检索结果-内蒙古大学图书馆

西南国防医药 2018年第1期28卷 13-15页

作者：白盈盈刘菊芬张建平和法莲陈慧芬张梦圆王颖翠潘兴华刘高米洋成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心、干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室、云南省干细胞重点实验室成都军区昆明总医院骨科昆明医科大学昆明总医院临床学院昆明650032

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSC)对ApoE^(-/-)缺陷小鼠动脉粥样硬化(AS)的治疗作用。方法 ApoE^(-/-)缺陷小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和实验组,同时设置正常对照组。实验组、阴性对照组于9 w龄时开始分别经尾静脉注射BMSC悬液20... 详细信息

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSC)对ApoE^(-/-)缺陷小鼠动脉粥样硬化(AS)的治疗作用。方法 ApoE^(-/-)缺陷小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和实验组,同时设置正常对照组。实验组、阴性对照组于9 w龄时开始分别经尾静脉注射BMSC悬液200μl(1×10~5个BMSC)和同体积生理盐水,正常对照组和空白对照组不做处理。小鼠分别于12 w时和BMSC注射后4 w,采用全自动生化分析仪测定各组血液总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,油红O染色观察主动脉弓斑块形成情况。结果空白对照组与正常对照组小鼠相比,TC、TG、LDL-C明显升高(P<0.05),主动脉弓油红O染色可见空白对照组主动脉弓出现斑块。BMSC治疗后,实验组的TC、TG、LDL-C较阴性对照组明显下降(P<0.05),油红染色发现实验组主动脉弓斑块斑块数量及面积均减少。结论 ApoE^(-/-)缺陷小鼠高脂饮食至12 w龄时出现典型动脉粥样硬化(AS)临床表征,而同种异体BMSC具有一定降低血脂、抑制主动脉弓内斑块形成的作用。

关键词：间充质干细胞动脉粥样硬化 ApoE-/-缺陷小鼠血脂斑块

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山羊胎肝内定位注射不同体积间充质干细胞对胎羊发育的影响

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西南国防医药 2018年第1期28卷 19-22页

作者：黄小昆龙海苏锡雄杨艾梅李自安余璞王强刘菊芬王金祥潘兴华庞荣清许立奇成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明医科大学昆明总医院临床学院昆明总医院特诊科昆明650032

目的探索山羊胎肝内定位注射不同体积间充质干细胞(MSC)对胎羊发育的影响。方法以B超探查10只疑似怀孕的母山羊,观察胎羊数量、胎羊性别,确定胎肝位置。怀孕约3个月时,在B超引导下穿刺至胎肝,注射不同体积和不同数量的雄性山羊骨髓MSC... 详细信息

目的探索山羊胎肝内定位注射不同体积间充质干细胞(MSC)对胎羊发育的影响。方法以B超探查10只疑似怀孕的母山羊,观察胎羊数量、胎羊性别,确定胎肝位置。怀孕约3个月时,在B超引导下穿刺至胎肝,注射不同体积和不同数量的雄性山羊骨髓MSC悬液到胎肝实质区域,精心护理并观察穿刺母羊是否流产。结果借助B超探查10只疑似怀孕母羊中的6只怀孕,可以发现胎心跳动和胎肝血流并确定胎肝的位置,在B超引导下能够准确注射MSC悬液至胎肝实质区域,注射1 ml MSC悬液,不会引起流产,安全可行;而注射同等细胞数量的4 ml MSC悬液,则导致穿刺山羊流产。结论 B超显影可确诊山羊怀孕和确定胎肝位置,胎肝内注射1 m山羊骨髓MSC悬液不会导致胎羊流产,MSC数量不变而体积增加至4 ml时易导致胎羊流产。

关键词：超声诊断超声引导定位注射山羊

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干细胞移植治疗炎症性肠病

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中国组织工程研究 2017年第21期21卷 3432-3437页

作者：李青青刘建昆潘兴华成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省干细胞工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室云南省昆明市650032 昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院云南省昆明市650031

