检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2008年第6期48卷 745-749页

作者：唐应华吴培培彭大新龙进学张评浒张文俊李彦芳汪文斌刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

【目的】为了探讨高致病性禽流感病毒对水禽致病性差异的分子致病机理。【方法】我们对从野鸭分离到的H5N1亚型禽流感病毒的生物学特性进行鉴定,其中A/mallard/Huadong/Y/2003(Y)是对麻鸭无致病性病毒,而A/mallard/Huadong/S/2005(S)是... 详细信息

【目的】为了探讨高致病性禽流感病毒对水禽致病性差异的分子致病机理。【方法】我们对从野鸭分离到的H5N1亚型禽流感病毒的生物学特性进行鉴定,其中A/mallard/Huadong/Y/2003(Y)是对麻鸭无致病性病毒,而A/mallard/Huadong/S/2005(S)是对麻鸭高致病性病毒。利用反向遗传技术构建一系列单个和多个基因组合替换基因重排病毒,并验证重排病毒在麻鸭上的致病力。【结果】研究表明,PB2,PB1,PA(3P),HA单基因以及3P基因组合替换的使S病毒对麻鸭的毒力完全致弱,但相应的基因替换后仅使Y病毒对麻鸭的毒力略有上升。两病毒的其它基因对毒力影响较小。【结论】H5N1亚型禽流感病毒对麻鸭的致病力受多基因调控,且这种调控作用在不同病毒骨架上的影响不一致,强毒受影响程度远比弱毒的大。

关键词： H5N1 致病力反向遗传麻鸭

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近年来华东地区家鸭中禽流感病毒的亚型分布

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微生物学报 2008年第10期48卷 1290-1294页

作者：仇保丰刘武杰彭大新胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

【目的】为了研究近年来华东地区家鸭中禽流感病毒的亚型分布情况。【方法】对2002-2006年分离自华东地区家鸭的180株禽流感病毒的HA亚型和其中88株禽流感病毒的NA亚型分别进行了测定。【结果】近年来华东地区家鸭中至少存在9种HA亚型和... 详细信息

【目的】为了研究近年来华东地区家鸭中禽流感病毒的亚型分布情况。【方法】对2002-2006年分离自华东地区家鸭的180株禽流感病毒的HA亚型和其中88株禽流感病毒的NA亚型分别进行了测定。【结果】近年来华东地区家鸭中至少存在9种HA亚型和6种NA亚型组成的H1N1,H3N1,H3N2,H3N8,H4N6,H5N1,H5N2,H6N2,H6N8,H8N4,H9N2,H10N3,H11N2共13种亚型的禽流感病毒。【结论】华东地区家鸭中有多种亚型的禽流感病毒分布,应加强家鸭禽流感的监测和防制工作。

关键词：华东地区家鸭禽流感病毒亚型分布

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HA基因322位和329位氨基酸对H5N1亚型禽流感病毒毒力的影响

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病毒学报 2008年第5期24卷 340-344页

作者：唐应华吴培培孙庆彭大新张文俊李彦芳汪文斌龙进学张评浒刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

A/mallard/Huadong/S/2005(S,IVPI=2.65)和A/mallard/Huadong/Y/2003(Y,IVPI=0),是对麻鸭具有不同致病力的病毒。两病毒的HA裂解位点区有2个氨基酸差异,S病毒在HA裂解位点区322是Leu(L322),329位缺失(-329),而Y病毒322位是Gln(Q322),329位是Lys(K329)。根据这两个位点的差异,利用反向遗传系统,以S和Y病毒各自为骨架,拯救HA基因突变病毒,检测获救的突变病毒对麻鸭的毒力。可以得知,以S病毒为骨架,将S病毒HA基因322位Leu替换为Gln和(或)在329位添加Lys,以及用Y病毒的HA(Q322L,K329-)替换S病毒HA,获救的重组病毒对麻鸭亦完全无致病力;但以Y病毒为骨架,将Y病毒HA基因322位Gln替换为Leu和(或)在329位缺失Lys后,Y重组病毒对麻鸭的毒力上升。结果提示,S和Y病毒HA基因裂解位点区322和329氨基酸残基突变或缺失均影响病毒对麻鸭的致病力,且HA基因与其它基因的匹配性显著影响病毒对麻鸭的致病力。

