检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：孙志王金勇张建武秦爱健袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室扬州大学兽医学院

以北美株PRRSV感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,将3'UTR中的一级结构进行了系列缺失或插入突变,并改变二级结构中的一个保守的茎环结构,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3'UTR突变对病毒感染性的影响,旨在界定调控PRRSV3... 详细信息

以北美株PRRSV感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,将3'UTR中的一级结构进行了系列缺失或插入突变,并改变二级结构中的一个保守的茎环结构,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3'UTR突变对病毒感染性的影响,旨在界定调控PRRSV3'UTR的启动子序列及二级结构,即复制过程中的最小调控元件。以空斑和Northern Blot来研究拯救后重组病毒的复制、转录和生长特性,发现重组病毒感染动力学与亲本病毒无可见差别。结果表明PRRSV3'UTR的5'端可耐受一定数目的核苷酸的缺失(41nt)与插入(23nt)突变,但进一步9nt缺失造成保守的环结构突变后就使病毒失去了感染性。证明了这是3'UTR中控制PRRSV复制过程的的必需序列及二级结构,为进一步解析PRRSV复制过程的调控元件奠定了基础。

关键词： PRRSV)3 感染性克隆 UTR 顺式调控元件猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒非翻译区

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利用反向遗传技术产生8基因全禽源流感病毒疫苗候选株

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病毒学报 2006年第2期22卷 126-130页

作者：石火英张小荣陈素娟吴艳涛刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

利用反向遗传技术将含有A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）株禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的6个内部基因与H5N1亚型AIV的2个表面基因HA和NA共转染COS-1细胞，产生了6＋2全禽源的重配AIV。将H5N1亚型AIV的HA基因经基因... 详细信息

利用反向遗传技术将含有A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）株禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的6个内部基因与H5N1亚型AIV的2个表面基因HA和NA共转染COS-1细胞，产生了6＋2全禽源的重配AIV。将H5N1亚型AIV的HA基因经基因突变致弱，然后将A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）AIV的6个内部基因的cDNA和以上致弱的禽源HA基因及NA基因的cDNA分别克隆到转录／表达载体pHW2000中，构建成8个转录／表达质粒。将8个质粒共转染COS-1细胞，24h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚，72～90h后鸡胚死亡，收取鸡胚尿囊液进行血凝、血凝抑制试验、序列分析、病毒致病性试验和动物免疫保护试验，最终证实产生了致弱的全禽源AIV瘩苗候诜株．

关键词：反向遗传技术 AIV 质粒转染

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H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较

H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：石火英陈素娟高崧刘武杰刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

选择中国大陆最早分离的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV) A／Chicken／Guangdong／SS／94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AIV A／Chicken／Shanghai／F／98(H9N2)(缩写为F株)为研究对象,对其在SPF鸡体内的复制能力和传播途径特性作了系统的比较,发现F株在4周龄SPF鸡气管中的复制能力高于SS株,F株可以经气溶胶传播途径传播,SS株不能经气溶胶传播途径传播。

关键词： H9N2亚型AIV F株 SS株传播途径 HA和NA基因序列

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H9N2亚型禽流感病毒复制特性的基因分析

H9N2亚型禽流感病毒复制特性的基因分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：石火英陈素娟孙蕾刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

为研究A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）和A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）复制特性差异的原因,从分子水平上探讨中国大陆1998年H9N2亚型禽流感病毒获得气溶胶传播特性的机制,本研究利用反向遗传技术,通过基因重排,产生来自A/Chicken...