背景:理论上,干细胞可以重建并调节人体免疫系统,而且干细胞具备定向分化功能,从而有望用于治疗炎症性肠病。目的:综述不同类型干细胞干预炎症性肠病的研究进展。方法:以"干细胞,造血干细胞,间充质干细胞,炎症性肠病,克罗恩病,溃... 详细信息

背景:理论上,干细胞可以重建并调节人体免疫系统,而且干细胞具备定向分化功能,从而有望用于治疗炎症性肠病。目的:综述不同类型干细胞干预炎症性肠病的研究进展。方法:以"干细胞,造血干细胞,间充质干细胞,炎症性肠病,克罗恩病,溃疡性结肠炎"为中文检索词,以"stem cells transplantation,cell therapy,inflammatory bowel diseases,ulcerative colitis,Crohn’s disease"为英文检索词,在中国知网(CNKI)期刊全文数据库、Pub Med数据库以及FMJS数据库检索2002年1月至今有关干细胞移植治疗炎症性肠病的文献。最终纳入49篇文献进行综述。结果与结论:胚胎干细胞与成体干细胞对炎症性肠病均有一定的治疗作用,但具体哪一种类型的干细胞最安全、最有效以及此种细胞的最佳剂量与移植途径等,仍需要开展大量的研究。

关键词：干细胞炎性肠疾病 Crohn病组织工程移植炎症性肠病克罗恩病溃疡性结肠炎干细胞移植

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两种人脐带间充质干细胞源外泌体分离方法的比较

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2017年第2期7卷 81-86页

作者：刘高米洋潘兴华和法莲陆容刘菊芬何洁王红阳第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200438 成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明650032 昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院 650032 上海市儿童医院儿科 200062

目的探索人脐带间充质干细胞(hUMSCs)来源的外泌体的最佳分离条件并对其进行生物学鉴定。方法无血清培养法培养hUMSCs,培养上清中收集外泌体,超高速离心法(ult-exo)和沉淀法分离外泌体(pri-exo),Western Blot检测外泌体标志性蛋白CD63、... 详细信息

目的探索人脐带间充质干细胞(hUMSCs)来源的外泌体的最佳分离条件并对其进行生物学鉴定。方法无血清培养法培养hUMSCs,培养上清中收集外泌体,超高速离心法(ult-exo)和沉淀法分离外泌体(pri-exo),Western Blot检测外泌体标志性蛋白CD63、HSP70、HSP90和阴性对照蛋白TAPA1,透射电镜观察分离所得外泌体生物学形态,高清晰质谱分析外泌体包裹蛋白种类。结果无血清培养法能够在不改变细胞生物学形态的条件下获取hUMSCs源外泌体,透射电镜下可见超高速离心可以获得具有典型双层膜结构的外泌体,大小在100 nm左右,而沉淀法分离所得产物不具有典型的外泌体形态表征,大小在30 nm左右;Western Blot结果表明超高速离心法所得外泌体CD63、HSP70、HSP90均呈现阳性,阴性对照蛋白TAPA1呈现阴性,沉淀法只能检测到HSP90;高清晰质谱检测出超高速离心法分离所得外泌体有169种蛋白,沉淀法有102种,共有蛋白79种。结论超高速离心法和沉淀法所得外泌体在蛋白标志物、生物学形态和内含蛋白种类均有差别,本实验结果提示分离hUMSCs源外泌体超高速离心法优于沉淀法。

关键词：脐带间质干细胞外泌体分离鉴定

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骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特性研究

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西南国防医药 2016年第12期26卷 1386-1391页

作者：朱光旭王金祥周芳李自安刘菊芬阮光萍白盈盈潘兴华成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心、干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明650032 昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院

目的体外培养骨髓脂肪祖细胞（BMAPs），比较其与骨髓间充质干细胞（BMSCs）在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差异。方法无菌取1-2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液，EBM-2（含20％FBS、15μ... 详细信息

