检索结果-内蒙古大学图书馆

中国血吸虫病防治杂志 2016年第1期28卷 34-38页

作者：苏胖胖孟令文李江艳陶志勇陈勇乔继琛武肖肖金赟王好鹏方强王雪梅夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

目的克隆恶性疟原虫配子体期特异性基因(Plasmodium falciparum gametocyte development 1 gene,Pfgdv1),体外表达和鉴定重组Pfgdv1蛋白。方法通过PCR法从恶性疟原虫感染病人血液DNA样本中扩增Pfgdv1基因,插入到原核表达载体p ET28a(+)... 详细信息

目的克隆恶性疟原虫配子体期特异性基因(Plasmodium falciparum gametocyte development 1 gene,Pfgdv1),体外表达和鉴定重组Pfgdv1蛋白。方法通过PCR法从恶性疟原虫感染病人血液DNA样本中扩增Pfgdv1基因,插入到原核表达载体p ET28a(+),构建p ET28a-Pfgdv1重组表达质粒,转化至大肠埃希菌(***)BL21(DE3+),通过异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导表达重组蛋白,经Ni+-亲和层析柱纯化重组蛋白,纯化产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting鉴定。结果 PCR扩增的Pfgdv1基因长度约为1.65 kb,重组p ET28a-Pfgdv1质粒构建成功,插入方向正确无框移,转化至*** BL21(DE3+)所表达的重组蛋白分子量约为67 k Da,且能被抗His标签单克隆抗体识别。结论成功克隆了Pfgdv1基因,表达并纯化了重组Pfgdv1蛋白,为进一步研究恶性疟原虫配子体期传播阻断疫苗奠定了基础。

关键词：恶性疟原虫 Pfgdv1 配子体传播阻断疫苗原核表达

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旋毛虫及其衍生产物调节过敏性及自身免疫性疾病的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第4期34卷 382-386页

作者：丁忆晗王小莉宋迪吴琦杨小迪蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

旋毛虫(Trichinella spiralis)及其衍生抗原可通过诱导树突状细胞(DC)的半成熟来刺激T细胞的活化,从而调节Th1/Th2型细胞的免疫应答,以缓解或抑制过敏性疾病/自身免疫性疾病。在此免疫调节过程中,调节性T细胞(Treg)及抑炎细胞因子的释... 详细信息

旋毛虫(Trichinella spiralis)及其衍生抗原可通过诱导树突状细胞(DC)的半成熟来刺激T细胞的活化,从而调节Th1/Th2型细胞的免疫应答,以缓解或抑制过敏性疾病/自身免疫性疾病。在此免疫调节过程中,调节性T细胞(Treg)及抑炎细胞因子的释放发挥着重要作用。本文综述了旋毛虫及其衍生产物在各种免疫失调性疾病中的调节作用及其机制。

关键词：旋毛虫调节过敏性疾病自身免疫性疾病

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10-23型脱氧核酶对HBV S、C基因体外切割作用研究

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蚌埠医学院学报 2017年第12期42卷 1573-1575页

作者：江京娣张晓洁张爱霞位春芳徐茹葛建顺钱中清吕静竹蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠医学院免疫学教研室蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030

目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23 DRz)对HBV S基因及C基因体外转录产物的特异性切割作用。方法:分别构建含有HBV S基因或C基因的重组质粒,以线性化的重组质粒为模板,体外转录获得相应HBV S基因RNA及C基因RNA。设计并合成针对HBV S基因的DR... 详细信息

目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23 DRz)对HBV S基因及C基因体外转录产物的特异性切割作用。方法:分别构建含有HBV S基因或C基因的重组质粒,以线性化的重组质粒为模板,体外转录获得相应HBV S基因RNA及C基因RNA。设计并合成针对HBV S基因的DRz-hbvs-1和针对C基因的DRz-hbvc-1,观察其对靶RNA的体外切割作用。结果:DRz-hbvs-1及DRz-hbvc-1能对各自相应的靶RNA进行有效的特异性切割;无DRz对照组及反义寡核苷酸对照组均未见特异性切割。结论:10-23 DRz能特异性切割HBV S基因及C基因体外转录产物。

关键词：乙型肝炎病毒脱氧核酶基因治疗

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安徽省中北部淡色库蚊对多种杀虫剂抗性及其kdr基因突变研究

