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中国人兽共患病学报 2013年第7期29卷 692-696页

作者：陈兴智杨雯杨小迪王旗夏惠刘刚沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 鲁东大学化学与材料科学学院烟台264025 人兽共患病安徽省重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的观察二(喹唑啉-4-基)二硒醚体外对弓形虫RH株速殖子杀伤作用,探讨该药抗弓形虫的效果与机制。方法将二(喹唑啉-4-基)二硒醚,(下称药物)浓度分为4组,即生理盐水对照组(A组)、药物浓度为0.05μg/mL(B组)、0.5μg/mL(C组)、5.00μg/mL(... 详细信息

目的观察二(喹唑啉-4-基)二硒醚体外对弓形虫RH株速殖子杀伤作用,探讨该药抗弓形虫的效果与机制。方法将二(喹唑啉-4-基)二硒醚,(下称药物)浓度分为4组,即生理盐水对照组(A组)、药物浓度为0.05μg/mL(B组)、0.5μg/mL(C组)、5.00μg/mL(D组),分别加入到含弓形虫速殖子(含虫体4×106个/mL)的24孔培养板中,于1h、2h、4h后收集弓形虫速殖子,以Trypan blue染色法检测弓形虫着色率;C组和A组以MTT法检测弓形虫活性,Giemsa染色法观察虫体形态和结构变化,透射电镜观察弓形虫速殖子超微结构。结果不同浓度(0.05μg/mL、0.5μg/mL、5.00μg/mL)弓形虫经二(喹唑啉-4-基)二硒醚作用1h后的着色率分别为5.00%、26.70%和99.50%,作用2h后的着色率分别为22.00%、98.70%和100.00%,作用4h后的着色率分别为58.30%、100.00%和100.00%;生理盐水组1h、2h、4h后的着色率分别为1.0%、1.20%和1.70%。0.5μg/mL浓度药物组,MTT检测弓形虫活性,OD值随时间延长增长率明显低于生理盐水对照组(P<0.05);Giemsa染色观察,弓形虫速殖子随着时间的延长,逐渐出现肿胀,两端变圆,虫体坏死现象;透射电镜观察随着时间延长,逐渐出现虫体肿胀,胞膜与基质之间空隙明显,越来越多和大的空泡形成,胞膜出现断裂,内部结构溶解模糊。结论二(喹唑啉-4-基)二硒醚体外可部分或全部杀死弓形虫,效果与时间、剂量相关。

关键词：二(喹唑啉-4-基)二硒醚刚地弓形虫速殖子体外

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2009-2011年安徽省五河县疟疾流行特征分析

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中国血吸虫病防治杂志 2013年第1期25卷 70-72页

作者：王雪梅夏立环方强陶志勇焦玉萌夏惠孙新蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠 233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽省五河县疾病预防控制中心

目的分析2009-2011年安徽省五河县疟疾流行特征,为制定行之有效的防治措施提供科学依据。方法对2009-2011年五河县疟疾疫情报表和流行病学调查资料进行统计学分析。结果 2009-2011年五河县疟疾总发病349例,发病呈逐年下降趋势。其中男性... 详细信息

目的分析2009-2011年安徽省五河县疟疾流行特征,为制定行之有效的防治措施提供科学依据。方法对2009-2011年五河县疟疾疫情报表和流行病学调查资料进行统计学分析。结果 2009-2011年五河县疟疾总发病349例,发病呈逐年下降趋势。其中男性205例,女性144例,男女比例为1.42∶1。年龄最小的1岁,最大的100岁,11～、21～岁2个年龄组发病人数较多。疟疾流行有明显的季节性,1-3月发病较少,4月开始上升,6-9月为发病高峰季节,11-12月仅占2.01%。349例中,县城2例,占0.57%,农村347例,占99.43%。县城人口疟疾年均发病率0.08/万,显著低于农村的1.78/万(P<0.05)。发病率前2位为丘陵区的朱顶镇和小溪镇,年均发病率分别为5.53/万和4.78/万,丘陵区占发病总数的36.10%。患者多住平瓦房,纱门、纱窗使用率较低,少有疟防知识且多有露宿习惯。结论五河县疟疾发病呈逐年下降趋势。疟疾发病与居住条件、疟防知识知晓等因素有关。

