检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2002年第2期18卷 149-154页

作者：刘红旗黄勇程坚彭大新贾立军张如宽刘秀梵扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009

为了解H9N2 亚型禽流行性感冒 (流感 )病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况 ,对某鸡场的感染鸡群进行连续 4年的跟踪监测 ,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2 亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析。结果... 详细信息

为了解H9N2 亚型禽流行性感冒 (流感 )病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况 ,对某鸡场的感染鸡群进行连续 4年的跟踪监测 ,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2 亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析。结果表明 ,在使用第一次分离的病毒株制备的疫苗后 8个月分离到的病毒株 ,其HA基因仅发生一个氨基酸的差异 ;但在继续使用该疫苗的第二个和第三个年头分离的病毒株 ,它们的HA基因则一直在发生较大的变化。这一发现对进一步研究禽流感病毒在不断使用疫苗的选择压力下发生变异的规律。

关键词：疫苗免疫选择压力 H9N2亚型禽流行性感冒病毒 HA基因遗传变异

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我国部分地区不同动物来源新城疫病毒的分子流行病学研究

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病毒学报 2002年第3期18卷 264-269页

作者：吴艳涛倪雪霞万洪全刘文博刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

对从我国部分地区 1985～ 2 0 0 1年间分离的 2 6株新城疫病毒毒株进行研究 ,克隆其融合蛋白 (F)基因 ,分析相应的核苷酸 (nt)序列。根据绘制的系统进化发生树和F基因上三种限制性内切酶 (RE)位点分布 ,确定了这些毒株的基因型分类地位... 详细信息

对从我国部分地区 1985～ 2 0 0 1年间分离的 2 6株新城疫病毒毒株进行研究 ,克隆其融合蛋白 (F)基因 ,分析相应的核苷酸 (nt)序列。根据绘制的系统进化发生树和F基因上三种限制性内切酶 (RE)位点分布 ,确定了这些毒株的基因型分类地位。除 2个毒株属于已知的VIb亚型外 ,其余 2 4个毒株分别属于新发现的基因Ⅸ型、Ⅵf亚型、Ⅵg亚型和VⅡc亚型。基因Ⅸ型毒株的F基因 5 4 0nt存在RsaⅠ位点 ,同时缺乏 1198ntHinfⅠ位点、14 78ntBstOⅠ位点和 16 2 5ntRsaⅠ位点 ;Ⅵf和Ⅵg亚型毒株不具有国外其它Ⅵ型毒株的 872ntRsaⅠ位点 ;Ⅶc亚型的RE位点分布和Ⅶa亚型、Ⅶb亚型、Ⅷ型毒株不同 ,鹅源毒株均出现 973ntRsaⅠ位点 ,7个鹅源毒株还出现了特有的 12 4 9ntRsaⅠ位点。在F基因编码的氨基酸中 ,基因Ⅸ型毒株出现Ile9→Val9和Val10 6→Ala10 6的替换。

关键词：部分地区中国动物来源新城疫病毒分子流行病学

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致人腹泻产气荚膜梭菌的分离鉴定与基因分型

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中国人兽共患病杂志 2002年第4期18卷 36-38页

作者：张小荣文其乙刘秀梵焦新安扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的　研究产气荚膜梭菌与我国人群中引起食物中毒的关系。方法　从江苏扬州三家医院采集腹泻病人临床粪便样品进行细菌分离培养与生化鉴定 ,然后根据ＧｅｎｅＢａｎｋ中已发表的产气荚膜梭菌毒素基因序列 ,设计出针对ｃｐａ、ｃｐｂ、... 详细信息

目的　研究产气荚膜梭菌与我国人群中引起食物中毒的关系。方法　从江苏扬州三家医院采集腹泻病人临床粪便样品进行细菌分离培养与生化鉴定 ,然后根据ＧｅｎｅＢａｎｋ中已发表的产气荚膜梭菌毒素基因序列 ,设计出针对ｃｐａ、ｃｐｂ、ｅｔｘ、ｉＡ、ｃｐｅ和ｃｐｂ2的 6对引物 ,应用多重ＰＣＲ方法对鉴定出的产气荚膜梭菌进行基因分型。结果　从 40份样品中分离到 8株 (占 2 0 %)产气荚膜梭菌 ,分型结果均为Ａ型 ,其中 4株还扩增出ｃｐｂ2基因。结论　产气荚膜梭菌是致人类腹泻的重要病原菌 ,

