检索结果-内蒙古大学图书馆

饲料研究 2024年第14期47卷 128-133页

作者：张寒蒋永嘉刘为王志强肖霞扬州大学兽医学院兽医药理毒理教研室江苏扬州225009

试验为建立猪小肠内容物中苯甲酸及其代谢物马尿酸的高效液相色谱(HPLC)测定方法,采用乙酸乙酯为提取剂,亚铁氰化钾-乙酸锌为蛋白沉淀剂,提取样品中的苯甲酸,流动相为甲醇∶0.02%磷酸水;水、亚铁氰化钾-乙酸锌共同提取样品中的马尿酸,... 详细信息

试验为建立猪小肠内容物中苯甲酸及其代谢物马尿酸的高效液相色谱(HPLC)测定方法,采用乙酸乙酯为提取剂,亚铁氰化钾-乙酸锌为蛋白沉淀剂,提取样品中的苯甲酸,流动相为甲醇∶0.02%磷酸水;水、亚铁氰化钾-乙酸锌共同提取样品中的马尿酸,流动相为甲醇∶20 mmol/L乙酸铵溶液,紫外检测波长230 nm。结果显示:在猪小肠内容物中苯甲酸添加浓度为0.10~10.00μg/g内线性关系良好(R^(2)=0.9994);检测限为0.05μg/g,定量限为0.10μg/g;添加浓度在0.10、0.50、1.00、5.00、10.00μg/g时,回收率为(101.62±4.49)%,批内和批间变异系数分别低于4.80%和9.96%。猪小肠内容物中马尿酸添加浓度在0.30~10.00μg/g内线性关系良好(R^(2)=1.0000);检测限和定量限分别为0.10μg/g和0.30μg/g;马尿酸添加浓度在0.50、1.00、5.00、20.00μg/g时,回收率为(90.3±4.00)%,批内和批间变异系数分别低于5.93%和5.26%。研究表明,此方法苯甲酸及马尿酸预处理方法简单省时,无须固相萃取及使用有毒有害溶剂,节约成本,为猪小肠内容物中苯甲酸及马尿酸的检测提供参考。

关键词：猪苯甲酸马尿酸 HPLC 小肠内容物

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猪肝中β-受体激动剂多残留的样品前处理方法比较及同时检测

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分析测试学报 2012年第3期31卷 290-295页

作者：刘敏刘戎王立琦贺利民贺倩倩张高奎华南农业大学兽医学院兽医药理毒理研究室广东广州510642

比较了乙酸铵提取法(即农业部1025号公告-18-2008方法)、乙腈直接提取法及10%碳酸钠-乙腈溶液提取法对猪肝脏中9种β-受体激动剂残留的提取效果。结果表明,乙酸铵提取法对非诺特罗和喷布特罗等药物的回收率较低(小于20%);乙腈直接提取... 详细信息

比较了乙酸铵提取法(即农业部1025号公告-18-2008方法)、乙腈直接提取法及10%碳酸钠-乙腈溶液提取法对猪肝脏中9种β-受体激动剂残留的提取效果。结果表明,乙酸铵提取法对非诺特罗和喷布特罗等药物的回收率较低(小于20%);乙腈直接提取法可有效提取出喷布特罗,其回收率达79%,但对非诺特罗的回收率仅为32%;而10%碳酸钠-乙腈溶液提取9种药物的效果明显好于其他两种方法,除了非诺特罗的回收率为72%外,其他8种药物的回收率均在80%以上。基于此,建立了猪肝脏中9种β-受体激动剂残留检测的高效液相色谱-串联质谱法。在优化条件下,9种药物在0.50～25μg/kg范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99;在0.50、2.0、10μg/kg 3个加标水平的回收率为71%～105%,相对标准偏差均小于15%;9种药物的检出限均达0.2μg/kg。方法的准确度和精密度达到残留分析要求。

