检索结果-内蒙古大学图书馆

猪囊尾蚴病重组DNA疫苗pcDNA3.1-TSO45-4B在小鼠体内的表达及诱导的细胞免疫效应

中国病原生物学杂志 2007年第4期2卷 262-265页

作者：王媛媛孙新方强胡守锋杨小迪张莺莺陈兴智王雪梅夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的观察基于六钩蚴期的猪囊尾蚴病基因疫苗pcDNA3.1-TSO45-4B在小鼠体内的表达及诱导的小鼠细胞免疫应答。方法将真核重组表达质粒pcDNA3.1-TSO45-4B肌注小鼠,RT-PCR方法扩增出目的条带;ELISA方法检测小鼠血清细胞因子IL-2、IL-4及IFN... 详细信息

目的观察基于六钩蚴期的猪囊尾蚴病基因疫苗pcDNA3.1-TSO45-4B在小鼠体内的表达及诱导的小鼠细胞免疫应答。方法将真核重组表达质粒pcDNA3.1-TSO45-4B肌注小鼠,RT-PCR方法扩增出目的条带;ELISA方法检测小鼠血清细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ含量。结果RT-PCR产物为单一条带,大小为456bp,与TSO45-4B大小一致。免疫小鼠第2周细胞因子含量达到较高水平,第4周达到最高水平,第8周开始下降。结论基于猪囊尾蚴保护性抗原TSO45-4B的DNA疫苗能在小鼠体内表达并有效诱导细胞免疫效应。

关键词：猪囊尾蚴 pcDNA 3 1-TSO45—4B 疫苗 RT—PCR 细胞免疫

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革兰阴性菌L型与其原菌内毒素含量比较

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蚌埠医学院学报 2007年第2期32卷 130-131页

作者：陈登宇刘勇冯锡才夏佩莹蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:探讨革兰阴性菌L型和原菌内毒素含量差异。方法:采用定性和定量鲎试验,分别检测稳定的大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型及其原菌内毒素含量。结果:大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型内毒素定性鲎试验检测阳性,定量鲎试验检测出大肠埃希菌和... 详细信息

目的:探讨革兰阴性菌L型和原菌内毒素含量差异。方法:采用定性和定量鲎试验,分别检测稳定的大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型及其原菌内毒素含量。结果:大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型内毒素定性鲎试验检测阳性,定量鲎试验检测出大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型内毒素含量分别为原菌内毒素含量的25.1%和36.4%。结论:革兰阴性菌L型仍能产生内毒素,但其含量较原菌明显减少,是其致病力减弱的原因之一。

关键词：革兰阴性菌细菌L型内毒素

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痢疾杆菌致病的分子机制

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蚌埠医学院学报 2007年第4期32卷 496-497页

作者：管俊昌李凤云蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

志贺菌属细菌通称痢疾杆菌,是一类具有高度传染性和危害严重的革兰阴性肠道致病菌,临床感染可导致细菌性痢疾(菌痢)。菌痢是世界上,尤其是发展中国家重要的传染病之一,全球每年的病例超过1.6亿,并导致100万患者死亡,其中绝大多数为5岁... 详细信息

志贺菌属细菌通称痢疾杆菌,是一类具有高度传染性和危害严重的革兰阴性肠道致病菌,临床感染可导致细菌性痢疾(菌痢)。菌痢是世界上,尤其是发展中国家重要的传染病之一,全球每年的病例超过1.6亿,并导致100万患者死亡,其中绝大多数为5岁以下的儿童。目前,关于菌痢的确切发病机制尚未明确,国外学者研究认为,痢疾杆菌的感染可能包括以下过程:(1)痢疾杆菌通过微皱褶细胞进入结肠黏膜;[第一段]

关键词：痢疾杆菌性分子生物学综述

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GST-颗粒溶解素融合蛋白的纯化及其抗菌活性分析

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蚌埠医学院学报 2007年第3期32卷 265-267页

作者：闵宏林沈继龙陈勇李柏青安徽医科大学病原生物学教研室蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院) 安徽蚌埠233030

目的:纯化大肠埃希菌表达的GST-颗粒溶解素融合蛋白,并分析其体外抗菌活性。方法:将IPTG诱导处理后的细菌破碎,分离含有可溶性GST-颗粒溶解素融合蛋白的细菌裂解液,并通过GSH-琼脂糖珠亲和层析柱纯化。同时采用MTT法分析该纯化蛋白的抗... 详细信息

目的:纯化大肠埃希菌表达的GST-颗粒溶解素融合蛋白,并分析其体外抗菌活性。方法:将IPTG诱导处理后的细菌破碎,分离含有可溶性GST-颗粒溶解素融合蛋白的细菌裂解液,并通过GSH-琼脂糖珠亲和层析柱纯化。同时采用MTT法分析该纯化蛋白的抗菌活性。结果:GST-颗粒溶解素融合蛋白能以可溶性形式在大肠埃希菌中表达,采用亲和层析法可获得分子量为44kDa的单一蛋白条带。经抗菌活性分析,表明纯化产物对金黄色葡萄球菌和甲型溶血性链球菌具有显著抑制作用,而对伤寒沙门菌和大肠埃希菌BL21的抗菌活性不明显。结论:成功纯化GST-颗粒溶解素融合蛋白,该蛋白对革兰阳性菌具有高效抗菌活性。