关键词：腹泻产气荚膜梭菌分离鉴定基因分型多重PCR

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应用多重PCR快速诊断山羊猝死症的研究

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中国兽医科技 2002年第3期32卷 10-12页

作者：张小荣文其乙刘秀梵焦新安扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

对 2例突然死亡的山羊病料进行细菌分离培养 ,再应用多重PCR方法对可疑菌进行鉴定和基因分型 ,结合流行病学、临床症状、病理变化 ,诊断为由A型产气荚膜梭菌引起的山羊猝死症 ,通过毒素中和试验加以验证 ,两者结果相一致。

关键词：多重PCR 产气英膜梭菌山羊猝死症诊断

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两株H_9N_2亚型禽流行性感冒病毒HA基因序列分析

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病毒学报 2002年第3期18卷 285-287页

作者：程坚刘红旗彭大新张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

The complete cDNA sequences of HA genes of two AIV isolates were presented in this paper The result of comparative sequence analysis seemed to suggest that these two isolates may be identical to three other AIV strains(H 9N 2) isolated from HongKong recently and these five strains may have the same origin in that the identity of the HA protein sequences of these AIV isolates is higher than 95%

关键词： H9N2亚型禽流行性感冒病毒 HA基因序列分析禽流感病毒血凝素基因

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表达鸡Ⅱ型干扰素基因的重组鸡痘病毒的构建

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农业生物技术学报 2002年第2期10卷 152-155页

作者：程坚刘秀梵彭大新吴艳涛扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009

以插入鸡Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)cDNA序列的重组质粒AIFN为模板,根据鸡痘病毒早晚期启动子PE/L的序列设计上游引物,鸡IFN-Ⅱ基因的cDNA3’端序列设计下游引物,采用PCR法扩增包括启动子PE/L和鸡IFN-Ⅱ全长cDNA序列的基因片段。将该扩增片段... 详细信息

以插入鸡Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)cDNA序列的重组质粒AIFN为模板,根据鸡痘病毒早晚期启动子PE/L的序列设计上游引物,鸡IFN-Ⅱ基因的cDNA3’端序列设计下游引物,采用PCR法扩增包括启动子PE/L和鸡IFN-Ⅱ全长cDNA序列的基因片段。将该扩增片段定向插入鸡痘病毒转移载体1175中,获重组转移载体1175IFN,用以转染已感染鸡痘病毒282E4疫苗株(wt-FPV)的鸡(Gallusgallus)胚成纤维细胞(CEF)。1175IFN与wt-FPV基因组DNA之间的同源重组产生了表达IFN-Ⅱ的重组鸡痘病毒rFPV-IFN-Ⅱ。通过在含X-gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化rFPV-IFN-Ⅱ。以细胞病变抑制实验证实,rFPV-IFN-Ⅱ感染的CEF表达了具有抗水泡性口炎病毒(VSV)活性的鸡IFN-Ⅱ。rFPV-IFN-Ⅱ(M.O.I=0.01)感染CEF72h后,培养上清中IFN-Ⅱ的表达量为1280U/mL。动物实验表明,rFPV-IFN-Ⅱ接种雏鸡7d或14d后,其在体内表达的IFN-Ⅱ可显著减轻载体鸡痘病毒对1日龄SPF雏鸡体重增长的抑制作用。

关键词：鸡Ⅱ型干扰素重组鸡痘病毒表达

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多重PCR方法快速检测粪样中产气荚膜梭菌

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中国预防兽医学报 2002年第1期24卷 48-51页

作者：文其乙刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

建立了多重聚合酶链反应 (multiplexPCR)检测产气荚膜梭菌的α_毒素和肠毒素 (enterotoxin)基因。该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌。首先猪粪便样品经前处理后 ,接种选择性培养基 ,再挑取单个菌落溶于超纯水... 详细信息