关键词： β-受体激动剂前处理猪肝脏高效液相色谱-串联质谱比较

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应激诱发的海马神经元突触增强参与大鼠的新环境学习

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生理学报 2011年第2期63卷 138-142页

作者：刘娜邢华江善祥南京农业大学动物医学院兽医药理学与毒理学实验室南京210095 扬州大学兽医学院扬州225009

本文旨在研究应激对海马新环境空间学习记忆的损伤作用机制。在大鼠海马CA1区埋植电极,刺激Schaffer侧枝记录CA1区树突层的兴奋性突触后场电位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP),探索应激对大鼠新环境空间学习的突触可... 详细信息

本文旨在研究应激对海马新环境空间学习记忆的损伤作用机制。在大鼠海马CA1区埋植电极,刺激Schaffer侧枝记录CA1区树突层的兴奋性突触后场电位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP),探索应激对大鼠新环境空间学习的突触可塑性的影响。同时研究了再次新环境空间学习时,应激对动物海马的突触可塑性的影响。结果显示,在未给予外源性强直刺激(高频或低频刺激)诱导的前提下,应激适应大鼠首次探索新环境时诱发了海马神经元的突触抑制;而应激未适应大鼠首次探索新环境时却诱发了海马神经元的突触增强。在首次探索新环境24h后,再次将应激未适应大鼠放入"新环境"时,大鼠海马的突触传递却未发生显著变化。以上结果表明,应激通过产生突触增强来实现对海马新环境空间学习过程的损害,但是海马可通过再次接触经验对应激产生适应。

关键词：应激突触可塑性海马新环境探索大鼠

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沙拉沙星对实验性猪链球菌病及猪水肿病的药效学

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中国兽医学报 2002年第2期22卷 165-167页

作者：方炳虎王志强陈杖榴陈燕凌华南农业大学兽医药理研究室广东广州510642 扬州大学畜牧兽医学院江苏扬州225009

将兽医专用氟喹诺酮类药物沙拉沙星以不同治疗方案分别对实验性猪链球菌病和猪水肿病进行药效学研究。在每天总剂量相同的情况下 ,每天 1次与每天 2次给药取得了较好而相似的疗效 (P>0 .0 5 ) :对猪链球菌病 ,每天总剂量为 10 m g/ k... 详细信息

将兽医专用氟喹诺酮类药物沙拉沙星以不同治疗方案分别对实验性猪链球菌病和猪水肿病进行药效学研究。在每天总剂量相同的情况下 ,每天 1次与每天 2次给药取得了较好而相似的疗效 (P>0 .0 5 ) :对猪链球菌病 ,每天总剂量为 10 m g/ kg时 ,肌注给药的治愈率分别为 10 0 %和 90 %,但在迅速改善临床症状方面 ,每天 1次给药优于每天 2次(P<0 .0 5 ) ;对猪水肿病 ,每天总剂量为 5 mg/ kg时 ,肌注给药的治愈率均为 10 0 %。结果表明 ,在总剂量相同时 ,以大剂量、长间隔与以较小剂量、短间隔治疗实验性猪链球菌病与猪水肿病 ,均取得相当的疗效。

关键词：沙拉沙星猪链球菌病猪水肿病药效学实验性

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猪食欲肽受体2激动剂细胞筛选模型的建立及对天然中药提取物受体激动剂的筛选

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中国畜牧兽医 2020年第2期47卷 407-415页

作者：崔子鹤张海洁蔺帅姜军娜肖霞刘源王志强扬州大学兽医学院兽医药理毒理研究室扬州225009 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

本研究旨在构建猪食欲肽受体2(pOX2R)的真核表达载体,探究其对天然中药提取物的药理学活性。将成功构建的pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R和报告质粒PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]分别瞬时转染HEK293T细胞,利用萤火虫荧光素酶报告基因检测法测定阳性... 详细信息

