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中国医药导报 2020年第14期17卷 8-13页

作者：王蔚周忠光杨婧刘旭田明乔羽仲丽丽黑龙江中医药大学基础医学院病理教研室黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学基础医学院组织胚胎学教研室黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学实验中心黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学基础医学院伤寒教研室黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学临床医学院病理科黑龙江哈尔滨150040

目的研究桦褐孔菌醇提物(IO醇提物)对胃癌BGC-823裸鼠移植瘤的抑制作用,推测其作用机制与PI3K/AKT通路相关性。方法48只裸鼠使用异位移植瘤造模法建立胃癌模型,造模后按照随机数字法分为IO醇提物高剂量组(3 mg/g)、中剂量组(1 mg/g)、... 详细信息

目的研究桦褐孔菌醇提物(IO醇提物)对胃癌BGC-823裸鼠移植瘤的抑制作用,推测其作用机制与PI3K/AKT通路相关性。方法48只裸鼠使用异位移植瘤造模法建立胃癌模型,造模后按照随机数字法分为IO醇提物高剂量组(3 mg/g)、中剂量组(1 mg/g)、低剂量组(0.75 mg/g),阴性对照组(羧甲基纤维素钠灌胃),模型组(不灌药物),阳性对照组(卡培他滨灌胃,0.5 mg/g),每组各8只。灌胃14 d,处死小鼠,剥离肿瘤组织,称重计算抑瘤率;光镜和电镜下观察药物干预后肿瘤组织形态变化;免疫组织化学法检测相关蛋白4E-BP1、p27kip1、Bcl-2、Bax、caspase-3的表达;逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测磷酸酶基因(PTEN)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、蛋白激酶(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定PI3K、p-AKT蛋白表达。结果与阴性对照组、模型组比较,各IO醇提物组肿瘤重量降低(P<0.05),生长受到抑制(P<0.05);各IO醇提物组的肿瘤坏死、凋亡、细胞器破坏明显;与阴性对照组、模型组比较,各IO醇提物组Bcl-2细胞平均光密度值降低,4E-BP1、p27kip1、Bax、caspase-3细胞平均光密度值升高(P<0.05);RT-PCR检测结果示,PTEN在各IO醇提物组表达均高于阴性对照组、模型组,低于阳性对照组(P<0.05),mTOR、PI3K和AKT表达低于阴性对照组、模型组,高于阳性对照组(P<0.05)。Western blot检测结果示,各IO醇提物组PI3K、p-AKT蛋白表达低于阴性对照组、模型组,高于阳性对照组(P<0.05)。结论IO醇提物具有较为明显的胃癌抑制作用,其机制可能与PI3K/AKT通路及其上下游因子有关。

关键词： PI3K/AKT通路胃癌桦褐孔菌分子机制

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桦褐孔菌醇提物对胃癌侵袭迁移的影响及分子机制探讨

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中国医学装备 2020年第9期17卷 206-212页

作者：王蔚乔羽周忠光杨婧刘旭仲丽丽辽宁中医药大学医学检验学院医学检验教研室辽宁沈阳110000 黑龙江中医药大学基础医学院伤寒教研室黑龙江哈尔滨150000 黑龙江中医药大学基础医学院组织胚胎学教研室黑龙江哈尔滨150000 黑龙江中医药大学基础医学院病理教研室黑龙江哈尔滨150000 黑龙江中医药大学实验中心黑龙江哈尔滨150000 黑龙江中医药大学临床医学院病理科黑龙江哈尔滨150000

目的:研究桦褐孔菌(IO)醇提物(IO醇提物)对胃癌细胞BGC-823侵袭转移的影响,以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/AKT)通路在其中发挥的作用。方法:药物干预后用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测高剂量组、中剂量组、低剂量组和阴性对照组细胞的增殖情... 详细信息

