检索结果-内蒙古大学图书馆

中国微生态学杂志 2011年第9期23卷 802-805,809页

作者：俞岚周蕾于东红甘怀勇唐素兰蚌埠医学院第一附属医院病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

目的通过检测胃癌中幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori L-form,***-L型)感染以及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况,探讨***-L型在胃癌侵袭、转移中的作用。方法将胃癌BGC-823细胞与***-L型按不同比例共培养,细胞爬片进行免疫组化(S... 详细信息

目的通过检测胃癌中幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori L-form,***-L型)感染以及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况,探讨***-L型在胃癌侵袭、转移中的作用。方法将胃癌BGC-823细胞与***-L型按不同比例共培养,细胞爬片进行免疫组化(SP法)检测BGC-823细胞OPN的表达情况。革兰染色及免疫组化检测120例胃癌组织中***-L型的感染情况。免疫组化检测胃癌组织中的OPN的表达。结果 (1)随着细菌比例增大,细胞爬片OPN阳性的胃癌BGC-823细胞数逐渐增加,各组之间差异有统计学意义(F=137.5,P<0.01)。(2)胃癌组织***-L型阳性组的OPN表达阳性率为70.73%,显著高于***-L型阴性组OPN表达阳性率42.1%(P<0.005)。胃癌中***-L型阳性率与肿瘤的大小、癌细胞的血管侵袭、浸润深度及淋巴结转移具有相关性(P<0.001～P<0.05)。(3)胃癌组织中***-L型阳性率与OPN的阳性表达呈正相关性(r=0.27,P<0.001)。结论 ***-L型感染增强了胃癌细胞的侵袭和转移能力,其机制可能与胃癌细胞的OPN表达量增加有关。

关键词：幽门螺杆菌L型胃癌侵袭转移 OPN 免疫组织化学

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间日疟原虫谷氨酸脱氢酶基因的克隆表达

间日疟原虫谷氨酸脱氢酶基因的克隆表达

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第三届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者：方强夏惠王雪梅齐文娟曹俊顾亚萍高琪蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院免疫学教研室江苏省血吸虫病防治研究所

目的克隆表达间日疟原虫谷氨酸脱氢酶.方法:根据推测的PvGDH编码基因设计特异性引物,采用PCR自构建的中国红内期间日疟原虫全长cDNA文库扩增PvGDH编码基因,将其克隆至pMD 18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定后,亚克隆至pCOLD ... 详细信息

目的克隆表达间日疟原虫谷氨酸脱氢酶.方法:根据推测的PvGDH编码基因设计特异性引物,采用PCR自构建的中国红内期间日疟原虫全长cDNA文库扩增PvGDH编码基因,将其克隆至pMD 18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定后,亚克隆至pCOLD Ⅱ载体进行表达.通过ELISA和Western-blot检测正常人血清、间日疟患者血清、恶性疟患者血清与rPvGDH的免疫反应性;以表达的rPvGDH免疫小鼠制备抗血清,通过ELISA检测抗血清与rPvGDH的免疫反应性;并以Western-blot检测抗血清与间日疟原虫抗原、恶性疟原虫抗原、正常红红细胞抗原的免疫反应性.

关键词：间日疟原虫谷氨酸脱氢酶克隆表达抗血清免疫反应性

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幽门螺杆菌感染者CD4^+ CD25^+调节性T细胞的检测及其相关性分析

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中国微生态学杂志 2011年第12期23卷 1094-1096页

作者：王雪梅杨清峰方强焦玉萌蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠市第三人民医院消化内科安徽蚌埠233000