关键词：疟疾疫情流行病学五河县安徽省

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猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽免疫原性研究

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蚌埠医学院学报 2013年第5期38卷 513-515页

作者：王媛媛陶志勇杨小迪王小莉常雪莲陈勇孙新夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:观察载体蛋白偶联的TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽诱导的体液免疫反应。方法:人工合成TSO45-4B抗原FnⅢ结构域2条预测表位肽,偶联钥孔血蓝蛋白免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中预测表位肽特异性抗体滴度。结果:... 详细信息

目的:观察载体蛋白偶联的TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽诱导的体液免疫反应。方法:人工合成TSO45-4B抗原FnⅢ结构域2条预测表位肽,偶联钥孔血蓝蛋白免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中预测表位肽特异性抗体滴度。结果:免疫小鼠血清中检测到1条预测表位肽特异性抗体,其效价达到1∶1 280。结论:设计的1条TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位肽可诱导小鼠产生体液免疫反应。

关键词：猪带绦虫六钩蚴 TSO45-4B FnⅢ结构域 B细胞表位免疫反应

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小鼠肝脏淋巴细胞几种分离方法的比较

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蚌埠医学院学报 2013年第8期38卷 1052-1055页

作者：孔晓明金齐力韦莉王婷范伟朱翔刘勇蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:通过比较几种肝脏淋巴细胞分离方法得到的总淋巴细胞、T细胞、自然杀伤T细胞(NKT cells)及自然杀伤细胞(NK细胞)的比例和细胞绝对数,明确各种方法的适用范围。方法:按照析因设计,将不放血(A法)、摘眼球放血(B法)、体循环灌流(C法)... 详细信息

目的:通过比较几种肝脏淋巴细胞分离方法得到的总淋巴细胞、T细胞、自然杀伤T细胞(NKT cells)及自然杀伤细胞(NK细胞)的比例和细胞绝对数,明确各种方法的适用范围。方法:按照析因设计,将不放血(A法)、摘眼球放血(B法)、体循环灌流(C法)、摘眼球结合体循环灌流(B法+C法)4种肝脏预处理方法和单浓度离心法(Ⅰ法)、非连续密度梯度离心法(Ⅱ法)2种Percoll分离方法进行全面组合,共获得8种组合条件,分离小鼠肝脏淋巴细胞,用流式细胞术检测各类型细胞比例。结果:肝脏预处理方法中B法+C法获得淋巴细胞比例最高,A法获得淋巴细胞绝对数最高,B法获得的NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均最高;Ⅱ法获得的淋巴细胞、T细胞、NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均高于Ⅰ法。对于NKT细胞比例和NK细胞绝对数,肝脏预处理方法和Percoll浓度之间有交互作用(P<0.01和P<0.05),其他均无交互作用(P>0.05)。结论:采用摘眼球放血结合体循环灌流法,结合Percoll非连续密度梯度法(33%+70%),可获得较高数量和比例的固有免疫细胞,有助于对肝脏固有免疫细胞如NKT细胞、NK细胞等的研究。

关键词：细胞分离肝脏淋巴细胞分离方法 Percoll 析因分析

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安徽省沿淮地区中华按蚊溴氰菊酯抗性及代谢解毒酶活性kdr突变频率调查

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中国血吸虫病防治杂志 2013年第3期25卷 263-267页

作者：常雪莲薛玉芹张安冬朱国鼎方强蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院临床医学二系江苏省血吸虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室

目的了解安徽省沿淮地区疟疾媒介中华按蚊对溴氰菊酯杀虫剂的抗性状况及谷胱甘肽S转移酶(GSTs)、细胞色素氧化酶(P450s)等代谢解毒酶活性和钠离子通道击倒抗性基因(Knockdown resistance,kdr)的突变情况。方法2011年8-9月采集安徽省蚌... 详细信息