目的:研究桦褐孔菌(IO)醇提物(IO醇提物)对胃癌细胞BGC-823侵袭转移的影响,以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/AKT)通路在其中发挥的作用。方法:药物干预后用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测高剂量组、中剂量组、低剂量组和阴性对照组细胞的增殖情况,划痕实验比较各组细胞的迁移能力,通过细胞迁移(Transwell)实验比较胃癌细胞BGC-823的侵袭能力,采用流式细胞术检测细胞的凋亡及细胞周期情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹方法(Westernblot)检测PI3K/AKT通路相关基因、蛋白的表达。观察关键蛋白、基因与IO醇提物抗胃癌的关系。结果:MTT法显示IO醇提物对人胃癌细胞系BGC-823细胞具有抑制作用,高剂量组抑制率为(88.67±2.82)%;流式细胞术观察细胞表明IO醇提物对胃癌BGC-823细胞的凋亡和细胞周期可产生影响,大量胃癌细胞停留于G0/G1期;细胞划痕和Transwell小室表明其对胃癌BGC-823细胞的迁移和侵袭具有抑制作用,细胞迁移和侵袭能力随IO醇提物浓度增高而减弱,侵袭力高剂量组为(40±2.2)%,阴性对照组为(80±3.5)%,其差异有统计学意义(F=166.164,P<0.05);RT-PCR显示抑癌基因PTEN增加,胃癌发生发展相关的mTORmRNA减少,高剂量组分别为(0.91±0.06)bp和(1.65±0.08)bp,阴性对照组分别为(0.64±0.08)bp和(2.38±0.13)bp,其差异有统计学意义(F=18.859,F=55.021;P<0.05);Westernblot法可见PI3K和p-AKT蛋白减少,高剂量组分别为(1.96±0.05)KD和(1.68±0.32)KD,而阴性对照组分别为(6.06±0.35)KD和(6.35±0.73)KD,IO醇提物与阴性对照组PI3K比较差异有统计学意义(F=799.507,F=59.018;P<0.05)。结论:IO醇提物对胃癌BGC-823细胞的迁移侵袭能力具有抑制作用,其发生机制可能与IO醇提物对PI3K/AKT通路有关。

关键词：胃癌桦褐孔菌(IO) 侵袭迁移磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/AKT)

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HSV-TK/CD20双自杀基因系统慢病毒载体的构建及应用

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免疫学杂志 2019年第8期35卷 711-717页

作者：家婷张涛邹强郑武燕赵日欧阳寒梅曹倩朱榕王茂庆叶鑫宇刘佳慧李华西南交通大学医学院成都610031 西部战区总医院肿瘤诊治中心成都610083 成都医学院科研实验中心 610500 成都中医药大学基础医学院免疫学教研室 610072

目的构建同时表达单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和RQR8膜蛋白双自杀可控开关的Jurkat细胞,使之可通过更昔洛韦药物(GCV)或利妥昔单抗(RTX)实现可控性细胞消除。方法 RQR8膜蛋白小分子含利妥昔单抗识别的模拟表位和抗CD34单抗表位。合成... 详细信息

目的构建同时表达单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和RQR8膜蛋白双自杀可控开关的Jurkat细胞,使之可通过更昔洛韦药物(GCV)或利妥昔单抗(RTX)实现可控性细胞消除。方法 RQR8膜蛋白小分子含利妥昔单抗识别的模拟表位和抗CD34单抗表位。合成编码RQR8及HSV-TK的基因,构建慢病毒共表达载体pLV-RQR8-T2A-TK;脂质体Lipofectamine3000转染Jurkat细胞,流式荧光抗CD34单抗检测RQR8的表达,通过磁珠筛选获得RQR8+TK+Jurkat细胞;分别加入GCV或RTX检测自杀可控开关功能:CCK8法检测加药后细胞增殖情况,Annexin-V/PI检测细胞凋亡情况。结果慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK酶切片段大约1 670 bp,测序进一步证实外源片段插入正确。慢病毒感染Jurkat细胞,感染率为45.21%,磁珠纯化得到99.4%纯度的RQR8+TK+Jurkat。GCV对RQR8+TK+Jurkat具有细胞毒性作用,GCV浓度为40μmol/L时,其存活率为(52.11±7.04)%,IC50为20.66μmol/L。80μmol/L GCV作用RQR8+TK+Jurkat细胞72 h后凋亡率达(41.28±2.78)%。在血清(含补体)存在情况下,320μg/ml RTX可通过补体介导的细胞杀伤作用杀伤RQR8+TK+Jurkat,其存活率为(29.64±4.52)%。结论双自杀可控开关慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK构建成功,加入GCV或RTX可通过2种不同路径成功杀伤细胞,达到细胞清除目的,提高了安全性,为临床治疗过继免疫不良反应提供多种选择。