目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染阳性的胃部疾病患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)的百分含量及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的水平,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在***感染中的免疫调节作用及意义。方法采用流式细胞术检测***感染的慢性浅表性胃炎、胃癌前病变和胃癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量、CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3的细胞比例;并采用ELISA方法检测***感染者血清中TGF-β1的含量,无***感染的患者作为阴性对照。结果 ***感染的患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的百分含量及TGF-β1的水平较不伴有***感染的患者显著升高(P<0.05);***感染的浅表性胃炎、胃癌前病变及胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量及CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3的细胞比例随病变严重程度的进展逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);***感染的患者血清中TGF-β1水平也随病变严重程度的进展逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ***感染可增加CD4+CD25+调节性T细胞的含量和TGF-β1的水平;随着病变严重程度的进展,CD4+CD25+调节性T细胞的含量和TGF-β1的水平逐渐升高,CD4+CD25+调节性T细胞百分含量和TGF-β1水平可作为临床判断病情进展的指标。

关键词：幽门螺杆菌胃部疾病 CD4+CD25+调节性T细胞转化生长因子-β1

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寄生虫病DNA疫苗研究进展

寄生虫病DNA疫苗研究进展

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第三届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者： Qi Wen-juan 齐文娟 Fang Qiang 方强 Department of Immunology Bengbu Medical College Bengbu 233030 China Anhui Key Laboratory of Infe 蚌埠医学院免疫学教研室(蚌埠233030) 安徽省感染与免疫重点实验室 Department of Microbiology and Parasitology Bengbu Medical College China Anhui Key Laboratory of I 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

寄生虫病防治策略之一是研制安全有效的疫苗,DNA疫苗是近10多年发展起来的新型疫苗。近年来寄生虫病DNA疫苗研究取得了很大进展。本文就DNA疫苗的免疫机理、构建与优化、佐剂、递送途径,以及疟疾、血吸虫病、囊尾蚴病、弓形虫病等重要... 详细信息

寄生虫病防治策略之一是研制安全有效的疫苗,DNA疫苗是近10多年发展起来的新型疫苗。近年来寄生虫病DNA疫苗研究取得了很大进展。本文就DNA疫苗的免疫机理、构建与优化、佐剂、递送途径,以及疟疾、血吸虫病、囊尾蚴病、弓形虫病等重要寄生虫病DNA疫苗的研究进展作一综述。

关键词：寄生虫病基因疫苗免疫佐剂递送途径

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ERK1/2信号途径与弓形虫侵入细胞及胞内增殖关系的研究

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中国病原生物学杂志 2011年第3期6卷 204-206,212,F0002页

作者：杨小迪陈兴智王媛媛常雪莲徐军程启媛胡守锋孙新蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 淮南市第一人民医院检验科浙江省立同德医院检验科

目的探讨阻断细胞外蛋白调节激酶(ERK1/2)信号途径对弓形虫速殖子侵入宿主细胞及在胞内增殖的影响。方法姬氏染色法检测ERK1/2途径不同时间及不同剂量的抑制剂U0126或PD98059作用下宿主细胞感染弓形虫速殖子的百分率,根据细胞感染率和... 详细信息

目的探讨阻断细胞外蛋白调节激酶(ERK1/2)信号途径对弓形虫速殖子侵入宿主细胞及在胞内增殖的影响。方法姬氏染色法检测ERK1/2途径不同时间及不同剂量的抑制剂U0126或PD98059作用下宿主细胞感染弓形虫速殖子的百分率,根据细胞感染率和感染细胞内虫荷量分析ERK1/2途径抑制剂对速殖子在细胞中增殖的影响。结果速殖子在细胞培养系统中以1、10和100μmol/L U0126或PD98059作用3 h、6 h和9 h后,前者细胞培养孔中的细胞感染率分别较对照组平均下降34.62%(P<0.01)、53.55%(P<0.01)和67.76%(P<0.01),后者分别较对照组平均下降22.67%(P<0.01)、52.21%(P<0.01)和58.99%(P<0.01);感染细胞感染速殖子率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论阻断ERK1/2途径的不同信号位点对弓形虫速殖子侵入宿主细胞影响不同,ERK1/2途径在速殖子侵入宿主细胞起主要作用,但对侵入后的增殖无明显影响。