关键词： H5N1 HA基因麻鸭反向遗传致病力

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H9N2亚型禽流感病毒复制特性的基因分析

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畜牧兽医学报 2008年第2期39卷 189-194页

作者：石火英孙蕾陈素娟卢建红刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

利用反向遗传技术,通过基因重排方法,以A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)禽流感病毒(Avian influ-enza virus,AIV)的6个内部基因为骨架,与A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV的HA和NA基因组合,产生3株H9N2亚型重排AIVs。动物试验发现A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)和A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV主要在呼吸系统复制,A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株在气管和肺组织的复制能力明显强于A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV株。3株H9N2亚型重排AIVs的动物试验发现HA和NA基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制特性起主要作用。内部基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制也有一定的作用。结果表明1994年中国首次分离到的H9N2亚型AIV经过4年的宿主适应和基因进化,加强了其在呼吸系统的复制能力,奠定了气溶胶传播的基础。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型复制特性反向遗传技术 HA基因 NA基因

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重组鸡痘病毒首免与灭活疫苗加强免疫对高致病性禽流感免疫效果的影响

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中国兽医科学 2008年第5期38卷 397-400页

作者：刘武杰仇保丰马怀良王彦红陈素娟彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

用表达H5亚型禽流感病毒(AIV)HA与NA基因的重组鸡痘病毒(rFPV)rFPV-12LSH5NA对10日龄带有H5亚型AIV母源抗体的商品鸡进行了首次免疫,17日龄时再用H5亚型AIV全病毒灭活疫苗加强免疫。免疫鸡分为2个批次,分别在24和31日龄用H5亚型AIV进行... 详细信息

用表达H5亚型禽流感病毒(AIV)HA与NA基因的重组鸡痘病毒(rFPV)rFPV-12LSH5NA对10日龄带有H5亚型AIV母源抗体的商品鸡进行了首次免疫,17日龄时再用H5亚型AIV全病毒灭活疫苗加强免疫。免疫鸡分为2个批次,分别在24和31日龄用H5亚型AIV进行致死性攻击。在24日龄攻毒组中,rFPV首免与全病毒灭活疫苗加强免疫组的死亡比例(0/17)显著低于17日龄全病毒灭活疫苗单独免疫组(16/17)。在31日龄攻毒组中,rFPV首免与全病毒灭活疫苗加强免疫组的死亡比例(0/17)显著低于10日龄rFPV单独免疫组(6/17)。结果显示,在鸡群普遍存在针对H5亚型AIV母源抗体的情况下,rFPV首免与全病毒灭活疫苗配合使用能使鸡体快速建立坚强的免疫保护反应,是一种非常有效的免疫策略。

关键词： H5亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒全病毒灭活疫苗加强免疫

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实时荧光定量聚合酶链反应原理和在预防兽医学中的应用及研究进展

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中国动物检疫 2008年第7期25卷 56-57页

作者：曹军平刘秀梵扬州大学兽医学院畜禽传染病农业部重点开放性实验室江苏扬州225009

聚合酶链反应（PCR）是检测核酸的强力方法。由于PCR技术简便易行、灵敏度高等优点，该技术被广泛应用于基础研究．成为分子生物学必不可少的研究工具。由于传统的PCR技术存在不能准确定量．且操作过程中易污染而使得假阳性率高等缺点... 详细信息

聚合酶链反应（PCR）是检测核酸的强力方法。由于PCR技术简便易行、灵敏度高等优点，该技术被广泛应用于基础研究．成为分子生物学必不可少的研究工具。由于传统的PCR技术存在不能准确定量．且操作过程中易污染而使得假阳性率高等缺点．使其应用受到局限。对PCR产物进行准确定量成为PCR技术发展的重要方向。

关键词：聚合酶链反应预防兽医学应用反应原理荧光定量 PCR技术分子生物学

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三种重组鸡痘病毒联合与单独免疫效力比较

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中国免疫学杂志 2008年第6期24卷 538-541页

作者：刘武杰仇旭升马怀良孙蕾陈素娟彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州225009 中国科学院微生物研究所分子病毒中心北京100101

目的:利用针对不同病原的重组鸡痘病毒(rFPV)在鸡群进行间隔性的多次免疫时,后期免疫会受到前期免疫所诱生的载体特异性免疫反应的干扰,并导致其免疫效力下降。将这些rFPVs进行联合免疫或许是解决此问题的一种策略。为验证rFPVs联合免... 详细信息

目的:利用针对不同病原的重组鸡痘病毒(rFPV)在鸡群进行间隔性的多次免疫时,后期免疫会受到前期免疫所诱生的载体特异性免疫反应的干扰,并导致其免疫效力下降。将这些rFPVs进行联合免疫或许是解决此问题的一种策略。为验证rFPVs联合免疫的可行性,研究中将三种针对不同病原的rFPVs以联合或单独的方式分别进行免疫,并对它们的免疫效力进行比较。方法:rFPV-12LSH9A、rFPV-12LSH5NA及rFPV-12LSHN为分别表达H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、H5亚型AIV的HA和NA基因及新城疫病毒(NDV)HN基因的三种rFPVs。将这三种rFPVs分别在SPF鸡和带有针对H9、H5亚型AIV及NDV三种病原母源抗体的商品鸡上进行联合或单独免疫。结果:这三株rFPVs在SPF鸡上进行联合免疫时,所诱生的体液免疫应答受到了一定程度的抑制;个别成员株的排毒及死亡保护也受到了显著的干扰。结论:在进行rFPVs联合免疫时,有必要对各成员株rFPV的免疫效力进行比较分析,以确定其可行性。

