检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2019年第5期41卷 449-454,461页

作者：孙王杨吉刘源刘子拓范佳文石火英扬州大学兽医学院/农业部畜禽传染病学重点开放实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

本研究从有流感症状的病猪中分离到一株H9N2亚型猪流感病毒(SIV),命名为A/swine/Jiangsu/1/2015(SW/JS/1/15)。为探究其遗传特征和生物学特性,本研究采用RT-PCR技术扩增其全部基因节段后测序并进行遗传分析,并研究了其对鸡和豚鼠的致病... 详细信息

本研究从有流感症状的病猪中分离到一株H9N2亚型猪流感病毒(SIV),命名为A/swine/Jiangsu/1/2015(SW/JS/1/15)。为探究其遗传特征和生物学特性,本研究采用RT-PCR技术扩增其全部基因节段后测序并进行遗传分析,并研究了其对鸡和豚鼠的致病特性。遗传进化分析显示,分离病毒SW/JS/1/15株是由BJ/94系、DK1系、G1系和F/98系4个分支病毒重组而成,8个基因节段均属于G57基因型。分离株HA蛋白裂解位点为PSRSSR*GL,符合低致病性流感病毒的特征。HA蛋白有9个潜在糖基化位点,其中218位糖基化位点缺失,145位与313位各新增一个糖基化位点。与疫苗株SH/F/98、SD/6/96、GD/SS/94相比,分离病毒HA抗原位点发生了G^90E、S^127R、S^145N、D^153G、N^167S、A^168N、A^198T、T^200R、N^201D、和Q^235M(H9numbering)突变;NA蛋白发生6个氨基酸突变:K^367R、K/E^368N、D^369N、D^401E、K^143N和T^434P。同时NA蛋白颈部缺失aa63~aa65。分离病毒的8个基因节段与2株禽源H9N2病毒的相应基因高度同源,其6个内部基因与两株人源H7N9病毒的内部基因高度同源。致病性试验结果显示分离病毒可以感染鸡和豚鼠,但不能在豚鼠群内水平传播,且可能作为H7N9等新型流感病毒内部基因供体,同时表明猪可以感染禽流感病毒(AIV),且可能是AIV获得感染哺乳动物能力的过渡宿主。本研究为H9N2亚型SIV的致病性以及遗传特征的研究提供科学依据。

关键词：猪流感病毒 H9N2 遗传进化分析致病性分析

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趋化因子IP-10在介导病毒感染性疾病中的研究进展

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病毒学报 2019年第4期35卷 672-678页

作者：胡艮娣王晓泉陈祥张评浒江苏省新药筛选重点实验室中国药科大学南京210009 农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学扬州225009 江苏省人兽共患病重点实验室扬州大学扬州225009 转化医学研究院江苏省中西医结合老年病防治重点实验室扬州大学医学院扬州225009

干扰素诱生蛋白10(Interferon-inducible protein-10,IP-10)是由IFN-γ诱导产生的一个分子量为10kD的趋化因子,通过与受体CXCR3作用,发挥趋化作用与多种生物学功能。IP-10作为Th1型促炎趋化因子,招募多种细胞到达炎症部位,在炎症中发挥... 详细信息

干扰素诱生蛋白10(Interferon-inducible protein-10,IP-10)是由IFN-γ诱导产生的一个分子量为10kD的趋化因子,通过与受体CXCR3作用,发挥趋化作用与多种生物学功能。IP-10作为Th1型促炎趋化因子,招募多种细胞到达炎症部位,在炎症中发挥作用。同时IP-10在包括危害人类较大的病毒性疾病如乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)、人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)、H7N9禽流感病毒、呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)等感染所致的炎症中也发挥重要作用。本研究就IP-10与病毒感染性疾病中炎症产生的密切关系作一综述,以供同行参考。

关键词：干扰素诱生蛋白10(IP-10) 乙型肝炎病毒(HBV) 人类免疫缺陷病毒(HIV) H7N9 炎症

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猪圆环病毒3型Cap蛋白单克隆抗体的制备及其在免疫组化试验中的初步应用

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中国预防兽医学报 2019年第2期41卷 174-178页

作者：赵冬王小波高清清郇长超王万彬高崧刘秀梵农业部禽用生物制品创制重点实验室江苏扬州225009 农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学农业科技发展研究院江苏扬州225009 扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省研究生工作站江苏泰州225511

为制备猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白单克隆抗体(MAb),并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验(IFA)或免疫组化(IHC)检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了... 详细信息