目的体外培养骨髓脂肪祖细胞（BMAPs），比较其与骨髓间充质干细胞（BMSCs）在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差异。方法无菌取1-2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液，EBM-2（含20％FBS、15μg／ml ECGs）培养基差速贴壁法培养第3次贴壁细胞，取传代至第3-5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45及CD90表达；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-timeq PCR）检测过氧化物酶体增殖激活受体γ（Ppaγ）、脂肪酸结合蛋白4（Fabp4）、脂蛋白脂肪酶（Lpl）、CCAAT／增强子结合蛋白α（cebpa）、葡萄糖转运蛋白4（Slc2a4）及前脂肪细胞因子1（preadl）mRNA表达水平。结果传代接种培养24h后，BMSCs形态上呈宽大、扁平状，而BMAPs大部呈长三角状；接种48h后，BMSCs排列更为有序，而BMAPs多交织成网状。BMAP表达CD34、CD44、CD45及CD90，BMSC表达CD44及CD90，未检测到CD34和CD45表达。诱导培养后第4d，BMAPs成脂率显著高于BMSCs（P〈0．01）；到第8d。BMAPs成脂率为（87．2±1L67）％，BMSCs成脂率为（18．5±10．2）％，差异具有统计学意义（P〈0．01）。诱导分化后第4、8d，Cebpa、Fabp4、Lp1、Ppaγ和Slc2a4mRNA在BMAPs表达水平均显著高于BMSCs（P〈0．01）。结论本实验获得了1种具有干细胞的生物学特性，高表达脂肪分化相关的特异性基因，可高效均质性地分化为脂肪细胞的BMAPs。

关键词：骨髓脂肪祖细胞间充质干细胞脂肪细胞分化

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骨髓单个核细胞体外培养诱导分化为脂肪细胞

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西南国防医药 2016年第12期26卷 1382-1385页

作者：周芳王金祥李自安刘菊芬白盈盈杨建勇朱光旭潘兴华成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心、干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明650032 昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院

目的体外培养骨髓单个核细胞（BMNCs），并观察其成脂肪细胞分化能力。方法无菌取SD大鼠骨髓制作细胞悬液，差速贴壁法培养第三次贴壁细胞，传代扩增，取3-5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144（VE—cadhe... 详细信息

目的体外培养骨髓单个核细胞（BMNCs），并观察其成脂肪细胞分化能力。方法无菌取SD大鼠骨髓制作细胞悬液，差速贴壁法培养第三次贴壁细胞，传代扩增，取3-5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144（VE—cadherin）和血管内皮细胞生长因子受体．2（KDR）表达；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力。结果通过差速贴壁法可获得相对单一的BMNCs，流式细胞分析表明培养的BMNCs细胞表达CD34、CD44、CD45及CD90等表面标志，但不表达CDl44和KDR；在未经诱导的情况下，培养的BMNCs能自发分化为脂肪细胞；培养BMNCs成脂肪细胞诱导后在第3、5、7d，成脂率分别为（22．4±3．8）％、（55．6±11．4）％以及（82．4±17．7）％，显著高于诱导培养第1d[（1．3±1．1）％，P〈0．011。结论骨髓单个核细胞体外培养后可以诱导分化为脂肪细胞。

关键词：骨髓单个核细胞间充质干细胞脂肪细胞分化

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人脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞株U87上皮间质转化及皮下荷瘤能力的影响

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2016年第6期6卷 369-375页

作者：刘高米洋和法莲陈慧芬陆容李自安何洁赵晶潘兴华成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明650032 昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院 650032 上海市儿童医院中医科 200062

目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)体外模型中对胶质瘤细胞株U87荷瘤能力及其上皮间质转化(EMT)的影响及其可能机制。方法建立裸鼠皮下荷瘤模型,观察hUCMSCs与U87共培养组和U87单独荷瘤组皮下荷瘤能力的差别,免疫组化检测EMT相关基... 详细信息