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中国血吸虫病防治杂志 2016年第4期28卷 406-410页

作者：魏星杨小迪王小莉李江艳王媛媛夏惠常雪莲方强蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院公共课程部

目的了解安徽省中北部地区淡色库蚊对多种杀虫剂的抗药性现状及其kdr基因突变情况。方法 2014年6-9月在淮北市、蚌埠市和滁州市3地采集淡色库蚊幼虫,带回实验室饲养至成虫,采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触法对其进行0.05%溴氰菊酯、5%马... 详细信息

目的了解安徽省中北部地区淡色库蚊对多种杀虫剂的抗药性现状及其kdr基因突变情况。方法 2014年6-9月在淮北市、蚌埠市和滁州市3地采集淡色库蚊幼虫,带回实验室饲养至成虫,采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触法对其进行0.05%溴氰菊酯、5%马拉硫磷、0.1%噁虫威、4%DDT抗性生物测定。以PCR扩增经溴氰菊酯抗性测定的库蚊抗性相关kdr基因并进行测序,统计L1014位点突变情况。结果上述3个地区淡色库蚊对溴氰菊酯、马拉硫磷、噁虫威、DDT 4种杀虫剂都产生了不同程度的抗药性,对DDT产生的抗性较高;虽然3地淡色库蚊接触DDT后的死亡率差异无统计学意义(F=1.027,P>0.05);但接触溴氰菊酯、马拉硫磷、噁虫威后的死亡率差异均有统计学意义(F=23.823、33.955、128.841,P均<0.01)。3地淡色库蚊种群的kdr基因1014位点均存在L1014F、L1014S这2种非同义突变;L1014F突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关(r2=0.718,P<0.01)。结论安徽省中北部地区淡色库蚊对溴氰菊酯、马拉硫磷、噁虫威、DDT均产生了较强的抗性,kdr基因L1014F突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关;各地区卫生部门需加强对媒介蚊虫抗性的动态监测。

关键词：淡色库蚊杀虫剂抗药性溴氰菊酯马拉硫磷噁虫威 kdr基因突变安徽省

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人外周γδ T细胞不同亚群在活动性结核病患者的变化

人外周γδ T细胞不同亚群在活动性结核病患者的变化

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第十二届全国免疫学学术大会

作者：李柏青唐洁梁友宝陈立陈策梁华刘震天钱中清夏惠蚌埠医学院免疫学教研室和免疫学实验中心感染与免疫安徽省重点实验室(蚌埠医学院) 蚌埠医学院科研中心仪器中心蚌埠医学院病原生物学教研室

研究背景:已知人γδ T细胞在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染的免疫中承担重要作用。人γδT细胞可分为δ1至Vδ8八个亚群,以Vδ2亚群为主。根据细胞因子产生分为Tγδ1,Tγδ17细胞等亚群。但不同γδT细胞亚群在活动性肺结核病(TB)患者中有... 详细信息

