检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验诊断学 2016年第4期20卷 573-576页

作者：周芳王金祥王珂朱向情庞荣清李雪梅朱光旭潘兴华成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省干细胞工程实验室云南昆明650032 昆明医科大学成都军区昆明总医院临床学院云南昆明650500 成都军区昆明总医院检验科云南昆明650032

目的探讨2型糖尿病(type 2diabetes mellitus,T2DM)并发冠状动脉疾病(coronary artery disease,CAD)患者血清中半乳糖凝集素(Galectin-3)的表达情况、与超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)的相关性及其诊断价值。方法采用病例对照研究,选择成都军区昆明总医院CAD患者(CAD组)100例、T2DM并发CAD患者(T2DM-CAD组)100例、T2DM患者(T2DM组)100例及健康对照者(Control组)100例,采集临床标本,分别应用酶联免疫法、免疫比浊法测定Galectin-3和hs-CRP的含量,同时采用酶法检测血糖(Glu)、尿素(BUN)、肌酐(CREA)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的浓度,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则运用直接法检测。统计学分析采用K-S检验,Levene方差齐性检验,Kruskal-Wallis方差分析,Nemenyi检验,χ2检验,Pearson相关分析及ROC曲线。结果 T2DM-CAD组Galectin-3和hs-CRP的水平分别为(10.523±4.552)mg/L和(9.60±3.75)mg/L,均明显高于CAD组的(7.417±1.797)mg/L、(5.57±2.21)mg/L和T2DM组的(6.515±1.499)mg/L、(5.23±2.51)mg/L,差异有统计学意义(P均<0.01);T2DM-CAD组的Galectin-3与hs-CRP呈正相关(r=0.724,P<0.001);在T2DM-CAD组/T2DM组,ROC曲线下面积Galectin-3检测为0.859,hs-CRP检测为0.842,差异无统计学意义(Z=0.245,P>0.05)。结论 Galectin-3对于T2DM是否并发CAD具有与hs-CRP相似效能的诊断价值,为临床诊断提供一种新的生物学标记。

关键词： 2型糖尿病并发冠状动脉疾病半乳糖凝集素3 超敏C反应蛋白

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成体干细胞治疗老年退行性疾病的可行性研究

成体干细胞治疗老年退行性疾病的可行性研究

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：潘兴华庞荣清阮光萍朱向情蔡学敏何洁赵晶刘高米洋 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室

衰老或老年退行性变的原因是组织器官中的衰老死亡细胞更新不足而导致结构与功能减退.成体干细胞具有自我更新和参与、促进损伤修复作用,其生物学特点符合老年退行性疾病治疗要求,多种局部或系统性损伤模型治疗研究结果显示,不同来源的... 详细信息

衰老或老年退行性变的原因是组织器官中的衰老死亡细胞更新不足而导致结构与功能减退.成体干细胞具有自我更新和参与、促进损伤修复作用,其生物学特点符合老年退行性疾病治疗要求,多种局部或系统性损伤模型治疗研究结果显示,不同来源的成体干细胞可用于涉及创伤、缺血、中毒、免疫、衰老等导致的损伤性疾病,将在老年退行性疾病和延缓或逆转衰老治疗中发挥积极作用.

关键词：老年退行性疾病成体干细胞自我更新损伤修复

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脐带间充质干细胞治疗儿童造血干细胞移植后GVHD的疗效观察

脐带间充质干细胞治疗儿童造血干细胞移植后GVHD的疗效观察

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：何洁赵晶庞荣清阮光萍蔡学敏朱向情潘兴华 650032 昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室

随着移植技术的进步,异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)目前已成为治疗白血病的有效方法,移植后成功率增高,死亡率显著降低,但是与移植相关的并发症尤其是移植物抗宿主病(graft-vers... 详细信息

随着移植技术的进步,异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)目前已成为治疗白血病的有效方法,移植后成功率增高,死亡率显著降低,但是与移植相关的并发症尤其是移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)的发生会严重影响患者的生存质量.目前,慢性GVHD(cGVHD)除了应用免疫抑制剂仍无有效应对方法.慢性GVHD的发病机制复杂,几乎影响到所有组织器官,临床表现多样化,其特征类似于自身免疫及其他免疫疾病,如：硬皮病、干燥综合征、免疫性血细胞减少症等.尽管不断有新药出现,为进一步提升患者的长期生存质量,寻求一种慢性移植物抗宿主病的治疗方法是临床亟待解决的问题.脐带间充质干细胞(Umbilical cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSC)免疫原性低,几乎可以影响免疫系统所有的细胞,具有免疫调节、免疫抑制作用,可有效的治疗GVDH.2006年5月Ringden等[3]的报道指出,骨髓间充质干细胞能有效控制常规免疫抑制疗法无效的严重急性GVHD,随后脐带MSC也用于治疗成人aGVHD.本项目组用脐带MSC治疗1例造血干细胞移植后发生GVHD的患儿,取得了较好的疗效,现总结如下.