关键词：自杀基因 HSV-TK CD20 RQR8 利妥昔单抗更昔洛韦

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四逆散开阖以运少阴枢机论治抑郁症

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中国中医基础医学杂志 2019年第2期25卷 273-275页

作者：穆杰王庆国王雪茜程发峰尹湘君杜欣刘姝伶北京中医药大学基础医学院中医临床基础伤寒论教研室北京中医药大学"经典方剂的应用基础研究"创新团队北京100029

抑郁症作为现代临床中高发疾病之一,西医药物治疗存在副作用大等诟病,中医在辨证论治的基础上论治思路多样,其中从《伤寒论》六经辨证基于"开阖枢"的观点论治临床疗效确切,本文述四逆散开阖运少阴枢机论治抑郁症并举验案一则... 详细信息

抑郁症作为现代临床中高发疾病之一,西医药物治疗存在副作用大等诟病,中医在辨证论治的基础上论治思路多样,其中从《伤寒论》六经辨证基于"开阖枢"的观点论治临床疗效确切,本文述四逆散开阖运少阴枢机论治抑郁症并举验案一则,著而望有资于同道。

关键词：抑郁症少阴枢机名老中医王庆国

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复肝丸调控miR-424表达抑制肝窦内皮细胞血管新生的体外研究

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上海中医药杂志 2020年第1期54卷 68-73,96页

作者：王清兰张风雷扬刘成海陶艳艳上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海中医药大学基础医学院伤寒金匮教研室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海中医药大学上海201203

目的观察复肝丸调控miR-424表达以抑制肝窦内皮细胞血管新生的作用及其机制。方法以不同剂量(0~2000 mg/L)的复肝丸与人肝窦内皮细胞(HHSEC)共孵育,CCK8法检测复肝丸对细胞活力的影响,分析复肝丸对细胞无毒性作用的剂量范围,并以此作为... 详细信息

目的观察复肝丸调控miR-424表达以抑制肝窦内皮细胞血管新生的作用及其机制。方法以不同剂量(0~2000 mg/L)的复肝丸与人肝窦内皮细胞(HHSEC)共孵育,CCK8法检测复肝丸对细胞活力的影响,分析复肝丸对细胞无毒性作用的剂量范围,并以此作为后续药效及机制评价的剂量。以CoCl2诱导HHSEC血管新生模型,分为正常组、模型组、miR-424抑制剂组及复肝丸组,除正常组外,其余各组以CoCl2诱导细胞血管新生,miR-424抑制剂组及复肝丸组分别以miR-424抑制剂及复肝丸(200 mg/L)与细胞共孵育24 h。采用CCK8法检测细胞活力与增殖情况;Transwell观察细胞迁移变化情况;Matrigel管腔生成实验评价细胞管腔形成情况;定量RT-PCR检测miR-424、HIF-1α、vWF、CD31基因表达;Western blot法检测HIF-1α、vWF、CD31蛋白表达。结果复肝丸剂量小于400 mg/L对HHSCE无明显细胞毒性。与正常组比较,200μmol/L CoCl2可诱导肝窦内皮细胞缺氧损伤模型,且模型组miR-424、HIF-1α表达增加,细胞迁移和管腔生成增多,vWF、CD31表达增加(P<0.01);与模型组比较,miR-424抑制剂与200 mg/L复肝丸干预后,miR-424与HIF-1α表达均不同程度降低,细胞迁移和管腔生成受抑制,vWF、CD31表达降低(P<0.01);且复肝丸组综合疗效与miR-424抑制剂相当。结论复肝丸具有良好的抑制肝窦内皮细胞血管新生的作用,其作用机制与抑制miR-424表达相关。

