检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈建平杨斌斌徐佳楠陈达丽陈宪孙柯常凯朱达峰赖彩虹龚雨四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室四川大学华西基础医学与法医学院成都中医药大学大学医学技术学院

1.方法以杜氏利什曼原虫***的基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得amastni基因扩增产物。将amastin基因定向克隆到pcDNA3.1（+）中,构建重组质粒pcDNA3.1（+）-GS-amastin。amastin基因经测序,同源性分析,并对其跨膜区结构进行分析。用PCR... 详细信息

1.方法以杜氏利什曼原虫***的基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得amastni基因扩增产物。将amastin基因定向克隆到pcDNA3.1（+）中,构建重组质粒pcDNA3.1（+）-GS-amastin。amastin基因经测序,同源性分析,并对其跨膜区结构进行分析。用PCR方法扩增得到amastin基因N端第一个胞外区序列（命名为ast1）,并将其定向克隆到质粒pET32a（+）上,成功构建了原核重组表达质粒pET32a（+）-ast1。重组蛋白rAST1在大肠杆菌中高效表达,并用固定化金属离子亲和层析（IMAC）法进行纯化。以重组蛋白rAST1作为包被抗原,用间接ELISA的方法检测内脏利什曼病人血清。2.结果所得amastin基因经测序,同源性分析表明与***10H2的同源性最高,核苷酸序列同源性为99.6%,氨基酸为98.8%;而与来自***和***的无鞭毛体蛋白基因序列的同源性最低核苷酸序列同源性仅为7.8%6.6%,氨基酸序列为19.4～23.4。跨膜区预测结果显示所得到的无鞭毛体蛋白有四个跨膜区域,依次位于N端的第1（2）0aa,72（74）4（95）aa,101（102）21（124）aa,161（165）82（183）aa。N端胞外区有一个11个aa的高度保守序列amastin signature（-CVTVWGLKNDC-）。两端的2个半胱氨酸,中间的1个甘氨酸、1个色氨酸和1个苏氨酸的保守位点与其它无鞭毛体蛋白家族成员完全一致。用PCR方法扩增得到amastin基因N端第一个胞外区序列（命名为ast1）,并将其定向克隆到质粒pET32a（+）上,成功构建了原核重组表达质粒pET32a（+）-ast1。重组蛋白rAST1在大肠杆菌中高效表达,并用固定化金属离子亲和层析（IMAC）法进行纯化。以重组蛋白rAST1作为包被抗原,用间接ELISA的方法检测内脏利什曼病人血清30份,血吸虫病人血清10份,肺吸虫病人血清5份。结果发现rAST1-间接ELISA法检测内脏利什曼病人血清的阳性率为90%（27、30）;检测血吸虫病人血清10份,肺吸虫病人血清5份均为阴性。而用杜氏利什曼原虫前鞭毛体可溶性抗原（SLA）做包被抗原检测,阳性率为100%。3.结论rAST1可作为诊断内脏利什曼病的候选多肽抗原。

关键词：黑热病杜氏利什曼原虫 amastin基因 ast1基因 rAST1 间接ELISA 诊断

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我国黑热病流行现状

我国黑热病流行现状

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

内脏利什曼病又称黑热病,广泛流行于62个国家,约2亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50万人。黑热病曾广泛分布于我国长江以北16个省、市、自治区,自1950年代经大规模的有效防治,多数地区已基本消灭了黑热病,近年来在新疆、甘肃、... 详细信息

内脏利什曼病又称黑热病,广泛流行于62个国家,约2亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50万人。黑热病曾广泛分布于我国长江以北16个省、市、自治区,自1950年代经大规模的有效防治,多数地区已基本消灭了黑热病,近年来在新疆、甘肃、四川、陕西、山西和内蒙古等6省(区)仍有62个县(市)出现当地感染的黑热病,另有50个县有输入性病例报告。其中以川北、陇南和新疆的病人最多。四川省黑热病散发于川北的汶川、九寨沟、茂县、理县、北川和黑水等6县(市)。在甘肃以陇南市的文县、武都和舟曲的病人为多。上述地区犬的感染率都很高,其中四川省犬的感染率达8.29%,犬是我国山区疫区黑热病的主要传染源。新疆自1996年以来有33个县(市)仍陆续出现新发病人,主要分布在喀什三角洲及其周围的农场,涉及喀什、疏附、疏勒、巴楚、伽师和阿图什等县(市),其余27县呈散发,但动物保虫宿主尚不清楚。目前我国每年新发病人数在250～350例左右。黑热病确诊依赖于在淋巴结、骨髓或脾等穿刺物涂片上查见利什曼原虫无鞭毛体,这种方法不仅会给病人造成痛苦,而且由于原虫的检出率较低,临床易产生漏诊。发展高效、快速、敏感的诊断方法依然是黑热病防治研究的重点之一。

关键词：黑热病流行诊断

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甲型流感病毒核蛋白的表达与鉴定及其B细胞表位的预测

甲型流感病毒核蛋白的表达与鉴定及其B细胞表位的预测

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第二届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学三江论坛