目的了解安徽省沿淮地区疟疾媒介中华按蚊对溴氰菊酯杀虫剂的抗性状况及谷胱甘肽S转移酶(GSTs)、细胞色素氧化酶(P450s)等代谢解毒酶活性和钠离子通道击倒抗性基因(Knockdown resistance,kdr)的突变情况。方法2011年8-9月采集安徽省蚌埠市李楼乡、沫河口镇和沱湖乡中华按蚊成蚊样本,采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触法,调查3个地区中华按蚊对溴氰菊酯抗性状况。随机挑选样本采用生化法检测代谢解毒酶活性并用PCR扩增产物直接测序法检测分析钠离子通道kdr基因IIS6片段L1014位点基因型。结果李楼乡、沫河口镇和沱湖乡3个检测点的中华按蚊对溴氰菊酯60 min内击倒率分别为4.1%、7.0%和8.2%,恢复24 h后校正死亡率分别为8.2%、12.0%、12.8%,均为抗性种群。3个检测点的中华按蚊GSTs和P450s活性均显著高于实验室敏感种群(P<0.001)。3个检测点的中华按蚊kdr基因均发生突变,存在L1014C和L1014F两种突变类型,无野生纯合型(TTG/TTG),实验室敏感种群kdr基因均为无突变的野生纯合型。结论安徽省沿淮地区的中华按蚊已对溴氰菊酯产生较强的抗性,代谢解毒酶活性比实验室敏感种群显著升高,钠离子通道kdr基因L1014位点出现高频率的突变。

关键词：中华按蚊溴氰菊酯抗性代谢解毒酶 kdr 基因突变沿淮地区

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结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因的克隆与序列分析

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蚌埠医学院学报 2013年第11期38卷 1385-1388页

作者：薛玉芹王英陈勇李江艳李倩唐洁夏惠王雪梅方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的:克隆结核分枝杆菌减毒株H37Ra培养滤液蛋白10(CFP10)基因,并对其进行序列分析。方法:自结核菌H37Ra株抽提基因组DNA为模板,以已知结核菌H37Ra株CFP10基因设计引物。通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增出结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,... 详细信息

目的:克隆结核分枝杆菌减毒株H37Ra培养滤液蛋白10(CFP10)基因,并对其进行序列分析。方法:自结核菌H37Ra株抽提基因组DNA为模板,以已知结核菌H37Ra株CFP10基因设计引物。通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增出结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,将其克隆至pTG19-T载体后,经PCR和双酶切鉴定后进行DNA序列测定,并以BLAST在线软件进行序列比对分析。结果:PCR产物电泳显示扩增片段约为300 bp,测序获得的片段开放编码框由303 bp组成,与H37Rv株CFP10基因同源性为100%,推导出编码氨基酸序列同源性为100%。结论:成功克隆结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,其基因序列与H37Rv株CFP10基因序列无差异。

关键词：结核分枝杆菌 H37Ra株培养滤液蛋白10基因克隆序列分析

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结核分枝杆菌ESAT6疫苗的研究进展

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淮海医药 2013年第6期31卷 576-579页

作者：王英王雪梅方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

结核病是由结核分枝杆菌（MTB）引起的一种严重危害人类健康的重要传染性疾病。根据WHO发布的《2011年全球结核病（TB）控制报告》，患结核病的人数降到2010年的880万，结核病死亡数降到140万人，结核病死亡率在1990年和2010年之间下降... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌（MTB）引起的一种严重危害人类健康的重要传染性疾病。根据WHO发布的《2011年全球结核病（TB）控制报告》，患结核病的人数降到2010年的880万，结核病死亡数降到140万人，结核病死亡率在1990年和2010年之间下降了40％，除非洲之外，其他区域都可按期实现到2015年时使死亡率降低50％这一目标；但是流动人口剧增、结核菌与艾滋病毒双重感染和耐药结核菌病的增多均增加了结核病防治工作的难度，使得结核病疫情的形势依然严峻，防治任务仍然十分艰巨。在艾滋病感染患者中结核的发病率则更高，艾滋病毒携带者同时感染了结核分枝杆菌后，发生结核病的可能性是正常人的34倍。

关键词：结核分枝杆菌疫苗 ESAT6

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孕鼠给予葡萄球菌肠毒素B对新生子代鼠CD3+TCR Vβ 8+T细胞的印迹效应

孕鼠给予葡萄球菌肠毒素B对新生子代鼠CD3+TCR Vβ 8+T细胞的印迹...