建立了多重聚合酶链反应 (multiplexPCR)检测产气荚膜梭菌的α_毒素和肠毒素 (enterotoxin)基因。该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌。首先猪粪便样品经前处理后 ,接种选择性培养基 ,再挑取单个菌落溶于超纯水中 ,煮沸提抽 ,制备样品DNA ,进行PCR检测。从实验中我们成功的扩增出 32 4bp的α毒素基因片段和 2 33bp的肠毒素基因片段。以人工污染样品 10倍系例稀释后进行检测 ,该方法的检测灵敏度达到 1.0× 10 4 CFU/g并对 5 8份猪粪便样品检测 ,获得 5 3株产气荚膜梭菌 ,分离率为 91%,其中 4株为带有肠毒素的产气荚膜杆菌 ,占整个分离菌株的 7.5 %。因此多重PCR方法在检测粪样中的产气荚膜梭菌是一种非常有用的方法并可以快速检出肠毒素 ,从而避免了使用动物作定型试验。

关键词：产气荚膜梭菌 α-毒素肠毒素多重聚合酶链反应粪样检测

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两种消毒剂对禽流感病毒的杀灭效果比较

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中国家禽 2002年第24期24卷 18-19页

作者：卢建红邵卫星刘玉良韦栋平吴艳涛张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

我们受湖南省畜牧兽医总站和浏阳市消毒剂厂的委托,对两种消毒剂产品(消毒威和流感灭)进行了杀灭禽流感病毒(AIV)的试验,现报告如下.

关键词：消毒剂禽流感病毒杀灭效果比较

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表达绿色荧光蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建与鉴定

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 119-122页

作者：王芳焦新安刘文博张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白 (GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。在体外稳定试验中 ,重组菌经LB固体及液体培养基连续传 15代后 ,单个菌落和菌液均呈绿色 ;在体内稳定试验中 ,经ICR小鼠连续传代 10次 ,从肝脏、脾脏中分离的细... 详细信息

应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白 (GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。在体外稳定试验中 ,重组菌经LB固体及液体培养基连续传 15代后 ,单个菌落和菌液均呈绿色 ;在体内稳定试验中 ,经ICR小鼠连续传代 10次 ,从肝脏、脾脏中分离的细菌经LB固体培养仍为绿色 ,证明构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌是稳定的。SDS_PAGE结果显示 ,鼠伤寒沙门氏菌表达的GFP分子量约为 2 7kD ,这与预计的分子量大小一致。用免疫剂量的重组细菌接种BALB/C小鼠后 ,观察 1个月未见有异常现象 ,同时剖检后也未见脏器有眼观病变。表达GFP的重组鼠伤寒沙门氏菌的构建为减毒沙门氏菌作为活载体的基因工程疫苗的研制提供一个优良模型 ,为研究沙门氏菌疫苗和沙门氏菌疾病的致病机理提供了一个有力的工具。

关键词：基因表达基因重组基因构建基因鉴定绿色荧光蛋白减毒鼠伤寒沙门氏菌

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H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的遗传变异

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2002年第2期23卷 6-9页

作者：刘红旗彭大新程坚贾立军张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

连续3年对某鸡场禽流感感染鸡群进行跟踪监测,对使用疫苗前与使用疫苗后不同时段分离的H9N2亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因进行全序列分析,研究其H9N2亚型禽流感病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异。结果表明:在使用第1次分... 详细信息

连续3年对某鸡场禽流感感染鸡群进行跟踪监测,对使用疫苗前与使用疫苗后不同时段分离的H9N2亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因进行全序列分析,研究其H9N2亚型禽流感病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异。结果表明:在使用第1次分离的病毒株制备的疫苗后8个月分离该病毒株,其HA基因仅有1个氨基酸发生变异;继续使用该疫苗第2年分离的该病毒株,其HA基因有20个氨基酸发生变异。

关键词： H9N2亚型血凝素基因遗传变异禽流感病毒疫苗选择压力

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