转移酶基因UGT75C1的克隆及原核表达

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园艺学报 2015年第11期42卷 2299-2305页

作者：黎晓英伍贤进姚元枝付明宁鹏飞李昭君魏麟民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室怀化学院生物与食品工程学院湖南怀化418008

根据已经获得的鱼腥草UGT75C1转录本序列设计1对引物,采用RT-PCR方法获得UGT75C1基因cDNA序列,并对UGT75C1蛋白进行理化性质分析,并预测该蛋白功能;利用实时荧光定量PCR方法检测了UGT75C1基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达... 详细信息

根据已经获得的鱼腥草UGT75C1转录本序列设计1对引物,采用RT-PCR方法获得UGT75C1基因cDNA序列,并对UGT75C1蛋白进行理化性质分析,并预测该蛋白功能;利用实时荧光定量PCR方法检测了UGT75C1基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达情况,将克隆得到的UGT75C1基因完整开放阅读框连接到原核表达载体pGEX4T-1上,转化大肠杆菌*** BL21(DE3),通过IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达产物。克隆获得的UGT75C1基因长为1 787 bp,开放阅读框1 461 bp,编码486个氨基酸。生物信息学预测UGT75C1蛋白含跨膜区,不含信号肽,具有糖基转移酶的PSPG motif。UGT75C1在鱼腥草的叶片中表达丰度最高,其他器官中表达量相对较低,花中表达量最低;该基因原核表达产物与预期大小一致,显示原核表达成功,为下一步研究其功能奠定了基础。

关键词：鱼腥草 UGT75C1 克隆原核表达

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不同土壤对天门冬生长的影响

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中药材 2015年第2期38卷 234-236页

作者：姚元枝欧立军怀化学院生命科学系/民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室/湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

目的:对栽培天门冬1年后的土壤(黑色腐殖质土、黑色砂质土、暗棕色粘性土和棕黄色粘性土)的金属元素(K、Fe和Zn)含量、土壤酶(磷酸酶、脲酶、蔗糖酶和过氧化氢酶)活性、天门冬的主要营养成分(皂苷、氨基酸和可溶性糖)、部分微量元素(Zn+... 详细信息

目的:对栽培天门冬1年后的土壤(黑色腐殖质土、黑色砂质土、暗棕色粘性土和棕黄色粘性土)的金属元素(K、Fe和Zn)含量、土壤酶(磷酸酶、脲酶、蔗糖酶和过氧化氢酶)活性、天门冬的主要营养成分(皂苷、氨基酸和可溶性糖)、部分微量元素(Zn+、Fe3+和K+)和农艺性状进行分析,探讨不同土壤对天门冬质量和品质的影响。方法:通过便携式矿石分析仪测量土壤中金属元素含量、比色法和滴定法测定土壤酶活性及天门冬营养物质和微量元素含量,用Excel 2003和SPSS 13.0分析软件进行数据分析。结果:天门冬栽培后,不同土壤中的金属元素和土壤酶活性不同,黑色砂质土中的金属元素利用率和土壤酶活性较高;栽培于黑色砂质土的天门冬中皂苷和可溶性糖、K+和Zn2+含量及块根质量(鲜重)均高于其他3种土壤中栽培的天门冬。结论:黑色砂质土是适宜天门冬人工栽培的土壤,且栽培时需多施K肥,这有利于提高天门冬的产量和品质。

关键词：天门冬土壤酶活性微量元素营养物质人工栽培

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