为研究A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）和A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）复制特性差异的原因,从分子水平上探讨中国大陆1998年H9N2亚型禽流感病毒获得气溶胶传播特性的机制,本研究利用反向遗传技术,通过基因重排,产生来自A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）的两个表面基因和其余基因来自A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）的三株重排H9N2亚型AIV。经动物实验发现,A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）在气管和肺组织中的复制能力都很强,都是6.58±0.581og10EID50/0.2mL,而A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）在气管中的复制能力要强于在肺组织中的复制能力,分别是4.0±0.83 log10EID/0.2mL和2.5±0.33log10EID/0.2mL。2株病毒在肠道中的复制能力都不强,只是偶尔分离到病毒。A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）在气管和肺中的复制能力明显要强于A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）,即1994年中国首次分离到的H9N2亚型AIV经过4年的宿主适应和基因进化,加强了其在呼吸系统的复制能力,奠定了气溶胶传播的基础。以A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）为内部基因骨架,当替换为A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）的HA基因和/或NA基因时,病毒在鸡的气管中的复制能力都低于A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）,其中RF/SSHA株与A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）的复制滴度最接近;RF/SSHA在肺组织中的复制滴度最低,RF/SSNA和RF/SSHA/SSNA在肺组织中的复制滴度要高于其表面基因的母本病毒株A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）,低于内部基因母本病毒株A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）。表明HA和NA基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制特性起主要作用,内部基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制也有作用。有报道认为肠道是禽流感病毒复制的主要场所。而人适应流感病毒是在呼吸道复制,不在内脏复制。中国大陆自1994年家禽中流行H9N2亚型禽流感病毒,仅仅经过4年的进化,其在呼吸系统复制能力得到了明显的提高,值得人们重视。

关键词：

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H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较

H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

作者：石火英陈素娟高崧刘武杰刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

选择中国大陆最早分离的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AIVA/Chicken/Shanghai/F/98 (H9N2)(缩写为F株)为研究对象,对其在SPF鸡体内的复制能力和传播途径特性作了系统的比晓,发现F株在4周龄SPF鸡气管中的复制能力高于SS株,F株可以经气溶胶传播途径传播,SS株不能经气溶胶传播途径传播.

关键词：传播途径禽流感病毒病理生理学

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防控好动物禽流感降低人类大流行流感的发生

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北方牧业 2006年第21期 9-9页

作者：刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

近年来，禽流感给人类造成的损失不可估量。据FAO估计．禽流感在亚洲已造成约1.5～2．0亿家禽死亡或被销毁．经济损失远超过100亿美元，近2亿从事小规模家禽生产的农民的生计受到严重影响。我国家禽年生产量约130亿羽，2004年H5N1禽流... 详细信息

近年来，禽流感给人类造成的损失不可估量。据FAO估计．禽流感在亚洲已造成约1.5～2．0亿家禽死亡或被销毁．经济损失远超过100亿美元，近2亿从事小规模家禽生产的农民的生计受到严重影响。我国家禽年生产量约130亿羽，2004年H5N1禽流感暴发以来养禽业的经济损失严重．养禽业和相关行业的8000万从业人员受到影响。自2003年至2006年10月3日，全世界确诊感染H5NI亚型禽流感的人数累计已达252人．其中148人死亡，这导致全球对可能出现人大流行流感的严重关注。我国自2004年1月至2006年6月已报告发生H5N1禽流感近80起．涉及20多个省、市、自治区．死亡和销毁的家禽达数千万羽。自2005年至2006年10月3日底．我国已发生21例人类感染．其中14例死亡。

关键词：禽流感人类家禽生产动物防控经济损失 H5N1 从业人员

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利用8质粒系统拯救A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株禽流感病毒

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微生物学报 2005年第3期45卷 373-376页

作者：石火英卢建红陈素娟孙蕾刘秀梵刘玉良扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

应用反向遗传技术将含有1998年中国大陆分离株H9N2亚型禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)的8个基因片段的质粒共转染COS_1细胞,产生了与野生病毒生物学特性相同的H9N2亚型AIV。将A Chicken Shanghai F 98(CK SH F 98)株H9N2亚型AIV的... 详细信息