关键词：大肠埃希菌颗粒溶解素融合表达纯化抗菌作用

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日本血吸虫信号蛋白14-3-3在毕赤酵母菌中的分泌表达及其抗原性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第1期25卷 12-16页

作者：郑美娟李敏王志成罗飞罗庆礼储德勇李丛磊沈继龙蚌埠医学院生物化学与分子生物学实验室蚌埠233003 安徽医科大学病原生物学教研室教育部与安徽省共建重要遗传病基因资源利用重点实验室(安徽医科大学) 合肥230032

目的在毕赤酵母菌(Pichia pastoris)表达系统中表达日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3),并与原核表达rSj14-3-3比较其抗原性。方法以重组质粒pET28a-rSj14-3-3为模板,PCR扩增Sj14-3-3基因,将特异片段连接到pMD18-T载体,DNA序列分析后,... 详细信息

目的在毕赤酵母菌(Pichia pastoris)表达系统中表达日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3),并与原核表达rSj14-3-3比较其抗原性。方法以重组质粒pET28a-rSj14-3-3为模板,PCR扩增Sj14-3-3基因,将特异片段连接到pMD18-T载体,DNA序列分析后,亚克隆目的片段Sj14-3-3至酵母菌分泌表达载体pPICZαB。测序正确后,重组质粒经电转化转染至毕赤酵母菌X-33菌株,经抗生素Zeocin筛选得到高拷贝转化子。经甲醇诱导表达,取诱导上清进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)分析。用间接ELISA法比较毕赤酵母菌表达的rSj14-3-3和原核表达rSj14-3-3检测血吸虫病患者血清抗体的特异性和敏感性。结果目的基因已在酵母菌基因组中得到整合,PCR扩增得到约1 300 bp的片段。经甲醇诱导,Sj14-3-3表达并分泌到培养上清中。表达产物经SDS-PAGE测定为Mr 35 000。Western blotting结果显示,Mr 35 000蛋白可被Sj14-3-3单克隆抗体识别,表明该真核表达产物具有免疫反应性。间接ELISA检测结果表明,该重组蛋白检测36份急性血吸虫病患者血清rSj14-3-3抗体,阳性率为81%。与12份华支睪吸虫感染者血清未见交叉反应,32份健康人血清假阳性反应率为9.3%。以原核表达的rSj14-3-3为抗原,间接ELISA检测,36份急性血吸虫病患者血清的rSj14-3-3,抗体阳性率为88.9%;与12份华支睪吸虫感染者的交叉反应率为16.7%,32份健康人血清假阳性反应率为12.5%,其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在毕赤酵母菌中成功表达了Sj14-3-3,培养上清中产物丰度较高,且免疫反应性良好。

关键词：日本血吸虫信号蛋白14-3-3 毕赤酵母菌真核表达

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以GoldView和EB检测PCR产物敏感性的观察

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中国实验诊断学 2007年第3期11卷 416-417页

作者：张莺莺孙新吴俊英蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030

聚合酶链反应(PCR)是公认的一种简便、准确的核酸检测技术,它的检测依赖于显示DNA的染色方法。荧光测定法是测定DNA浓度最敏感的分子技术之一。作者对琼脂糖凝胶电泳GoldView染色及EB染色检测人4—1BBL(M-1BBL)的效果进行了比较研究,旨... 详细信息

聚合酶链反应(PCR)是公认的一种简便、准确的核酸检测技术,它的检测依赖于显示DNA的染色方法。荧光测定法是测定DNA浓度最敏感的分子技术之一。作者对琼脂糖凝胶电泳GoldView染色及EB染色检测人4—1BBL(M-1BBL)的效果进行了比较研究,旨在寻求一种敏感、安全、便捷的PCR产物检测方法。[第一段]

关键词：核酸检测技术 PCR产物 EB 敏感性琼脂糖凝胶电泳 DNA浓度荧光测定法聚合酶链反应

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解脲脲原体垂直感染对新生小鼠出生体重的影响

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蚌埠医学院学报 2007年第1期32卷 4-6,F0004页

作者：吕杰李凤云唐素兰蚌埠医学院微生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:建立妊娠期解脲脲原体(ureap lasm a urealyticum,UU)生殖道感染的实验小鼠模型,观察其对新生仔鼠出生体重的影响。方法:血清4型UU标准株生殖道感染妊娠期孕鼠,观察对新生仔鼠体重的影响,并通过UU病原学分离培养、病理学及免疫组... 详细信息

目的:建立妊娠期解脲脲原体(ureap lasm a urealyticum,UU)生殖道感染的实验小鼠模型,观察其对新生仔鼠出生体重的影响。方法:血清4型UU标准株生殖道感染妊娠期孕鼠,观察对新生仔鼠体重的影响,并通过UU病原学分离培养、病理学及免疫组化等方法探讨其可能机制。结果:UU感染的新生仔鼠体重平均为1.518 g,对照组新生仔鼠体重平均为1.924 g,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:妊娠期UU感染可通过垂直传播方式影响子代发育,导致出生低体重。