本研究旨在构建猪食欲肽受体2(pOX2R)的真核表达载体,探究其对天然中药提取物的药理学活性。将成功构建的pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R和报告质粒PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]分别瞬时转染HEK293T细胞,利用萤火虫荧光素酶报告基因检测法测定阳性细胞株在不同浓度激动剂Orexin A和Orexin B以及颉颃剂TCS作用下胞内cAMP水平。将目的质粒与报告质粒稳定共转染CHO-K1细胞,利用G418和潮霉素B进行抗性筛选,获得6株阳性细胞株和5株阴性细胞株。对具有促进食欲作用的18种天然中药材的36种提取物进行筛选,并用瞬时共转染了pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R和PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]的HEK293T细胞作为研究对象,对阳性提取物进行剂量效应分析。结果显示,Orexin A与Orexin B单独作用细胞时,可以使萤火虫荧光素酶的活性提高,呈明显的剂量效应关系,当与颉颃剂TCS联合作用时,TCS可以颉颃激动剂对受体的激活作用。通过优化药物刺激时间和二甲亚砜(DMSO)用量后,建立了以pOX2R为靶点的稳定、可靠的激动剂细胞筛选模型。经过初筛和复筛,得到了甘草水提物、白莲子和山药醇提物3种可以使阳性细胞荧光素酶表达量升高的提取物。提取物在一定浓度范围内可以刺激胞内荧光素酶的表达,呈剂量效应关系。以上结果为筛选出可以提高猪生产效率的先导化合物及相关药物研究提供参考依据。

关键词：猪食欲肽受体2(pOX2R) 萤火虫荧光素酶天然中药材筛选

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猪β2肾上腺素能受体基因真核表达载体及突变体的构建及表达

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中国畜牧兽医 2017年第11期44卷 3130-3136页

作者：张海洁谢华杰江礼捷连俊伟刘敏闵天奇王志强扬州大学兽医学院兽医药理毒理研究室扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

试验旨在构建猪β_2肾上腺素能受体(β_2adrenergic receptor,β_2AR)基因及其突变体真核表达载体,并鉴定其在HEK293T细胞中的表达。通过猪基因组DNA克隆猪β_2AR基因,利用同源重组技术将其连接至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达... 详细信息

试验旨在构建猪β_2肾上腺素能受体(β_2adrenergic receptor,β_2AR)基因及其突变体真核表达载体,并鉴定其在HEK293T细胞中的表达。通过猪基因组DNA克隆猪β_2AR基因,利用同源重组技术将其连接至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-β_2AR,加入c-myc标签后命名为myc-pcDNA3.1(+)-β_2AR。以真核表达载体为模板构建突变体myc-pcDNA3.1(+)-β_2AR-D130N、myc-pcDNA3.1(+)-β_2AR-C285S和mycpcDNA3.1(+)-β_2AR-D130N/C285S,并将构建的真核表达载体和突变体转染HEK293T细胞,利用Western blotting技术验证其表达。结果显示,猪β_2AR基因已正确重组入pcDNA3.1(+)载体中;经测序鉴定,猪β_2AR的第130位天冬氨酸成功突变为天冬酰胺,第285位半胱氨酸成功突变为丝氨酸。Western blotting检测结果证明所构建的表达载体均可在HEK293T细胞中表达。本研究成功构建了猪β_2AR野生型的真核表达载体及2个单点突变和1个双点突变的突变体,并验证其在HEK293T细胞中正常表达,为进一步研究猪β_2AR蛋白表达及其药理学活性奠定基础。

关键词：猪 β2AR基因真核表达载体突变体 Western blotting

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氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌在鸭中的体内药动药效同步模型研究

氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌在鸭中的体内药动药效同步模型研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：蒋永嘉肖霞江礼捷李聪聪卞玲张惠茹王志强扬州大学兽医学院兽医药理毒理研究室

[目的]本研究旨在建立氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌在鸭中的体内药动药效（PK/PD）同步模型,确定最佳PK/PD参数值,为临床合理使用氟苯尼考,提高疗效,减缓耐药性的产生或富集提供理论支持。[方法]测定氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌临床分离株r-... 详细信息