应用反向遗传技术将含有1998年中国大陆分离株H9N2亚型禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)的8个基因片段的质粒共转染COS_1细胞,产生了与野生病毒生物学特性相同的H9N2亚型AIV。将A Chicken Shanghai F 98(CK SH F 98)株H9N2亚型AIV的8个基因组cDNA分别克隆到polⅠ_polⅡ转录表达载体pHW2 0 0 0中,构建成8个转录表达载体重组质粒。将这8个质粒共转染COS_1细胞,2 4h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚,4 8h后收取鸡胚尿囊液继续进行鸡胚传代,产生能致死鸡胚的病毒。经血凝、血凝抑制试验、序列分析和电镜观察,证实产生了CK SH F 98(H9N2 )株AIV。

关键词：反向遗传技术 H9N2亚型AIV 质粒转染

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H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/093/2004株的全基因克隆及序列分析

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微生物学报 2005年第5期45卷 690-696页

作者：龙进学王曲直卢建红刘玉良刘秀梵扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

应用流感病毒通用引物[4]和H5N1亚型禽流感(Avian influenza virus,AIV)的型特异性引物,成功的扩增出H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/093/2004株(简称A/D/SD/04)的全基因序列(包括5′和3′端的非编码区序列).A/D/SD/04的基因组核苷酸全序列与18株网上公布的禽流感基因序列进行比较和分析,结果与4株鸭源H5N1的5～7个基因具99%以上的同源性;与14株H5N1有至少一个以上内部基因同源性在95%以上.与H9亚型AIV代表株A/Quail/Hongkong/G1/97(简称G1株)和A/Chicken/Beijing/1/94(简称BJ94)比较,除了非结构基因(Nonstructural gene,NS)与G1株的同源性为95.3%外,其余基因均在36.6%～92.1%之间.说明A/D/SD/04没有H9N2基因的直接整合,是H5N1毒株在自然界的重组株.推导的HA氨基酸序列分析,A/D/SD/04 的血凝素(Heamgglutinin,HA)裂解位点与比较的16株AIV的序列一致,是高致病性禽流感的分子特征(PQRERRRKKR/G),第226位氨基酸是对禽类和哺乳细胞均具有亲嗜性的蛋氨酸(Met).神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)在第48位氨基酸(颈部)后有20个氨基酸的缺失,但非结构蛋白(NS)没有在79～84氨基酸发生缺失.碱性聚合酶2(PB2)的627位氨基酸是亲禽类细胞的谷氨酸(Glu,E).结合生物学特性和分子特征,A/D/SD/04对小鼠的致病力是由多种因素决定,其可能是一株对鸡高度致病,并逐渐获得对哺乳动物致病能力的中间重组病毒.

关键词： H5N1亚型禽流感病毒通用引物全基因组序列序列分析

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反向遗传操作技术产生全禽源致弱的H5N1亚型禽流感病毒的免疫保护性试验

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中国家禽 2005年第17期27卷 11-13页

作者：石火英张小荣孙学辉刘慧谋刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死... 详细信息

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标,评价其免疫和交叉免疫保护作用。结果表明:反向遗传操作技术为构建新型的流感疫苗株提供了更好的方法。

关键词：反向遗传操作技术禽流感病毒疫苗免疫保护作用 H5N1亚型操作技术反向遗传保护性试验致弱禽源

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免疫程序与母源抗体对H5禽流感疫苗免疫鸭和鹅HI抗体水平的影响

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中国兽医科技 2005年第8期35卷 638-642页

作者：张评浒任涛唐应华薛峰仇旭升曹永忠刘晓文辛朝安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 华南农业大学兽医学院广东广州510642

对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅,用H5亚型禽流感疫苗免疫后,其HI抗体消长情况进行了比较和观察,结果,初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答;雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退;母源抗... 详细信息

对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅,用H5亚型禽流感疫苗免疫后,其HI抗体消长情况进行了比较和观察,结果,初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答;雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退;母源抗体对H5禽流感疫苗免疫后的HI抗体水平存在一定的干扰作用;加强免疫鸭和鹅所产生的H5 HI抗体水平及其维持时间与仅免疫一次的鸭和鹅所产生的抗体水平之间存在显著差异;鸭和鹅免疫H5禽流感疫苗后第25～30d H5 HI抗体水平达到高峰.

关键词：禽流感 H5亚型灭活疫苗免疫母源抗体

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