关键词：解脲脲原体妊娠并发症体重感染小鼠

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前列腺癌患者调节性T细胞的表达及意义

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中国基层医药 2007年第9期14卷 1462-1464,1586页

作者：杨梅张莺莺潘兴花安徽省红十字朝阳医院临床检测中心安徽省淮南232007 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

目的探讨CD4^+CD25^(high)调节性T细胞在前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中的存在及其意义。方法检测45例前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的表达,并进一步检测CD4^+CD25^(high)调节性T细胞胞内FoxP3的表达。... 详细信息

目的探讨CD4^+CD25^(high)调节性T细胞在前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中的存在及其意义。方法检测45例前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的表达,并进一步检测CD4^+CD25^(high)调节性T细胞胞内FoxP3的表达。同时检测肿瘤来源的CD4^+CD25^(high)调节性T细胞在体外的抑制功能。结果前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中存在大量CD4^+ CD25^(high)调节性T细胞,正常供者外周血中CD4^+ CD25^(high)T细胞的比例仅为(0.5±0.1)%,患者外周血为(2.3±0.7)%,两者比较,P<0.01;患者良性组织CD4^+ CD25^(high)T细胞的比例也显著低于恶性肿瘤组织[分别为(6.9±0.8)%和(11.3±1.3)%,P<0.05]。结论CD4^+CD25^(high)调节性T细胞可能有助于肿瘤的生长,提示抑制或清除CD4^+CD25^(high)调节性T细胞可能为前列腺癌的治疗提供新的途径。

关键词：前列腺肿瘤 T淋巴细胞肿瘤生长外周血

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结核杆菌抗原诱导的人γδT细胞表达L-选择素的调控机制

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现代免疫学 2006年第5期26卷 413-417页

作者：武文娟李柏青蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院)

采用CD62L生物素-链霉亲和素染色流式细胞术检测L-选择素在细胞表面表达的方法，分别观察新鲜PBMC和刺激后培养3～21d的γδT细胞表面L-选择素的表达，并研究培养6～7d的MtbAT预先用LY294002（PI3K途径抑制剂）、SB203580（p38途径抑制... 详细信息

采用CD62L生物素-链霉亲和素染色流式细胞术检测L-选择素在细胞表面表达的方法，分别观察新鲜PBMC和刺激后培养3～21d的γδT细胞表面L-选择素的表达，并研究培养6～7d的MtbAT预先用LY294002（PI3K途径抑制剂）、SB203580（p38途径抑制剂）、PD98059（MEK抑制剂）分别处理20min，然后用Mtb-Ag再刺激3h时γδT细胞表面L-选择素的表达情况。结果显示新鲜PBMC中γδT细胞L-选择素的表达率为（43．9％±6．7％），γδT细胞L-选择素的表达率为（76．6％±7．9％），有显著差异（P〈0．05）。用Mtb-Ag激活后培养第6天时L-选择素在γδT细胞的表达达到高峰（90．7％）；以后L-选择素表达逐渐下降，15～21dγδT细胞L-选择素的表达在低水平（16．2％～10．6％）维持；Mtb—Ag再刺激MtbAT诱导γδT细胞L-选择素表达下调为69．5％，预先加入LY294002或PD98059，则L-选择素表达率分别为83．1％和78．7％；而加入SB203580未见明显影响。提示γδT细胞活化时L-选择素表达调控与PI3K、Ras／Erk途径有关，但与p38MAPK途径无关。

关键词： L-选择素 γδT细胞结核杆菌抗原信号转导

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丝裂原蛋白激酶抑制剂U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响

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热带病与寄生虫学 2006年第1期4卷 5-7+30页

作者：杨小迪陈兴智孙新夏惠方强胡守锋徐胜贵王媛媛蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室

目的观察丝裂原蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinases,MAPK)抑制剂对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响。方法以丝裂原蛋白激酶抑制剂U0126分别以不同浓度加入分孔培养的细胞中,于不同时间分别用吉氏染色和流式细胞仪(FCM)检测其宿主细... 详细信息

目的观察丝裂原蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinases,MAPK)抑制剂对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响。方法以丝裂原蛋白激酶抑制剂U0126分别以不同浓度加入分孔培养的细胞中,于不同时间分别用吉氏染色和流式细胞仪(FCM)检测其宿主细胞感染速殖子的差异。结果吉氏染色检测在以U01261μM,10μM和100μM作用3小时下其感染率分别比对照组下降了20.22%(,P<0.01),52.91%(P<0.01)和75.27%(P<0.01);在作用6小时及9小时其感染率分别比对照组下降了32.88%(P<0.01),57.24%(P<0.01),79.21%(P<0.01)和41.26%(P<0.01),54.73%(P<0.01),80.80%(P<0.01)。FCM检测结果与之相似。结论U0126通过作用于MAPK信号传导途径而明显抑制弓形虫速殖子侵入宿主细胞。

关键词：弓形虫速殖子 MAP激酶抑制剂

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