检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2013年第10期40卷 37-41页

作者：宋庆庆朱杰丁平云段志强屠颉刘晓文刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

新城疫病毒Ⅰ系苗Mukteswar株为中等毒力,野外分离株JS/7/05/Ch的基因组核苷酸与其具有高于99%的相似性,但其毒力却明显强于前者。为了给基因Ⅲ型NDV的遗传进化机制研究提供基础,本研究成功构建了JS/7/05/Ch株的反向遗传平台。首先根据G... 详细信息

新城疫病毒Ⅰ系苗Mukteswar株为中等毒力,野外分离株JS/7/05/Ch的基因组核苷酸与其具有高于99%的相似性,但其毒力却明显强于前者。为了给基因Ⅲ型NDV的遗传进化机制研究提供基础,本研究成功构建了JS/7/05/Ch株的反向遗传平台。首先根据GenBank上公布的基因Ⅲ型新城疫病毒JS/7/05/Ch株基因组全序列设计并合成8对引物,RT-PCR扩增目的片段后,分别依次亚克隆至pCR2.1载体中构建含有JS/7/05/Ch全长基因组cDNA的克隆质粒pJS/7/05/Ch,然后再通过特异性酶切位点将JS/7/05株全长基因组cDNA转移到TVT7R(0.0)转录载体中,成功构建出含JS/7/05/Ch株基因组全长cDNA的转录质粒pTVT/JS705。然后将该质粒与3个辅助质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,转染60h后将该细胞及其上清接种鸡胚;血凝(HA)试验和RT-PCR结果表明JS/7/05/Ch株新城疫病毒被成功拯救。

关键词：新城疫病毒基因Ⅲ型反向遗传技术拯救

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H5N1亚型禽流感病毒HA糖基化位点缺失突变株的构建及生物学特性

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病毒学报 2013年第5期29卷 495-499页

作者：张晓剑李彦芳熊丽平陈素娟彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室禽类预防医学教育部重点实验室扬州225009

不同H5亚型禽流感(AIV)HA上糖基化位点的分布是不同的,然而不同糖基化位点对病毒的作用仍不十分清楚。本研究利用定点突变和反向遗传操作构建了3个不同糖基化位点单缺失突变病毒,并对其增殖特性和毒力进行了测定。结果表明,通过HA基因... 详细信息

不同H5亚型禽流感(AIV)HA上糖基化位点的分布是不同的,然而不同糖基化位点对病毒的作用仍不十分清楚。本研究利用定点突变和反向遗传操作构建了3个不同糖基化位点单缺失突变病毒,并对其增殖特性和毒力进行了测定。结果表明,通过HA基因序列测定和免疫印迹分析证实已成功去除了特定糖基化位点。158位糖基化位点缺失突变株rS△158在鸡胚中的EID50和MDCK细胞上TCID50比野生型rS略低,空斑直径显著减小;而单独去除169位和290位糖基化位点的rS△169和rS△290的EID50和TCID50略高于野生型rS,空斑直径相近,但空斑数要比后者高出10倍以上。所有突变株及野生型病毒在CEF上增殖速率相同,对SPF鸡均是高致病性的。因此,糖基化位点可影响病毒的体外增殖,但结果因细胞而异。

关键词： H5N1亚型禽流感 HA 糖基化位点突变

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H5N1亚型禽流感病毒进化的研究进展

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中国家禽 2013年第8期35卷 40-43页

作者：李彦芳彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院/农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

H5N1亚型禽流感病毒是重要的人兽共患病病原,其基因组为分节段的负股单链RNA,这种特殊的基因组结构使得流感病毒的进化机制跟其他病毒有所不同。本文对流感病毒的进化机制、H5N1亚型禽流感病毒的进化规律和生物信息学在流感病毒进化中... 详细信息

H5N1亚型禽流感病毒是重要的人兽共患病病原,其基因组为分节段的负股单链RNA,这种特殊的基因组结构使得流感病毒的进化机制跟其他病毒有所不同。本文对流感病毒的进化机制、H5N1亚型禽流感病毒的进化规律和生物信息学在流感病毒进化中应用等方面的研究进展予以综述。