为制备猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白单克隆抗体(MAb),并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验(IFA)或免疫组化(IHC)检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了具有免疫原性的融合蛋白。以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,共获得8株能够稳定分泌针对PCV3 Cap蛋白的MAb杂交瘤细胞株。Western blot与IFA试验结果显示,8株MAbs均能够与真核表达的重组Cap蛋白反应。选取3株杂交瘤细胞制备3株MAbs,小鼠腹水效价分别为1∶409 600、1∶204 800和1∶409 600。利用3株MAbs对自然感染PCV3临床病猪的腹股沟淋巴结进行IHC检测,结果显示3株MAbs的腹水均能够与感染PCV3的临床样品发生特异性的免疫反应。本研究制备的MAbs具有较好的特异性,为深入研究Cap蛋白的结构和PCV3快速诊断奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒3型 Cap蛋白单克隆抗体免疫组化

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基因Ⅶ型新城疫病毒调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及诱导脾脏免疫病理的机制研究

基因Ⅶ型新城疫病毒调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及诱导脾脏免疫病...

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江苏省畜牧兽医学会首届“青年科技论坛”

作者：胡增垒顾晗胡顺林焦新安刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州 225009 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州 225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州 225009 江苏省人兽共患病学重点实验室扬州 225009 农业部农产

细胞外基质(ECM)重构对基因Ⅶ 型新城疫病毒(NDV)诱导鸡脾脏的免疫病理损伤具有重要影响.本研究旨在探讨基因Ⅶ 型NDV调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及对ECM重塑的影响,进一步解析基因Ⅶ 型NDV的致病机理.首先,用荧光定量PCR与Western blo... 详细信息

细胞外基质(ECM)重构对基因Ⅶ 型新城疫病毒(NDV)诱导鸡脾脏的免疫病理损伤具有重要影响.本研究旨在探讨基因Ⅶ 型NDV调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及对ECM重塑的影响,进一步解析基因Ⅶ 型NDV的致病机理.首先,用荧光定量PCR与Western blot方法对基因Ⅶ 型与Ⅳ型NDV感染脾脏中MMP-1、MMP-13与MMP-14的表达水平进行测定.其次,选用鸡外周血单个核细胞(PBMC)为细胞模型,测定不同MMP的表达水平及MMP-14的细胞定位与膜表达水平.最后,建立了评价PBMC侵袭力的Transwell模型与测定细胞降解胶原蛋白能力的模型,并测定了基因Ⅶ 型与Ⅳ型NDV感染对PBMC侵袭力与胶原降解能力的影响.结果表明,与基因Ⅳ型NDV Herts/33相比,基因Ⅶ 型NDV JS5/05株可显著上调鸡脾脏与PBMC中MMP-13与MMP-14的表达水平,尤其是***-14在JS5/05感染的PBMC中在细胞质、细胞核与细胞膜上均有定位,但是在细胞膜上的表达水平显著高于Herts/33感染的细胞.细胞侵袭实验表明,JS5/05感染的PBMC在趋化因子的诱导作用下,其侵袭力显著强于Herts/33感染细胞.此外,JS5/05感染的PBMC对Ⅰ型胶原蛋白的降解能力也显著高于Herts/33感染细胞.基因Ⅶ型NDV可显著上调PBMC中MMP-14的表达水平,激活其降解胶原蛋白的活性,使炎性细胞突破ECM屏障的侵袭力显著增强.因此,基因Ⅶ 型NDV调控MMP-14的活性可能对其诱导的脾脏免疫病理损伤有重要的影响.

关键词：基因Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白酶14 细胞外基质脾脏免疫病理致病机制

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2016—2017年华东地区活禽市场7株H9N2禽流感病毒遗传进化分析

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畜牧兽医学报 2018年第8期49卷 1789-1796页

作者：蒋大秀马静王晓泉胡顺林刘晓文刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州225009 江苏省重点动物传染病和人畜共患病预防控制联合创新中心扬州225009

活禽市场的家禽,特别是水禽在禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的演化、维持和扩散过程中起重要作用,因此对活禽市场进行长期不间断的流行病学监测非常重要。2016年10月至2017年9月,每月定期采集华东地区某活禽市场家禽喉头和泄... 详细信息

