检索结果-内蒙古大学图书馆

第九届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者：乔继琛李舟王伟伟夏惠戴雪喻方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽省蚌埠市东海大道2600号蚌埠医学院中国科学院上海巴斯德研究所上海市徐汇区岳阳路320号

目的利用CRISPR/Cas9方法构建stk基因融合HA和TY1标签序列的恶性疟原虫虫株.方法针对stk基因设计sgRNA序列和左、右同源臂.通过搭桥PCR法将HA及TY1标签的编码序列插入左、右同源臂的中间作为供体DNA.将供体DNA 和sgRNA 序列连接到pL6c... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9方法构建stk基因融合HA和TY1标签序列的恶性疟原虫虫株.方法针对stk基因设计sgRNA序列和左、右同源臂.通过搭桥PCR法将HA及TY1标签的编码序列插入左、右同源臂的中间作为供体DNA.将供体DNA 和sgRNA 序列连接到pL6cs-hDHFR 载体,构建pL6cs-hDHFR-stk-HA-TY1-sgRNA质粒并酶切、测序鉴定.以pUF1-BSD-Cas9 质粒与pL6cs-hDHFR-stk-HA-TY1-sgRNA质粒同时电转恶性疟原虫3D7 虫株,加杀稻瘟菌素和WR99210 筛选.药物筛选成功的疟原虫以PCR测序、Western blotting鉴定,并以ant-TY1 为一抗免疫荧光法分析STK蛋白的亚细胞定位.结果经测序比对,成功构建了pL6cs-hDHFR-stk-HA-TY1-sgRNA质粒;PCR测序显示HA 和TY1 成功融合于stk基因,Western b1otting在预期位置显示特异性条带,免疫荧光显示STK蛋白在恶性疟原虫环状体、大滋养体、裂殖体位置相似,定位于细胞核内及环绕核膜的细胞质.结论成功利用CRISPR/Cas9 方法构建了stk基因融合HA 和TY1 标签序列的恶性疟原虫虫株,发现STK蛋白定位于细胞核内及环绕核膜的细胞质.

关键词：恶性疟原虫 CRISPR/Cas9 stk基因 HA标签 TY1标签

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结核病DNA疫苗研究进展

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蚌埠医学院学报 2016年第3期41卷 408-413页

作者：薛玉芹方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

结核病（TB）是由结核分枝杆菌（Mtb）引起的以呼吸道为主的一种传染性疾病,严重危害人类健康。随着医学科学技术的发展,人类对抗TB已取得了一定的成果,包括有效的治疗药物及疫苗的研发。但同时由于Mtb耐药的严重性、人类免疫缺陷性病毒... 详细信息

结核病（TB）是由结核分枝杆菌（Mtb）引起的以呼吸道为主的一种传染性疾病,严重危害人类健康。随着医学科学技术的发展,人类对抗TB已取得了一定的成果,包括有效的治疗药物及疫苗的研发。但同时由于Mtb耐药的严重性、人类免疫缺陷性病毒（HIV）与Mtb的双重感染及流动人口的日益增多、吸毒等,加上不少国家对TB的忽视,TB在全球范围内呈回升趋势。

关键词：结核病 DNA疫苗综述

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铜绿假单胞菌L型对第三代和第四代头孢菌素的药物敏感性研究

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蚌埠医学院学报 2016年第10期41卷 1358-1360页

作者：陈登宇徐志本郑庆委高淑娴蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:探讨铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)L型对第三代和第四代头孢菌素敏感及耐药状况。方法:将PA诱导成稳定的L型,利用K-B纸片琼脂扩散法检测PA原菌及其L型对第三代和第四代头孢菌素的敏感程度,分析PA-L型的耐药状况。结果:P... 详细信息

目的:探讨铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)L型对第三代和第四代头孢菌素敏感及耐药状况。方法:将PA诱导成稳定的L型,利用K-B纸片琼脂扩散法检测PA原菌及其L型对第三代和第四代头孢菌素的敏感程度,分析PA-L型的耐药状况。结果:PA-L型对第三代和第四代头孢菌素的抑菌圈直径均较原菌缩小(P<0.05),但仍维持在敏感程度。结论:PA-L型对第三代和第四代头孢菌素仍具有敏感性。

关键词：铜绿假单胞菌 L型耐药性头孢菌素

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注重细节讲解提高临床微生物学实验教学水平

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齐齐哈尔医学院学报 2016年第15期37卷 1969-1970页

作者：陈登宇徐志本郑庆委管俊昌蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽233030

注重实验原理理论知识要点及实验操作细节讲解及示范,可提高临床微生物学实验教学效果。授课教师针对细菌鉴定实验教学中无菌观念、油镜使用、革兰染色、病原性球菌辨别、肠道杆菌鉴定、肥达反应分析等方面重点内容,强调突出要点的讲解... 详细信息