目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)体外模型中对胶质瘤细胞株U87荷瘤能力及其上皮间质转化(EMT)的影响及其可能机制。方法建立裸鼠皮下荷瘤模型,观察hUCMSCs与U87共培养组和U87单独荷瘤组皮下荷瘤能力的差别,免疫组化检测EMT相关基因组织表达水平,Western Blot检测EMT相关蛋白MMP2,MMP7,MMP9,E-cadherin(E-cad),N-cadherin(N-cad)和Vimentin(VIM)表达情况,q PCR检测EMT相关基因(mmp2,mmp7,mmp9,E-cad,N-cad和vimentin)转录水平。Transwell和Matrigel分别检测hUCMSCs对U87转移能力的影响,两组间比较拟采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果皮下荷瘤结果提示hUCMSCs与U87共培养组皮下荷瘤率高于U87单独荷瘤组,且肿瘤体积较大,RT-PCR结果提示:共培养组和单独培养组相比,E-cad水平下调,N-cad和VIM上调,且基质金属蛋白酶家族MMP2,MMP7,MMP9也有不同程度上调。Western blot结果提示:在蛋白水平共培养组和单独培养组相比,E-cad水平下调2.1倍,N-cad和VIM上调1.0倍,MMP9上调0.9倍;E-cad,N-cad,VIM以及MMP2变化结果与RT-PCR结果一致。免疫组化结果进一步验证hUCMSCs能促进U87表达Ki67,E-cad与N-cad低表达。Transwell和Matrigel实验结果提示hUCMSCs能够促进U87细胞的转移侵袭能力。结论 hUCMSCs能通过促进U87高表达EMT相关基因和增殖相关基因Ki67,从而促进胶质瘤细胞株U87皮下肿瘤形成并发生上皮间质转化,提示hUCMSCs临床应用中应该充分考略受试者是否是潜在胶质瘤患者。

关键词：脐带间质干细胞胶质瘤生物转化

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骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特征研究

骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特征研究

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：朱光旭王金祥周芳李自安刘菊芬阮光萍白盈盈潘兴华成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院

目的体外培养骨髓脂肪祖细胞(BMAPs),比较其与骨髓间充质干细胞(BMSCs)在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差别。方法确无菌取1～2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20%FBS、15μg/ml ... 详细信息

目的体外培养骨髓脂肪祖细胞(BMAPs),比较其与骨髓间充质干细胞(BMSCs)在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差别。方法确无菌取1～2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20%FBS、15μg/ml ECGs)培养基差速贴壁法培养第三次贴壁细胞,取3到5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45以及CD90表达;STEMPRO(?)Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)检测过氧化物酶体增殖激活受体γ(Ppaγ),脂肪酸结合蛋白4(Fabp4),脂蛋白脂肪酶(Lpl),CCAAT/增强子结合蛋白α(Cebpa),葡萄糖转运蛋白4(S1c2a4)以及前脂肪细胞因子1(pread1)mRNA表达。结果传代接种培养24h,BMSCs形态上呈宽大、扁平状,而BMAPs大部呈长三角状,接种48h后BMSCs排列更为有序,而BMAPs多交织成网状。BMAP表达CD34、CD44、CD45以及CD90,BMSC表达CD44以及CD90,未检测到CD34和CD45表达。诱导培养后第4天,BMAPs成脂率显著高于BMSCs组(P<0.01),到第8天,BMAPs成脂率为(87.2±11.67)%),BMSCs组成脂率为(18.5±10.2)%,相差更为显著(P<0.01)。诱导分化后第4、8天,Cebpa、Fabp4、Lp1、Ppaγ和Slc2a4 mRNA在BMAPs表达均显著高于BMSCs(P<0.01)。结论本次实验获得养的1种具有干细胞的生物学特性,同时也高表达脂肪分化相关的特异性基因,可以高效均质性地分化为脂肪细胞的BMAPs。