[目的]本研究旨在建立氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌在鸭中的体内药动药效（PK/PD）同步模型,确定最佳PK/PD参数值,为临床合理使用氟苯尼考,提高疗效,减缓耐药性的产生或富集提供理论支持。[方法]测定氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌临床分离株r-3株的最小抑菌浓度（MIC）,最小杀菌浓度（MBC）,预防突变浓度（MPC）。以7日龄雏鸭为对象,建立鸭疫里默氏杆菌感染模型。对感染鸭口服不同剂量氟苯尼考（10mg/kg、30mg/kg、60mg/kg）,高效液相色谱（HPLC）法测定雏鸭血清中的氟苯尼考浓度,研究氟苯尼考在感染鸭中的药动学特征。60只感染雏鸭,随机选取6只测定血液、肺脏和肝脏中的载菌量。其余54只随机分为9组,分别口服60、50、40、35、30、20、15、10、0mg/kg氟苯尼考,一天给药2次,连续3天。最后一次给药12h后处死雏鸭,测定血液、肺脏和肝脏中的载菌量。利用Inhibitory Effect Imax模型拟合PK/PD参数与抗菌效果之间的相关性。[结果]氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌r-3株的MIC、MBC、MPC值分别为0.5μg/mL、1μg/mL、1.6μg/mL。通过腹腔注射10～8cfu/mL的菌液感染雏鸭血液、肝脏和肝脏载菌量分别稳定在105cfu/mL、10～7cfu/g和10～7cfu/g,死亡率为20%。药动学结果显示,在10～60mg/kg范围内,氟苯尼考的C,AUC与给药剂量有良好的线性关系,相关系数分别大于0.9884和0.9988。将PK/PD参数AUC/MIC分别与血液、脏器中细菌减少量用Inhibitory Effect Imax模型进行拟合,拟合相关系数良好,R为0.9483、0.9327、0.9341 （血、肝、肺）,说明AUC/MIC是最佳PK/PD相关参数。体内药效学研究中,氟苯尼考给药后,细菌减少的log值随着药物浓度的增加而呈现梯度的变化。以不同的器官作为靶组织,氟苯尼考PK/PD参数AUC/MIC与体内药物抗菌效应拟合良好（R分别为0.9483、0.9327、0.9341）。在血液中,当AUC/MIC的值分别为14.00、34.29和53.75时,氟苯尼考在体内呈现抑菌、杀菌和清除作用,即鸭疫里默氏杆菌载菌量分别下降0、3和4 Logcfu/mL;在肝脏中,当AUC/MIC的值分别为10.54、35.07和49.76时,氟苯尼考在体内呈现抑菌、杀菌和清除作用;在肺脏中,当AUC/MIC的值分别为7.64、26.09和37.67时,氟苯尼考在体内呈现抑菌、杀菌和清除作用。[结论]氟苯尼考对鸭疫里默氏杆菌在鸭中的体内药动药效（PK/PD）同步模型的最佳PK/PD参数值为AUC/MIC,当药物作用于血液和肝脏时,达到抑菌、杀菌和清除作用的PK/PD参数仅较小差异,而药物作用于肝脏时,则差异显著,这可能与靶器官的特异性有关。

关键词：氟苯尼考鸭疫里默氏杆菌体内药动药效同步模型雏鸭

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动物园大肠杆菌中mcr-1和blaNDM基因的流行特征及传播机制

动物园大肠杆菌中mcr-1和blaNDM基因的流行特征及传播机制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：高艳云李瑞超王志强扬州大学兽医学院兽医药理毒理研究室

目的耐药基因mcr-1、bla可介导粘菌素和碳青霉烯耐药,本研究主要分析了扬州某动物园大肠杆菌中mcr-1和bla耐药基因的流行情况及传播机制。材料与方法本研究于2022年9月从江苏省扬州市某动物园采集188份样品,其中包括动物（虎、豹、狼等...

目的耐药基因mcr-1、bla可介导粘菌素和碳青霉烯耐药,本研究主要分析了扬州某动物园大肠杆菌中mcr-1和bla耐药基因的流行情况及传播机制。材料与方法本研究于2022年9月从江苏省扬州市某动物园采集188份样品,其中包括动物（虎、豹、狼等）粪便及动物园环境样品,分别用含1μg/mL粘菌素的LB培养基和含2μg/mL美罗培南的麦康凯培养基筛选耐药菌;耐药菌分离纯化后通过MALDI-TOF MS鉴定细菌种属,并采用PCR技术检测mcr-1和bla基因

关键词：

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同时携带mcr-8、blaNDM-1以及tmexCD1-toprJ1的肺炎克雷伯菌株特征分析