关键词： miRNA-424 血管新生肝窦内皮细胞复肝丸

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聚乙二醇沉淀剂有效分离尿外泌体(英文)

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中国生物化学与分子生物学报 2018年第1期34卷 110-116页

作者：吕春燕汪弋力丁维俊成都中医药大学临床医学院病理科/病理教研室成都610072 成都中医药大学基础医学院基础医学实验中心成都610072

尿外泌体是病毒大小的胞外囊泡,是非侵入性获得肾及泌尿生殖道细胞生理病理信息的重要靶标。聚乙二醇沉淀剂可经济高效地分离富集血清等外泌体,但未见用于尿外泌体富集的详细报道。本研究采用聚乙二醇沉淀剂分离鉴定尿外泌体,并对其RNA... 详细信息

尿外泌体是病毒大小的胞外囊泡,是非侵入性获得肾及泌尿生殖道细胞生理病理信息的重要靶标。聚乙二醇沉淀剂可经济高效地分离富集血清等外泌体,但未见用于尿外泌体富集的详细报道。本研究采用聚乙二醇沉淀剂分离鉴定尿外泌体,并对其RNA组分进行检测,以期建立一个经济、高效、简便的尿外泌体分离富集方法。采集10例健康志愿者晨尿20 m L,聚乙二醇沉淀剂分离尿外泌体。透射电镜观察到直径30~100 nm双层膜包绕的囊性小泡,中央有直径5~15 nm高电子密度区。Western印迹检测到外泌体标记蛋白CD63、CD9、TSG101、ADAM10和内标蛋白β-肌动蛋白的表达。纳米粒径仪测定粒子直径介于30~130 nm,并可见25.37 nm和95.07 nm二个粒子峰。qRT-PCR扩增得到β-肌动蛋白和RNU6 RNA产物带。上述结果表明,聚乙二醇沉淀剂可分离富集尿外泌体,该法简单、高效,不需要超速离心机等昂贵设备,且采用该法富集到的外泌体可用于后续蛋白质与核酸分析。该方法可望加速液体活检应用,尤其是肾及泌尿生殖道病变的无创检测。

关键词：尿外泌体聚乙二醇沉淀法 RNA检测

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续断来源考证、化学成分及药理作用综述

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中国药物评价 2020年第6期37卷 432-436页

作者：代琪叶臻叶俏波雷蕾成都市食品药品检验研究院国家药品监督管理局中药材质量监测评价重点实验室四川成都610045 成都中医药大学基础医学院四川成都611137 成都中医药大学方剂学教研室四川成都611137

目的:对续断的来源考证、化学成分和药理作用进行综述,回顾续断确定来源的发展历程,并通过化学成分和药理作用的总结,为续断的考证、进一步研究及应用提供参考。方法:以“续断”、“川续断”、“考证”、“化学成分”、“药理作用”等... 详细信息

目的:对续断的来源考证、化学成分和药理作用进行综述,回顾续断确定来源的发展历程,并通过化学成分和药理作用的总结,为续断的考证、进一步研究及应用提供参考。方法:以“续断”、“川续断”、“考证”、“化学成分”、“药理作用”等作为关键词,在中国知网、中国生物医学文献服务系统、万方医学网、Pubmed、维普网等数据库进行检索,整理相关文献并进行综述。结果与结论:目前,续断现行版药典来源是川续断科植物川续断Dipsacus asper *** Henry的干燥根。川续断化学成分包含三萜皂苷类、环烯醚萜类、生物碱类、酚醛酸类及其他成分,具有预防复发性自然流产、骨保护、神经保护、肝脏保护、抗衰老等药理作用。