关键词：骨髓脂肪祖细胞间充质干细胞脂肪细胞分化

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骨髓单个核细胞体外培养诱导分化为脂肪细胞

骨髓单个核细胞体外培养诱导分化为脂肪细胞

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：周芳王金祥李自安刘菊芬白盈盈杨建勇朱光旭潘兴华 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室 650032昆明昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室

目的：体外培养骨髓单个核细胞(BMNCs),并观察其成脂肪细胞分化能力. 方法：脱臼处死1～2月龄雄性SD大鼠,无菌取股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20％FBS、15μg/ml ECGs)培养基差速贴壁法培养第三次贴壁细胞,传代扩增,3到5代细... 详细信息

目的：体外培养骨髓单个核细胞(BMNCs),并观察其成脂肪细胞分化能力. 方法：脱臼处死1～2月龄雄性SD大鼠,无菌取股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20％FBS、15μg/ml ECGs)培养基差速贴壁法培养第三次贴壁细胞,传代扩增,3到5代细胞用于实验.流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144(VE-cadherin)和血管内皮细胞生长因子受体-2(KDR)表达;STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力. 结果：通过差速贴壁法可以有效去除淋巴细胞、红细胞、骨髓间充质干细胞(BMSCs)等细胞而获得相对单一的骨髓单个核细胞(BMNCs),流式细胞分析表明培养的BMNCs细胞表达CD34、CD44、CD45以及CD90等表面标志,但是几乎不表达CD144和KDR;在未经诱导的情况下,培养的BMNCs也可能自发分化为脂肪细胞;培养BMNCs具有极强的脂肪细胞分化能力,成脂肪细胞诱导后在第3、5、7天,BMNCs成脂率分别为(22.4±3.8)％、(55.6±11.4)％以及(82.4±17.7)％,显著高于诱导培养第1天((1.3±1.1)％,P＜0.01). 结论：骨髓单个核细胞体外培养后可以诱导分化为脂肪细胞.

关键词：骨髓单个核细胞体外培养脂肪细胞定向分化

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骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特征研究

骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特征研究

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：朱光旭王金祥周芳李自安刘菊芬阮光萍白盈盈潘兴华 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室 650032昆明昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院

目的体外培养骨髓脂肪祖细胞(BMAPs),比较其与骨髓间充质干细胞(BMSCs)在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差别.方法确无菌取1～2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20％FBS、15μ g/... 详细信息

目的体外培养骨髓脂肪祖细胞(BMAPs),比较其与骨髓间充质干细胞(BMSCs)在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差别.方法确无菌取1～2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20％FBS、15μ g/ml ECGs)培养基差速贴壁法培养第三次贴壁细胞,取3到5代细胞用于实验.流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45以及CD90表达;STEMPRO(R) Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)检测过氧化物酶体增殖激活受体γ(Ppaγ),脂肪酸结合蛋白4(Fabp4),脂蛋白脂肪酶(Lpl),CCAAT/增强子结合蛋白a(Cebpa),葡萄糖转运蛋白4(Slc2a4)以及前脂肪细胞因子1 (pread1) mRNA表达.结果传代接种培养24h,BMSCs形态上呈宽大、扁平状,而BMAPs大部呈长三角状,接种48h后BMSCs排列更为有序,而BMAPs多交织成网状.BMAP表达CD34、CD44、CD45以及CD90,BMSC表达CD44以及CD90,未检测到CD34和CD45表达.诱导培养后第4天,BMAPs成脂率显著高于BMSCs组(P＜0.01),到第8天,BMAPs成脂率为(87.2±11.67)％),BMSCs组成脂率为(18.5±10.2)％,相差更为显著(P＜0.01).诱导分化后第4、8天,Cebpa、Fabp4、Lp1、Ppaγ和Slc2a4 mRNA在BMAPs表达均显著高于BMSCs(P＜0.01).结论本次实验获得养的1种具有干细胞的生物学特性,同时也高表达脂肪分化相关的特异性基因,可以高效均质性地分化为脂肪细胞的BMAPs.

关键词：骨髓脂肪祖细胞间充质干细胞脂肪细胞分化

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