关键词：禽流感病毒 H5N1亚型进化生物信息学

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转变防疫观念为现代畜牧业发展护航

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中国禽业导刊 2013年第14期30卷 8-9页

作者：刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

一H7N9流感在我国流行的特点．历史上，曾有多次人的大流行流感，造成了极大的灾难，其中最著名的1918年的西班牙流感为H1N1亚型，造成死亡人数5000万以上；1957年的亚洲流感为H2N2亚型，造成死亡人数200万以上；1968年的香港流感为H3N... 详细信息

一H7N9流感在我国流行的特点．历史上，曾有多次人的大流行流感，造成了极大的灾难，其中最著名的1918年的西班牙流感为H1N1亚型，造成死亡人数5000万以上；1957年的亚洲流感为H2N2亚型，造成死亡人数200万以上；1968年的香港流感为H3N2亚型，造成死亡人数近100万人。2009年大流行流感：数万人死亡。季节性流感有两种：H1N1亚型和H3N2亚型，均为当前全球发生的流感。禽流感主要分为：低致病性禽流感（H9N2亚型或其他亚型）和高致病性禽流感（H7亚型和H5亚型）。

关键词：高致病性禽流感牧业发展防疫观念 H1N1亚型 H3N2亚型低致病性禽流感死亡人数护航

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核磷蛋白B23与新城疫病毒M蛋白相互作用促进病毒的复制

核磷蛋白B23与新城疫病毒M蛋白相互作用促进病毒的复制

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：段志强陈坚许海旭何亮刘慧谋胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州 225009

M蛋白是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)编码的病毒蛋白中含量最为丰富且高度保守的一种非糖基化膜相关蛋白,在NDV整个感染周期中扮演着重要的角色.M蛋白在病毒感染早期大量聚集在细胞核和核仁中,不仅持续抑制宿主细胞基因的... 详细信息

M蛋白是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)编码的病毒蛋白中含量最为丰富且高度保守的一种非糖基化膜相关蛋白,在NDV整个感染周期中扮演着重要的角色.M蛋白在病毒感染早期大量聚集在细胞核和核仁中,不仅持续抑制宿主细胞基因的转录和翻译,还可调控病毒基因组的复制和转录;在病毒感染后期进入细胞质,协助子代病毒粒子的出芽和释放.但是目前对M蛋白的核仁定位机制、与核仁蛋白的相互作用及其对病毒的复制影响还不清楚.核仁素、核仁纤维蛋白和核磷蛋白B23是核仁中含量丰富且研究深入的三个蛋白,可介导蛋白的核仁定位并与具有核仁定位特性的病毒蛋白发生相互作用促进病毒的复制.本研究首先通过酵母双杂交方法在酵母体内证实核磷蛋白B23与M蛋白发生相互作用,并进一步通过GST pull-down、免疫共沉淀和荧光共定位证实两者的互作.对两个蛋白截短表达鉴定彼此相互作用结构域,发现B23蛋白通过其核酸结合结构域的aa188-245与M蛋白相互作用;M蛋白通过aa30-60与B23蛋白相互作用,同时该结构域介导M蛋白的核仁定位.此外,通过RNA干扰方法抑制DF1细胞内B23蛋白的表达或在DF1细胞内过表达B23蛋白均能显著抑制NDV的复制效率.以上结果证实,M蛋白通过其核仁定位信号基序结合B23蛋白进入核仁,并在核仁内持续破坏B23蛋白的结构与功能促进NDV的复制.

关键词：核磷蛋白B23 新城疫病毒 M蛋白相互作用

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水禽流感的流行情况及防控措施

水禽流感的流行情况及防控措施

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2013中国第三届水禽疫病防制高层论坛

作者：刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

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OIE法典中必须报告的禽流感(notifiable avian influenza,NAI):H5和H7亚型禽流感病毒感染的防控策略

OIE法典中必须报告的禽流感(notifiable avian influenza,NAI):H5...