关键词：造血干细胞移植慢性移植物抗宿主病脐带间充质干细胞治疗临床疗效

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干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后化学发光成像

干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后化学发光成像

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：阮光萍刘菊芬李自安王金祥吕燕波庞荣清潘兴华 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室

目的：树鼩脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后是否成功通常用小动物活体成像仪观察,但活体成像仪价格昂贵,尝试用化学发光成像的方法观察. 方法：用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用最... 详细信息

目的：树鼩脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后是否成功通常用小动物活体成像仪观察,但活体成像仪价格昂贵,尝试用化学发光成像的方法观察. 方法：用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用最适浓度的嘌呤霉素筛选,存活的细胞用6孔板的3个孔培养,贴壁后,3个孔依次加入底物D-荧光素钾盐,用化学发光成像仪拍照,再用软件进行活体成像转换.将转染成功的细胞注入麻醉后的树鼩皮下,树鼩静脉注射底物. 结果：细胞加入底物后有生物发光,发光强度随底物作用时间延长而减弱.树鼩皮下也观察到发光细胞. 结论：C MV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒能成功转染树鼩脐带间充质干细胞,转染成功的细胞用于动物模型治疗后,可进行活体成像,观察细胞在动物体内的分布.

关键词：动物模型脐带间充质干细胞慢病毒转染化学发光成像

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人脐带间充质干细胞制剂创制的关键技术研究

人脐带间充质干细胞制剂创制的关键技术研究

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

脐带间充质干细胞(Human Umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC)来源于新生儿脐带,具有自我复制和多向分化能力,在体内外特定环境诱导下,可分化为骨、软骨、肌肉、肝、内皮和心肌等功能细胞.与骨髓和脂肪来源的间充质干细胞(m... 详细信息

脐带间充质干细胞(Human Umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC)来源于新生儿脐带,具有自我复制和多向分化能力,在体内外特定环境诱导下,可分化为骨、软骨、肌肉、肝、内皮和心肌等功能细胞.与骨髓和脂肪来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)相比,HUC-MSC采集方便、来源充足、可规模化、标准化生产与储存,无伦理学争论,是最具有产业化和临床应用前景的干细胞之一.鉴于HUC-MSC的可塑性和免疫调节作用,在临床上可用于衰老、退变、损伤性疾病的治疗,例如肝肾损伤、脊髓损伤、退行性病变、移植物抗宿主病(GVHD)以及自身免疫性疾病等的治疗.本文对研制UC-MSC制剂的关键技术进行了概述.

关键词：脐带间充质干细胞制剂制备技术质量控制

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树鼩急性放射损伤模型的建立

树鼩急性放射损伤模型的建立

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：王强王永刚马洪磊李自安杨建勇朱慧朱向情何洁潘兴华庞荣清 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室

目的：建立树鼩急性放射损伤模型. 方法：将树鼩32只随机分为对照组(16只)和照射组(16只),照射组给予X射线全身一次性4Gy照射.分别在照射后7、14、21和28d,检测两组血象、血生化指标,并于照射后第2w,处死树鼩做病理检查. 结果：... 详细信息

目的：建立树鼩急性放射损伤模型. 方法：将树鼩32只随机分为对照组(16只)和照射组(16只),照射组给予X射线全身一次性4Gy照射.分别在照射后7、14、21和28d,检测两组血象、血生化指标,并于照射后第2w,处死树鼩做病理检查. 结果：照射组经4Gy射线照射后,总死亡率为50％,对照组无树鼩死亡;照射后照射组白细胞计数(WBC)、淋巴细胞绝对值(LYM＃)先降低后升高;谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(HGB)与对照组相比先降低后升高,之后又降低;血清尿素(BUN)、肌酐(CREA)含量与对照组相比先升高后降低,之后又升高.照射组肺、肝、肾、胃、脾及小肠等重要脏器病理改变明显. 结论：成功地建立了树鼩急性放射损伤模型.

关键词：急性放射损伤动物模型造模技术病理特征

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脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞转移侵袭能力影响初探

脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞转移侵袭能力影响初探

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：刘高米洋朱慧何洁刘菊芬阮光萍李自安潘兴华 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室

目的：观察人源脐带间充质干细胞(HUCMSC)对胶质瘤细胞株U87转移、侵袭能力的影响.方法：建立细胞共培养体系,CCK8法、transwell法和Matrigel法分别检测HUCMSC与U87非接触共培养后,U87增殖、转移、侵袭能力变化.结果：体外细胞共培养体... 详细信息

目的：观察人源脐带间充质干细胞(HUCMSC)对胶质瘤细胞株U87转移、侵袭能力的影响.方法：建立细胞共培养体系,CCK8法、transwell法和Matrigel法分别检测HUCMSC与U87非接触共培养后,U87增殖、转移、侵袭能力变化.结果：体外细胞共培养体系中,HUCMSC共培养U87组(实验组)比U87单独培养组(对照组)转移和侵袭能力都有显著提高,对U87有促增殖作用.结论：在体外共培养体系中,HUCMSC可能通过促进EMT而提高胶质瘤细胞株U87增殖、转移和侵袭潜能.因此,在HUCMSC的临床转化应用中,应该考虑其可能的促肿瘤作用.