研究背景:已知人γδ T细胞在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染的免疫中承担重要作用。人γδT细胞可分为δ1至Vδ8八个亚群,以Vδ2亚群为主。根据细胞因子产生分为Tγδ1,Tγδ17细胞等亚群。但不同γδT细胞亚群在活动性肺结核病(TB)患者中有何变化尚未明了。研究目的:观察活动性TB患者外周不同γδT细胞(Tγδ1,研δ17等)亚群数量与健康人的差异,以及对Mtb耐热抗原(MtbHAg)刺激后细胞因子产生的变化,以探讨不同γδT细胞亚群在抗Mtb感染的免疫作用及其机制。方法:收集45例活动性肺TB患者和40例健康成人外周静脉血,用流式细胞术测定Tγδ9、Tγδ17和Tγδ22 T细胞的数量在γδT细胞中比例;或分离PBMC用MtbHAg或抗TCRγδ+抗CD28单抗刺激,用流式细胞术或ELISOPT测定产生IFN-γ,TNF-α和IL-17细胞的比例。部分PBMC测定γδT细胞中不同类型记忆性细胞(Tcm和Tern)的比例。结果:流式细胞术检测结果显示,活动性TB患者外周血γδT细胞中产生IL-9的Tγδ9细胞比例(2.9%)显著高于健康人组(1.1%);产生IL-17的Tγδ17细胞(5.0～10.9%)显著高于健康组(4.0～7.2%),Tγδ17细胞主要分布在Vδ3-8亚群中,并在TB患者中显著增加。活动性TB患者外周μδT细胞中产生IL-22的Tγδ22细胞比例(7.37%)显著高于健康人组(1.81%)。活动性TB结核患者Vδ1和Vδ2细胞中Tcm细胞比例降低,Tem细胞比例升高;Tcm细胞比例降低;Vδ3-8 T细胞中Tem细胞比例升高。免疫磁珠分选纯化γδT细胞后用MtbHAg刺激不能,而用抗TCRγδ+抗CD26单抗刺激后,能在极化培养后诱导出产生IL-17的Tγδ17细胞,进一步证实Tγδ17细胞以Vδ3-8的亚群为主,能激活Vδ2亚群增殖的MtbHAg不能诱导γδT细胞产生IL-17。流式细胞术和ELISPOT方法检测显示,用MtbHAG或磷酸类抗原刺激活动性TB患者PBMC后,γδT细胞中产生IFN-γ和TNF-α的Tγδ1细胞数量和比例明显低于健康人对照组。结论:TB患者外周γδT细胞中,承担保护免疫的Tγδ1细胞(IFN-γ和INF-α)受损,炎症类γδT细胞亚群(Tγδ9,Tγδ17和Tγδ22)增加,提示这些变化与TB的发病机制密切相关。

关键词：结核分枝杆菌结核病抗原 γδ T细胞细胞因子

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约氏疟原虫感染对小鼠黑色素瘤的抑制作用

约氏疟原虫感染对小鼠黑色素瘤的抑制作用

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第九届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者：乔继琛张慧焦玉萌杨玉婷董家军王争争李江艳孟令文杨小迪陶志勇夏惠方强 233030 蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院临床医学2系蚌埠医学院临床医学1系

目的观察约氏疟原虫17XL虫株感染对小鼠黑色素瘤的抑制作用.方法取C57 BL/6小鼠20只,腋下注射传代培养的B16F10黑色素瘤细胞;次日,将小鼠随机分为约氏疟原虫(P.y)感染组和对照组2组,10只/组;P.y感染组小鼠每只腹腔注射1 × 106含... 详细信息

目的观察约氏疟原虫17XL虫株感染对小鼠黑色素瘤的抑制作用.方法取C57 BL/6小鼠20只,腋下注射传代培养的B16F10黑色素瘤细胞;次日,将小鼠随机分为约氏疟原虫(P.y)感染组和对照组2组,10只/组;P.y感染组小鼠每只腹腔注射1 × 106含虫红细胞率为20%的小鼠红细胞;对照组小鼠腹腔注射等量的C57 BL/6小鼠正常红细胞.观察小鼠黑色素瘤出瘤时间并测量肿瘤的体积.结果 P.y感染组小鼠黑色素瘤出瘤时间为注射黑色素瘤细胞后[(11.3±0.21)天],晚于对照组[(10.4±0.22)天](P＜0.05);自可精确测量瘤体起至实验终点,2组小鼠肿瘤均不断增长,P.y感染组瘤体体积均显著小于对照组(均P＜0.05);P.y感染组瘤体生长速度为[(71.10±6.292)mm3/d],明显慢于对照组[(302.8± 49.94)mm3/d](P＜0.05),且P.y感染组肿瘤每日生长速度明显均小于对照组(均P＜0.05).结论约氏疟原虫感染可以延缓肿瘤出瘤时间且对小鼠黑色素瘤瘤体的增长具有明显的抑制作用.