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江苏省畜牧兽医学会第十一次会员代表大会暨学术报告会

作者：刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州

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猪源大肠杆菌(ETEC、STEC、AEEC)毒力基因及其与O抗原型的关系

猪源大肠杆菌(ETEC、STEC、AEEC)毒力基因及其与O抗原型的关系

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：陈祥赵李祥高崧苗晓青焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室/江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

为揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系,O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测.结果显示:通过对这300个分离株的O血清... 详细信息

为揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系,O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测.结果显示:通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定,结果显示除50株未定型、17株自凝外,测定出233个分离株的血清型,这些分离株覆盖了45个血清型,其中以O149、O107、O139、O93和O91为主,共133株,占定型菌株的57.1％;拥有eatⅠ、estⅡ、elt、stx2e和eaeA基因的菌株分别为102 (34.0％)、190(63.3％)、81 (27.0％)、57 (19.0％)和54 (18.0％)株;分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100％),75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7％),在K88菌株中,O149血清型与estⅠ或estⅡ+elt密切相关,在F18菌株中,O107血清型与estⅠ或estⅡ、O139血清型与stx2e紧密相关.依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型:ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、AEEC/ETEC和AEEC/ETEC/STEC,分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株,占分离株的63.3％、8.0％、12.0％、10.7％、5.7％和0.3％.通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性:猪源ETEC以O149、O107、O93和O98等血清型为主,O149∶K88菌株主要与estⅡ或estⅡ+elt肠毒素相关,O107:F18菌株主要与estⅡ相关,O93和O98血清型菌株主要与estⅡ肠毒素相关;STEC菌株以O139:F18血清型为主,拥有stx2e;AEEC菌株拥有紧密素,无明显优势血清型;ETEC/STEC菌株以O107:F18和O116:F18血清型为主,主要与estⅠ +stx2e或estⅡ+stx2e密切相关,ETEC/AEEC菌株以O91和O107血清型为主,全部拥有肠毒素estⅠ和紧密素基因.结果表明我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌,其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原,同时其病原型日益复杂.

关键词：猪源大肠杆菌病毒力测定 O血清型抗原基因

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新城疫病毒同源重组现象的解析

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中国家禽 2013年第9期35卷 1-1页

作者：宋庆庆刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

近年来有报道显示NDV有些重组子代病毒基因组序列来自于多种基因型并发生多次基因重组现象,但学界对此存在争议。扬州大学的研究人员对此现象进行了分析验证,认为重组现象很可能是由于测序样品中含有不同基因型的NDV或是在测序过程中引... 详细信息

近年来有报道显示NDV有些重组子代病毒基因组序列来自于多种基因型并发生多次基因重组现象,但学界对此存在争议。扬州大学的研究人员对此现象进行了分析验证,认为重组现象很可能是由于测序样品中含有不同基因型的NDV或是在测序过程中引入了实验室污染导致。

关键词：新城疫病毒同源重组解析基因组序列实验室污染基因重组研究人员扬州大学

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新城疫病毒人工感染鹅脾脏差异表达蛋白质组初步分析

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畜牧兽医学报 2012年第7期43卷 1088-1095页

作者：王郁杨开妍段志强吴双胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工... 详细信息

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工感染NDV强毒株Herts/33和JS5/05,并于感染后36、72、108h采集2个感染组和对照组的鹅脾脏,提取脾脏蛋白,以17cm、pH5～8的IPG胶条进行二维电泳,运用PDQuest 8.0.1软件对凝胶图谱进行差异蛋白分析。结果显示:与对照组相比,Herts/33感染组和JS5/05感染组脾脏组织分别有154个和148个蛋白出现了显著的差异表达,其中有86个蛋白点是不同感染组共有的差异点,包括52个感染后上调表达蛋白点,34个下调表达蛋白点;另外,有130个差异蛋白点为NDV感染鹅后不同毒株之间产生的差异表达,包括71个感染后上调表达蛋白点,59个下调表达蛋白点。基因Ⅳ型NDV强毒和基因Ⅶd亚型NDV强毒分别感染鹅后,能引起宿主脾脏组织蛋白表达谱发生不同的改变,这为进一步研究Ⅶd亚型NDV对水禽致病性增强的机制提供了重要线索。

关键词：鹅脾脏蛋白质组新城疫病毒

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