关键词：续断来源化学成分药理作用

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不同浸渍条件下大黄黄连泻心汤对大鼠胃溃疡的疗效及胃组织PGE_2含量的影响

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中华中医药杂志 2018年第1期33卷 291-293页

作者：包雨晴凌云石银龙周春祥南京中医药大学基础医学院伤寒教研室南京210023 南京明基医院南京210036

目的:探究大黄黄连泻心汤最佳浸渍温度和时间。方法:采用干姜水煎剂灌胃结合腹腔注射消炎痛法,建立大鼠热证胃溃疡模型,检测不同浸渍条件下大黄黄连泻心汤对受试大鼠胃溃疡指数、胃蛋白酶活性及PGE2含量的影响。结果:药物E组胃溃疡指数... 详细信息

目的:探究大黄黄连泻心汤最佳浸渍温度和时间。方法:采用干姜水煎剂灌胃结合腹腔注射消炎痛法,建立大鼠热证胃溃疡模型,检测不同浸渍条件下大黄黄连泻心汤对受试大鼠胃溃疡指数、胃蛋白酶活性及PGE2含量的影响。结果:药物E组胃溃疡指数较其他药物组显著降低(P<0.01);与模型组比较,药物E组能显著降低胃蛋白酶活性(P<0.01),药物B、D、E、F组PGE2含量显著升高(P<0.01,P<0.05),其中以B组升高最为明显。结论:大黄黄连泻心汤最佳浸渍条件为85℃浸渍15min。

关键词：大黄黄连泻心汤热证胃溃疡溃疡指数胃蛋白酶活性前列腺素E

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试析李东垣除热思想于仲景方论中的体现

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环球中医药 2019年第2期12卷 235-237页

作者：高琛宇闫雪祎田淑梅鲁美君黑龙江中医药大学基础医学院伤寒论教研室硕士研究生150040

文章以李东垣针对阴火所行之甘温除热法为启引,探得甘寒祛热、苦寒泻热、解郁除热等除热方法亦是李东垣临证对于热证的主要治疗方法。故以此类比参照仲景方论对于热证的论治分析所得,两家论述所体现的治法思路如出一辙,如此后世所奉仲... 详细信息

文章以李东垣针对阴火所行之甘温除热法为启引,探得甘寒祛热、苦寒泻热、解郁除热等除热方法亦是李东垣临证对于热证的主要治疗方法。故以此类比参照仲景方论对于热证的论治分析所得,两家论述所体现的治法思路如出一辙,如此后世所奉仲景为万法之宗、方书之祖,确为名不过实。

关键词：李东垣除热法伤寒论析源

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高校课堂文化构建的探讨

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基础医学教育 2019年第9期21卷 711-712页

作者：王燕刘宇陈敏师锐赞宋励阳杨山西医科大学基础医学院药理教研室太原030001 山西医科大学基础医学院组胚教研室成都中医药大学养生康复学院康复医学教研室

课堂文化是一种特殊的聚合化文化,本质是构建自己的教学理念,形成一种内在的聚合力。文章结合加拿大不列颠哥伦比亚大学半年访学收获和我国医学高等教育实际情况,讨论如何有效构建课堂文化,并贯穿教学过程始终,使师生双方获益,提高教学... 详细信息

课堂文化是一种特殊的聚合化文化,本质是构建自己的教学理念,形成一种内在的聚合力。文章结合加拿大不列颠哥伦比亚大学半年访学收获和我国医学高等教育实际情况,讨论如何有效构建课堂文化,并贯穿教学过程始终,使师生双方获益,提高教学质量。

关键词：课堂文化高等教育教学改革

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