关键词：刚地弓形虫速殖子 ERK1/2信号通路 NIH3T3细胞 U0126 PD98059

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幽门螺杆菌L型感染对胃癌BGC-823细胞增殖的影响

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现代肿瘤医学 2011年第2期19卷 229-234页

作者：吴海波于东红唐素兰承泽农安徽医科大学附属省立医院病理科安徽合肥230001 蚌埠医学院第一附属医院病理科安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233004 蚌埠医学院微生物学教研室安徽蚌埠233030

目的:研究幽门螺杆菌L型(helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染对胃癌BGC-823细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:将胃癌BGC-823细胞与Hp-L型以不同比例(1:20、1:100、1:500)共培养,以不加Hp-L型为对照组,在不同时段进行以下实验... 详细信息

目的:研究幽门螺杆菌L型(helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染对胃癌BGC-823细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:将胃癌BGC-823细胞与Hp-L型以不同比例(1:20、1:100、1:500)共培养,以不加Hp-L型为对照组,在不同时段进行以下实验:倒置显微镜观察细胞形态学变化;四甲基噻唑氮蓝(MTT)法检测细胞生长增殖率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;免疫组化(SP法)检测癌基因(skp2)、抑癌基因(p53)和核增殖指数(Ki-67)的表达情况。结果:Hp-L型作用BGC-823细胞后,倒置显微镜观察到细胞分裂增多,增殖旺盛,瘤巨细胞增多,出现明显的生长加速现象;MTT法测定细胞生长曲线显示,Hp-L型对胃癌BGC-823细胞增殖有促进作用;FCM检测可见,Hp-L型影响胃癌BGC-823细胞周期的分布,使G0/G1期比例降低,S期比例升高;免疫组化可见细胞中Skp2、p53和Ki-67蛋白表达阳性率逐渐增加;以上作用均呈细菌浓度和作用时间依赖性。结论:Hp-L型可促进胃癌BGC-823细胞增殖,其机制与上调Skp2、p53和Ki-67蛋白的表达有关。

关键词：幽门螺杆菌 L型 Skp2 Ki-67 p53 胃癌BGC-823细胞

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S期激酶相关蛋白2在幽门螺杆菌L型致胃癌中的作用

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癌变．畸变．突变 2011年第4期23卷 255-259页

目的:研究S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)在幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染致胃癌中所起的作用。方法:将胃癌BGC-823细胞与Hp-L型以不同比例共培养,在倒置显微镜下观察细胞形态学... 详细信息

目的:研究S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)在幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染致胃癌中所起的作用。方法:将胃癌BGC-823细胞与Hp-L型以不同比例共培养,在倒置显微镜下观察细胞形态学变化,并应用原位杂交和免疫组化分别检测Skp2 mRNA和蛋白在胃癌BGC-823细胞中的表达情况。同时收集慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃肠腺化生(GIM)、胃不典型增生(GED)、胃癌(GCa)标本各40例,以40例轻度慢性浅表性胃炎(CSG)作为对照。应用革兰染色和免疫组化检测Hp-L型在上述组织中的感染情况;并进一步检测Hp-L型阳性组织中Skp2 mRNA和蛋白的表达情况。结果:Hp-L型作用BGC-823细胞后,倒置显微镜观察到细胞分裂增多,出现明显的生长加速现象;原位杂交和免疫组化检测发现BGC-823细胞中Skp2 mRNA和蛋白表达阳性率随细菌浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增加(P<0.05)。Hp-L型阳性组织中的Skp2mRNA和蛋白的表达阳性率按CAG、GIM、GED、GCa的顺序逐渐增加,但仅GCa组与CSG组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Skp2在Hp-L型感染的胃癌前病变及胃癌中均明显升高,提示其在胃癌的发生及发展中起着重要作用。