注重实验原理理论知识要点及实验操作细节讲解及示范,可提高临床微生物学实验教学效果。授课教师针对细菌鉴定实验教学中无菌观念、油镜使用、革兰染色、病原性球菌辨别、肠道杆菌鉴定、肥达反应分析等方面重点内容,强调突出要点的讲解及规范的操作示教,有利于微生物学实验教学水平的提高。

关键词：临床微生物学实验教学教学方法

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PBL教学在病原生物学与免疫学课程中的应用及效果评价

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齐齐哈尔医学院学报 2016年第7期37卷 929-931页

作者：王小莉杨小迪夏惠陶志勇方强常雪莲蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽233030

为了提高教学质量,提升学生综合素养。在本科临床专业的病原生物学与免疫学课程中,采用了PBL与传统讲授式教学相结合的模式。结果显示PBL教学法对培养学生自主学习的能力、表达沟通能力、分析和解决问题的能力、团队协作精神等多方面皆... 详细信息

为了提高教学质量,提升学生综合素养。在本科临床专业的病原生物学与免疫学课程中,采用了PBL与传统讲授式教学相结合的模式。结果显示PBL教学法对培养学生自主学习的能力、表达沟通能力、分析和解决问题的能力、团队协作精神等多方面皆有重要作用。PBL教学法可提高病原生物学与免疫学教学效果。

关键词： PBL 病原生物学与免疫学

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应用shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白的组分

应用shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白的组分

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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：杨小迪陶志勇程洋吴琦王小莉常雪莲张慧陈兴智方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

目的：通过shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白(adult worm excretory/secretory protein,AwESP)的组分,寻找具有免疫调节功能的活性成分。方法：利用收集的旋毛虫成虫制备成虫期的AESP,SDS-PAGE分离酶解后,采用shotgun液相色谱串... 详细信息

目的：通过shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白(adult worm excretory/secretory protein,AwESP)的组分,寻找具有免疫调节功能的活性成分。方法：利用收集的旋毛虫成虫制备成虫期的AESP,SDS-PAGE分离酶解后,采用shotgun液相色谱串联质谱系统鉴定,将分析所得的数据应用软件及数据库搜索完成蛋白质的鉴定,并对鉴定出的蛋白质从细胞组分、分子功能、生物学途径三个方面进行Gene Ontology (GO)分类。

关键词：旋毛虫成虫排泄分泌蛋白 shotgun技术

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应用shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白的组分

应用shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白的组分

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：杨小迪陶志勇程洋吴琦王小莉常雪莲张慧陈兴智方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

目的:通过shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白(adult worm excretory/secretory protein,AwESP)的组分,寻找具有免疫调节功能的活性成分。方法:利用收集的旋毛虫成虫制备成虫期的AESP,SDS-PAGE分离酶解后,采用shotgun液相色谱串联... 详细信息

目的:通过shotgun技术分析旋毛虫成虫排泄分泌蛋白(adult worm excretory/secretory protein,AwESP)的组分,寻找具有免疫调节功能的活性成分。方法:利用收集的旋毛虫成虫制备成虫期的AESP,SDS-PAGE分离酶解后,采用shotgun液相色谱串联质谱系统鉴定,将分析所得的数据应用软件及数据库搜索完成蛋白质的鉴定,并对鉴定出的蛋白质从细胞组分、分子功能、生物学途径三个方面进行Gene Ontology(GO)分类。结果:SDS-PAGE分离的Aw ESP分子量范围在15 000-116 000之间,从中共鉴定出280个蛋白,其中96个蛋白质为已明确鉴定的,假定的蛋白为98个,未鉴定的蛋白为86种。已初步明确鉴定的蛋白中至少有4种可能具有免疫调节作用,包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂、丝氨酸蛋白酶、53k Da排泄/分泌抗原、谷胱氨肽转移酶。GO工具分析显示已明确的蛋白具有104种分子功能,参与了365种生物过程。结论:旋毛虫Aw ESP成分复杂多样,有多种蛋白质和多肽未被鉴定,从已明确的蛋白质中初步筛选出4种与免疫调节相关的蛋白。

关键词：旋毛虫成虫排泄分泌蛋白 shotgun技术

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低温对中国河南株旋毛虫肌幼虫生存能力和感染力的影响

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蚌埠医学院学报 2016年第10期41卷 1261-1264页

作者：李江艳朱伟李倩王小莉杨小迪夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院科研中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的:了解低温(-18℃、-72℃)冻存对中国河南株旋毛虫肌幼虫(肌幼虫)生存能力和感染力的影响。方法:将含有肌幼虫的小鼠骨骼肌肌肉经-18℃、-72℃冻存处理不同时间后观察肌幼虫活力;55只小鼠分别经口感染300条经过-18℃、-72℃处理不同... 详细信息

