检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2007年第10期29卷 12-15页

作者：宦海霞陈祥高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

克隆并分析禽病原性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)部分毒力基因,探寻APEC毒力因子的变异和进化发生关系。以APEC中国分离株为模板,PCR扩增其部分毒力基因(fimC,kpsM,csgA,papC,felA,cvaC,iss),并测定了这些毒力基... 详细信息

克隆并分析禽病原性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)部分毒力基因,探寻APEC毒力因子的变异和进化发生关系。以APEC中国分离株为模板,PCR扩增其部分毒力基因(fimC,kpsM,csgA,papC,felA,cvaC,iss),并测定了这些毒力基因扩增片段的核苷酸序列,与GenBank中的同一基因进行序列比较。PCR扩增产物经克隆、酶切鉴定,均与预期结果一致,序列分析结果表明上述毒力因子在APEC中的保守性非常高,均能达到99%以上。与其他来源大肠杆菌的同一基因的同源性也非常高,但不同基因间有所差别。APEC分离株的受试部分毒力因子的变异程度非常小,保守性很高,一些毒力因子与人源致肠外感染大肠杆菌的毒力因子同源性也很高,说明APEC与人源致肠外感染大肠杆菌的亲缘关系很近。

关键词： APEC 毒力基因克隆序列分析

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沙门氏菌gyrA基因的变异对氟喹诺酮类药物敏感性的影响

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中国人兽共患病学报 2007年第9期23卷 891-894,898页

作者：王晓泉陈祥吴双巢国祥焦新安刘秀梵江苏省人兽共患病学重点实验室扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏省人兽共患病学重点实验室扬州225009 扬州市疾病预防控制中心江苏省人兽共患病学重点实验室扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

目的分析125株萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因QRDR区变异情况及其对氟喹诺酮类药物敏感性的影响.方法用常规血清学方法鉴定沙门氏菌分离株血清型,通过微量稀释法测定其对萘啶酮酸和3种氟喹诺酮的敏感性,用PCR方法扩增沙门氏菌gyrA基因... 详细信息

目的分析125株萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因QRDR区变异情况及其对氟喹诺酮类药物敏感性的影响.方法用常规血清学方法鉴定沙门氏菌分离株血清型,通过微量稀释法测定其对萘啶酮酸和3种氟喹诺酮的敏感性,用PCR方法扩增沙门氏菌gyrA基因QRDR的序列并进行序列分析.结果这些分离株涉及18个血清型,最常见的血清型为德尔卑沙门氏菌和肠炎沙门氏菌,它们的分离率分别为22.4%(28/125)和19.2%(24/125).沙门氏菌分离株对萘啶酮酸的耐药率为39/125.3种氟喹诺酮药物对萘啶酮酸耐药性沙门氏菌的最小抑菌浓度明显比萘啶酮酸敏感株高.萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因QRDR的序列分析表明,所有萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因的83或87位点发生了突变,83位点发生点突变的菌株对萘啶酮酸的MIC范围大于或等于1 024μg/ml,而87位点突变的菌株的MIC范围为32～512μg/ml.结论沙门氏菌分离株gyrA基因发生点突变的位点与萘啶酮酸耐药水平高低存在关联,且导致对三种氟喹诺酮类药物的敏感性下降.

关键词：萘啶酮酸耐药沙门氏菌氟喹诺酮敏感性 gyrA变异

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抗禽流感病毒H7亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第10期23卷 953-955页

作者：李玉君焦新安潘志明孙林王传彬张苏华孙泉云刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009 农业部兽医诊断中心北京100094 上海市畜牧兽医站上海201103

目的:研制禽流感病毒H7亚型血凝素特异性单克隆抗体(mAb)。方法:以H7亚型禽流感诊断抗原为免疫原免疫6～8周雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14进行融合。通过HA和HI试验筛选阳性克隆。应用HI试验和Wester... 详细信息

目的:研制禽流感病毒H7亚型血凝素特异性单克隆抗体(mAb)。方法:以H7亚型禽流感诊断抗原为免疫原免疫6～8周雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14进行融合。通过HA和HI试验筛选阳性克隆。应用HI试验和Western blot试验测定mAb的反应性和特异性。结果:共获得4株分泌抗AIVH7亚型HAmAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为2E2、2A4、5F5、7G5。这些mAb的腹水HI效价在5×27～5×211之间,其中2E2属于IgM亚类,2A4属于IgG1亚类,5F5、7G5属于IgG2a亚类。Western blot分析结果显示,4株AIVH7亚型HAmAb能与AIVH7蛋白在Mr75000处反应,但不与新城疫病毒(NDV)蛋白发生反应,表明这些mAb能特异性识别AIVH7亚型HA。mAbHI反应性测定结果表明:4株mAb中,2E2、5F5、7G5只与H7亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他亚型AIV以及NDV、传染性支气管炎病毒(IBV)反应,显示出良好的特异性;而2A4除了与H7亚型AIV反应外,还与H15N8标准株发生低水平交叉反应。结论:这些mAb不仅为H7亚型AIV的HA结构分析提供了工具,而且为建立快速廉价的H7亚型禽流感诊断方法提供了核心试剂。

关键词：禽流感病毒 H7亚型血凝素单克隆抗体

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家养水禽在A型流感病毒和新城疫病毒进化和疾病流行中的作用