作者：刘冯欢张菁王欢左斌李婉宜王保宁李明远李燕四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都中医药大学医学技术学院

目的:构建甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)的原核表达表达载体,诱导NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定;预测人NP蛋白的B细胞抗原表位。方法:以pcDNA3.1(+)/NP为模板,利用PCR方法扩增目的片段NP,再将此片段插入原核表达载体pET32... 详细信息

目的:构建甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)的原核表达表达载体,诱导NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定;预测人NP蛋白的B细胞抗原表位。方法:以pcDNA3.1(+)/NP为模板,利用PCR方法扩增目的片段NP,再将此片段插入原核表达载体pET32a(+),并进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定,将鉴定正确的质粒转入表达菌Rosetta-gami(2)中,用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测表达产物。按Chou-Fasman和Gami er-Robson方法预测其编码蛋白的二级结构,采用Karplns-Schulz方法预测蛋白骨架区的柔韧性;用KyteDoolittle方法预测其亲水性、Emini方法预测蛋白质表面可能性及Jameson-Wolf方法预测抗原性指数。结果:成功构建了流感病毒核蛋白(NP)的原核表达载体,经SDSPAGE检测NP蛋白得到了表达,Western Blot证明表达的重组蛋白具有免疫活性。在蛋白质第6-11、79-91、241-248和319-326区段附近很可能为B细胞表位优势区域。结论:流感病毒核蛋白的表达及B细胞表位的预测为流感病毒的快速诊断试剂的研发工作提供了基础。

关键词：甲型流感病毒核蛋白细胞表位流感病毒

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溃结宁合剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织Bcl-2及Bax表达的影响

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实用中医药杂志 2011年第11期27卷 740-741页

作者：祝鹏辉雷蕾王晓梅广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室广东广州510006 广西中医学院第一附属医院广西南宁530023 宝鸡文理学院陕西宝鸡721013

目的:观察溃结宁合剂对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织Bcl-2和Bax表达的影响,探讨其防治UC的作用机制。方法:采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)和醋酸复合法制备模型。将55只大鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组、中药高剂量组、中药低剂量组... 详细信息

目的:观察溃结宁合剂对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织Bcl-2和Bax表达的影响,探讨其防治UC的作用机制。方法:采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)和醋酸复合法制备模型。将55只大鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组、中药高剂量组、中药低剂量组各11只,正常组及模型组用生理盐水、西药对照组用柳氮磺吡啶、中药高剂量组及中药低剂量组分别用高、低剂量溃结宁合剂灌胃。以各组大鼠结肠湿重、肠重指数、结肠溃疡点、结肠充血点、Bcl-2和Bax表达等为检测指标。结果:溃结宁合剂可明显改善UC大鼠结肠黏膜组织病理学损伤,显著增加Bcl-2表达,降低Bax表达。结论:溃结宁合剂可抑制UC结肠上皮细胞凋亡,对大鼠UC有治疗作用,其作用机制可能与影响Bcl-2及Bax表达有关。

关键词：溃结宁合剂溃疡性结肠炎大鼠模型Bcl-2 Bax 影响

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黄芪甲苷联合树突状细胞瘤苗抗胃癌免疫的体外实验研究

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国际中医中药杂志 2011年第4期33卷 301-304页

作者：杨璐沈洪王立新林琳周晓波吴静刘增巍徐艺赵崧葛超骆殊刘亚军南京中医药大学第一临床医学院2008级硕士研究生 210046 南京中医药大学2008级博士研究生 210046 南京中医药大学基础医学院中医基础教研室 210046 江苏省中医院消化内科南京210029 东南大学医学院病原生物学与免疫学系

目的通过体外实验观察中药单体黄芪甲苷（astragaloside IV，AIV）联合树突状细胞（DC）瘤苗对机体免疫功能的调节作用。方法外周血单个核细胞体外诱导、培养，负载胃癌SGC7901冻融抗原，制备DC瘤苗，分别观察AⅣ联合DC瘤苗、DC瘤苗、AI... 详细信息

目的通过体外实验观察中药单体黄芪甲苷（astragaloside IV，AIV）联合树突状细胞（DC）瘤苗对机体免疫功能的调节作用。方法外周血单个核细胞体外诱导、培养，负载胃癌SGC7901冻融抗原，制备DC瘤苗，分别观察AⅣ联合DC瘤苗、DC瘤苗、AIV淋巴细胞增殖情况及其激活的效应细胞在体外杀伤胃癌细胞的活性。结果①AⅣ联合DC瘤苗（联合）组、DC瘤苗组T淋巴细胞增殖率显著高于AIV组、T细胞组（阴性对照组）（P=0．000），其中联合组促淋巴细胞增殖能力优于DC瘤苗组（S／R为1：5、1：10、1：50、1：100时，P分别为0．013、0．014、0．017、0．019）；AIV组T淋巴细胞增殖与T细胞组比较，差异无统计学意义（P=0．185）。②联合组及DC瘤苗组所活化的T细胞对胃癌SGC7901细胞的杀伤率高于AⅣ组、未活化T细胞组（P=0．000），联合组杀伤能力优于DC瘤苗组（E／T为5：1、10：1、20：1、50：1时，P分别为0．023、0．012、0．016、0．011）；而AⅣ组与未活化T细胞组几乎无杀伤作用（P=0．267）。结论AⅣ可通过DC瘤苗促进T淋巴细胞的增殖及杀伤肿瘤的活性，从而更有效地诱导抗胃癌特异性免疫应答。