关键词：约氏疟原虫黑色素瘤抑瘤作用

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多模式教学法提升病原生物学青年教师教学能力的实践

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中国病原生物学杂志 2016年第9期11卷 I0004-I0004,F0003页

作者：杨小迪王媛媛陈兴智王小莉常雪莲李楠夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

教学质量是学校的立校之本,而青年教师的教学能力是保证教学质量及学校发展的前提。本文通过探索多种教学模式如案例式教学、PBL教学和微课教学相结合的方法,以期相应的提升病原生物学青年教师的教学能力,从而提高课堂教学效果,亦为基... 详细信息

教学质量是学校的立校之本,而青年教师的教学能力是保证教学质量及学校发展的前提。本文通过探索多种教学模式如案例式教学、PBL教学和微课教学相结合的方法,以期相应的提升病原生物学青年教师的教学能力,从而提高课堂教学效果,亦为基础医学的其他专业提供参考与借鉴。

关键词：病原生物学青年教师教学能力

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3种分枝杆菌耐热蛋白抗原对人γδT细胞的刺激活性研究

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中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 986-990页

作者：陈勇张涛刘勇管俊昌夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的研究3种分枝杆菌耐热蛋白抗原体外对人γδT细胞的刺激活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用人型结核分枝杆菌H37Ra耐热蛋白抗原(H37Ra-HAg)、牛型结核分枝杆菌BCG耐热蛋白抗原(BCG-HAg)和耻垢分枝杆菌耐热蛋白抗原... 详细信息

目的研究3种分枝杆菌耐热蛋白抗原体外对人γδT细胞的刺激活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用人型结核分枝杆菌H37Ra耐热蛋白抗原(H37Ra-HAg)、牛型结核分枝杆菌BCG耐热蛋白抗原(BCG-HAg)和耻垢分枝杆菌耐热蛋白抗原(MS-HAg)进行刺激并持续培养12d,采用流式细胞仪检测增殖细胞中γδT细胞数量及CD4+T细胞所占比例。结果 H37Ra-HAg刺激组扩增细胞中γδT细胞的比例和数量均显著高于BCGHAg、MS-HAg刺激组和IL-2对照组[((50.52±5.40)%v.s(7.31±3.15)%、(5.82±3.42)%、(5.56±2.68)%);(9.63±1.64)×106v.s(0.69±0.36)×106、(0.57±0.22)×106、(0.34±0.18)×106))]。BCG-HAg刺激组扩增细胞中CD4+T细胞的比例和数量均显著高于H37Ra-HAg刺激组和IL-2对照组[(73.56±7.12%、66.93±7.65)%v.s(23.18±6.29)%、(52.61±5.37)%;(4.75±0.86)×106、(3.28±0.59)×106 v.s(2.71±0.65)×106、(1.63±0.45)×106]。而BCG-HAg刺激组和MS-HAg刺激组扩增细胞中γδT细胞的比例和数量和IL-2对照组相比并无显著性差异。结论 H37Ra-HAg具有促进γδT细胞增殖活性,BCG-HAg和MS-HAg具有促进CD4+T细胞增殖活性,BCG-HAg和MS-HAg无刺激γδT细胞增殖活性。

关键词：结核分枝杆菌卡介苗耻垢分枝杆菌 γδT细胞增殖流式细胞术

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旋毛虫成虫排泄分泌蛋白抗CLP诱导的小鼠脓毒症的观察

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中国血吸虫病防治杂志 2016年第3期28卷 293-296,322页

作者：杨小迪贺文欣方强宋迪吴琦王小莉李楠齐琦万勇坤张慧周瑞陈兴智刘牧林李徽徽褚亮蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠23303 蚌埠医学院组织学与胚胎学教研室蚌埠医学院病理学教研室蚌埠医学院第一附属医院蚌埠医学院第二附属医院

目的探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白（AES）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法将48只BALB/c小鼠随机分为3组,即假手术对照组（PBS＋sham组,A组）、脓毒症组（PBS＋CLP组,B组）、AES蛋白治疗组（AES＋CLP组,C组）。... 详细信息