活禽市场的家禽,特别是水禽在禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的演化、维持和扩散过程中起重要作用,因此对活禽市场进行长期不间断的流行病学监测非常重要。2016年10月至2017年9月,每月定期采集华东地区某活禽市场家禽喉头和泄殖腔棉拭子,并接种10日龄SPF鸡胚,测定鸡胚尿囊液HA效价,取阳性尿囊液进行HI试验分型,应用RT-PCR对该样品进行全基因PCR并测序,利用DNASTAR、MEGA6.0分析序列,并绘制系统发生树。结果共采集样品1 178份,来自127群,H9N2AIV阳性样品100份。从水禽中分离到H9N2AIV 7株,对7株病毒全基因组进行测序和遗传进化分析,不同基因片段均存在不同的遗传进化趋势。活禽市场水禽体内携带的7株H9N2AIV与当前家禽优势流行基因型一致,因此对活禽市场家禽中循环存在的AIV进行的定期监测,对了解潜在的流行株的演化和出现有重要作用。

关键词：活禽市场 H9N2禽流感病毒监测遗传进化

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2017年华东地区活禽市场和商品化养殖场新城疫病毒的流行病学调查

2017年华东地区活禽市场和商品化养殖场新城疫病毒的流行病学调查

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：陆小龙王晓泉胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言新城疫(Newcastle disease,ND),是一种由禽副粘病毒血清Ⅰ型引起的急性、高度传染性疾病,对我国以及全球禽类养殖业具有重大危害,我国农业部将其列为一类动物疾病,世界动物卫生组织(OIE)也将其列为必须通报的动物疫病之一。为了研... 详细信息

引言新城疫(Newcastle disease,ND),是一种由禽副粘病毒血清Ⅰ型引起的急性、高度传染性疾病,对我国以及全球禽类养殖业具有重大危害,我国农业部将其列为一类动物疾病,世界动物卫生组织(OIE)也将其列为必须通报的动物疫病之一。为了研究华东地区活禽市场和商品化禽群中NDV的宿主和地区分布状况,我们实施了一项长期计划——在2017年对华东地区不同禽群进行流行病学调查。材料与方法

关键词：活禽市场新城疫病毒流行病学调查华东地区

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同源疫苗抗体选择压下H9N2亚型禽流感病毒的致病性和抗原性的变化

同源疫苗抗体选择压下H9N2亚型禽流感病毒的致病性和抗原性的变化

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：孙王杨吉晋海云王婉石火英刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

引言为控制鸡群中H9亚型禽流感病毒的传播,在上世纪90年代初中国大陆广泛实施H9N2亚型禽流感病毒疫苗接种计划,并能够有效地降低H9N2亚型禽流感病毒感染对鸡的影响,但病毒最终扩散到中国大部分地区。鉴于中国广泛使用各种禽流感疫苗的... 详细信息

引言为控制鸡群中H9亚型禽流感病毒的传播,在上世纪90年代初中国大陆广泛实施H9N2亚型禽流感病毒疫苗接种计划,并能够有效地降低H9N2亚型禽流感病毒感染对鸡的影响,但病毒最终扩散到中国大部分地区。鉴于中国广泛使用各种禽流感疫苗的策略以及目前H9N2亚型禽流感在中国广泛流行和复杂的作用,有必要评价疫苗抗体选择压在H9N2亚型禽流感病毒演化中的作用。本研究选择

关键词：禽流感病毒同源疫苗抗原性

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稳定表达TIGAR基因的MDCK细胞建立及禽流感病毒在其中的增殖特性研究

稳定表达TIGAR基因的MDCK细胞建立及禽流感病毒在其中的增殖特性...

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：许靖孙中涛刘晓文王晓泉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

1997年香港发生首例H5N1亚型高致病性禽流感病毒感染人的事件,引发了全世界的关注.此后,该亚型病毒在包括中国大陆在内的多个国家和地区相继爆发流行,给全球养禽业造成重大经济损失,同时也使人类的公共卫生安全面临严峻挑战.传统的禽流... 详细信息

1997年香港发生首例H5N1亚型高致病性禽流感病毒感染人的事件,引发了全世界的关注.此后,该亚型病毒在包括中国大陆在内的多个国家和地区相继爆发流行,给全球养禽业造成重大经济损失,同时也使人类的公共卫生安全面临严峻挑战.传统的禽流感重组灭活疫苗通常是通过反向遗传操作技术构建的高产致弱毒株,在SPF鸡胚上扩大增殖培养,灭活乳化后投入使用.但是该种方法生产的疫苗其抗原性与母本毒株存在差异,并且使用鸡胚的固有缺点也严重限制了该方法的发展.MDCK细胞是分离、培养禽流感病毒常用细胞系,因此科研工作者将目光投向以MDCK细胞为基质的禽流感疫苗研发.然而该方法也面临两方面的问题:一是MDCK细胞贴壁性太强,无法适应工业化生产;二是与鸡胚培养相比,禽流感病毒在MDCK细胞上的复制能力较低.TIGAR(TP53-induced glycolysis andapoptosis regulator)基因能够调节糖代谢和细胞凋亡,减少各种应激引起的凋亡,提高细胞存活时间.因此,本文通过建立稳定表达TIGAR基因的MDCK细胞期望解决上述MDCK细胞生产禽流感疫苗的问题.