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第五届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：管俊昌朱翔余峰玲杨文选林娜张涛刘勇蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院病原生物学教研室

目的观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B（SEB）对新生子代鼠CD3TCR Vβ8T细胞的影响。方法在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15μg SEB,同时设立PBS对照组。在子代鼠出生后第1、2、3、5天,用流式细胞仪检测新生子代鼠胸腺及外周血中CD3TC... 详细信息

目的观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B（SEB）对新生子代鼠CD3TCR Vβ8T细胞的影响。方法在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15μg SEB,同时设立PBS对照组。在子代鼠出生后第1、2、3、5天,用流式细胞仪检测新生子代鼠胸腺及外周血中CD3TCR Vβ8T细胞;并观察新生鼠血液中CD4TCR Vβ8T细胞与CD8TCR Vβ8T细胞比值的变化。结果妊娠期母鼠给予SEB可导致新生子代鼠胸腺中CD3CD8TCR Vβ8T细胞百分比在第1、2、3、5天均较对照组明显减少,而CD3CD4TCR Vβ8T细胞百分比在第1、2、3天均较对照组明显减少;其血液中CD3CD8TCR Vβ8T细胞及CD3CD4TCR Vβ8T细胞百分比均较对照组明显减少;但妊娠期母鼠给予SEB对新生子代鼠血液中CD4TCR Vβ8T细胞与CD8TCR Vβ8T细胞的比值无影响。结论妊娠期母鼠给予SEB改变其新生子代鼠CD3TCR Vβ8T细胞的百分比并形成印迹效应。

关键词：子代鼠 SEB TCR V CD3 肠毒素

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孕鼠给予葡萄球菌肠毒素B对新生子代鼠CD3+TCR Vβ 8+T细胞的印迹效应

孕鼠给予葡萄球菌肠毒素B对新生子代鼠CD3+TCR Vβ 8+T细胞的印迹...

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2013年中国微生物学会学术年会

作者：管俊昌朱翔余峰玲杨文选林娜张涛刘勇蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

目的观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B (SEB)对新生子代鼠CD3+ TCR Vβ 8+T细胞的影响.方法在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15u g SEB,同时设立PBS对照组.

关键词：

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产单核细胞李斯特菌感染小鼠脾脏树突状细胞亚群和表型的变化

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蚌埠医学院学报 2013年第6期38卷 645-647,651页

作者：韦莉金齐力管俊昌孔晓明蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第二附属医院检验科安徽蚌埠233040

目的:利用产单核细胞李斯特菌(LM)感染BALB/c小鼠模型,研究LM感染对小鼠脾脏树突状细胞(DC)亚群及表型变化的影响。方法:LM尾静脉感染BALB/c小鼠,感染后第3、5、7天取小鼠脾脏,平板稀释法进行脾脏细菌载量分析;流式细胞术检测脾脏DC亚群... 详细信息

目的:利用产单核细胞李斯特菌(LM)感染BALB/c小鼠模型,研究LM感染对小鼠脾脏树突状细胞(DC)亚群及表型变化的影响。方法:LM尾静脉感染BALB/c小鼠,感染后第3、5、7天取小鼠脾脏,平板稀释法进行脾脏细菌载量分析;流式细胞术检测脾脏DC亚群及DC相关表面分子CD80、CD86的表达情况。结果:感染小鼠脾脏细菌载量感染后第3天有高水平的菌落形成单位计数,随着时间的推移细菌的数量迅速降低,直到第7天基本被清除;CD11c+DC的数量在感染第5天高于对照组(P<0.05),CD4+DC的数量在感染后第5天和第7天均高于对照组(P<0.05),CD8α+DC的数量在感染后第3、5和7天及CD4-CD8α-DC的数量在感染后的第3和第5天亦均高于对照组(P<0.05～P<0.01);LM感染后,DC表面CD80和CD86的表达增加,均于感染后第3天和第5天显著高于对照组(P<0.01)。结论:LM感染早期,小鼠脾脏DC亚群出现的增殖和成熟表型特征性分子表达上调,决定了其在细胞免疫应答活化中的作用地位。

关键词：李斯特菌感染产单核细胞树突状细胞免疫应答小鼠

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