目的探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白（AES）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法将48只BALB/c小鼠随机分为3组,即假手术对照组（PBS＋sham组,A组）、脓毒症组（PBS＋CLP组,B组）、AES蛋白治疗组（AES＋CLP组,C组）。A组和B组于CLP术后经腹腔注射200μl PBS,C组术后经腹腔注射含25μg AES蛋白的等量PBS。每组随机抽取8只,建模后观察各组小鼠的一般情况及96 h生存率;每组其余8只小鼠于建模后12 h取肝、肺、肾,HE染色观察病理改变;以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10及TGF-β细胞因子水平的变化。结果 3组小鼠96 h生存率差异有统计学意义（χ^2=21.16,P〈0.05）;与A组（100%）相比,B组小鼠生存率（0）降低（P〈0.05）,且肺、肝及肾脏损伤明显加重;经AES治疗后,C组存活率（75%）明显增加（P〈0.05）,小鼠肺脏、肝脏及肾脏病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中的促炎因子TNF-α（F=27.11,P〈0.05）、IL-1β（F=18.75,P〈0.05）及IL-6（F=100.93,P〈0.05）水平差异均有统计学意义;B组小鼠的促炎因子水平均高于A组（P均〈0.05）;经AES治疗后,C组小鼠上述3种促炎因子水平较B组均显著下降（P均〈0.05）。3组小鼠血清中的调节性细胞因子IL-10（F=10.88,P〈0.05）及TGF-β（F=11.37,P〈0.05）水平差异亦有统计学意义;经AES治疗后,C组小鼠IL-10及TGF-β分泌水平较B组亦明显增加（P〈0.05）。结论旋毛虫AES对CLP诱导的BALB/c小鼠脓毒症有显著的缓解作用。

关键词：旋毛虫盲肠结扎穿孔术排泄分泌蛋白脓毒症小鼠促炎因子抑炎因子

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金丝桃素体外抗刚地弓形虫速殖子效果的观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第3期34卷 203-207页

作者：杨小迪孙希萌王旗崔洁计永胜薛洪宝胡守锋苏胖胖李江艳孟令文乔继琛丁忆晗宋迪吴琦方强陈兴智蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室北京100069 安徽医科大学病原生物学教研室、安徽省人兽共患病重点实验室合肥230032 蚌埠医学院化学教研室蚌埠233030

目的观察金丝桃素对体外培养的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果。方法将生理盐水(A组)和终浓度为5μg/ml(B组)、50μg/ml(C组)、500μg/ml(D组)的金丝桃素分别加入含弓形虫速殖子1×... 详细信息

目的观察金丝桃素对体外培养的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果。方法将生理盐水(A组)和终浓度为5μg/ml(B组)、50μg/ml(C组)、500μg/ml(D组)的金丝桃素分别加入含弓形虫速殖子1×106个/孔的24孔培养板中,于2、4、6 h后收集虫体,台盼蓝染色检测速殖子着色率,吉氏染色观察速殖子形态和结构变化,透射电镜观察速殖子超微结构的变化,流式细胞仪检测相同处理的携带黄色荧光蛋白的弓形虫的存活情况。结果弓形虫速殖子经不同浓度金丝桃素作用2 h后,B组、C组和D组虫体的台盼蓝着色率分别为(11.0±3.6)%、(25.0±6.3)%和(40.0±2.7)%,D组着色率高于C组和B组(P<0.01),3组均高于A组(6.0±3.0)%,但B组和A组间差异无统计学意义(P>0.05)。作用4 h后,D组着色率为(97.0±2.0)%,高于C组(30.0±7.2)%、B组(20.0±3.0)%和A组(10.0±1.0)%(P<0.01);作用6 h后,D组着色率为(98.0±1.7)%,亦高于C组(42.7±5.5)%、B组(34.0±6.6)%和A组(19.3±4.9)%,两两比较,各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。吉氏染色观察发现,随时间的延长和剂量的增高,虫体两端逐渐变圆、肿胀、坏死。透射电镜观察结果显示,随金丝桃素作用时间延长,虫体逐渐肿胀,胞膜与基质间出现明显空隙,虫体内空泡增多、变大,胞膜破裂,内部结构溶解。流式细胞仪检测结果表明,弓形虫速殖子存活率在金丝桃素作用后的各时间段内与对照组间差异有统计学意义(P<0.01);金丝桃素作用2 h后,D组无弓形虫存活,C组弓形虫存活率为(7.9±1.9)%,低于B组(38.1±5.5)%和A组(81.8±6.0)%(P<0.01);作用4 h后,C组无弓形虫存活;B组在作用4 h和6 h后,弓形虫存活率分别为(14.3±7.9)%和(1.4±1.8)%,均低于A组的(73.8±11.3)%和(64.1±14.4)%(P<0.01)。结论金丝桃素具有较强的体外抗弓形虫速殖子效果,且随剂量增高和作用时间延长抗虫效果更明显。

关键词：金丝桃素刚地弓形虫速殖子体外效果

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