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中国家禽 2007年第15期29卷 1-7页

作者：刘秀梵农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学兽医学院江苏扬州225009

高致病性禽流感和新城疫是最重要的两种禽病,近年来对世界家禽业造成了重创。由于家养水禽在这两种病原体的进化和疾病流行中占据着独特的地位,作者对此进行了详细探讨,为两种疾病的防控提出了积极有效的建议。

关键词：流感病毒 AIV 新城疫病毒水禽强毒株 NDV 疾病流行

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四环素耐药基因在鸡源沙门氏菌中的分布和传播

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中国家禽 2007年第9期29卷 10-12,18页

作者：王晓泉王彦红吴双焦新安潘志明刘秀梵江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

试验分析了84株鸡源沙门氏菌分离株的四环素耐药性,用PCR方法检测四环素耐药基因在分离株中的分布情况。结果显示,四环素耐药率为49%(41/84),鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅携带tet(A)基因(23/23),肠炎沙门氏菌和德尔卑沙门氏菌携带tet(A)(8/... 详细信息

试验分析了84株鸡源沙门氏菌分离株的四环素耐药性,用PCR方法检测四环素耐药基因在分离株中的分布情况。结果显示,四环素耐药率为49%(41/84),鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅携带tet(A)基因(23/23),肠炎沙门氏菌和德尔卑沙门氏菌携带tet(A)(8/18)、tet(B)(17/18)或tet(G)(10/18)三种基因,tetC基因在这些沙门氏菌中都没有检测到。该类基因多数位于结合性质粒上,但是不在整合子范围内。

关键词：沙门氏菌分离株四环素耐药基因鸡

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奶牛大肠杆菌与鲍氏志贺氏菌混合感染的诊疗

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中国兽医杂志 2007年第9期43卷 70-71页

作者：王彦红苗晓青周琼王晓泉刘文博扬州大学兽医学院畜禽传染病学农业部重点开放实验室江苏扬州225009

2006年8月某奶牛场新引进一批奶牛出现高热不退,配种4月左右的初产牛出现乳房炎,有犊牛死亡,将病死牛的病料及发病牛的乳样、血样送到扬州大学动物医院分离病原。[第一段]

关键词：奶牛场混合感染志贺氏菌大肠杆菌诊疗动物医院扬州大学鲍

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携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性

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中国兽医学报 2007年第1期27卷 17-21页

作者：潘志明焦新安唐丽华黄金林张辉张晓明张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接... 详细信息

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)。重组菌以109CFU/只的剂量2次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDVF蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(P<0.05)。将SL7207(pVAX1-F)以109CFU/只剂量口服免疫1日龄雏鸡,免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)免疫组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能成功释放所携带的质粒,并能刺激机体产生免疫应答,可对NDV强毒攻击提供良好的免疫保护作用,提示该疫苗候选株对新城疫的控制有重要应用前景。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒免疫原性

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用反向遗传学技术产生致弱的基因Ⅶ型新城疫病毒疫苗候选株

用反向遗传学技术产生致弱的基因Ⅶ型新城疫病毒疫苗候选株

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第15届世界禽病大会、中国畜牧兽医学会2007年学术年会

作者：胡顺林孙庆王曲直吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

近年来引起我国 ND 大流行的毒株绝大多数为基因Ⅶ型,而常规的 ND 疫苗株主要有 V4和 LaSota 等,其基因型主要为Ⅰ和Ⅱ型,当前所分离的毒株与以往的毒株特别是疫苗株相比,遗传距离越来越远,常

关键词：疫苗候选株新城疫病毒反向遗传学技术

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两株对麻鸭不同毒力H5 N1亚型禽流感病毒鉴定及其全基因组比较分析

两株对麻鸭不同毒力H5 N1亚型禽流感病毒鉴定及其全基因组比较分析

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第15届世界禽病大会、中国畜牧兽医学会2007年学术年会

目的：水禽被认为是流感病毒的储存库,流感病毒在水禽中隐性感染且排毒,直至2002年香港出现大量水禽感染发病,我们有必要探究其可能的致病机理。

关键词：禽流感病毒 H5 N1 全基因组

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利用流式细胞术检测H4亚型禽流感病毒感染细胞

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2007年第4期28卷 10-12页

作者：高明燕胡茂志吴艳涛王志亮焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省物质微区与性能测试服务中心江苏扬州225009 农业部动物检疫所外来动物疾病诊断中心山东青岛266032

以不同稀释度的H4亚型禽流感病毒(AIV)感染MDCK细胞,分别在添加与不添加TPCK-胰酶的培养基中培养36 h后收集细胞。经固定后,加入抗H4亚型AIV的单抗2C11,继续加入荧光标记的抗鼠Ig抗体,用流式细胞仪(FCM)分析不同条件下病毒感染的细胞,... 详细信息

以不同稀释度的H4亚型禽流感病毒(AIV)感染MDCK细胞,分别在添加与不添加TPCK-胰酶的培养基中培养36 h后收集细胞。经固定后,加入抗H4亚型AIV的单抗2C11,继续加入荧光标记的抗鼠Ig抗体,用流式细胞仪(FCM)分析不同条件下病毒感染的细胞,并用血凝(HA)试验检测细胞培养上清中病毒的HA效价。FCM结果表明:不论加TPCK-胰酶与否,均能引起病毒的感染,且随着感染剂量的增加,含有病毒细胞的比率增加。相比而言,加胰酶后,低剂量感染便可引起病毒在MDCK细胞内大量增殖,并能检测到细胞上清中的病毒。FCM与HA试验相比,FCM试验更敏感,更能反应病毒在感染早期的增殖情况。

关键词：禽流感病毒血凝试验流式细胞术

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