关键词：重组鸡痘病毒联合免疫 H5亚型禽流感病毒 H9亚型禽流感病毒新城疫病毒

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两株表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力

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畜牧兽医学报 2008年第3期39卷 327-332页

作者：刘武杰孙蕾陈素娟徐忠林刘金彪刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 中国科学院微生物研究所分子病毒中心北京100101

将H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A,再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒(FPV)282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞,经系列蓝斑筛选纯化,获得了2种重组鸡痘病毒(rFP... 详细信息

将H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A,再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒(FPV)282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞,经系列蓝斑筛选纯化,获得了2种重组鸡痘病毒(rFPV),分别命名为rFPV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A。将这2株rFPV在SPF鸡和带有高水平抗H9亚型AIV母源抗体的商品鸡上分别进行免疫效力试验。结果:rF-PV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A在SPF鸡上的排毒保护率均为100%(10/10),在商品鸡上的排毒保护率分别为88%(23/26)和92%(24/26)。结果表明获得了2株在带有抗H9亚型AIV高水平母源抗体的商品鸡上免疫效力较好的rFPV。

关键词： H9亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒母源抗体免疫效力

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HSN1亚型禽流感病毒基因重排后毒力的变化

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微生物学报 2008年第6期48卷 745-749页

作者：唐应华吴培培彭大新龙进学张评浒张文俊李彦芳汪文斌刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

【目的】为了探讨高致病性禽流感病毒对水禽致病性差异的分子致病机理。【方法】我们对从野鸭分离到的H5N1亚型禽流感病毒的生物学特性进行鉴定，其中A/mallard/Huadong/Y/2003（Y）是对麻鸭无致病性病毒，而A/mallard/Huadong/S/2005（... 详细信息

【目的】为了探讨高致病性禽流感病毒对水禽致病性差异的分子致病机理。【方法】我们对从野鸭分离到的H5N1亚型禽流感病毒的生物学特性进行鉴定，其中A/mallard/Huadong/Y/2003（Y）是对麻鸭无致病性病毒，而A/mallard/Huadong/S/2005（S）是对麻鸭高致病性病毒。利用反向遗传技术构建一系列单个和多个基因组合替换基因重排病毒，并验证重排病毒在麻鸭上的致病力。【结果】研究表明，PB2，PB1，PA（3P），HA单基因以及3P基因组合替换的使S病毒对麻鸭的毒力完全致弱，但相应的基因替换后仅使Y病毒对麻鸭的毒力略有上升。两病毒的其它基因对毒力影响较小。【结论】H5N1亚型禽流感病毒对麻鸭的致病力受多基因调控，且这种调控作用在不同病毒骨架上的影响不一致，强毒受影响程度远比弱毒的大。

关键词： H5N1 致病力反向遗传麻鸭

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4株野鸭源H5N1亚型禽流感病毒的全基因组鉴定

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中国人兽共患病学报 2008年第11期24卷 1006-1008,1013页

作者：唐应华吴培培彭大新张评浒龙进学张文俊李彦芳刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏省农科院国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

目的为了解H5N1病毒对基因进化情况,方法对4株野鸭源的H5N1禽流感病毒(A/mallard/Huadong/S/2005(S),A/mallard/Huadong/lk/2005(lk),A/mallard/Huadong/Y/2003(Y),A/mallard/Huadong/hn/2005(hn))进行全基因组测序分析,并鉴定对非免疫麻鸭的毒力。结果4株病毒全基因组序列及其氨基酸序列无明显差异,仅在HA裂解位点区,S和lk病毒的322位是Leu,329位缺失,而Y和hn在此两处分别是Gln和Lys。在遗传距离上,Y和hn比较接近,S与lk比较接近。结论根据H5亚型病毒最新分类规则,S和lk的与clade 2.3.4一致,而Y属于clade 2,hn位于clade 3。对麻鸭致病性试验表明,Y和hn是低致病性病毒,而S及lk是高致病性病毒。HA的322位的Leu和329位缺失可能是clade 2.3.4这类病毒的一个遗传进化标志。

关键词：禽流感病毒野鸭遗传进化

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