目的:了解低温(-18℃、-72℃)冻存对中国河南株旋毛虫肌幼虫(肌幼虫)生存能力和感染力的影响。方法:将含有肌幼虫的小鼠骨骼肌肌肉经-18℃、-72℃冻存处理不同时间后观察肌幼虫活力;55只小鼠分别经口感染300条经过-18℃、-72℃处理不同时间的肌幼虫,感染小鼠35 d后收集肌幼虫,测定生殖力指数(RCI)。结果:肌幼虫经-18℃冻存0、6、12、24、36、48 h的死亡率分别为0.00%、6.30%、18.23%、35.81%、74.60%及100.00%;经-72℃冻存0、15、30、45、60 min的死亡率分别为0.00%、21.21%、57.11%、86.24%及100.00%;肌幼虫死亡率随-18℃、-72℃冻存处理时间的延长而升高(P<0.01)。经过-18℃冻存处理6、12、24、36 h后感染小鼠的肌幼虫RCI分别为(126.38±6.90)、(68.58±4.83)、(12.58±1.77)、(5.77±0.77),与未冻存(0 h)组肌幼虫的RCI(163.70±10.70)差异均有统计学意义(P<0.01);通过-72℃冻存处理15、30、45 min后感染小鼠的RCI分别为(18.19±2.15)、(8.83±1.39)、(3.10±0.26),与未冻存(0 min)组肌幼虫的RCI(163.70±10.70)差异均有统计学意义(P<0.01);肌幼虫的RCI均随-18℃、-72℃冻存处理时间延长而下降(P<0.01)。结论:低温冻存可导致中国河南株肌幼虫存活能力和感染能力下降,-18℃冻存48 h或-72℃冻存60 min可完全灭活小鼠肌肉内的中国河南株肌幼虫。

关键词：线虫病旋毛虫肌幼虫低温生存能力感染力

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妊娠期母鼠感染伯氏鼠疟原虫(***)对子代鼠生长发育及易感性的影响

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华东地区第十四届实验动物科学学术交流会

作者：陶莉陶志勇苏胖胖孟令文夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的观察妊娠期母鼠感染伯氏鼠疟原虫(***)对子代鼠的生长发育及其易感性的影响.方法在母鼠妊娠第14天腹腔接种1×106个/只P.b作为实验组,对照组注射相同体积的Nacl,饲养孕鼠到自然分娩,分娩后继续饲养4周,得到子代鼠.再次给予实... 详细信息

目的观察妊娠期母鼠感染伯氏鼠疟原虫(***)对子代鼠的生长发育及其易感性的影响.方法在母鼠妊娠第14天腹腔接种1×106个/只P.b作为实验组,对照组注射相同体积的Nacl,饲养孕鼠到自然分娩,分娩后继续饲养4周,得到子代鼠.再次给予实验组和对照组的子代鼠腹腔接种1×106个/只P.b,观察实验组和对照组子代成年鼠再次给予P.b时,其生长发育指标和易感性的应答变化.结果妊娠期母鼠感染P.b丁导致子代鼠的体重较对照组的明显减少(P＜0.05).对于再次接种P.b,与对照组相比,实验组较早出现原虫血症,生存时间相对缩短.鼠临终的红细胞感染率两组相比较有明显差异(P＜0.05).结论妊娠期母鼠感染P.b可引起子代鼠低体重,并可导致子代鼠对P.b抗原的免疫耐受加重.

关键词：妊娠期伯氏鼠疟原虫(P.berghei) 生长发育易感性

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不同易感性鼠类宿主感染伯氏疟原虫后体内NK、NKT细胞动态分析

不同易感性鼠类宿主感染伯氏疟原虫后体内NK、NKT细胞动态分析

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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：苏胖胖陶志勇李江艳乔继琛孟令文陶莉方强夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室 233000

目的：了解不同易感性鼠类宿主感染伯氏疟原虫后体内NK细胞、NKT细胞动态变化特征，探讨NK细胞、NKT细胞在大小鼠对疟原虫易感性不同中的作用.方法：BALB/c小鼠、SD大鼠分为正常对照组和感染第1、3、5、7、9天组，感染组分别腹腔注射1&#... 详细信息

目的：了解不同易感性鼠类宿主感染伯氏疟原虫后体内NK细胞、NKT细胞动态变化特征，探讨NK细胞、NKT细胞在大小鼠对疟原虫易感性不同中的作用.方法：BALB/c小鼠、SD大鼠分为正常对照组和感染第1、3、5、7、9天组，感染组分别腹腔注射1×106个P.b(SD大鼠注射1×107个P.b)，每组10只;记录不同鼠类宿主的原虫血率、生存率;流式细胞术检测正常对照组和感染组外周血NK、NKT细胞比例变化.

关键词： BALB/c小鼠 SD大鼠伯氏疟原虫易感性 NK细胞 NKT细胞

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