关键词：禽流感病毒免疫疫苗 MDCK细胞 TIGAR基因

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表达广谱H5亚型禽流感病毒Mosaic HA蛋白重组火鸡疱疹病毒的构建

表达广谱H5亚型禽流感病毒Mosaic HA蛋白重组火鸡疱疹病毒的构建

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：李佳昕孙文强何东昌王晓泉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

禽流感是由正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的禽类烈性传染病.根据其在6周龄雏鸡静脉内致病指数的不同,又可将其分为高致病性(HPAIV)和低致病性(LPAIV)两种,其中H5N1亚型禽流感属于高致病性禽流感,对家禽的致死率可达100％.除感染... 详细信息

禽流感是由正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的禽类烈性传染病.根据其在6周龄雏鸡静脉内致病指数的不同,又可将其分为高致病性(HPAIV)和低致病性(LPAIV)两种,其中H5N1亚型禽流感属于高致病性禽流感,对家禽的致死率可达100％.除感染禽外,还可感染人和哺乳动物,引起人类死亡,具有重要的公共卫生学意义.近年,国内应用的H5亚型禽流感疫苗主要包括全病毒灭活疫苗和重组活载体疫苗.灭活疫苗一般选取与H5N1亚型接近的弱毒株或应用反向遗传技术构建减毒株,是目前我国主要免疫的疫苗种类,这种疫苗的缺点是产生的免疫效果维持时间短,生产成本较高,多次接种后应激反应大等;禽流感重组载体疫苗主要有重组鸡痘病毒疫苗和重组新城疫病毒疫苗,这两种疫苗受母源抗体的影响较大,实际大规模应用较难.火鸡疱疹病毒(HVT)为血清三型的马立克氏病毒(MDV).从二十世纪七十年初以来最早被广泛地用作防制马立克氏病的疫苗。它对鸡及其它动物均无致病性;基因组较大且含有病毒复制的非必需片段，可容纳较大外源基因片段的插入;在鸡体内可持续存在，有利于外源基因的持续表达;可刺激机体产生强烈细胞免疫反应和较高的抗体水平，免疫出现早，持续时间长;制备的疫苗可冻干保存，易于保存和运输;此外，还可以克服母源抗体干扰，显示出HVT作为疫苗载体良好的应用前景。

关键词：禽流感病毒免疫疫苗火鸡疱疹病毒抗体水平

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华东地区H5亚型禽流感病毒分子流行病学调查

华东地区H5亚型禽流感病毒分子流行病学调查

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：孙文强李佳昕刘开拓刘东胡娇刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

1996年从广东地区发病鹅群中首次分离到以A/Goose/Guangdong/1/96(GD/96)株为代表的H5N1高致病性禽流感病毒(Highly Pathogenic Avian Influenza Virus,HPAIV).此后,GD/96-like病毒在我国传播开来,蔓延到亚洲,继而传到欧洲、北美的多个国家和地区,给养禽业造成了巨大的经济损失,对公共卫生安全构成了严重的威胁.根据最新WHO对2003-2017年期间的H5N1感染人类案例统计结果显示,现已有858例感染,死亡453例,死亡率达到了52.8％.根据最近几年的文章报道新出现了多种能感染人的亚型,例如H7N9(2013年)、H10N8(2013年)、H5N6(2013年).另外H6N1、H7N2、H7N3、H7N7、H9N2和H10N7也有发生人感染的案例.因此对禽流感病毒的持续的流行病学调研具有重大的经济学和公共卫生学意义.自2016年1月至今，在华东地区(江苏、浙江、江西、安徽、山东等地)的活禽市场采集泄殖腔、口咽试子共1189份。先通过荧光定量PCR检测流感阳性样品，然后将阳性样品通过尿囊腔接种SPF鸡胚分离病毒，血凝及血凝抑制试验初步鉴定病毒的HA亚型。根据文献报道的引物，利用RT-PCR方法扩增病毒的全基因片段，应用DNAStar和MEGA7等软件进行测定序列的拼接、比对，并对病毒的全基因组进行遗传进化分析。

关键词：禽流感病毒病毒感染流行病学

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