关键词：幽门螺杆菌 L型 S期激酶相关蛋白2 胃癌

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金黄色葡萄球菌α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制的研究

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中国人兽共患病学报 2010年第6期26卷 569-571页

作者：刘婷婷刘从森管俊昌闵宏林李凤云夏佩莹蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233000

目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制。方法将不同浓度金葡菌α溶血素感染脐静脉内皮细胞8h后,检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,同时检测加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后的细胞... 详细信息

目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制。方法将不同浓度金葡菌α溶血素感染脐静脉内皮细胞8h后,检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,同时检测加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后的细胞凋亡率。结果金葡菌α溶血素感染脐静脉内皮细胞8h后,TNF-α、caspase-3、caspase-8的产生量与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);而加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后凋亡率明显降低(P<0.01)。结论金葡菌α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡的机制可能是通过TNF-α介导的caspase-8及caspase-3激活的外源性死亡因子受体途径,这为我们进一步研究金葡菌L型垂直感染与治疗提供了新的思路。

关键词：金黄色葡萄球菌 α溶血素脐静脉内皮细胞凋亡机制

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结核分枝杆菌P19对巨噬细胞功能及表型影响的研究

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中国人兽共患病学报 2010年第3期26卷 197-200页

作者：韦莉金齐力刘勇夏佩莹蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

目的探讨结核分枝杆菌19kD脂蛋白(MtbP19)对单核巨噬细胞功能及表型的影响。方法以10μg/mLMtbP19作用于拂波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞,CO2孵箱孵育,酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同时间巨噬细胞TNF-α和IL-6的分泌水平;对巨噬细胞表型分... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌19kD脂蛋白(MtbP19)对单核巨噬细胞功能及表型的影响。方法以10μg/mLMtbP19作用于拂波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞,CO2孵箱孵育,酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同时间巨噬细胞TNF-α和IL-6的分泌水平;对巨噬细胞表型分子HLA-DR进行荧光抗体染色,流式细胞术分析P19对巨噬细胞表型的影响;流式细胞术及光学显微镜研究MtbP19对巨噬细胞吞噬活性的影响。结果P19能够诱导巨噬细胞TNF-α和IL-6分泌水平的增加,呈时间依赖关系;经P19刺激的巨噬细胞HLA-DR表达增强,平均荧光强度(MFI)为(54.3±3.4)%,与BSA对照组(34.3±3.6)%比较P<0.05;P19能增强巨噬细胞的吞噬活性。结论MtbP19能诱导巨噬细胞活化,在感染过程中可能具有一定的抗结核保护作用。

关键词：结核分枝杆菌P19 THP-1细胞细胞因子表型分子吞噬

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猪囊尾蚴期特异性抗原cC1的克隆与高效可溶性原核表达

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南方医科大学学报 2010年第2期30卷 206-209页

作者：方强骆江坤崔琢齐文娟胡元生沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院安蚌埠233004 安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌*** BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表... 详细信息

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌*** BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表达条件,表达的融合蛋白Ni+-亲和层析柱纯化后经快速液相蛋白层析分离系统检测其纯度。采用SDS-PAGE和Western-blotting对目的蛋白进行分析和鉴定。结果RT-PCR扩增出的片段长度为1056bp,构建的重组表达质粒经PCR、酶切验证,和预期的结果一致,测序鉴定与Genbank中cC1基因相比于423位存在1个同义突变。转化有重组质粒的E. coli BL21(DE3)经过0.05mmol/LIPTG 37℃诱导6h高效表达了占菌体蛋白总量60%的可为囊虫病患者血清识别的相对分子质量约为40000的可溶性融合蛋白,经Ni+-亲和层析柱纯化后纯度达94%。结论成功克隆并高效可溶性原核表达了猪囊尾蚴期特异性抗原cC1,为其进一步研究和应用奠定了基础。

关键词：猪囊尾蚴,抗原cC1 克隆原核表达条件优化

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