关键词：胶质瘤脐带间充质干细胞病灶转移侵袭能力

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人脐带间充质干细胞的标准化制备与鉴定

人脐带间充质干细胞的标准化制备与鉴定

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：赵晶何洁王金祥蔡学敏庞荣清潘兴华 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室

目的：针对临床治疗需要,标准化体外脐带间充质干细胞培养的技术方法. 方法：规范了脐带组织块贴壁法的标准化技术操作,材料的选取,取无菌条件下的剖腹产婴儿脐带,剪成1mm3的组织块,加入含10％胎牛血清的DMEM/F12在培养瓶中培养分离... 详细信息

目的：针对临床治疗需要,标准化体外脐带间充质干细胞培养的技术方法. 方法：规范了脐带组织块贴壁法的标准化技术操作,材料的选取,取无菌条件下的剖腹产婴儿脐带,剪成1mm3的组织块,加入含10％胎牛血清的DMEM/F12在培养瓶中培养分离间充质干细胞,利用倒置相差显微镜观察细胞的生长形态,运用流式细胞仪检测细胞周期及免疫抗原表达,并检测体外多向分化潜能. 结果：脐带组织块贴壁法生长的细胞形态均一,成纤维样的梭形细胞,这些细胞表达CD90,CD105,CD29,不表达CD34,CD45,并在体外成功诱导分化成骨,软骨,脂肪细胞. 结论：在长期重复运用脐带组织块贴壁法可成功从人脐带中分离出间充质干细胞,其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似.

关键词：脐带间充质干细胞体外培养质量鉴定标准化体系

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人脐带间充质干细胞体外规模化、标准化制备技术研究

人脐带间充质干细胞体外规模化、标准化制备技术研究

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第十二届中国实验动物科学年会

目的建立人脐带间充质干细胞标准化、规模化制备技术。方法在无菌条件下,采集剖腹产婴儿脐带30条,长40～50CM,弃被膜、血管后,剪成1mm3的组织块,置于含10％胎牛血清的DMEM/F 12在培养瓶中进行组织块反复贴壁培养,采用倒置相差显微镜... 详细信息

目的建立人脐带间充质干细胞标准化、规模化制备技术。方法在无菌条件下,采集剖腹产婴儿脐带30条,长40～50CM,弃被膜、血管后,剪成1mm3的组织块,置于含10％胎牛血清的DMEM/F 12在培养瓶中进行组织块反复贴壁培养,采用倒置相差显微镜动态观察细胞的生长及形态,对传代培养的第3代细胞采用流式细胞分析法进行细胞周期及表形分析,采用体外定向诱导分化实验观察多向分化潜能。结果组织块贴壁后于第4天开始向周围呈放射状长出细胞,平均12天左右长满瓶底,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于4～5天达80％融合,连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90、CD29阳性率大于99％,CD105阳性率大于81％,不表达CD34,CD45,在体外能分化成骨,软骨,脂肪细胞。平均每条脐带获得细胞量大于6×109个。结论通过多条人脐带重复分离培养,建立了体外规模化、标准化制备人脐带间充质干细胞的制备与鉴定技术规范及标准,可为人脐带间充质干细胞库建设和临床应用提供技术支持和标准化脐带间充质干细胞。

关键词：脐带间充质干细胞制备鉴定,技术规范

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冻存脐带间充质干细胞的临床前制备

冻存脐带间充质干细胞的临床前制备

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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会

作者：何洁赵晶王金祥蔡学敏庞荣清潘兴华 650032昆明成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室

目的：将冻存脐带间充质干细胞制备成一种复苏后直接用于临床的制剂并进行质量检定. 方法：从种子细胞库里面复苏冻存的人脐带间充质干细胞,待细胞培养至P3代时,收集人脐带间充质干细胞,按照4×107/剂的规格加入含5％人血白蛋白... 详细信息

目的：将冻存脐带间充质干细胞制备成一种复苏后直接用于临床的制剂并进行质量检定. 方法：从种子细胞库里面复苏冻存的人脐带间充质干细胞,待细胞培养至P3代时,收集人脐带间充质干细胞,按照4×107/剂的规格加入含5％人血白蛋白、10％DMSO、85％复方电解质溶液的细胞保护液,形成制剂,并对其进行质量检定,包括无菌检测、支原体检测、细胞内外源致病因子检测、内毒素检测、免疫表型检测、稳定性检测、异常免疫学反应检测以及残留物检测. 结果：按照标准化工艺制备的人脐带间充质干细胞制剂无菌、无支原体污染,无内外致病因子,毒素＜2EU,能抑制异源淋巴细胞的增殖,抑制率随脐带间充质干细胞数量增加而增大,牛血清残留＜50ng/袋,制剂冻存前细胞活性＞90％,复苏后活性＞85％. 结论：按照此方法制备的人脐带间充质干细胞制剂符合临床治疗要求的质量检定要求.

关键词：脐带间充质干细胞制剂制备技术质量检定

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