关键词：树突状细胞黄芪甲苷胃癌抗肿瘤免疫

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杜氏利什曼原虫rAST1蛋白的制备及用于黑热病诊断的初步研究

杜氏利什曼原虫rAST1蛋白的制备及用于黑热病诊断的初步研究

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四川省动物学会第九届会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：陈建平龚雨杨斌斌徐佳楠陈达丽陈宪孙柯常凯朱达峰赖彩虹四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室成都 610041 成都中医药大学大学医学技术学院07 级生物科学专业本科生成都 610075 四川大学华西基础医学与法医学院06 级基础医学专业本科生成都 610041

1.方法以杜氏利什曼原虫*** 的基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得amastni基因扩增产物.将amastin 基因定向克隆到pcDNA3.1(+) 中,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-*** 基因经测序,同源性分析,并对其跨膜区结构进行分析.

关键词：黑热病杜氏利什曼原虫 amastin 基因 ast1 基因 rAST1 间接ELISA 诊断

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我国黑热病流行现状

我国黑热病流行现状

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四川省动物学会第九届会员代表大会暨第十届学术研讨会

内脏利什曼病又称黑热病,广泛流行于62 个国家,约2 亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50 万人.黑热病曾广泛分布于我国长江以北16 个省、市、自治区,自1950 年代经大规模的有效防治,多数地区已基本消灭了黑热病,近年来在新疆、甘... 详细信息

内脏利什曼病又称黑热病,广泛流行于62 个国家,约2 亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50 万人.黑热病曾广泛分布于我国长江以北16 个省、市、自治区,自1950 年代经大规模的有效防治,多数地区已基本消灭了黑热病,近年来在新疆、甘肃、四川、陕西、山西和内蒙古等6 省(区)仍有62 个县(市)出现当地感染的黑热病,另有50个县有输入性病例报告.

关键词：黑热病流行诊断

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心复康口服液对压力超负荷大鼠心肌ND4表达的影响

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第三军医大学学报 2011年第9期33卷 970-972页

作者：徐淑乐张刚曹雪滨平政崔英凯何建成胡元会王士雯解放军第252医院心血管内科全军老年心血管病研究诊疗中心河北保定071000 上海中医药大学基础医学院中医诊断学教研室上海201203 中国中医科学院广安门医院心血管内科北京100053 解放军总医院老年心血管病研究所北京100853

目的探讨心复康口服液对压力超负荷心衰大鼠心肌线粒体ND4 mRNA和蛋白表达的影响。方法 240只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为3组:假手术组、腹主动脉缩窄模型组(模型组)、心复康口服液治疗组(治疗组)。采用腹主动脉部分缩窄法制作心衰... 详细信息

目的探讨心复康口服液对压力超负荷心衰大鼠心肌线粒体ND4 mRNA和蛋白表达的影响。方法 240只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为3组:假手术组、腹主动脉缩窄模型组(模型组)、心复康口服液治疗组(治疗组)。采用腹主动脉部分缩窄法制作心衰大鼠模型,RT-PCR和Western blot检测分别大鼠第4、8、12周心肌线粒体ND4 mRNA和蛋白的表达。结果①术后第8周,与假手术组比较,模型组大鼠ND4 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组ND4 mRNA表达升高(P<0.01),ND4蛋白表达也升高(P<0.05)。②术后第12周,与8周时比较,模型组大鼠ND4 mRNA含量降低(P<0.05),ND4蛋白显著降低(P<0.01);与同期模型组比较,治疗组ND4 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01),较8周时也均显著升高(P<0.01)。结论心复康口服液可上调压力超负荷心衰大鼠心肌线粒体ND4 mRNA的表达,提高心肌细胞ND4蛋白含量,改善心肌能量生成障碍。

关键词：压力超负荷 ND4 心肌能量代谢心复康口服液

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张新渝治疗痛经经验

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实用中医药杂志 2011年第11期27卷 778-778页

作者：童银秀赵国惠张新渝成都中医药大学成都中医药大学基础医学院内经教研室四川成都610075

痛经属中医“经行腹痛”范畴，张教授根据多年的临床经验，提出痛经病位在肝，与脾肾有密切的关系，现将其治疗痛经的经验介绍如下。

关键词：痛经治疗张新渝经行腹痛临床经验

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浅析“病邪出入”与“证候转化”

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中国中医药现代远程教育 2011年第4期9卷 4-4页

作者：罗尧岳刘锐湖南中医药大学基础医学院中医学基础教研室 410007

病邪表里出入、病证的表里转化是中医学基本学术思想,反映了病邪动态变化与疾病病位改变、证候转化辨证统一。不同版本教材在论述过程中有所不同,有统一规范论述之必要。

关键词：病邪表里出入转化

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