同时携带mcr-8、blaNDM-1以及tmexCD1-toprJ1的肺炎克雷伯菌株特...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：杨彭斌高艳云李瑞超王志强扬州大学兽医学院兽医药理毒理研究室

目的肺炎克雷伯菌,是一种革兰氏阴性杆菌,是重要的人畜共患病原。肺炎克雷伯菌的耐药机制主要包括产生耐药酶、形成生物被膜、外膜孔蛋白突变、外排泵等,耐药基因的水平传播是多重耐药菌株临床加剧的重要原因。本研究拟对禽养殖环境中...

目的肺炎克雷伯菌,是一种革兰氏阴性杆菌,是重要的人畜共患病原。肺炎克雷伯菌的耐药机制主要包括产生耐药酶、形成生物被膜、外膜孔蛋白突变、外排泵等,耐药基因的水平传播是多重耐药菌株临床加剧的重要原因。本研究拟对禽养殖环境中的耐药肺炎克雷伯菌流行以及基因组特征进行分析。

关键词：

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利用三代纳米孔测序技术对江苏某鹅厂粪便中耐药基因丰度及流行情况的研究

利用三代纳米孔测序技术对江苏某鹅厂粪便中耐药基因丰度及流行情...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：彭凯李岩李瑞超王志强扬州大学兽医学院兽医药理毒理研究室

[目的]结合第三代牛津纳米孔测序技术与宏基因组技术,探究鹅厂环境中耐药基因的整体分布及流行情况。[方法]2019年4月从江苏省某商品化鹅厂采集粪样3份、肛拭子10份,分别用肉汤富集增菌培养,增菌后的菌液在含有复方新诺明（1ug/ml）、... 详细信息

[目的]结合第三代牛津纳米孔测序技术与宏基因组技术,探究鹅厂环境中耐药基因的整体分布及流行情况。[方法]2019年4月从江苏省某商品化鹅厂采集粪样3份、肛拭子10份,分别用肉汤富集增菌培养,增菌后的菌液在含有复方新诺明（1ug/ml）、头孢噻呋钠（8ug/ml）的LB药板筛选耐药菌,粪便样品中的平板耐药菌直接用含药肉汤富集培养,肛拭子样品中耐药菌进行单菌分离并分别增菌,增菌后混合菌液,两类样品分别进行质粒中提;对提取的质粒进行三代MinION单分子测序,利用生物信息学方法分析质粒序列中耐药基因和可移动元件的流行分布情况。[结果]对粪便和肛拭子样品进行耐药质粒测序,分别获得了198MB和523MB的原始reads,reads数目分别为69462条和132425条,0.62%和6.75%的reads含有至少一个耐药基因;根据耐药基因序列的测序深度,其中粪便样品中丰度较高的耐药基因有aadA、tet（A）、aph6-Ⅰ、dfrA12、aac（3）-Ⅱ、aph（3"）-Ⅰ、sul2、sul1、cmlA、rmtB、bla,肛拭子样品中丰度较高的耐药基因有bla、bla、aph（3"）-Ⅱa、floR、tet（A）、tetR;粪便样品中耐药基因主要介导氨基糖苷类、磺胺类、氯霉素类以及四环素类药物耐药,肛拭子样品中耐药基因主要介导β-内酰胺类、氯霉素类以及氨基糖苷类药物耐药。粪便样品中,含有转座酶、重组酶、整合酶基因的reads占总reads的2.64%,在肛拭子样品中,这个比例达到42.43%。[结论]该鹅厂粪便样品与肛拭子样品中耐药基因的分布存在明显差异性,且肛拭子样品中耐药基因检出率大于5%,其中粪便样品中丰度最高的为氨基糖苷类药物耐药基因,肛拭子样品中的为β-内酰胺类药物耐药基因,且在两个样品中都检出了丰富的可介导基因转移的遗传元件,这些介导基因转移的遗传元件与耐药基因共存,极大的增加了耐药基因的传播风险,并有可能给人类健康安全带来巨大威胁。

关键词：耐药基因 MinION测序宏基因组丰度

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